淋巴瘤患者血浆和PBMC EBV定量测定的对比研究

目的 比较分析淋巴瘤患者血浆和外周血单个核细胞(PBMC) EBV-DNA的阳性率及病毒载量.方法 采用荧光定量PCR法,对56例淋巴瘤患者(霍奇金淋巴瘤13例,非霍奇金淋巴瘤43例)血浆和PBMC EBV-DNA进行定量测定,比较分析两种样本的EB病毒阳性率及EBV载量的差异.结果 淋巴瘤患者血浆EBV-DNA阳性率(26.8％)与PBMCEBV-DNA阳性率(32.1％)之间差异无统计学意义(P＞0.05);EB阳性淋巴瘤患者血浆与PBMC的EBV栽量之间差异也无统计学意义(P＞0.05).结论 荧光定量PCR检测血浆EBV-DNA具有较好的特异性和敏感性,血浆EBV-DNA定量可以代替PBMC EBV-DNA定量作为监测EBV阳性淋巴瘤疗效的一个生物标志.     

儿童呼吸道EB病毒感染IgM抗体与病毒DNA的相关性分析

目的 研究不同年龄段儿童呼吸道感染EB病毒(EBV)IgM抗体与病毒DNA的相关性.方法采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测1 062例患儿的血清标本中的EBV-IgM,同时用荧光探针PCR法检测患儿咽拭子标本中的EBV-DNA,对不同年龄段结果利用软件SPSS11.5进行χ2检验分析.结果 1 062例患儿EBV-DNA阳性率为46.61%,EBV-IgM阳性率6.78%,二者比较差异有统计学意义(P＜0.01);EBV-DNA各年龄段分组检测中,阳性率分别为21.05%、40.91%、65.71%、50.00%,≤1岁的低龄患儿阳性率最低(21.05%),与其他组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 不同年龄段的儿童由于免疫系统发育处于不同阶段,对EB病毒的免疫应答可能存在差异.     

荧光定量PCR法检测鼻咽癌患者全血和血浆标本EB病毒DNA的比较研究

目的 研究全血和血浆标本对荧光定量PCR方法检测鼻咽癌患者EB病毒DNA的差异.方法 收集40例鼻咽癌患者的全血和血浆标本,用荧光定量PCR方法检测其EB病毒DNA含量,并对结果进行比较分析.结果 全血和血浆标本的EBV-DNA阳性率(含弱阳性)分别为85.0%和72.5%,差异无统计学意义(χ2=3.20,P>0.05),但不含弱阳性则阳性率分别为62.5%和32.5%,差异有统计学显著性意义(χ2=10.08,P<0.01);全血和血浆标本EB病毒DNA浓度几何平均浓度分别为3.58±1.42和4.72±1.53logcopies/ml,差异有统计学显著性意义(t=10.48,P<0.001);全血和血浆标本EB病毒DNA浓度有一定相关性(r2=0.787),但97.5%的患者全血载量高于血浆载量.结论 荧光定量PCR法检测EB病毒DNA全血标本好于血浆标本,更适合在临床实验室应用.     

EB病毒DNA定量检测在鼻咽癌临床分期中的诊断价值

目的探讨EB病毒(EBV)DNA定量检测在鼻咽癌患者不同临床分期中的诊断价值。方法选取广东省汕头大学医学院附属粤北人民医院2013年3月至2015年12月500例病理诊断为鼻咽癌的患者作为研究组,同时选取200例健康体检人群作为对照组。2组同时采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)方法检测血浆EBV-DNA的表达量,并对2组之间及临床TNM分期I、Ⅱ与Ⅲ、Ⅳ的结果进行比较;再将其分别与酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测的血清EBV病毒壳抗原免疫球蛋白A(VCA-IgA)检测结果进行比较。结果荧光定量PCR方法检测EBV-DNA表达量中,研究组阳性率75.00%,对照组阳性率9.00%,两者差异有统计学意义(P0.05)。鼻咽癌患者血浆EBV-DNA拷贝数与临床TNM分期呈正相关,差异有统计学意义(P0.05);鼻咽癌分期越晚,血浆EBV-DNA拷贝数越高。结论血浆EBV-DNA水平与鼻咽癌患者临床TNM分期有显著相关性,可作为评估鼻咽癌患者临床分期的1种辅助性分子生物指标,具有较高应用价值。     

儿童原发性传染性单核细胞增多症中血清EBV抗体与DNA载量检测的诊断意义

目的 探讨EB病毒(EBV)抗体及血清EBV-DNA载量检测在诊断儿童EB病毒感染传染性单核细胞增多症中的意义.方法 收集2007年1月～2008年10月间入住北京儿童医院住院治疗的130例EBV感染传染性单核细胞增多症患儿,采用间接免疫荧光法检测EBV特异性抗体及抗体亲和力,荧光定量PCR方法检测血清中EBV-DNA载量.结果 在130例儿童EBV感染传染性单核细胞增多症病例中,入院时血清EBV抗体反应存在多种类型,抗EBV-CA-IgM阳性率达95.4%,随着时间推移,EBV特异性抗体及抗体亲和力出现相应的变化.77例进行血清EBV-DNA检测,总阳性率为15.6%(12/77),平均拷贝数为1.5×104copies/ml,动态监测提示EBV-DNA载量亦随时间变化而变化.结论 血清EBV-CA-IgM结合EBV-CA-IgG亲和力检测,可以提高原发性EBV感染传染性单核细胞增多症诊断的敏感度.血清中EBV-DNA检测在原发性EBV感染传染性单核细胞增多症诊断中的作用有待进一步研究.     

荧光定量PCR在检测儿童肺炎支原体感染中的应用

目的探讨实时荧光定量PCR(FQ-PCR)方法检测肺炎支原体在临床儿童感染诊断中的价值。方法对425例表现为不明原因持续咳嗽、发热、咽炎、支气管肺炎等上呼吸道感染患儿,采用FQ-PCR方法检测其咽拭子中肺炎支原体核酸(MP-DNA)。结果检测出98例患儿咽拭子MP-DNA阳性,阳性率23.1%,其中男性42例,女性56例,年龄2岁26例,2岁～6岁56例,6岁16例。结论实时荧光定量PCR方法检测对儿童肺炎支原体感染的诊断具有准确、早期、快速、简便等优点。     

荧光定量PCR检测儿童非典型EB病毒感染的临床评价

目的探讨荧光定量PCR检测对诊断和治疗非典型EB病毒(EBV)感染的临床意义。方法对2007-04-2009-10诊断为非典型EBV感染90例患儿,抽静脉血2 ml,注入枸橼酸钠抗凝剂与静脉血充分混匀,用核酸扩增荧光PCR法测定基因拷贝数,同时进行常规外周血及异型淋巴细胞检查,对照病因和首发临床表现,分析儿童感染非典型EBV时荧光定量PCR检测的基因拷贝数变化。结果 EBV-DNA拷贝数能早期反映出非典型EBV感染,拷贝数越高,出现多器官损害概率越高。结论荧光定量PCR检测EBV-DNA拷贝数有助于早期诊断非典型EBV感染,能减少诊疗的盲目性,对临床有一定指导意义。     

EB病毒IgM、IgG及DNA检测在儿童呼吸道感染性疾病中的诊断价值分析

目的分析EB病毒(EBV)IgM、IgG及EBV-DNA在儿童呼吸道感染性疾病中的诊断价值。方法选取400例呼吸道感染患儿作为观察组,100例非呼吸道感染住院患儿作为对照组,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测患儿的EBV-IgM和IgG,荧光定量PCR(FQ-PCR)检测病毒DNA。比较观察组和对照组患儿的EBV-IgM、IgG及EBV-DNA阳性率,评价不同指标的诊断价值。结果观察组患儿EBV-IgM阳性率51.00%,EBV-IgG阳性率58.50%,EBV-DNA阳性率56.25%;对照组患儿EBV-IgM阳性率4.00%,EBV-IgG阳性率11.00%,EBV-DNA阳性率5.00%,差异具有统计学意义(P0.05)。EBV-IgM灵敏度51.00%,特异度96.00%,曲线下面积0.617;EBV-IgG灵敏度58.50%,特异度89.00%,曲线下面积0.583;EBV-DNA灵敏度56.25%,特异度95.00%,曲线下面积0.642。结论 EBV-IgM、IgG及EBV-DNA在儿童呼吸道感染中具有诊断价值。     

外周血细胞形态学检查与EBV-DNA定量分析 在小儿传染性单核细胞增多症早期诊断中的价值

目的 评价外周血异常淋巴细胞(异淋)形态学的检查和实时荧光定量PCR技术检测EB病毒DNA定量在小儿传染性单核细胞增多症早期诊断中的价值。方法 回顾性分析了2013年1月～2014年12月收治的212例传染性单核细胞增多症的患儿,分别抽取其发热初期和1周后抗凝静脉血做外周血涂片细胞形态学检查和实时荧光定量PCR技术检测EBV-DNA定量。结合患儿初诊时的临床表现进行综合分析。异型淋巴细胞>10%及EBV-DNA定量超过1.0×10³拷贝为阳性。结果 在212例传染性单核细胞增多症的患儿中,发热初期外周血涂片细胞形态学检查,82例异型淋巴细胞阳性,100例外周血EBV-DNA定量阳性。1周后复检外周血,156例异型淋巴细胞阳性,最高可达56%; 180例EBV-DNA定量阳性。联合检测外周血细胞形态学异型淋巴细胞及EBV-DNA定量,发热初期,阳性125例,较单纯外周血细胞形态学异型淋巴细胞检测(χ²=17.45,P<0.01)及EBV-DNA定量检测(χ²=5.92,P<0.05)均明显提高; 但1周后,阳性190例,较单纯外周血细胞形态学异型淋巴细胞检测明显升高(χ²=18.16,P<0.01),但与EBV-DNA定量检测比较,无明显提高(χ²=2.12,P>0.05)。结论 联合检测外周血细胞学形态及EBV-DNA定量对早期诊断小儿传染性单核细胞增多症十分重要,结合临床表现,能提高诊断的及时性及准确性。     

3项指标联合检测对儿童原发传染性单核细胞增多症的诊断价值

目的探讨血浆人类白细胞抗原G(HLA-G)、可溶性白细胞抗原G(sHLA-G)、EB病毒(EBV)-DNA载量对儿童原发传染性单核细胞增多症(IM)的诊断价值。方法将60例IM患儿作为观察组,并以同期非IM的发热儿童60例作为对照组。检测并比较两组血浆HLA-G、sHLA-G、EBV-DNA载量,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析HLA-G、sHLA-G、EBV-DNA载量及联合检测对儿童IM的诊断效能。结果观察组血浆HLA-G、sHLA-G、EBV-DNA载量均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析显示血浆HLA-G、sHLA-G、EBV-DNA载量联合检测诊断儿童IM的曲线下面积(0.958)高于HLA-G(0.886)、sHLA-G(0.789)、EBV-DNA载量(0.904)单项检测。结论血浆HLA-G、sHLA-G、EBV-DNA载量水平可作为诊断儿童IM的重要指标,联合检测的特异度和准确度更高。