一种新型HLA衍生肽对大鼠脾细胞免疫功能的抑制作用

目的：观察一种新型HLA衍生肽(RDP1258)的免疫抑制功能并探讨其机制。方法：人工固相合成一种HLA衍生肽(RDP1258)，^3H-TdR掺入法检测其在体外对大鼠脾细胞增殖反应的影响，并采用酶化学法观察其对脾细胞血红素氧化酶-1(heme oxygenase-1，HO-1)活性的影响。结果：RDP1258可显著抑制淋巴细胞转化及MLR的增殖反应；该肽体外降低HO-1活性呈现出剂量依赖性。结论：RDP1258能够显著抑制大鼠脾细胞经丝裂原或同种抗原刺激引起的增殖反应，这种作用可能是通过影响HO-1活性而达到的。     

RDP1258对大鼠脾细胞增殖功能影响的体内研究

目的：探讨一种新型HLA衍生肽（RDP1258）对大鼠脾细胞增殖的全内免疫抑制作用及其机制。方法：人工固相合成PDP1258，用^3H-TdR掺入法观察其对体内大鼠脾细胞增殖反应的影响。采用酶化学法及免疫组化染色方法，观察其对体内脾细胞血纸素氧合酶-1（heme oxygenase-1，HO-1）活性的影响。结果：^3H-TdR掺入法检测表明，RDP1258可显著抑制脾淋巴细胞转化及MLR的增殖反应：但能够明显提高体内HO-1的活性。并增强其表达。结论：RDP1258体内应用能够显著抑制大鼠脾细胞由丝裂原或同种抗原引起的增殖反应，这种作用可能是通过影响HO-1的活性而实现。     

新型HLA衍生肽对人外周单核细胞免疫功能的抑制作用

目的：探讨一种新型HLA衍生肽（RDP1258）对人外周血单核细胞增殖的免疫抑制作用及其机制。方法：人工固相合成RDP1258，用3H-TdR掺入法观察其在体外对人外周单核细胞增殖反应的影响，以酶化学法观察其对淋巴细胞血红素氧合酶-1（Heme oxygenase-1，HO-1）活性的影响。结果：RDP1258可显著抑制淋巴细胞转化及MLR的增殖反应；该肽体外降低HO-1活性呈现出剂量依赖性。结论：RDP1258能够显著抑制人外周单核细胞经丝裂原或同种抗原刺激引起的增殖反应，这种作用可能是通过影响HO-1活性而达到的。     

TLSFJM抑制大鼠心脏移植排斥反应的作用

目的　在同种异体大鼠异位心脏移植模型中 ,探讨TLSFJM对急性移植排斥反应的抑制作用及机制。方法　以F344大鼠作为心脏移植受体 ,以LOU/CN大鼠作为心脏移植供体 ,建立大鼠异位心脏移植模型。受体大鼠分为 3组 ,于移植前后分别施以RPMI16 4 0、CsA或TLSFJM。每天观察移植心脏跳动情况 ,并于停跳当天或之前解剖观察。分别取供体大鼠脾细胞作为刺激细胞 ,取受体大鼠脾细胞作为反应细胞 ,进行单向混合淋巴细胞反应。结果　TLSFJM可明显延长大鼠异位移植心脏的存活时间 :RPMI16 4 0对照组移植心脏的存活期全部为 6d ,TLSFJM治疗组最长均可存活 2 7d ,高剂量 (15mg/kg·d)CsA治疗组存活期超过 2 7d。TLSFJM治疗组大鼠脾细胞增殖的cpm值均低于对照组。结论　TLSFJM具有良好的抗急性移植排斥反应作用。TLSFJM对同种异体抗原诱导T细胞增殖的明显抑制 ,可能是其发挥免疫抑制作用的机制之一     

大鼠胚胎胸腺和后肾原基联合异种移植与诱导免疫耐受的初步研究

目的 将大鼠胚胎胸腺与后肾原基联合移植至无胸腺裸小鼠,探讨联合移植能否重建受体细胞免疫功能并诱导受者对异种供者器官的特异性免疫耐受的关系.方法 从受孕第15天(E15)的Lewis大鼠胚胎中提取胸腺、后肾原基,分别植入BALB/c裸小鼠腹腔右肾包膜下及大网膜内.移植后第10周,行胸腺、后肾移植物的形态学检查及移植后肾的功能检测;并进行外周血T淋巴细胞流式细胞学检测、单向混合淋巴细胞反应(MLR)及皮肤移植试验.结果 移植后第10周,移植胸腺及后肾形态发育良好.移植后肾显示一定的排泄功能,联合移植受体双肾切除后的生存时间明显延长(P＜0.05).联合移植受体的外周血T淋巴细胞重建良好;其淋巴细胞对胸腺供体来源的Lewis大鼠脾细胞的刺激呈特异性低反应(P＜0.01);且胸腺供体来源的大鼠移植皮片平均存活时间明显大于C57BL/6小鼠、BN大鼠移植皮片存活时间(P＜0.01).结论 E15 Lewis大鼠胚胎胸腺、后肾原基联合移植至细胞免疫缺陷的裸小鼠,移植物可生长分化形成器官并发挥功能,受体裸小鼠能重建免疫功能,并有可能诱导对同源供体器官的特异性异种移植免疫耐受.     

四肽化合物CMS030抗移植排斥作用的实验研究

目的：CMS030是从脾脏提取的四肽化合物,本研究观察CMS030对小鼠皮肤和心肌移植排斥反应的影响。方法：通过体外T淋巴细胞转化实验和混合淋巴细胞反应（MLR）实验,观察CMS030在体外的免疫抑制作用,建立小鼠皮肤移植和心肌移植模型,观察CMS030对小鼠同种移植物存活时间的影响,观察CMS030对移植受体小鼠T淋巴细胞转化和脾细胞分泌IL-2的影响。结果：CMS030在体外能够抑制T淋巴细胞转化和MLR,在体内可以明显延长小鼠皮肤移植物和心肌移植物存活时间,抑制皮肤移植受体小鼠T淋巴细胞转化能力和脾细胞分泌IL-2水平。结论：CMS030通过抑制T淋巴细胞分泌IL-2,抑制T淋巴细胞功能,有效拮抗移植排斥反应。     

茴香霉素对小鼠T细胞反应性及其杀伤作用的影响

目的 茴香霉素对小鼠T细胞活化、反应性、杀伤作用及其同种异基因皮肤移植的影响.方法 利用荧光标记的单克隆抗体双染技术结合流式细胞仪检测茴香霉素对小鼠CD3 T细胞早期及中期活化标志分子CD69和CD25表达的影响; 用MTT法检测茴香霉素刺激下T细胞在单向或双向混合淋巴细胞反应中T细胞的反应性及其对大鼠肝癌(7919)细胞的杀伤效应;建立小鼠同种异基因皮肤移植动物模型,观察茴香霉素对移植皮肤存活时间的影响.结果 在最佳剂量10.0 ng/mL时,茴香霉素能够明显抑制T细胞表面分子CD69和CD25的表达,且能抑制单向或双向混合淋巴细胞反应中T细胞的反应性(P＜0.01);10.0 ng/mL茴香霉素亦能明显抑制T细胞对大鼠肝癌细胞的杀伤效应(P＜0.01);5.0和15.0 mg/kg茴香霉素能够明显延长小鼠移植皮肤的存活时间 (P＜0.01).结论 茴香霉素对T 细胞的活化、反应性、杀伤效应及同种异基因皮肤移植排斥反应均有明显抑制作用,可能为治疗免疫反应性疾病提供新的策略 .     

山茱萸总甙对大鼠角膜移植排斥反应免疫抑制作用机制研究

目的：观察山茱萸总甙对大鼠角膜移植模型细胞免疫功能影响，并通过观察外周血淋巴细胞活化状态以期进一步阐明山茱萸总甙的免疫抑制机制。方法： 建立封闭群大鼠SD-Wistar组间同种异体穿透性角膜移植模型，观察脾淋巴细胞对丝裂原刀豆蛋白A(ConA)刺激的增殖反应和单向混合淋巴细胞反应；采用双标法流式分析技术(PE标记CD4单抗及FITC标记的CD8、CD25单抗)，观察角膜移植术后不同时间外周血淋巴细胞表型变化，并计算CD4/CD8比值。 结果： ①山茱萸总甙可以明显抑制同种异体穿透性角膜移植大鼠T淋巴细胞的增殖反应和单向混合淋巴细胞反应。②外周血淋巴细胞表型改变主要结果如下：空白对照组大鼠外周血CD4、CD8的表达及CD4/CD8比值在术后各时点其差别无显著。但术后表达CD25的CD4阳性细胞明显升高。治疗组CD4/CD8比值则下降，术后表达CD25的CD4阳性细胞明显低于对照组。 结论： 抑制T淋巴细胞的增殖、混合淋巴细胞反应、T淋巴细胞活化表达CD分子，IL-2受体的表达，可能是山茱萸总甙抑制机体细胞免疫功能的主要机制之一。     

对自身非T细胞起反应的人T细胞的特异性和抑制功能

用正常人的非 T 淋巴细胞刺激自身 T 细胞,可使后者增殖,称之为自身混合淋巴细胞反应(MLR)。最近发现,SLE 患者的T 细胞即使在异体 MLR 中也能起反应,却不能产生自身 MLR 反应,也不能用 ConA     

小鼠树突状细胞表面PD-L1分子对T淋巴细胞协同刺激效应的研究

目的：琛讨小鼠髓系DCs表面PD-L1分子在树突状细胞介导T细胞免疫应答中的作用。方法：采用流式细胞术分别检测未成熟DCs和凋亡肿瘤细胞负载并经CD40配基化的成熟DCs表面免疫分子的表达；混合淋巴细胞反应(MLR)和抗PD-L1单抗阻断试验分析未成熟DCs和成熟DCs表达的PD-L1分子对T淋巴细胞的协同刺激／抑制效应；^3H-TdR掺入试验检测未成熟DCs和成熟DCs对T淋巴细胞的促增殖效应；ELISA测定各组MLR反应上清中IL-10、IFN-γ的分泌水平；MTT比色法检测成熟DCs激发的肿瘤抗原特异性CTL对肿瘤细胞的杀伤效应。结果：未成熟DCs表面高表达PD-L1，负性调节未成熟DCs对自体T淋巴细胞的促增殖作用，抑制T细胞分泌IL-10、IFN-γ；凋亡肿瘤细胞负载并经CD40配基化的成熟DCs中等水平表达PD-L1，具有显著增强对自体T细胞的体外激发、扩增和细胞毒效应的作用，并可增加T细胞的IFN-γ分泌。结论：未成熟DCs高表达PD-L1抑制了对T细胞共刺激效应；CD40配基化成熟的DCs中度表达。PD-L1有助于激发T细胞介导免疫应答。     

移植免疫中T细胞疫苗作用机制的初步分析

为分析Ｔ细胞疫苗同种兔疫抑制作用的机制，在体外观察了Ｔ细胞疫苗免疫小鼠细胞免疫应答能力的改变，分别在ＭＩＣ实验中，观察了免疫小鼠血清和免疫小鼠脾细胞对同种应答细胞反应能力的影响。结果表明：免疫小鼠淋巴细胞ＣｏｎＡ转化反应能力及同种抗原反应能力均显著降低，免疫小鼠血清及其脾细胞不同程度地抑制了同种应答细胞的反应能力，但以上作用并未表现出抗原特异性。     

RDP1258对大鼠脾细胞增殖及HO-1活性的抑制作用

目的 :观察一种新型HLA衍生肽 (RDP12 5 8)的免疫抑制作用 ,并探讨其机制。方法 :用化学方法合成一种HLA衍生肽(RDP12 5 8) ,以3 H TdR掺入法观察其在体外对大鼠脾细胞增殖的影响 ;以酶化学法观察其对脾细胞血红素氧合酶 1(hemeoxygenase 1,HO 1)活性的影响。结果 :RDP12 5 8可显著抑制大鼠脾细胞增殖并以剂量依赖的方式降低HO 1的活性。结论 :RDP12 5 8能够显著抑制丝裂原或同种抗原刺激所致大鼠脾细胞的增殖反应 ,其抑制作用可能是通过降低HO 1活性而实现的     

同种特异T细胞疫苗诱导移植物存活期延长的研究——Ⅰ.同种特异T细胞疫苗诱导的细胞免疫水平低下

在体外实验中观察了同种特异T细胞疫苗（TCV）免疫鼠T淋巴细胞对同种抗原和有丝分裂原（ConA）的反应能力。B6同种抗原特异TCV免疫的BALB/c小鼠对B6同种抗原的反应（MLR）能力明显变抑制,对无关第三者同种抗原AKR的反应能力也显著下降,表明存在抗原非特异性的抑制作用。在BALB/c同种抗原特异TCV免疫的B6小鼠中,获得一致的结果。在观察两组TCV免疫动物T细胞对Cond诱导的淋巴细胞增殖实验中,与正常小鼠 T细胞反应性比较,TCV免疫动物 T细胞的增殖能力显著下降,表现为抗原非特异作用。此与MLR中ConA-T细胞免疫动物的结果相一致。在CML实验里,同种抗原特异TCV免疫小鼠的脾细胞体外诱导同种CTL活性明显受到抑制,CTL 活性十分低下。体外实验结果表明:同种特异TCV免疫小鼠可诱发同种抗原反应和对ConA诱发的增殖反应能力显著低下,表现为抗原非特异性作用。     

Complement inhibits immune responses: C3 preparations inhibit the generation of human cytotoxic T lymphocytes

C3 fragments have been shown to inhibit mitogen- and antigen-induced human lymphocyte blastogenesis. In this study, C3 preparations and a small fragment of C3 (contained in a preparation called Fraction 2) were examined for their capacity to regulate cytotoxic T lymphocytes (CTL) and proliferative mixed lymphocyte responses (MLR). We found that both preparations inhibited the generation of allogeneic human CTL as well as MLR in a dose-related manner. In contrast, Fraction 1, which contained native C3 and C3b, did not inhibit the generation of CTL nor did it inhibit the MLR. The kinetics of inhibition of proliferation were divergent from the kinetics of inhibition of CTL generation; the active preparations inhibited proliferation significantly when added as late as day 5 of a 6-day culture, whereas no inhibition of CTL generation was seen when these preparations were added after day 3 of culture. Cultures in which C3 preparations caused complete inhibition of CTL generation had normal levels of the nonspecific, anomalous killer cell activity, as assayed on K 562 target cells. Furthermore, C3 preparations and Fraction 2 had no effect on the lytic function of differentiated CTL, on “spontaneous” natural killer cell activity or on interferon-induced augmentation of natural killer cell activity. These findings indicate that C3 fragments may play a negative role in the regulation of CTL responses.     

柔毛淫羊藿提取液对小鼠免疫反应影响的体内外观察

经50％甲醇回流处理的柔毛淫羊藿提取液,在体外可强烈地抑制小鼠淋巴细胞对ConA、LPS的增殖反应和小鼠混合淋巴细胞反应(MLR),其抑制率与药物的浓度呈正相关。体内试验,给小鼠腹腔注射淫羊藿提取液,可部分延长同种异体新生鼠心脏移植物的存活期。     

CTLA4Ig修饰的树突状细胞在体外对淋巴细胞增殖及胞毒效应的影响

目的:探讨CTLA4Ig修饰的树突状细胞(DC)对T细胞增殖和细胞毒性T细胞(CTL)细胞毒活性的影响。方法:采用脂质体转染法,将质粒pG/CTLA4Ig转入DC。采用ELISA和SDS-PAGE鉴定转染质粒pG/CTLA4Ig的DC培养上清。以C57BL/6小鼠的单个核细胞作为反应细胞,以未修饰的DC及修饰的DC作为刺激细胞,共培养6 d,用MTT比色法检测细胞的增殖。用乳酸脱氢酶法和ELISA法,分别测定细胞毒活性及T细胞凋亡。结果:CTLA4Ig融合蛋白和修饰的DC,对同种细胞刺激的增殖反应有明显地抑制作用;而未修饰的DC可显著诱导淋巴细胞增殖反应。CTLA4Ig融合蛋白和修饰的DC,对特异性CTL的细胞毒活性有明显地抑制作用,且可诱导T细胞凋亡。结论:稳定表达CTLA4Ig融合蛋白的DC,对T细胞增殖和对CTL的细胞毒活性具有明显地抑制作用,并可诱导T细胞凋亡。