不同剂量辐射损伤后T淋巴细胞亚群,TH1和TH2变化观察

目的 观察不同剂量辐射损伤对小鼠T淋巴细胞功能亚群的影响,探讨辐射所致的免疫系统损伤在细胞学和分子水平上的机制。方法 C57BL/6j小鼠采用⁶⁰Coγ射线照射诱导辐射损伤模型。总照射剂量分别为0.7、1.4、2.8、和5.6Gy。应用细胞表面标志和细胞内因子标记,流式细胞仪检测分析不同剂量组小鼠脾T淋巴细胞功能亚群CD3,CD4,CD8改变及Th1和Th2的变化。结果 1.小鼠脾T-淋巴细胞功能亚群CD3,CD4和CD8在照射后均有明显降低,降低幅度与受照剂量明显相关。2.CD4/CD8比值显示照射后均有明显升高。3.照射后Th1和Th2均有明显降低,其中Th1降低明显高于Th2。受照剂量大于2.8Gy组Th2/Th1比值较空白对照组明显升高。结论 不同照射剂量对T淋巴细胞功能亚群CD3,CD4,CD8和CD4/CD8有明显影响,Th1和Th2和Th2/Th1功能亚群的失衡在辐射所致的免疫损伤中具有较重要作用。     

山楂醇提物腹腔注射对辐射损伤小鼠保护作用的研究

目的 研究山楂醇提物腹腔注射对辐射损伤小鼠的保护作用。方法 昆明种雄性小鼠60只被分为五组:正常对照、放射对照、药物高、中、低剂量组。各药物组腹腔内注射一次药物,其余两组给予生理盐水,1h后实验组小鼠用⁶⁰Coγ射线6Gy照射。分别在照射前4h、照后6d、照后12d称量小鼠体重、检测血象三次。在照后12d,处死小鼠,测股骨骨髓DNA含量、骨髓有核细胞数。结果 ①高剂量组8只小鼠注射药物后腹腔感染出血死亡,其余实验小鼠均存活。②同放射对照组比,三种浓度的山楂醇提物可以促进受辐射损伤小鼠外周血白细胞、血小板数的恢复。结论 山楂醇提物腹腔注射可促进受辐射损伤小鼠造血功能的恢复,对骨髓DNA及有核细胞有一定的保护作用。     

X射线对体外培养乳鼠心肌细胞损伤的实验研究

目的 研究X射线对体外培养的心肌细胞活性及凋亡的影响。方法 体外培养新生大鼠心肌细胞,分为对照组和放射组,放射组分别用X射线10Gy、20Gy、30Gy、40Gy单剂量照射心肌细胞,采用MTT法观察X射线对乳鼠心肌细胞活性的影响;血生化自动分析仪定量测定X射线作用后心肌细胞乳酸脱氢酶(LDH)的改变;吖啶橙/碘化丙啶(AO/PI)双染色法在激光扫描共聚焦显微镜下观察心肌细胞凋亡的形态学改变;流式细胞仪定量检测心肌细胞的凋亡率。结果 ①X射线剂量在10~40Gy均能抑制心肌细胞活性并成剂量依赖性;②细胞心肌酶谱检测到LDH释放量与X射线剂量相关;③流式细胞仪发现心肌细胞凋亡率与X射线照射剂量有相关性。结论 本研究结果显示X射线对心肌细胞有毒性作用,可致心肌细胞损伤,表现为心肌细胞坏死和凋亡发生率增加。     

不同剂量X射线对BALB/c小鼠放射性皮肤损伤程度比较

目的 对不同剂量X射线诱发BALB/c小鼠放射性皮肤损伤情况进行研究,为建立基础医学中动物急性放射性皮肤损伤模型提供实验依据。方法 采用剂量均一、安全性高的Rs2000系列生物学X射线辐照仪以40、50、60 Gy照射BALB/c小鼠下肢,对皮肤创面进行连续观察并对其评分,在辐照后32天取不同剂量组小鼠损伤皮肤作HE染色,比较损伤皮肤病理学变化。结果 BALB/c小鼠易感辐射,其皮肤损伤症状在照射后10天左右出现,50、60 Gy两组小鼠在32天后皮肤不再恶化,而低剂量组病程仍在发展。结论 BALB/c适合做放射损伤模型,且40 Gy更容易获得较佳的急性放射性皮肤损伤模型。     

咽部照射致机体免疫功能损伤的菌群因素研究

目的 观察微生物学等级不同的两种大鼠SPF级(specific pathogen free)和普通级大鼠(CV级,conven-tional raised)在中耳鼻咽部照射后外周血T细胞及亚群的改变,探讨菌群因素对于电离辐射致机体免疫状态改变中所起的作用。方法 选取SPF级和CV级SD大鼠各8只放射前做口咽菌群培养、鉴定,同时比较脾脏脏器系数。随后每组5只,分别6MX直线加速器以0、10Gy、20Gy、30Gy照射大鼠鼻咽区域,并与放射后24~36h,流式细胞仪(FCM)检测放射前后两种大鼠外周血中T淋巴细胞及CD₄⁺、CD₈⁺T淋巴细胞亚群。结果 ①CV级大鼠口咽部细菌培养阳性率为100%,并为铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌等致病菌,SPF级大鼠口咽部细菌培养阳性率为25%,且检出菌为常驻菌奇异变形杆菌;②脾脏系数差别无统计学意义,但SPF级大鼠脾脏系数相对较小。③未照射的两种大鼠外周血T淋巴细胞总数和CD₈⁺淋巴细胞无差异,CD₄⁺/CD₈⁺比值基本相同;经过照射的CV级大鼠外周血T淋巴细胞总数和CD₄⁺淋巴细胞均明显减少,CD₈⁺淋巴细胞增加,组间差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05),并与辐射剂量有一定的效应关系,同时CD₄⁺/CD₈⁺比值呈明显下降趋势,组间差异有统计学意义(P<0.01);SPF级大鼠照射后外周血T淋巴细胞总数、CD₄⁺和CD₈⁺淋巴细胞亚群在电离辐射后无明显下降,CD₄⁺/CD₈⁺比值变化统计学组间分析无明显差异。结论 微生物学等级不同的动物其鼻咽放射后机体免疫紊乱的程度是有差异的,SPF级动物损伤的程度较低,提示菌群因素在机体放射性损伤中可能起着协同作用。     

桑牛强生胶囊对4.0Gy照射小鼠造血功能的影响

目的 观察桑牛强生胶囊(SN)对4.0 Gy照射小鼠造血功能的保护作用。方法 将小鼠随机分为正常对照组、环磷酰胺对照组、阿归对照组和药物大小剂量5个实验组。实验组小鼠以⁶⁰Coγ射线照射和给予环磷酰胺注射形成骨髓抑制模型,药物组给予不同剂量中药口服,正常对照组与环磷酰胺对照组给予生理盐水。实验前及实验后测体重,第7、14天检测血象,停药后的第2天,处死小鼠,观察骨髓有核细胞数。结果 SN可使由于⁶⁰Coγ射线照射和环磷酰胺所致的Hb、RBC、WBC、PC减少明显提高,骨髓有核细胞数比环磷酰胺对照组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01]。结论 SN有显著刺激骨髓造血功能的作用,具有防治辐射损伤的作用。     

乳铁蛋白对小鼠的辐射防护作用

目的 研究乳铁蛋白对辐射损伤小鼠的保护作用。方法 小鼠随机分成3组,空白对照组、单纯照射组、给药组。给予6.8Gy照射剂量小鼠30d观察各组存活率实验;给予2Gy照射剂量观察各组小鼠的骨髓微核率并对有核细胞进行计数。结果 单纯照射组小鼠照后死亡率较高,25d全部死亡,与给药组比较存活时间差异有统计学意义(P < 0.05),一般情况也有统计学意义(P < 0.05)。单纯照射组照后小鼠骨髓有核细胞数明显下降,而乳铁蛋白给药组(包括照前给药和照后给药)高于单纯照射组,比较差异有统计学意义(P < 0.05)。单纯照射组照后3d小鼠骨髓的微核细胞率明显升高,而乳铁蛋白给药组低于单纯照射组,比较差异有统计学意义(P < 0.05)。结论 乳铁蛋白无论是照前给药还是照后给药都具有较好的抗辐射作用。     

苞叶雪莲水提物对小鼠生殖细胞辐射防护作用的研究

目的 初步研究苞叶雪莲水提物对小鼠生殖细胞的辐射防护作用。方法 以辐射损伤小鼠作为研究对象,分别给予不同剂量的苞叶雪莲水提物灌胃14d后接受4Gy的X射线一次性全身照射,后继续灌胃,在照射后第35天处死小鼠,测量小鼠精子畸形率。结果 各给药组+照射组与照射组相比较,低剂量、中剂量、高剂量小鼠精子畸形率低于照射组。其中,中剂量组和高剂量组明显低于照射组,差异有统计学意义,P<0.05。结论 苞叶雪莲水提物中的活性成分对小鼠的生殖细胞有一定程度的防辐射损伤作用。     

宽筋藤对辐射损伤小鼠造血功能的影响

目的 研究宽筋藤对辐射损伤小鼠造血功能的影响。方法 小鼠被分为五组:阴性对照组、照射对照组、药物高、中、低剂量组。实验组小鼠在⁶⁰Coγ射线6Gy照射后,药物组被给予不同剂量药物,其余两组给予生理盐水。分别在照射前4小时、照后第7、14天检测血象三次。在照后14d,处死小鼠,观察药物对骨髓DNA含量、骨髓有核细胞数、脾结节的影响。结果 宽筋藤照后给药,给药组小鼠外周血红细胞、血小板,骨髓有核细胞计数及骨髓DNA含量比照射对照组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 宽筋藤照后给药能促进放疗后骨髓造血功能的恢复,具有一定的抗辐射作用。     

红雪茶混合物对小鼠辐射损伤的保护作用

目的 对云南生物资源进行抗辐射保健食品的开发性研究。方法 对云南多种生物资源配方成分进行抗辐射损伤的筛选实验,对其中有作用的红雪茶混合物再进行剂量-效果的观察实验。通过照射前后给予受试物,检测各剂量组受照小鼠的白细胞数、骨髓嗜多染红细胞微核数,观察照射后30 d的平均存活天数。结果 筛选实验表明:红雪茶混合物及螺旋藻混合物具有一定的抗辐射作用。进一步的红雪茶剂量-效应观察试验表明:红雪茶混合物的低、中、高三个剂量均组可降低5 Gy γ射线诱发小鼠骨髓嗜多染红细胞微核发生率;对小鼠白细胞具不同程度的提升作用,对8 Gy受照小鼠30 d存活率在高剂量组有明显保护作用。结论 红雪茶混合物对接受γ射线全身照射小鼠的辐射损伤有一定的保护作用。     

热休克预处理对X射线诱发淋巴细胞hprt基因突变的影响

目的 探讨热休克预处理对X射线诱发淋巴细胞hprt基因突变的影响。方法 在42℃、5% CO₂培养箱中对大鼠外周血淋巴细胞进行热休克处理90min。将细胞样本分为:对照组,热休克组,照射组,热休克+照射组,每组6个平行样本。每组样本再分成两组细胞,其中一组细胞加入终浓度为0.1mmol/L的6-TG,另一组不加6-TG。每组细胞经不同剂量(0.5Gy、1.0 Gy、1.5 Gy、2.0 Gy、2.5 Gy、3.0 Gy)X射线照射并恢复培养3h,6h,10h后,用多核细胞法检测大鼠外周血淋巴细胞hprt基因突变。结果 大鼠外周血淋巴细胞接受不同剂量X射线照射后恢复3h,6h,10h,热休克+照射组细胞hprt基因突变率与照射组细胞hprt基因突变率相比明显下降(P < 0.01)。结论 热休克预处理对X射线所致细胞hprt基因突变具有保护效应,对X射线所致细胞hprt基因突变的保护作用在低剂量照射比高剂量照射时更为明显,其保护效率与照射剂量之间为负相关系。     

咖啡酸对辐射损伤小鼠造血恢复作用的初步研究

目的 观察咖啡酸对辐射损伤小鼠造血恢复的影响。方法 建立接受4.5 Gy X射线照射的辐射损伤小鼠模型,BALB/c小鼠随机分为空白对照组,单纯照射组,CFA组,观察小鼠30天存活率、体重、外周血白细胞(WBC)、血红蛋白(HGB)、血小板(PLT)、骨髓有核细胞(BMNC)、粒细胞巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)、巨核细胞形成单位(CFU-MK)及脾集落形成单位(CFU-S)和脾脏指数(SI)等指标。结果 CFA组小鼠的30天存活率、体重、WBC、BMNC、CFU-GM、CFU-MK、CFU-S和SI数均明显高于单纯照射组,差异有统计学意义(P < 0.05或P < 0.01)。结论 CFA能促进辐射损伤小鼠的造血恢复。     

新辅助放疗治疗Ⅱ期宫颈癌的临床观察

目的 总结分析新辅助放疗加根治术治疗Ⅱ期宫颈癌患者的3年、5年生存率和新辅助放疗对手术的影响以及放疗副反应,探讨新辅助放疗在Ⅱ期宫颈癌治疗中的意义。方法 选取山西医科大学第二医院2003年7月至2011年4月收治的Ⅱ期宫颈癌患者109例,其中59例行新辅助放疗(盆腔外照射+腔内后装治疗)休息2到3周后行根治性手术即广泛子宫切除+盆腔淋巴结清扫术,50例行根治性放疗。结果 ①新辅助放疗加根治术与根治性放疗两组患者3年、5年生存率:由于随访时间较短,还不能得出有统计学意义的结论。②新辅助放疗对手术的影响:59例患者在接受新辅助放疗后均能顺利行根治性手术,且未增加术中术后并发症。③放疗副反应:新辅助放疗组放疗副反应发生率小于根治性放疗组(P < 0.05),差异有统计学意义。结论 新辅助放疗加根治术可使①肿瘤明显缩小甚至消失,扩大手术适应证、提高手术治愈率。②不增加手术难度及术后并发症。③降低患者近期放疗副反应和远期并发症。④降低癌细胞的活力,减少转移的几率。⑤可取得与传统根治性放疗相近甚至更高的远期生存率。     

电离辐射诱发人外周血miRNA-150表达水平的改变及意义

目的 通过实时定量PCR技术检测不同剂量照射引起人外周血miRNA-150表达的差异,从而探讨miRNA-150在机体辐射损伤中的意义。方法 将采集的静脉血分别给予0.5、1、2、4、8 Gy剂量照射,并设置对照组。照射后将血样接种于含10%小牛血清的RPMI1640培养瓶中,置于37℃恒温培养箱中培养,利用实时定量PCR技术检测照射8、24 h后miR-150的含量变化;采用tbools软件进行miR-150序列比对,Starbase数据库预测miR-150靶基因。结果 miR-150在0.5、1、2、4、8 Gy照射后8 h后2^-△△Ct值分别为0.66、0.68、0.74、0.75、0.63,与未照射组相比,差异有统计学意义;照射24 h后2^-△△Ct值分别为0.94、0.95、0.71、0.59、0.67,较8 h均出现了不同程度的表达下调,与未照射组相比,差异有统计学意义;人与小鼠miR-150-5p序列一致,miR-150-3p种子序列区存在单一碱基差异,靶基因预测表明BASP1、MAP3K12和ZBTB4基因为人miR-150靶向基因的可能性最高。结论 照射后外周血中miR-150差异表达与辐射损伤有关,可成为预测辐射损伤的潜在生物标志物。     

补肾单药和复方对急性电离辐射损伤后小鼠外周血作用的研究

目的 探究补肾单药（CP）和复方（KS）对急性电离辐射损伤后小鼠造血的调控作用。方法 9~10周龄C57BL/6小鼠分成空白对照组、照射组、照射+KS和照射+CP 4组,照射组、照射+KS和照射+CP三组进行5.5 Gy ¹³⁷Cs-γ射线单次全身照射,剂量率1 Gy/min。照射后,照射+KS组按1.5 g/kg体重灌服KS药液,照射+CP组按2.7 g/kg体重灌服CP药液,其余两对照组灌服等体积生理盐水。每月取血监测血常规。另取小鼠按同样方式分组,照射后连续给药一个月,检测间充质干细胞集落形成。结果 照射+KS组和照射+CP组在前两个月的白细胞和淋巴细胞高于照射组,集落数也多于照射组。结论 KS和CP可以促进电离辐射损伤后小鼠的造血恢复。     

染料木黄酮抗辐射作用的实验研究

目的 研究染料木黄酮(Genistein,Gen)对照射小鼠的保护作用,为抗辐射功能食品的开发提供实验依据。方法 雄性昆明小鼠,经7.5 Gy γ射线照射,观察补充不同剂量的Gen对小鼠30 d死亡率、平均存活时间的影响;4.0 Gy γ射线照射,观察补充Gen对外周血白细胞、血小板、淋巴细胞、骨髓有核细胞(BMC)、内源性脾结节、以及骨髓嗜多染红细胞微核率的作用。结果 Gen可以提高受照射小鼠30d活存率,延长受照射小鼠存活时间,保护系数达1.44;可以升高受照射小鼠血小板、淋巴细胞计数和脾结节数,降低骨髓嗜多染红细胞微核率。结论 Gen对辐射小鼠有保护作用。