三苯氧胺对人脑胶质瘤细胞SHG-44增殖的影响

目的研究三苯氧胺（TAM）对人脑胶质瘤细胞SHG-44增殖的影响并探究其可能机制。方法将不同浓度TAM和脑胶质瘤细胞作用,分别用细胞划痕法、3H-TdR掺入法、流式细胞仪和免疫组化法检测细胞转移能力、细胞DNA合成情况、细胞周期改变和细胞凋亡率及雌激素受体的表达情况。结果TAM在体外能明显抑制SHG-44细胞转移,抑制细胞DNA合成,且抑制作用呈浓度依赖性。流式细胞仪显示细胞经TAM处理后,表现为G0/G1期和G2/M期细胞所占比例增加,而S期细胞所占比例减少。用0、2、10μmol/LTAM处理时细胞凋亡率分别为（2.05±0.28）%、（7.66±0.52）%和（19.00±0.77）%,SHG-44细胞不表达雌激素受体。结论TAM可能通过改变细胞周期和诱导细胞凋亡来抑制脑胶质瘤细胞SHG-44的生长。     

脑肿瘤干细胞放射敏感性的实验研究

目的 评价脑肿瘤干细胞(brain tumor stem cell,BTSC)与胶质瘤细胞系SHG-44细胞放射敏感性的差异.方法 SHG-44细胞分别接种于含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基和无血清的DMEM/F12培养基(添加bFGF和EGF)中.CD133免疫细胞化学染色鉴定BTSC.0、0.5、1、2、3、4、6、8、10、20 Gy X线照射SHG-44细胞和BTSC后以流式细胞仪检测两种细胞的细胞周期及细胞凋亡率,绘制SHG-44细胞和BTSC的存活曲线.结果 SHG-44细胞中存在BTSC,后者能在无血清的DMEM/F12培养基中存活并悬浮生长,增殖形成克隆球,具有自我更新和增殖能力,表达特异性标志物CD133.两种细胞在X线照射后细胞周期无明显差异,BTSC的细胞凋亡率低于SHG-44细胞(P<0.05),细胞存活率高于SHG-44细胞(P<0.01).结论 BTSC的放射敏感性较SHG-44细胞明显降低,是胶质瘤放疗抵抗的主要原因.     

吴茱萸碱对胶质瘤SHG-44细胞凋亡的促进作用及其机制

目的研究吴茱萸碱对人胶质瘤SHG-44细胞凋亡的促进用及其机制。方法将体外培养的胶质瘤SHG-44细胞分为对照组、吴茱萸碱组(根据吴茱萸碱浓度不同分为3个亚组),CCK-8法观察细胞活性,流式细胞仪测定细胞凋亡率,Hoechst 33258核染色法观察细胞核凋亡,透射电镜观察细胞形态学的变化,Western blot法检测胶质瘤SHG-44细胞内Cleaved Caspase-3及Cleaved Caspase-9的蛋白表达。结果吴茱萸碱对胶质瘤SHG-44细胞增殖有抑制作用。流式细胞仪及Hoechst 33258核染色法的检测结果表明,随着吴茱萸碱作用浓度的递增,胶质瘤SHG-44细胞凋亡率呈剂量依赖性递增;吴茱萸碱作用后可使Cleaved Caspase-3及Cleaved Caspase-9蛋白的表达升高。结论吴茱萸碱通过改变Cleaved Caspase-3及Cleaved Caspase-9蛋白的表达,抑制胶质瘤SHG-44细胞增殖并促进其凋亡。     

肝癌细胞受照后代生长特性及放射敏感性变化

目的 :探讨肝癌细胞照射后存活后代生长特性及放射敏感性的变化。方法 :人肝癌细胞株HepG2和其照射后存活后代体外培养 ,测定其群体倍增时间、放射敏感性。结果 :HepG2的群体倍增时间 (96 .0± 6 .8)h ,克隆形成率为 (13.0± 1.5 ) % ,SF2 为 0 .4 1± 0 .0 5。HepG2照射后存活后代群体倍增时间为 (12 .4 8± 12 .2 )h(t=3.5 72 ,P <0 .0 5 ) ,克隆形成率为 (5 .0± 0 .6 ) % (t =8.5 37,P <0 .0 1) ,SF2 为 0 .6 5± 0 .0 8(t =3.811,P <0 .0 5 )。结论 :肝癌细胞照射后存活后代生长延缓 ,放射敏感性降低     

60Coγ线照射联合Tamoxifen体外抑制脑胶质瘤细胞的生长研究

目的 探讨Tamoxifen(TAM)和^60Coγ线照射对脑胶质瘤细胞的增殖及凋亡影响。方法 用^3H-TdR掺入法测定TAM单用以及和^60Coγ线联用对脑胶质瘤细胞的抑制作用，用激光共聚焦显微镜观察TAM和^60Coγ线照射对脑胶质瘤细胞凋亡的影响。结果TAM对脑胶质瘤细胞的生长有明显的抑制作用，且抑制作用呈浓度依赖性；TAM与^60Coγ线联用具有显著的协同作用，TAM能诱导细胞凋亡，在激光共聚焦显微镜下表现为核固缩或核碎裂，可见凋亡小体。结论 ^60Coγ线和TAM联用在体外能有效地抑制脑胶质瘤细胞的生长。     

慢分割外照射对体外培养的小细胞肺癌细胞系放射敏感性的影响

目的 观察外照射前后小细胞肺癌NCI-H446细胞系放射敏感性的变化以及在外照射干扰下两组细胞生长和凋亡的特点。方法 采用GWGP80型远距离60Co治疗机对进入指数生长期的NCl-H446小细胞肺癌细胞系进行分次外照射，每次2Gy，总剂量为50Gy。然后，对未进行过外照射的NCI-H446细胞(S-cell)和己完成50Gy外照射的NCI-H446细胞(R-cell)再给予不同剂量的外照射，l周后计算各自的集落形成率(PE)和存活率(S)；另外，对相同数量的S-cell和R-cell给予同一剂量的外照射，于照射后的不同时间点计算细胞总数和死亡细胞百分率。结果 S-cell和R-cell的集落形成率分别为44．67％和13．11％，两者相比具有非常显著性差异(P＜0．01)；在分别给予2Gy和4Gy的外照射后，R-cell的存活率分别为79．67％和23．73％，而S-cell分别为51．24％和19．40％，两者分别相比均具有显著性差异(P均＜0．05)。在外照射后的相同时间点，两组细胞的细胞总数和死亡细胞百分率相差不大(P＞0．05)。结论 经50Gy的外照射后，NCI-H446细胞的自然生存能力明显下降，同时，其放射敏感性也有所下降；两组细胞在外照射的干扰下，其生长和凋亡的速率较为接近。     

CoCl2诱导缺氧对Eca109细胞细胞周期及放射敏感性的影响

目的 观察化学缺氧剂二氯化钴(CoCl2)诱导缺氧条件下,Eca109食管癌细胞的细胞周期及凋亡变化,并观察缺氧对放射敏感性的影响.方法 CoCl2用于建立Eca109食管癌细胞体外缺氧培养模型,并设对照组(CoCl2浓度为0 μmol).流式细胞仪(FCM)检测缺氧培养不同时相(0、8、16、24h)Eca109细胞株细胞周期和凋亡的变化;集落形成实验观察细胞的放射敏感性.结果 CoCl2诱导Eca109细胞缺氧0-24h,随着缺氧时间的延长,处于G0/G1期的细胞明显增加,S期细胞减少.而G2/M期、凋亡无影响(P＞0.05);6℃oγ射线5Gy照射,缺氧加照射组G0/G1期细胞增加、G2/M期细胞减少.单纯照射组G0/G1期细胞减少,G2/M期细胞增加.克隆形成实验结果显示,缺氧组和对照组的Eca-109细胞的D0值分别为2.44Gy和2.48Gy,存活分数分别为97.33%和96.33%;缺氧组和对照组Eca-109细胞的Dq值分别为2.89Gy和0.52Gy,照射4Gy后,细胞存活分数分别为48.3%和21.7%,缺氧条件下Eca109细胞放射敏感性降低.结论 CoCl2诱导缺氧影响Eca109细胞的细胞周期,并使细胞放射敏感性降低.     

CoCl2诱导缺氧对Eca109细胞细胞周期及放射敏感性的影响

目的 观察化学缺氧剂二氯化钴(CoCl2)诱导缺氧条件下,Eca109食管癌细胞的细胞周期及凋亡变化,并观察缺氧对放射敏感性的影响.方法 CoCl2用于建立Eca109食管癌细胞体外缺氧培养模型,并设对照组(CoCl2浓度为0 μmol).流式细胞仪(FCM)检测缺氧培养不同时相(0、8、16、24h)Eca109细胞株细胞周期和凋亡的变化;集落形成实验观察细胞的放射敏感性.结果 CoCl2诱导Eca109细胞缺氧0-24h,随着缺氧时间的延长,处于G0/G1期的细胞明显增加,S期细胞减少.而G2/M期、凋亡无影响(P＞0.05);6℃oγ射线5Gy照射,缺氧加照射组G0/G1期细胞增加、G2/M期细胞减少.单纯照射组G0/G1期细胞减少,G2/M期细胞增加.克隆形成实验结果显示,缺氧组和对照组的Eca-109细胞的D0值分别为2.44Gy和2.48Gy,存活分数分别为97.33%和96.33%;缺氧组和对照组Eca-109细胞的Dq值分别为2.89Gy和0.52Gy,照射4Gy后,细胞存活分数分别为48.3%和21.7%,缺氧条件下Eca109细胞放射敏感性降低.结论 CoCl2诱导缺氧影响Eca109细胞的细胞周期,并使细胞放射敏感性降低.     

放射线照射引起胶质瘤细胞细胞周期和凋亡的动力学变化及其对Chk1/2蛋白表达的影响

目的:观察非同步化的U251细胞株对放射线所表现的细胞周期和凋亡的变化以及放射线对Chk1、Chk2蛋白表达的影响。方法:以不同剂量的放射线处理非同步化的U251细胞株,流式细胞仪检测处理后不同时间细胞周期和凋亡的变化,流式细胞仪和Westernblot法检测照射后Chk1、Chk2蛋白表达量。结果:非同步化的U251细胞株经放射线处理后可引起G2/M期阻滞,细胞周期阻滞呈照射剂量依赖性增强,而细胞凋亡均发生于细胞周期阻滞解除后,其强度与细胞周期激活的程度成反比。照射后不影响Chk1、Chk2蛋白水平的表达。结论:放射线处理非同步化的U251细胞株可成功地建立G2/M期阻滞模型,但对Chk1、Chk2蛋白水平表达无影响。     

端粒酶抑制剂联合辐射对人胶质瘤细胞存活的影响

目的 :观察端粒酶抑制剂AZT联合60 Coγ 射线对人脑胶质瘤细胞U2 5 1端粒酶活性及细胞存活的影响 ,探讨AZT的放射增敏作用。方法 :实验分 4组 :A、空白对照组 ;B、放射组 ;C、加药组 ;D、加药放射组。用克隆形成分析法观察AZT对U2 5 1细胞放射敏感性的影响 ,通过拟合生存曲线计算放射增敏比SERD0 、SERDq、SERSF2 。用端粒重复序列扩增 (telomericrepeatamplificationprotocol,TRAP) PCR ELISA方法检测端粒酶活性的动态变化。结果 :照射前经 0 .8mmol·L-1AZT处理 2 4h明显降低了 2Gyγ 射线照射后U2 5 1细胞的存活分数 ,SERD0 、SERDq、SERSFM2 分别为 1.2 94 ,1.2 5和 1.36 5 ;表明AZT具有放射增敏的作用 (P <0 .0 5 )。端粒酶活性分析显示A、B、C、D组细胞的端粒酶活性分别为 1.5 6 3± 0 .0 2 2 ,1.92 3± 0 .188,1.0 5 7± 0 .12 6 ,1.2 0 9± 0 .15 3,各组之间差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 :AZT能明显抑制 2Gy照射诱导的U2 5 1细胞端粒酶活性升高 ,并显著增加U2 5 1细胞的放射敏感性 ;AZT的放射增敏作用可能与端粒酶活性受抑制有关。     

中华眼镜蛇毒组分对神经胶质瘤细胞U251生长的抑制作用

目的:探讨中华眼镜蛇毒卡迪(KD)中进一步分离纯化的10个组分KD Ⅰ-l、KD Ⅰ-1 H、KD Ⅰ-2、KDQ Ⅰ-2、KDⅡ、KDⅡ-2、KDⅡ-3,KDⅢ-1,KDⅢ-2和KDⅢ-2'对神经胶质瘤细胞U251的抑制作用.方法:采用MTT法和台盼蓝拒染法观察各组分对U251细胞增殖的影响.结果:在l～100 μg/mL的浓度范围内用MTT法筛选出3个具有显著抑制作用的组分KD、KDⅡ-3和KDⅢ-1.对以上3种组分再次细分浓度后(5、10、30、50、80、100 μg/mL)的MTT结果显示以上三种组分仍然具有显著的抑制作用.选取了KDⅢ-1和KDⅡ-3进一步细分浓度后(1、3.75、7.5、15、30 μg/mL)的MTT结果显示KDⅢ-1和KDⅡ-3组分在7.5 μg/mL时的抑制率分别为63.94%和62.15%,且2种组分在1～30 μg/mL呈现剂量效应关系(r=0.694,P＜0.05;r=0.732,P＜0.05).半数抑制浓度分别为6.65 μg/mL和10.54 μg/mL.KDⅡ-3的生长曲线显示药物的各个浓度(1、3.75、7.5、15、30 μg/mL)对肿瘤细胞均有抑制作用,以24 h的抑制作用最为明显.在7.5～15 μg/mL浓度范围内呈现明显抑制作用.结论:分离纯化的10组分对U251细胞有不同程度的抑制作用,尤以KDⅡ-3的抑制作用最为显著,并有明显的剂量效应关系.     

人脑胶质瘤细胞株SHG-44放射敏感性的测定方法探讨

目的 探讨MTT法、细咆计数Kit-8(CCK-8)法在进行人脑胶质瘤细胞株SHG-44细胞放射敏感性测定时能否替代集落形成试验法。方法 运用3种方法分别在0、1、2、3、4、6、8、10(3y8个不同剂量点照射后检测其存活分数，采用统计学检查分析3种方法所得存活分数的相关性。结果 在一定照射剂量内(照射剂量≤3Gy时)，MTT法、CCK-8法与克隆形成法相关性较好，而超出该剂量范围时的相关性差。经直线回归分析，3种方法均不存在高度线性相关。CCK-8和MTT法相比无更好的相关性。结论 集落形成法仍然是测定放射敏感性的“金标准”，MTT法等其他方法可以提供参考，但无法替代集落形成法。     

姜黄素对人卵巢癌细胞株skov3生长的影响

目的 探讨姜黄素对人卵巢癌细胞株skov3体外生长的的影响.方法 采用MTT法测定姜黄素不同浓度及不同时间对人卵巢癌细胞株skov3生长的抑制作用,计算细胞生长抑制率;光镜和电镜下观测细胞形态学及超微结构的改变;流式细胞仪检测细胞的凋亡率.结果 姜黄素具有诱导人卵巢癌细胞株skov3细胞凋亡的作用,呈剂量和时间依赖性....     

电化学疗法对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及细胞周期的影响

目的探讨电化学疗法对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及周期的影响。方法将等量人肿瘤细胞接种于培养板中,随机分为对照组和治疗组,治疗组按电量不同又分4组,对照组不通电。电化学治疗后培养6h和24h后用流式细胞仪分别检测各组细胞周期变化及凋亡率。结果电化学治疗后6h和24h MCF-7细胞凋亡率治疗组比对照组增加明显（P〈0.05）;治疗各电量组随电量的增加处于G0/G1期的细胞比例先逐渐增高,但至20C时反降低;而S期细胞比例有随电量增加下降至20C时升高的趋势。结论电化学疗法可抑制体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞株的生长,其机制与诱导肿瘤细胞凋亡及影响其细胞周期有关。     

长春瑞滨联合外照射对人乳腺癌MCF-7细胞作用的研究

目的　研究长春瑞滨联合外照射对人乳腺癌MCF - 7细胞的抗肿瘤机制。方法　采用MTT法检测长春瑞滨对MCF - 7细胞毒作用 ,流式细胞仪检测各组细胞周期分布、细胞凋亡指数 ,电子显微镜观察MCF - 7细胞凋亡的形态学特征。结果　MTT检测表明 ,长春瑞滨给药 2 4h的IC50 为 7.2 0 μg/ml。流式细胞仪细胞周期分析显示 :C组细胞大多处于G1～S期 ,V组G2 相细胞明显高于对照组 ,V组G2 相细胞与C组及R组相比均差异显著 (均P <0 .0 5 )。流式细胞仪检测各组MCF - 7细胞凋亡结果显示 :R组、V组、V +R组在不同时间内的平均凋亡指数分别为 2 .98± 3 .90 %、8.0 1± 1.87%、15 .5 7± 5 .2 3 % ,(V +R)组与V组及R组相比均差异显著 (均P <0 .0 5 )。透射电镜观察到MCF - 7细胞凋亡的形态学表现为染色质边集 ,胞浆浓缩 ,核固缩 ,可见有膜包绕的凋亡小体脱落。结论　长春瑞滨对乳腺癌MCF - 7细胞具有显著的细胞毒作用。它可诱导乳腺癌MCF - 7细胞生长阻止在G2 期 ,并能诱导它的凋亡。在照射前使用 ,能增强放疗对MCF - 7细胞凋亡的诱导作用     

中药安迪注射剂对人食管癌细胞的放射增敏作用

目的 :观察安迪注射剂 (Andi)对电离辐射生物学效应的影响。方法 :人食管癌细胞株 (ECA 10 9)在富氧 (空气 )和缺氧 (通 99 99%的高纯氮气 5 0min)条件下分别观察对照组、Andi组、60 Co γ线辐射和Andi +60 Co γ线辐射 4组细胞形态 (光镜 )、细胞倍增时间 (TD)、存活率 (SR)及集落存活分数 (SF)。结果 :光镜下可见Andi组、辐射组、Andi+辐射组癌细胞变性、坏死、凋亡 ,以Andi +辐射组为最显著。MTT法测定对照组、Andi组、60 Co γ线辐射和Andi+60 Co γ线辐射四组缺氧细胞的TD(% )分别为 4 6 12 ,118 72 ,6 2 81,171 0 2h ,SR分别为 10 0 % ,4 2 % ,86 % ,30 % ;各治疗组与对照组比较TD 和SR均相差显著 (P <0 0 5 )。方差分析显示 ,辐射在富氧 (F =90 19,P =0 0 0 0 1)和缺氧 (F =37 0 9,P =0 0 0 0 3)时均为SF的影响因素 ;Andi仅在缺氧时对SF是有意义的影响因素 (F =2 9 0 4 ,P =0 0 0 0 7) ,与60 Co γ线辐射合用对缺氧细胞SF的影响具有协同作用 (F =11 37,P =0 0 0 98)。用单靶多击模型拟合数据分析 ,Andi的放射增敏比 (SER)为 1 5 ,相对敏化效应 (RSE)为 5 5 %。结论 :Andi对缺氧ECA 10 9细胞具有明显的细胞毒和放射增敏作用。     

薯蓣皂苷元对人骨肉瘤U-20S细胞增殖和周期的影响

目的 探讨薯蓣皂苷元对人骨肉瘤U-20S细胞的作用机制. 方法 采用四氮唑盐还原法观察薯蓣皂苷元对U-20S细胞体外生长的作用,流式细胞技术检测细胞周期DNA分布. 结果 薯蓣皂苷元对U-20S细胞的生长具有明显抑制作用,半抑制率为87μmoL/L;用药后细胞周期阻滞于G1期. 结论 著蓣皂苷元能使U-20S细胞阻滞于G1期,明显抑制U-20S细胞生长,对骨肉瘤的治疗有一定价值.     

熊果酸对人肝癌SMMC-7721细胞周期的影响

目的探讨熊果酸（UA）对人肝癌SMMC-7721细胞周期的影响。方法用不同浓度的UA处理SMMC-7721细胞,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪检测细胞周期的变化,RT-PCR检测细胞周期相关基因p21、p53及增殖细胞核抗原（PCNA）的表达。结果 UA对SMMC-7721细胞生长有显著的抑制作用,且此作用呈明显的时间、剂量依赖性;UA可以诱导SMMC-7721细胞阻滞在S期,RT-PCR结果显示其能够上调p21和p53基因,下调PCNA基因。结论 UA能明显抑制SMMC-7721细胞的生长,引起细胞周期阻滞;细胞周期阻滞的发生与p21、p53、PCNA基因变化相关。