雌激素对骨折愈合过程中骨形态发生蛋白4 mRNA表达的影响

目的：探讨骨折愈合过程中雌激素对骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein-4，BMP—4)基因表达的影响，了解BMP—4在骨折愈合过程中的作用。方法：180只雌性SD大鼠随机分成4组。OVXE1组为卵巢切除后1d开始雌激素替代治疗；OVXE2组为骨折后雌激素替代组；OVX组为雌激素缺乏组；SO组为正常对照组。所有动物在一侧胫骨中段造成骨折模型；各组动物分别在骨折后1、2、3、4、5、6、7、14、28d处死取材；标本制成石蜡切片，用地高辛标记的BMP-4 cDNA探针进行原位核酸分子杂交；实验结果经计算机图像处理系统分析并作统计学处理。结果：各组动物骨折后1—3d，骨折周围血肿及组织内BMP—4 cRMA检测为阳性，从第4d开始为阴性。OVX组的BMP—4 mRNA表达较任何一组都明显增多(P＜0．05)；SO组及OVXE1组最少。结论：BMP—4主要在骨折愈合早期起作用。雌激素对BMP-4基因的表达有抑制作用，将BMP—4基因的表达控制在一定程度内可能是雌激素调节骨折愈合的一种方式。     

骨形态发生蛋白在骨折愈合中的作用

骨折愈合是一个复杂的组织学变化过程,涉及一系列不同的细胞活动,自1965年Urist提出骨诱导学说,并相继提纯骨形态发生蛋白(BMP)以来,对骨的再生修复均有了进一步的认识,并已开始将BMP初步应用于临床实践治疗骨不连接及骨缺损。对内源性BMP在骨折修复中的作用机制尚不清楚。本文应用骨形态发生蛋白单克隆抗体检测骨折愈合过程中外骨痂内BMP的分布及细胞定位,探讨BMP在闭合性骨折愈合外骨痂形成中的作用,以期对闭合性骨折之愈合获得进一步的认识。     

骨形态发生蛋白在闭合性长骨折愈合中的作用

为观察骨形态发生蛋白在闭合性长骨骨折愈合中的作用，以６４只健康ＳＤ大鼠为动物，制备闭合性胫骨骨折动物模型，分别于１２小时、，３，５，７，９，１４，２８天取材，行恒冷切片，ＰＡＰ染色，设立正常及ＰＢＳ阴性替代对照。     

骨形态发生蛋白5(BMP5)基因在骨折愈合中的定位研究

目的：应用骨形态发生蛋白5（BMP5）cDNA探针检测骨折愈合过程中外骨痂内BMP5基因表达的定位与分布,探讨BMP5基因表达在闭合性骨折愈合外骨痂形成中的作用。方法：以64只健康SD大鼠,制备闭合性胫骨骨折动物模型。骨折后分别于12小时,1,3,5,7,9,14及28天取材,取材后行恒冷切片,用地高辛素标记的BMP5 cDNA探针进行原位杂交,设立对照。结果：骨折后12小时及1天,骨折周围血肿内细胞及肌肉中新出现的间充质细胞内BMP5检测为阳性信号。结论：本实验表明创伤激活BMP5 cDNA的表达,并呈区域性参与骨折的修复,也说明骨折血肿及周围软组织在骨折愈合过程中具有非常重要的地位。     

骨折愈合过程中BMP3基因表达的实验研究

为从分子生物学水平探讨骨形成蛋白（ＢＭＰ）在骨折修复过程中的作用及机理，实验将４８只新西兰兔双侧桡骨中段制成骨折模型。术后随机分为６个时间组取材。采用核酸分子杂交技术，检测ＢＭＰ＿３ｍＲＮＡ的组织定位及表达水平。结果显示：（１）ＢＭＰ＿３基因在骨折修复早期表达水平明显增高；峰值位于术后２周，约为正常时的３．４倍；（２）间充质细胞、成软骨细胞和成骨细胞是ＢＭＰ３基因的高表达细胞。结果表明，ＢＭＰ＿３在骨折修复早期的诱导成骨中引起重要作用，其作用可能是以自分泌或／和旁分泌方式实现的。     

骨折愈合过程中的骨形态形成蛋白表达

骨折愈合过程包括骨祖细胞的趋化、增殖、分化、并合成细胞外基质。它以对细胞、血管、以及骨基质的损伤开始 ,最终达到彻底的重新塑形而没有瘢痕形成 ,是细胞和基质的一个连续变化过程。骨折愈合的组织学特征已很明确 ,但在生化和调控方面仍不甚明确。近来用免疫组化、ＲＴ -ＰＣＲ、原位杂交等方法检测ＢＭＰ在骨折愈合过程中的表达 ,以及ＢＭＰ在骨诱导及骨折愈合方面的作用 ,表明ＢＭＰ是骨折愈合过程中的关键物质 ,本文主要就骨折愈合过程中ＢＭＰ的表达作一综述。1　骨折愈合中骨形态形成蛋白的表达1.1　正常骨折愈合正常骨折愈合分膜…     

骨形态发生蛋白及其免疫学研究

骨形态发生蛋白及其免疫学研究钱金黔廖龙元孙材江骨形态发生蛋白（ｂｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎＢＭＰ）具有较强的诱导成骨能力，已成为治疗骨缺损、骨折不愈合的常用的新材料和方法。到目前为止，对ＢＭＰ的全身作用尚不清楚。因ＢＭＰ本身成分的...     

骨形态发生蛋白在异体骨段移植愈合中的表达及临床意义

目的：研究骨形态发生蛋白（BMP）在异体骨段移植愈中的表达及临床意义。方法：采用新西兰大白兔股骨中段切除1．5cm骨干和骨膜实验动物模型。方法：36只兔随机分实验组和对照组。实验组植入深低温保存的异体骨,对照组植入自体新鲜骨,均用髓内针固定,分别于术后第1、2、3个月用免疫组织化学染色法观察BMP在异体骨愈合过程的表达情况,结果：深低温保存的同种异体骨移植愈合BMP表达与体骨相似,移植骨段BMP表达阴性,新生骨及其周围类基质表达阳性。新生编织骨BMP表达活跃,成熟板层骨BMP表达减弱（P＜0．01）。结论：异体骨移植愈合中骨吸收和骨诱导是同时,骨诱导在异体骨愈合早期发挥了重要作用。     

骨形态发生蛋白基因表达及应用的研究进展

骨形态发生蛋白１～１２的ｃＤＮＡ克隆要继被报道。在大肠杆菌和真核细胞均表达出有诱骨活性的骨形态发生蛋白，随着基因重组技术和基因转移技术的发展，外源性骨形态发生蛋白基因的直接或间接转移和表达，将会对局部骨缺损修复产生重要意义，为骨形态发生蛋白的临床应用开辟新的途径。     

骨修复中骨形态发生蛋白（BMP）成骨机理的研究及其应用现状

在成年人成熟器官和组织中 ,只有一种组织能返祖到胚胎状态中 ,这就是骨组织。骨代谢与损伤时的修复过程与胚胎状态时极为相似 ,是一个极其复杂的过程。骨形成需要三个必要条件 :( 1)刺激因子 ;( 2 )靶细胞 ;( 3)特定的环境 ,即始于一组未分化的前体细胞移行到损伤部位 ,然后在一定生长因子刺激下开始发生形态变化 ,定向分化为成骨细胞 ,合成胶原 ,形成钙化的骨组织。这一过程受多种因素影响 ,就内在因素而言 ,有两种机制 :激素调节钙—磷代谢的系统作用和骨生长因子的局部调节作用。这些作用通过自分泌和旁分泌系统促进成骨细胞增殖和骨基…     

Distinct and Overlapping Patterns of Localization of Bone Morphogenetic Protein (BMP) Family Members and a BMP Type II Receptor During Fracture Healing in Rats

Bone morphogenetic proteins (BMPs) and their receptors (BMPRs) are thought to play an important role in bone morphogenesis. The purpose of this study was to determine the locations of BMP-2/-4, osteogenic protein-1 (OP-1, also termed BMP-7), and BMP type II receptor (BMPR-II) during rat fracture healing by immunostaining, and thereby elucidate the possible roles of the BMPs and BMPR-II in intramembranous ossification and endochondral ossification. In the early stage of fracture repair, the expression of BMP-2/-4 and OP-1 was strongly induced in the thickened periosteum near the fracture ends, and coincided with an enhanced expression of BMPR-II. On day 7 after fracture, staining for BMP-2/-4 and OP-1 immunostaining was increased in various types of chondrocytes, and was strong in fibroblast-like spindle cells and proliferating chondrocytes in endochondral bone. On day 14 after fracture, staining with OP-1 antibody disappeared in proliferating and mature chondrocytes, while BMP-2/-4 staining continued in various types of chondrocytes until the late stage. In the newly formed trabecular bone, BMP-2/-4 and OP-1 were present at various levels. BMPR-II was actively expressed in both intramembranous ossification and endochondral ossification. Additionally, immunostaining for BMP-2/-4 and OP-1 was observed in multinucleated osteoclast-like cells on the newly formed trabecular bone, along with BMPR-II. In reference to our previous study of BMP type I receptors (BMPR-IA and BMPR-IB), BMPR-II was found to be co-localized with BMPR-IA and BMPR-IB. BMP-2/-4 and OP-1 antibodies exhibited distinct and overlapping immunostaining patterns during fracture repair. OP-1 may act predominantly in the initial phase of endochondral ossification, while BMP-2/-4 acts throughout this process. Thus, these findings suggested that BMPs acting through their BMP receptors may play major roles in modulating the sequential events leading to bone formation.     

不同骨愈合方式的细胞与分子机理研究-BMP与骨祖细胞的分布及其作用

目的 :研究骨形态发生蛋白 (BMP)及骨祖细胞的分布与作用 ,探讨不同骨愈合方式的细胞与分子机理。方法 :制造兔桡骨中下段骨折 ,缺损 3mm ,不同时期取骨痂作HE及BMP免疫组化染色 ,显微镜下观察结果并作计算机图像分析。结果 :膜内成骨区及软骨内成骨区骨祖细胞、成骨细胞、成软骨细胞及未成熟的骨细胞BMP染色呈强阳性 ;但肥大的软骨细胞和成纤维细胞为阴性染色。计算机图像分析显示 :膜内成骨区较软骨内成骨区有较高BMP浓度及较多阳性着色细胞。结论 :骨愈合方式与局部BMP浓度及骨祖细胞的来源与分布有关。     

骨形态形成蛋白修复大面积关节软骨缺损的实验研究

将骨形态形成蛋白(BMP)用于大面积关节软骨缺损的修复,探讨应用方法,观察修复效果。在51只成年兔股骨的髌髁关节面上制造5mm×10mm的骨软骨缺损,深3～5mm。缺损内分别填充骨形态形成蛋白和纤维蛋白粘合剂复合物(BMP/FS)、BMP、FS,植入物均用自体游离骨膜覆盖,并设单纯骨膜覆盖缺损组和空白对照组。术后2、4、8、12周对缺损修复情况行大体和组织学观察。结果显示:BMP/FS组,8周时软骨下骨再生已完成,12周表层新生软骨组织结构接近正常,修复效果明显优于其它组。     

两种内固定后兔骨痂中成骨细胞内骨形态生成蛋白含量的比较

目的：比较钢板和矩形髓内钉固定对兔胫腓骨骨折成骨细胞内骨形态生成蛋白（BMP）含量的影响。方法：新西兰兔24只，对同一动物的两侧胫骨分别用矩形髓内钉和4孔不锈钢钢板固定，并分3批于固定后14、21、28d处死。用兔疫组化方法检测骨痂中成骨细胞中BMP的分布，用计算机图像分析系统将结果进行定量分析。结果：矩形髓内钉组骨痂中成骨细胞内BMP含量高于钢板组（P＜0．05）。结论：矩形髓内钉内固定胫骨后骨痂含量增加可能与矩形髓内钉的微动有关，可能有利于骨折愈合。     

纤维蛋白用作BMP载体的研究

目的：将纤维蛋白用作ＢＭＰ（骨形态发生蛋白）的载体材料。方法：用５ｍｇ ＢＭＰ分别与３种不同浓度的纤维蛋白制成复合物，植入小鼠肌囊后不同时间进行组织学观察、测定碱性磷酸酶活性和钙含量等。结果：纤维蛋白浓度为１２０ｍｇ／ｍｌ的复合物具有良好的骨诱导活性，成骨量是单纯５ｍｇ ＢＭＰ的两倍。结论：纤维蛋白是理想的ＢＭＰ载体材料，复合物可望应用于临床骨缺损的修复。     

人骨形成蛋白2的基因克隆和序列分析

目的　探讨克隆人骨形成蛋白 2基因编码区的方法。方法　由人末梢血白细胞中提取细胞总DNA ,利用PCR法 ,从DNA中分别扩增出人骨形成蛋白 2外显子编码区基因DNA片段 ;将获得的基因片段插入PGEM -T -Easy质粒中 ,转化到大肠杆菌DH5α后挑选阳性克隆 ,利用限制性内切酶酶切核苷酸序列分析鉴定后 ,连接获得人骨形成蛋白 2基因。结果　通过质粒DNA酶切分析及序列测定 ,我们获得的基因片段为人骨形成蛋白 - 2DNA序列。结论　首次由人白细胞DNA中克隆获得人骨形成蛋白 2全长基因 ,为表达、应用骨形成蛋白 2提供了前提条件