应用PCR技术检测急性淋巴细胞白血病T细胞受体γ基因重排

目的寻找可作为急性淋巴细胞白血病恶性克隆的基因标记。方法应用ＰＣＲ技术扩增Ｔ细胞受体γ链基因重排，选用四种限制性核酸内切酶消化扩增产物。结果初诊或复发１０例急性淋巴细胞白血病病人中，有５例出现清晰扩增带，约４００ｂｐ，扩增物经四种限制性核酸内切酶消化后形成的限制性核酸内切酶图谱各具特色；５例处于缓解期的急性淋巴细胞白血病病人，有４例被检出清晰扩增带。结论应用ＰＣＲ扩术扩增Ｔ细胞受体γ链基因重排，能用于检测急性淋巴细胞白血病微小残留病，如果结合限制性核酸内切酶图谱分析，则能用于研究白血病细胞的克隆演化     

免疫球蛋白重链和T细胞受体γ基因重排检测在急性非淋巴细胞白血病患者中的意义

目的 探讨免疫球蛋白重链（IgH）和T细胞受体γ（TCRγ）基因重排在急性非淋巴细胞白血病（ANLL）患者中的临床意义。方法 用聚合酶链反应（PCR）检测50例ANLL患者骨髓、外周血单个核细胞（MNCs）中克隆性IgH、TCRγ基因重排。结果 克隆性IgH和／或TCRγ基因重排在50例ANLL中检出率为32.0%（16／50），其中IgH为28.0%（14／50），TCRγ为16.0%（8／50）。1例反应性淋巴结炎和20例正常人均未检测到IgH和TCRγ基因重排。27例非M3初发ANLL患者经DA或HA标准方案化疗，10例基因重排阳性的患者1疗程后获完全缓解3例（30.0%），而17例基因重排阴性患者1疗程后完全缓解13例（76.5%），两者判别具有显著性意义（P＜0.05）。结论 （1）IgH、TCRγ基因重排不仅出现于淋巴细胞来源的的肿瘤，也可见于部分ANLL患者；（2）出现IgH和／或TCRγ基因重排可能是ANLL患者预后不佳的指标之一。     

淋巴瘤T细胞受体δ基因重排的研究

本文应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）方法对１７例淋巴瘤患者骨髓细胞Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）Ｖδ１－Ｊδ１基因重排进行了检测。１１例Ｔ细胞淋巴瘤中５例发生ＴＣＲＶδ１－Ｊδ１基因重排，６例Ｂ细胞淋巴瘤和１０例正常骨髓细胞无ＴＣＲＶδ１－Ｊδ１基因重排。研究表明：ＴＣＲＶδ１－Ｊδ１基因重排显示细胞系列的特异性，是Ｔ细胞恶性肿瘤的克隆标志。     

PCR检测急性淋巴细胞白血病T细胞抗原受体γ基因重排

应用多聚酶链反应技术体外扩增２０例初治或复发的急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）Ｔ细胞抗原受体，（ＴＣＲγ）基因重排，结果显示：１５例病人出现约４００ｂｐ的扩增产物，阳性检出率为７５％（１５／２０），产物电泳带位置略有差异提示其重排亚型的多样性。标准人急性Ｔ淋巴细胞白血病细胞株ＣＣＲＦ－ＣＥＭ细胞携带ＴＣＲγ基因重排，为阳性对照；而正常骨用及Ｒａｊｉ细胞检测阴性，为阴性对照。用系列稀释法证明本实验敏感性在１０－５水平以上。我们还探讨了该法在急性淋巴细胞白血病基因诊断、微量残留白血病细胞的监测及自体骨髓移植物体外净化效果的评价上的应用价值。该法不需寡核苷酸探针杂交、无需对扩增产物进行测序、且费时短、检出率高，提示有重要的临床意义。     

免疫球蛋白重链T细胞受体γ基因重排在急性淋巴细胞白血病中的表达

目的：探讨初诊急性淋巴细胞白血病（ALL）患者免疫球蛋白重链（IgH）、T细胞受体γ（TCRγ）基因重排情况。方法：应用多聚酶链反应（PCR）检测19例初发ALL患者骨髓IgH、TCRγ基因重排。结果：19例标本中10例发生单一IgH基因重排，5例发生单-TCRγ基因重排，2例同时出现IgH/TCRγ基因重排。结论：ALL患者IgH基因重排几率高于TCRγ基因重排，且存在着交叉重排现象。     

急性淋巴细胞白血病患者缓解期骨髓涂片PCR检测Ig基因重…

应用多聚酶链反应技术检测１５例急性淋巴细胞白血病患者缓解期骨髓涂片中Ｉｇ基因重排，其中有５例（３３％）检测出残留白血病细胞。回顾性分析结果表明，Ｉｇ基因重排患者均在后一次完全缓解期（ＣＲ）后２￣３个月出现白血病临床复发。ＰＣＲ技术检测微量残留白血病细胞有助于预测白血病复发和指导白血病的化疗。     

应用PCR技术检测急性淋巴细胞白血病T细胞受体γ基因重排

寻找可作为急性淋巴细胞白血病恶性克隆的基因标记。     

淋巴细胞白血病和淋巴瘤T细胞受体基因重排研究

目的：探讨淋巴细胞白血病及淋巴瘤的T淋巴细胞受体（TCR）Vβ亚家族分布特点。方法：用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测急性淋巴细胞白血病5例,慢性淋巴细胞白血病2例,弥漫大B淋巴瘤3例及外周T淋巴瘤3例患者的外周血或淋巴结T淋巴细胞TCR Vβ亚家族表达。对照组为健康人8例。结果：对照组健康8例外周血淋巴细胞表达全部24个Vβ亚家族。急性淋巴细胞白血病和慢性淋巴细胞白血病患者外周血淋巴细胞TCR Vβ亚家族均呈限制性表达,外周T淋巴瘤2例和弥漫大B淋巴瘤1例Vβ亚家族呈限制性表达,另外3例表达未受抑制。而淋巴瘤患者淋巴结标本Vβ亚家族全部呈限制性表达。结论：TCR基因重排对淋巴瘤和淋巴细胞白血病的诊断有辅助作用。     

PCR扩增T细胞受体δ基因监测儿童急性淋巴细胞白血病微量残留病

应用巢式聚合酶链反应技术拉增Ｔ细胞受体基因检测了小儿急性淋巴细胞白血病骨髓标本，２８例初治的Ｂ前体细胞白血病中有２１例检出ＴＣＲ－δ基因克隆重排带，检出率迷７５％。１８例缓解６个月以上ＰＲ仍阳性者接受大剂量化疗，１５例化疗后ＰＣＲ转阴者随访８－３０个月仍处持续缓解状态，３例ＰＣＲ未能转阴者中２例最终复发，另１例在此次化疗前已有半年未行化疗，本化疗后ＰＣＲ未阴转，继续化疗并随访一年，现ＰＣＲ转阴并持     

急性淋巴细胞白血病中p16基因甲基化及表达

目的：探讨p16基因甲基化在急性淋巴细胞白血病发生机制中的作用。方法：采用限制性内切酶酶切结合多聚酶链反应(PCR)方法检测82例急性淋巴细胞白血病患者白血病细胞p16基因部分启动子和外显子1 CpG岛甲基化的情况，同时应用免疫组织化学染色法检测p16蛋白的表达。结果：31例急性淋巴细胞白血病患者存在p16基因的甲基化；1例p16基因纯合缺失；39名患者p16蛋白表达阴性；p16蛋白阴性表达患者的初次化疗完全缓解率和平均生存时间低于p16蛋白阳性表达者。结论：p16基因甲基化在急性淋巴细胞白血病的发生机制中有一定的作用，p16蛋白可能是评估急性淋巴细胞白血病预后的一个指标。     

急性淋巴细胞白血病T细胞受体γ、δ链基因的重组

本文对３７例形态学上确认为急性淋巴细胞白血病患者（ＡＬＬ）的免疫表型、Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）γ、δ链基因以及免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因的重组进行了研究。根据免疫表型分析，有２６例为Ｂ系ＡＬＬ，８例为Ｔ－ＡＬＬ，２例为急性未分化白血病（ＡＵＬ）及１例粒系白血病。发现在Ｔ－ＡＬＬ中ＴＣＲ基因的重组有时序性，δ基因的重组先于γ基因；在Ｂ系ＡＬＬ中，绝大多数均发生γ和δ基因的重组和（或）缺失，且重组类型与Ｔ－ＡＬＬ不同；相反，ＩｇＨ基因的重组仅见于Ｂ系ＡＬＬ。ＡＬＬ基因型分析是非常有用的克隆标志，并为了解人类早期的淋巴细胞分化提供了重要资料。另外还证实ＴＣＲγ基因Ｖ－Ｊ接头部顺序的测定可以作为检测临床缓解期患者微小残余病变的克隆标志。     

急性白血病细胞免疫球蛋白重链和T细胞受体r基因重排及意义

急性白血病是一组异质性较高的恶性血液病，通过T细胞受体正（TCRr）基因和免疫球蛋白重链（IgH）基因重排检测其白血病细胞，在鉴别T或B一急性淋巴细胞白血病（ALL）有一定价值［’1。对急性白血病细胞来源、分化发育，对分型、监测微小残留细胞及判断预后都有重要意义。！材料与方法1．l病例：27例ALL，l例T细胞淋巴瘤（T－LL），5例急性粒细胞白血病（AML），共33例。男ZI例，女12例；年龄18～53岁。均根据FAB标准确诊和分型。采用间接免疫荧光技术［’］，用CD。、CD。、CD。、CD。、CDI。、CD19、CD。。、OKT。单克…     

儿童急性淋巴细胞性白血病IgH基因和TCR基因重排的研究

采用PCR或巢式PCR方法对71例未治疗的急性淋巴细胞性白血病（ALL）患儿骨髓样本的免疫球蛋白重链基因（IgH）和T细胞受体基因（TCR）进行了克隆性重排检测，结果显示在52例B系ALL及19例T系ALL中分别存在82．7％（43例）和15．8％（3例）的IgHCDRⅢ区域重排，而TCRVδ2Dδ3基因重排见于32．7％的B系ALL（17例）和63．2％的T系ALL（12例），二种基因重排在儿童ALL的覆盖面达到88．7％（63例），此结果提示IgHCDRⅢ和TCRVδ2Dδ3基因可作为监测儿童ALL的标志基因；采有相同方法对完全缓解期患儿的67份脑脊液标本进行了检测，结果显示9例存在IgHCDRⅢ基因重排，4例存在TCRVδ2Dδ3基因重排（与骨髓标本重排类型一致），提示采用PCR技术对ALL患儿CSF标本进行IgH和Vδ2Dδ3基因重排的检测对早期诊断中枢神经系统白血病（CNSL）具有较大价值；采用有限稀释法对完全缓解期的儿童ALL病例骨髓样本进行上述二种基因重排的定量分析，结果提示对儿童ALL进行微小残留病（MRD）的持续追踪监测可指导化疗方法的选择，观察治疗效果并预测预后。     

老年人急性白血病T细胞受体VγI-Jγ基因重排分析

目的为研究老年人急性白血病分子生物学特点及临床意义。方法提取34例老年人急性非淋巴细胞白血病(ANLL)、9例老年人急性淋巴细胞白血病(ALL)及10名正常献血员DNA标本,应用PCR技术扩增TCRVγI-Jγ基因重排,对阳性的PCR产物进行SSCP分析。结果34例老年人ANLL中有16例(47.1%)发现TCRVγI-Jγ基因重排,老年人ANLL TCRVγI-Jγ基因重排检测阳性率显著高于非老年人ANLL组(P<0.025)。9例老年人ALL中有7例(77.8%)发现TCRVγI-Jγ基因重排,其中3例(33.3%)存在寡/亚克隆重排,老年人ALL寡/亚克隆重排阳性率显著高于非老年人ALL组(P<0.05)。10例正常献血员PCR技术扩增TCRVγI-Jγ基因重排均为阴性。TCRVγI-Jγ基因重排阳性老年人ANLL完全缓解率为25.0%(4/16),显著低于重排阴性老年人ANLL组(61.1%)(P<0.05)。结论应用PCR/SSCP方法分析老年人急性白血病TCRγ重排可作为疗效和预后判断的新指标。老年人急性白血病寡/亚克隆重排检测阳性率显著高于非老年人组可能是导致其疗效差的一个重要因素。     

老年人急性白血病T细胞受体VγI-Jγ基因重排分析

OBJECTIVE: To obtain insight into the molecular mechanism of acute leukemia in elderly patients in relation to the clinical features of the disease. METHODS: DNA specimens were obtained from 34 elderly patients with acute nonlymphoblastic leukemia (ANLL), 9 elderly patients with acute lymphoblastic leukemia (ALL) and 10 healthy blood donors. Polymerase chain reaction (PCR) coupled with single-strand conformation polymorphism (SSCP) was performed to detect T cell receptor (TCR) V gamma I-J gamma gene rearrangement. RESULTS: In the 34 elderly ANLL patients, 47.1% (16/34) were found with TCRV gamma I-J gamma gene rearrangement, showing a higher rate of the rearrangement than in younger ANLL patients (P<0.025). TCRV gamma I-J gamma gene rearrangement was identified in 7 (77.8%) of the 9 elderly patients with ALL, and 3 of the identified cases had oligoclonal/ subclonal rearrangement, suggesting a higher rate of oligoclonal/subclonal rearrangement in elderly ALL patients than in younger ALL patients (P<0.01). None of the blood donors was found with TCRV gamma I-J gamma gene rearrangement. The complete remission rate was lower in the elderly ANLL patient with TCRV gamma I-J gamma gene rearrangement than in those without (P<0.05). CONCLUSION: The detection of TCRV gamma I-J gamma gene rearrangement can be of value in assessing the therapeutic effect and making prognostic prediction in elderly patients with acute leukemia.     

急性非淋巴细胞白血病IgH,TCRr基因重排的检测

研究急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）基因分型和微小残留病（ＭＲＤ）的检测方法，选择ＩｇＨ、ＴＣＲｒ基因重排标记，用ＰＣＲ技术，对３１例ＡＮＬＬ患者进行检测，结果：ＩｇＮ阳性１２．９％，ＴＣＲｒ阳性６．４５％，表明ＡＮＬＬ中存在ＩｇＨ和ＴＣＲｒ基因重排，对ＭＲＤ的研究有一定的临床意义。