低氧对Jurkat细胞低氧诱导因子-1α及其类泛素化的影响及意义

目的 探讨低氧条件下Jurkat细胞低氧诱导因子-1α(HIF-1α)类泛素化的变化对其基因转录活性和蛋白稳定性的影响,以及对下游靶基因转录活性调控的影响和意义.方法 氯化钴(CoCl2)化学缺氧法模拟肿瘤缺氧不同时间,分别用荧光定量PCR、Western blot法检测HIF-1α基因及蛋白稳定性的变化,类泛素-1(SUMO-1)、类泛素蛋酶-1(SENP-1)蛋白水平的表达,VEGF、mdr1、mdr3、Mcl-1和survivin等基因转录活性的变化.结果 在缺氧诱导4、8、16、48、72 h后,HIF-1α基因转录活性分别为缺氧诱导前的(0.79 ±0.19)、(2.65±2.05)、(4.19±4.72)、(2.77±3.37)、(0.09±0.05)、(0.69±0.55)倍(P>0.01),而蛋白稳定性逐渐增高后减低(P<0.01).SEN-1蛋白的表达与SUMO-1蛋白表达呈相反趋势,前者逐渐增高后减低,而后者逐渐减低后增高(P<0.01).除survivin 基因外,VEGF、mdr1、mdr3、Mcl-1基因转录水平与HIF-1α蛋白稳定性相平行.结论 缺氧引起SENP-1表达变化,通过减低HIF-1α蛋白类泛素化作用而影响HIF-1α稳定性,从而改变下游VEGF、mdr1、mdr3、Mcl-1等基因的转录活性而最终影响细胞牛物学过程.     

低氧诱导因子-1与鼻咽癌关系研究进展

许多肿瘤内存在明显缺氧区域,但缺氧状态下的肿瘤细胞仍能不断生长、繁殖和转移。低氧诱导因子-1是调节肿瘤细胞缺氧反应的主要转录因子。目前研究的机制主要包括调节肿瘤细胞代谢、促进肿瘤新生血管形成、促进肿瘤干细胞分化与抗肿瘤细胞凋亡等。本文就低氧诱导因子-1基本生物学特性及其在鼻咽癌领域中的研究进展作一综述。     

低氧诱导因子1α对钾-氯协同转运子1启动子调控作用的研究

目的:钾-氯共同转运子1(KCC1)启动子中有一推断的低氧诱导因子1α(HIF-1α)的结合位点,通过表达HIF-1α,探索该位点是否为真正的低氧诱导因子结合位点.方法:分别用KCC1野生型启动子和HIF-1α位点变异的KCC1启动子,与HIF-1α质粒或对照载体共转染HEK293细胞,用荧光素酶功能分析的方法观测HIF-1α对KCC1启动子活性的影响,用RT-PCR方法比较转染与不转染HIF-1α对KCC1表达水平的差异.结果:转染HIF-1α后野生型KCC1启动子荧光素酶活性为对照Z组的2.39倍,而变异的HIF-1α位点的KCC1启动子荧光素酶活性则在转染与不转染HIF-1α条件下差异无统计学意义,在HIF-1α转染条件下KCC1表达水平高于对照组的水平,HIF-1α转染条件下是HIF-1α不转染条件下表达量的3.19倍.结论:首次证实了HIF-1α可直接增强KCC1启动子的活性,HIF-1α可调节KCC1的表达水平.     

低氧诱导因子-2对红系造血和铁代谢调控相关蛋白作用的研究进展

低氧诱导因子(HIF)-2是由HIF-2α和HIF-1β组成的异二聚合体.HIF-1通过诱导红细胞生成素基因表达和调节铁代谢等调控红系造血.HIF-2在诱导红细胞生成素基因表达、调节造血微环境以及铁代谢调控相关蛋白等方面发挥着更重要的作用.本文就有关家族性红细胞增多症中的HIF-2α变异、HIF-2诱导红细胞生成素基因表达、HIF-2α基因敲除对造血微环境的影响以及HIF-2对铁代谢相关蛋白调节作用的研究进展作一综述.     

低氧诱导因子-2对红系造血和铁代谢调控相关蛋白作用的研究进展

低氧诱导因子(HIF)-2是由HIF-2α和HIF-1β组成的异二聚合体.HIF-1通过诱导红细胞生成素基因表达和调节铁代谢等调控红系造血.HIF-2在诱导红细胞生成素基因表达、调节造血微环境以及铁代谢调控相关蛋白等方面发挥着更重要的作用.本文就有关家族性红细胞增多症中的HIF-2α变异、HIF-2诱导红细胞生成素基因表达、HIF-2α基因敲除对造血微环境的影响以及HIF-2对铁代谢相关蛋白调节作用的研究进展作一综述.     

低氧对大鼠肝肾组织内红细胞生成素和低氧诱导因子-1α基因表达的影响

目的　观察急性低氧和间断低氧习服对大鼠肝、肾组织内红细胞生成素 (EPO)及其调控蛋白低氧诱导因子 1α(HIF 1α)基因表达的影响。方法　用低压舱模拟高原低氧环境 ,进行 30 0 0 m 2周、5 0 0 0 m2周低氧训练 ,使大鼠达到低氧习服状态后 ,采用 Northern斑点杂交研究间断低氧习服前后 ,80 0 0 m4 h低氧处理的大鼠肝、肾组织内 EPO和 HIF 1α基因表达的变化。结果　与常氧对照组相比 ,急性低氧处理的大鼠肝、肾组织内 EPO基因表达都明显增强 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ;而间断低氧习服后 ,同样的低氧处理的大鼠肝、肾组织中 EPO基因表达都明显低于急性低氧组 (P<0 .0 1) ,EPO m RNA含量与常氧对照组水平差异不显著 (P>0 .0 5 )。急性低氧处理的大鼠肝组织中 HIF 1α基因表达水平明显高于常氧对照组和间断低氧习服组 (P均 <0 .0 1) ,而在不同处理的肾组织中 ,该基因表达水平差异不明显 (P均 >0 .0 5 )。结论　急性低氧能够刺激肝、肾组织内 EPO基因表达 ;而间断低氧习服的大鼠耐低氧能力明显增强 ,肝、肾组织内 EPO基因表达水平可恢复到常氧对照组水平。 HIF 1α在低氧影响 EPO基因表达的过程中可能起着重要的调节作用。     

低氧诱导因子-1α对肺癌生长影响的研究

目的:研究抑制低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达对肺癌细胞体内生长的影响并探讨可能机制。方法:以小RNA干扰(siRNA)表达质粒抑制A549肺癌细胞的HIF-1α表达,建立稳定表达细胞株并接种于裸鼠,观察肿瘤生长情况,TUNEL法检测细胞凋亡,MTT法检测细胞增殖。结果:抑制HIF-1α表达可加速肿瘤生长,促进细胞增殖并抑制细胞凋亡的发生,降低糖酵解关键基因的表达。结论:HIF-1α在低氧环境下可能通过上调糖酵解基因表达促进糖酵解,改变细胞生长环境,促进细胞凋亡并抑制细胞增殖。     

低氧诱导因子-1与低氧预处理诱导的脑缺血耐受

1990年．日本学者发现．短暂的、轻微的脑缺血可对1—7d后的再次严重的脑缺血产生部分保护作用，此现象被称为脑缺血耐受（cerebral ischemic tolerance，CIT）现象，而提前给予的短暂性缺血则称为缺血预处理。近年来的研究表明，不单是缺血预处理，其他多种预处理方式均可诱导脑缺血耐受。低氧预处理（hypoxia preconditioning，HP）作为一种干预措施，已被证实能使脑组织产生缺血耐受。[第一段]     

大鼠脑外伤合并骨折时低氧诱导因子-1对骨折愈合的影响

目的分析脑外伤合并骨折时低氧诱导因子-1对骨折愈合的影响效果。方法选用72只健康大鼠,随机分为骨折组(F组)和脑外伤合并骨折组(BF组),先后制作脑外伤模型与骨折模型,进行苏木精-伊红(HE)染色和组织免疫化学染色,对两组大鼠低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达情况进行分析。结果 BF组的大鼠在伤后第1周HIF-1α阳性细胞明显增多,骨细胞增长明显,成纤维细胞比较活跃;平均灰度值、平均光密度值和积分光密度值均呈现出最大值,提示骨痂组织矿化比较明显;在伤后的第2～4周,骨细胞和软骨细胞整体数量增加,成纤维细胞相对减少,但仍较为活跃。F组大鼠在伤后的第1周提示存在成纤维细胞,但直至第4周骨细胞和软骨细胞总体数量仍较少;伤后1～4周HIF-1α阳性细胞以及平均灰度值、平均光密度值和积分光密度值变化均不明显。结论低氧诱导因子-1在促进骨痂组织恢复中作用明显,在防止骨质疏松及治疗骨折延迟愈合等方面可通过激活低氧诱导因子-1改善临床整体效果。     

低氧诱导因子-1α在血液系统恶性肿瘤中的研究进展

低氧诱导因子1-α(Hypoxia inducible factor,HIF-1α)为低氧环境下诱导产生的转录因子,调控低氧相关基因转录,是细胞特别是肿瘤细胞适应低氧环境生存的重要转录因子.HIF-1α在乳腺癌、肝癌等实体肿瘤中研究较多,HIF-1α表达水平增高与肿瘤的血管生成、转移、化疗耐药相关.近年来研究发现HIF...     

HIF-1在大鼠实验性糖尿病心肌病中的表达

目的探讨缺氧诱导因子-1（HIF-1）在大鼠实验性糖尿病心肌病中的表达。方法应用链脲佐菌素（STZ）制作大鼠糖尿病心肌痛模型,采用免疫组织化学S—P法检测HIF-1在心肌细胞中的表达。结果免疫组化染色结果HIF-1主要阳性表达部位为细胞质和细胞核,糖尿病组阳性表达率明显高于对照组,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论HIF-1在糖尿病心肌细胞中表达增强,具有促进心肌细胞凋亡的作用,     

HIF-1alpha expression regulates the bactericidal capacity of phagocytes

Hypoxia is a characteristic feature of the tissue microenvironment during bacterial infection. Here we report on our use of conditional gene targeting to examine the contribution of hypoxia-inducible factor 1, alpha subunit (HIF-1alpha) to myeloid cell innate immune function. HIF-1alpha was induced by bacterial infection, even under normoxia, and regulated the production of key immune effector molecules, including granule proteases, antimicrobial peptides, nitric oxide, and TNF-alpha. Mice lacking HIF-1alpha in their myeloid cell lineage showed decreased bactericidal activity and failed to restrict systemic spread of infection from an initial tissue focus. Conversely, activation of the HIF-1alpha pathway through deletion of von Hippel-Lindau tumor-suppressor protein or pharmacologic inducers supported myeloid cell production of defense factors and improved bactericidal capacity. HIF-1alpha control of myeloid cell activity in infected tissues could represent a novel therapeutic target for enhancing host defense.     

胃癌中缺氧诱导因子-1α与Survivin表达的相互关系及临床病理意义

目的 研究缺氧诱导因子.1d(HIF-lα与Survivin在胃癌及正常胃组织中表达的相互关系,探讨其在胃癌的发生、浸润和转移中的作用. 方法 应用免疫组化SP法检测54例胃癌中HIF-lα、Survivin的表达情况,分析HIF-1α、Survivin与胃癌,临床病理因素的关系. 结果 HIF-lα在胃癌中的表达率74.1%,明显高于正常胃组织(0)(P相似文献   

HAP1与pro—BDNF胞吞关系的机制研究

目的：探讨HAP1与pro—BDNF胞吞的相关性和可能机制。方法：NGF诱导分化PCI2细胞,利用脂质体lipofectamine2000将提取的荧光质粒HAP1A-CFP和（或）pro—BDNF-ds—red转染进入细胞,培养48h后在含有BDNF、p75NTR或sortilin抗体的DMEM／10％FCS中培养,激光共聚焦显微镜观察荧光的表达情况及其在细胞中的定位;利用培养的小鼠皮质神经元（正常型和HAP1基因敲除型）在生物素标记pro-BDNF的培养基中孵育60min,激光共聚焦显微镜观察皮质神经元免疫荧光的效果。结果：共转染HAP1小cFP和pro—BDNF-ds—red质粒的细胞,以及pro—BDNF-ds—red荧光蛋白培养基孵育的转染HAPIA—CFP质粒的细胞,pro—BDNF与HAP1蛋白的共定位比例高达93％～97％;抗BDNF培养基孵育的共转染2种质粒的细胞,以及pro—BDNF-ds—red荧光蛋白＋抗p75NTR／抗sortilin培养基孵育的转染HAP1A—CFP质粒的细胞,2种荧光蛋白的共定位比率下降近一半;pro—BDNF-ds—red荧光蛋白＋抗BDNF培养基孵育的转染HAP1A-CFP质粒的细胞几乎未显示2种蛋白的共定位;正常新生小鼠皮质神经元内可见内吞的pro—BDNF免疫荧光,HAP1基因敲除小鼠的皮质神经元内未见。结论：pro—BDNF的胞吞必需HAP1的表达和参与。     

食管鳞状细胞癌患者细胞分化抑制因子-1和低氧诱导因子-1α的表达及意义

目的 研究细胞分化抑制因子-1（Id-1）、缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在食管鳞状细胞癌中的表达及其相关性,探讨其在食管鳞状细胞癌发生发展中的意义.方法 选取食管鳞状细胞癌60例,正常食管组织40例,应用免疫组化SP法分别检测Id-1、HIF-1α在两组中的表达,分析其与食管鳞状细胞癌临床病理特征的关系.结果 Id-1和HIF-1 0在食管鳞状细胞癌组织中表达率分别为81.7％和73.3％,与正常组比较差异有统计学意义（P＜0.05）,且Id-1和HIF-1α的表达与食管鳞状细胞癌的浸润深度、TNM分期及淋巴结转移有关,并随着浸润深度的加深、临床分期的提高及淋巴结的转移阳性率增高,差异有统计学意义（P＜0.05）.在食管鳞状细胞癌组织中,Id-1和HIF-1α的表达呈正相关（r=0.396,P=0.002）.结论 Id-1和HIF-1d与食管鳞状细胞癌的发生发展密切相关,,联合检测可作为判断食管鳞状细胞癌浸润和转移的重要指标.     

SUMO-1在HIF-1/VEGF信号通路中作用

目的研究SUMO-1在低氧激活的HIF-1/VEGF信号通路中作用。方法构建稳定表达SUMO-1的细胞系,采用荧光显微镜观察SUMO-1的细胞内定位,利用Western blot检测在低氧培养细胞中SUMO-1和HIF-1α的表达;利用荧光素酶报告基因实验检测SUMO-1对依赖于HIF-1的报告基因表达的影响。结果 SUMO-1主要分布在细胞核中,低氧可以上调SUMO-1的表达,SUMO-1可以上调HIF-1α的表达,促进依赖于HIF-1的荧光素酶报告基因的表达。结论低氧可能通过上调细胞中SUMO-1的表达,进而稳定HIF-1α或者上调HIF-1α的表达,增强HIF-1的转录活性。