SCID小鼠耳廓皮下滑膜移植模型的建立及其在英夫利昔疗效评估中的应用

目的:建立一种简便、可靠、易于给药及观察的小鼠荷人类风湿关节炎(BA)滑膜模型,为抗BA药物疗效及其机制的体内研究提供实验系统.方法:无菌获取4例RA患者膝关节滑膜组织,修剪成3mm2大小,移植入严重联合免疫缺陷小鼠(SCID)耳廓皮下,同时以2例OA滑膜作为对照.移植入4 wk后开始,给予TNF-αmAb体英夫利昔治疗4 wk,以无关抗人IsGl抗体作为对照.隔日观察,根据移植物红肿程度对炎症进行评分.移植入8 wk后,处死小鼠取出移植物,进行苏木素.伊红(HE)染色病理分析.结果:人滑膜在SCID小鼠体内存活至少8 Wk,移植后RA滑膜炎症大体评分高于OA滑膜组(P<0.05);移植前后RA滑膜病理特点无明显变化,经局部注射TNF-α抗体治疗后炎症评分降低(P<0.05),病理检测示滑膜增殖及淋巴细胞浸润评分降低(P<0.05).结论:SCID-HuRAg模型的病理特点与RA患者体内类似;经局部注射生物靶向药物英夫利昔后有相应改善,是对RA滑膜炎症机制进行体内研究的一种简便实用模型.     

龙藤汤加减方治疗类风湿关节炎活动期超声下关节病理改变及对血清IL-6、IL-17、TNF-α水平的影响

[目的]研究来氟米特联合龙藤汤加减方对类风湿关节炎(rheumatoid athritis,RA)患者的临床疗效,对关节滑膜超声病理改变及血清白细胞介素-(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平的影响。[方法]选取 2018 年 1 月至2019年6月北京中医药大学附属东直门医院确诊和收治的40例RA患者,采取随机数字表法将这些患者分为两组,每组各20例,一组为对照组,采用来氟米特单药治疗,另一组为试验组,在来氟米特的基础上服用龙藤汤,两组均连续给药24周。试验过程中以28个关节疾病活动度评分(disease activity score for 28 joints,DAS-28)显效率,关节疾病活动度,关节病理变化血清IL-6、IL-17、TNF-α水平等为评价指标,比较两种疗法对RA活动期治疗作用的差异。[结果]经过24周的治疗试验组患者DAS-28显效率高于对照组差异有统计学意义(P0.05)。经过24周的治疗两组患者滑膜增厚关节数量均显著减少(P0.05)且试验组优于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)治疗后两组滑膜增厚厚度较前显著降低试验组差异有统计学意义(P0.05)对照组差异无统计学意义(P.05),且试验组优于对照组(P0.05)。经过24周的治疗两组患者的血清炎症因子水平均较前降低(P0.05),且试验组优于对照组差异具有统计学意义(P0.05)。[结论]与单独采用来氟米特治疗比较来氟米特联合龙藤汤加减方治疗RA效果更为显著,能够有效缓解RA的临床症状,显著改善关节滑膜的病理表现机制可能与抑制IL-6、IL-17及TNF-α等因子的表达从而减轻滑膜炎症反应有关。     

穴位埋线对CIA大鼠IL-1β、TGF-α及MVD表达的影响

目的通过观察穴位埋线对大鼠胶元诱导型关节炎(CIA)模型血清IL-1β、TNF-α表达及其滑膜新生血管的影响,探讨其对类风湿关节炎(RA)的作用机理。方法建立Ⅱ型胶原诱导大鼠胶原性关节炎模型,造模成功的大鼠随机分为模型组、来氟米特组、穴位埋线治疗组、来氟米特+穴位埋线治疗组。ELISA法血清中IL-1β、TNF-α表达含量变化和SP免疫组织化学染色法滑膜组织MVD计数。结果与模型组比较,各治疗组血清中IL-1β、TNF-α及滑膜组织MVD均明显下降(P0.01),且各治疗组之间比较无统计学差异(P0.05)。结论穴位埋线可能通过降低大鼠血清IL-1β、TNF-α表达而发挥抑制关节滑膜血管新生作用,这可能是姜黄素治疗类风湿关节炎的作用机制之一。     

(九王)痹片治疗类风湿关节炎机制的动物实验研究

前期大量临床工作及实验研究发现,类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)造成软骨和关节破坏的主要原因是成纤维样滑膜细胞的类肿瘤样增生、新生血管翳侵蚀及过量分泌的多种炎性细胞因子和基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)的作用.因此,抑制MMPs的分泌,减少其对细胞外基质的降解及软骨的破坏,将有利于控制RA的发生和发展.     

Fas相关死亡区样白介素1β转换酶抑制蛋白在类风湿关节炎患者滑膜组织中的表达

目的:探讨抗凋亡分子Fas相关死亡区样白介素1β转换酶抑制蛋白(FLIP)在类风湿关节炎(BA)滑膜组织中的表达,及其在RA滑膜炎性增生中的作用.方法:采用免疫组织化学方法检测FLIP在17例RA和10例骨关节炎(OA)滑膜组织中的表达,并分析其与滑膜炎症程度积分的相关性,同时采用酶显色分析方法测定滑膜组织中caspase-8活性.结果:FLIP阳性细胞百分率在KA滑膜为(30.60±18.90)%,在OA滑膜为(1.87±0.57)%(P<0.05).在RA滑膜组织FLIP阳性主要见于巨噬细胞样滑膜细胞,FLIP表达阳性率与滑膜炎症程度积分呈显著性正相关(r=0.425,P<0.05),而与RA滑膜组织中caspase-8活性呈现负相关趋势.结论:RA滑膜组织中抗凋亡分子FLIP表达增高,而且与RA滑膜炎症程度积分相关,提示FLIP可能在RA滑膜炎性增生病变中起重要作用.     

肿瘤坏死因子及其受体在类风湿关节炎中的作用

 肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor alpha,TNF-α）是主要组织相容性复合体（major histocompatibility complex,MHC）基因编码的同源三聚体蛋白,TNF-α与其受体结合后可发挥免疫调节作用并参与机体的多种病理生理过程,包括发热、炎症、感染、创伤愈合和肿瘤杀伤。TNF-α是炎症通路中一重要的细胞因子,存在于类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）患者的滑膜组织、滑液及血清中。TNF-α通过与多种组织因子和基质蛋白相互作用促进RA的炎症反应、滑膜细胞异常增殖和凋亡、血管翳生成及软骨与骨的破坏,推动RA炎症反应持续性进展。因而,TNF-α可以作为RA病情活动的一个临床指标,同时又是治疗RA的一个有效靶点。     

普鲁泊福对TNF-α诱导的小鼠脊髓神经元凋亡及Bax表达的影响

目的:研究普鲁泊福(propofol)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的小鼠脊髓神经元凋亡及Bax表达的影响.方法:脊髓神经元取自小鼠胎鼠,置于含B27的神经细胞培养基中培养,在培养第7天随机分为6组:对照组,50 μmol/L普鲁泊福组,TNF-α组,25 μmol/L普鲁泊福 TNF-α组,50 μmol/L普鲁泊福 TNF-α组,100 μmol/L普鲁泊福 TNF-α组.在相应组中加入不同终浓度的普鲁泊福,孵育30 min,再加入TNF-α至终末浓度为2 000 U/ml,培养24 h后,采用碘化丙锭(PI)/Hoechst33342双染法检测细胞凋亡,于荧光显微镜下观察凋亡细胞.采用免疫细胞化学的方法检测Bax的表达.结果:与对照组相比,TNF-α组细胞凋亡百分率明显升高[(21.8±1.1)% vs (2.8±0.8)%,P<0.01],Bax表达明显增加[(0.251±0.016) vs (0.141±0.015),P<0.01];而经不同浓度普鲁泊福(25,50,100 μmol/L)处理后再加入TNF-α的各组与TNF-α组相比,细胞凋亡百分率下降[(16.2±1.2)%、(15.3±0.6)%、(12.2±0.8)% vs (21.8±1.1)%,P<0.05、P<0.05、P<0.01],Bax的表达降低[(0.198±0.011)、(0.188±0.012)、(0.167±0.014) vs (0.251±0.016),P均<0.05],且呈现一定的剂量效应关系.结论:临床浓度的普鲁泊福可能通过调节Bax的表达进而抑制由TNF-α诱导的脊髓神经元凋亡.     

类风湿关节炎新生血管形成中细胞因子的作用

类风湿关节炎(rheum atoid arthritis,RA)是一种自身免疫功能障碍性疾病,是以滑膜细胞增生,血管翳形成,单个核细胞浸润,进而软骨侵蚀和关节破坏为特征的慢性炎症性疾病。炎症性关节炎最明显特征是滑膜衬里层滑膜成纤维细胞的增生[1]。成纤维样滑膜细胞(fibrob last-like synovi     

彩色多普勒超声对类风湿关节炎腕关节、手部关节病变的诊断价值

目的探讨彩色多普勒在类风湿关节炎（RA）腕关节、手部关节病变中的诊断价值。方法选择健康对照组30例,RA病人40例,应用彩色多普勒超声检测对比观察腕关节、掌指关节、指间关节、近端指间关节滑膜的厚度,血流供应、骨面及软组织情况。结果RA组共检查出73%腕关节滑膜增生,11%手部关节滑膜增生,89%腕关节及29%的手部关节增生的滑膜内见血管过度增生。病变关节数的10%见软骨下骨侵蚀。结论彩色多普勒超声能够显示RA病变关节的滑膜炎症,血管翳形成,软骨下骨侵蚀等病理改变,由于其无辐射、易重复的特点,是诊断RA病人腕关节、手部关节病变的首选方法之一。     

氟伐他汀对尿毒症患者高敏C反应蛋白、肿瘤坏死因子α、尿白蛋白排泄率和血清肌酐的影响

目的 探讨氟伐他汀对尿毒症患者高敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、尿白蛋白排泄率(UAER)和血清肌酐(Cr)的影响.方法 选择进行维持性血液透析的尿毒症患者100例,按随机原则分为2组,每组50例.对照组进行常规治疗;观察组在常规治疗基础上采用氟伐他汀治疗,2组均连续治疗6个月.治疗前后采血,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测TNF-α水平,用电化学发光法测定hs-CRP水平,同时使用全自动生化分析仪检测UAER、血清Cr的变化.结果 与治疗前hs-CRP、TNF-α、Cr、UAER等指标(13.91±2.10)ng/L、(197.64±25.47)ng/L、(138.42±46.95)μg/min、(88.00±19.00)μmol/L比较,观察组治疗后炎症指标hs-CRP、TNF-α均明显下降(5.65±2.21)ng/L、(80.21±9.41)ng/L(均P<0.05);Cr、UAER等指标均明显下降(80.00±15.00)μmol/L、(67.83±21.52)μg/min(均P<0.05).对照组治疗前后hs-CRP、TNF-α、Cr变化不明显[(14.23±2.33)ng/L vs (13.22±1.10)ng/L]、[(198.68±26.65)ng/L vs (196.87±24.54)ng/L]、[(90.00±18.00)μmol/L vs (87.00±14.00)μmol/L].而UAER 指标明显低于治疗前[(85.55±39.86)μg/min vs (134.13±45.10)μg/min](P<0.05);观察组上述各项指标的改善程度优于对照组(均P<0.05).结论 氟伐他汀可明显抑制炎症因子hs-CRP、TNF-α,降低UAER、Cr.     

钙黏蛋白11在类风湿关节炎中的作用

类风湿关节炎(RA)是一种慢性炎症,滑膜炎症和关节软骨破坏是其病理改变的主要特征之一。钙黏蛋白11是滑膜成纤维样细胞特异性表达的膜蛋白。它参与滑膜炎性反应,影响成纤维样滑膜细胞对关节软骨的侵蚀破坏作用。对钙黏蛋白11在RA发病机制中的病因性作用及其潜在的药物靶标作用予以综述。     

低氧诱导因子在类风湿关节炎发病机制中的作用

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）是一种系统性自身免疫性疾病,病理特征为异常的滑膜增生伴血管翳形成、软骨和骨的侵蚀破坏,最终导致关节畸形。目前RA确切发病机制未明,环境和遗传因素相互作用共同促进了RA的发病。低氧微环境是RA重要的病理特点,炎症滑膜组织的高代谢需求和滑膜的快速增生共同导致了RA关节内低氧状态。研究表明,低氧通过低氧诱导因子（hypoxia-inducible factor,HIF）调控的一系列转录因子的活化促进RA的疾病进展［1］。HIF可通过促进RA滑膜细胞（RA fibroblast-like synoviocytes,RA-FLS）增殖和侵袭、调节炎性细胞因子分泌、诱导血管生成及软骨破坏参与RA的发病和病情进展［2-4］。鉴于低氧在RA发病机制中的重要作用,本文对HIF与RA发病机制的研究进展进行综述。     

类风湿关节炎滑膜细胞凋亡机制的研究进展

类风湿关节炎(RA)是以关节滑膜炎症为主要病理表现的慢性全身性自身免疫性疾病,以慢性、对称性、多关节滑膜炎和关节外病变为主要临床表现,好发于手、腕、足等小关节,反复发作,呈对称分布,其滑膜炎持久反复发作,可导致关节内软骨和骨的破坏,关节功能障碍,甚至致残。RA发病机制至今尚未阐明。滑膜细胞增生,血管翳形成,骨与软骨破坏是其主要的病理特点。滑膜细胞信号转导异常、滑膜细胞增殖及凋亡失衡导致滑膜细胞增生,基因突变、原癌基因活化及细胞因子等与滑膜细胞的凋亡相关。     

高频超声诊断早期类风湿关节炎的应用研究

目的：分析高频超声诊断早期类风湿关节炎的应用价值。方法以该院收治的40例早期类风湿关节炎（RA ）患者为观察组,另选择40例健康者作为对照组,分别采用高频超声和X线对两组对象进行影像学检查。对比分析两组的超声检查结果和高频超声与X线对观察组患者膝关节髌上囊积液、滑膜增生及骨侵蚀的阳性检出率,以及观察组患者的C‐反应蛋白（CRP）、红细胞沉降率（ESR）指标与超声检查相关指标的相关性。结果观察组患者膝关节髌上囊积液、滑膜增生、滑膜彩色血流、骨侵蚀高频超声检查的阳性率均高于对照组（P＜0．05）;观察组患者的动脉阻力指数小于对照组,股骨内髁及外髁软骨厚度较对照组薄（P＜0．05）。高频超声对观察组患者膝关节髌上囊积液、滑膜增生、骨侵蚀的阳性检出率均高于X线等检查结果（P＜0．05）。观察组患者膝关节髌上囊积液厚度、滑膜增生厚度、滑膜彩色血流分级与CRP、ESR均存在一定的相关性（P＜0．01）。结论高频超声能较好地反映早期RA患者的病变情况,且对各病变的检出率高于X线片,高频超声检查指标与CRP、ESR有一定的相关性。     

兔膝骨性关节炎治疗中透明质酸钠与曲安奈德对滑膜和软骨的影响

目的：评估透明质酸钠与曲安奈德对兔膝骨性关节炎中关节滑膜及软骨的影响。方法24只新西兰兔制造骨关节炎模型后按数表法随机分为对照组、透明质酸钠(SH)组、曲安奈德(TA)组,每组各8只,分别进行关节腔注射生理盐水0.4 mL、SH 0.4 mL、TA 0.4 mL,每周一次,每组6次。6周后观察每组兔膝关节滑膜组织病理切片、血管滑膜SP法染色、软骨AB-PAS染色及MMP-1免疫组化。结果滑膜病理切片显示,SH组滑膜增生最少, TA组滑膜增生较少,对照组滑膜增生明显;滑膜SP法染色显示SH组、TA组VEGF阳性细胞百分数较对照组减少[(42.50±5.29)%、(50.80±5.24)%vs (53.38±4.75)%,P<0.05],SH组、TA组平均光密度值较对照组减少[(0.32±0.02)、(0.43±0.04) vs (0.48±0.05),P<0.05],TA组较SH组和对照组内软骨细胞减少,软骨基质成分减少,SH组、TA组较对照组软骨表层破坏减少。SH组、TA组软骨MMP-1细胞百分数评分优于对照组[(61.25±4.06)%、(76.27±4.68)%vs (87.13±3.64)%,P<0.05];SH组、TA组软骨Mankins评分优于对照组[(6.88±1.25)分、(7.27±0.68)分vs (8.13±0.83)分, P<0.05]。结论透明质酸钠和曲安奈德均能抑制滑膜炎增生,减少兔膝关节腔内的炎性细胞因子,减少了软骨基质的破坏,且透明质酸钠要优于曲安奈德。     

血管翳并非类风湿关节炎的专利—膝骨关节炎血管翳病理形态观察

目的比较类风湿关节炎（RA）与骨关节炎（OA）滑膜组织病理学差异。方法回顾性分析72例RA、24例OA患者经关节 腔镜手术获得的滑膜标本病理苏木精-伊红（HE）染色切片,经两位高年资病理医师对滑膜细胞（FLS）增生程度、血管增生程度、 纤维组织增生程度、淋巴细胞浸润程度几个方面进行量化评分,对有无浆细胞浸润采用计数统计。并结合临床分析RA、OA滑 膜病理形态学的差异。结果OA滑膜也存在着血管翳形成,但OA-FLS增生程度、纤维组织增生程度和淋巴细胞浸润程度,及 浆细胞浸润比例明显低于RA血管翳;血管增生程度低于RA血管翳,但无统计学差异。OA血管翳在显微镜下可表现的与RA 难以区分。结论OA滑膜存在着血管翳病理变化,FLS增生程度、纤维组织增生程度和淋巴细胞浸润程度,及浆细胞浸润比例 明显低于RA血管翳;OA与RA血管翳的差异给诊断和治疗提示了一定潜在的价值。     

7关节超声半定量评分评估类风湿关节炎疾病活动度

目的探讨7关节超声（US7）半定量评分评估类风湿关节炎（RA）疾病活动度的效果。方法选取37例RA病人,根据超敏C反应蛋白（hs-CRP）水平将RA病人分为hs-CRP正常组（n=14）与hs-CRP升高组（n=23）,对2组病人病变严重侧腕关节,第2、3掌指关节,第2、3近端指间关节,第2、5跖趾关节行灰阶超声和能量多普勒超声检查并进行评分,比较2组间评分差异,并分析US7评分与hs-CRP之间的相关性。结果hs-CRP升高组滑膜增生、滑膜血流评分及US7总分均高于hs-CRP正常组（P < 0.05~P < 0.01）,2组间关节积液、骨质侵蚀评分差异均无统计学意义（P>0.05）。37例RA病人中,US7的滑膜血流、骨质侵蚀、US7总分与hs-CRP水平均呈正相关关系（P < 0.01）;滑膜增生、关节积液与hs-CRP水平均无明显相关关系（P>0.05）。结论US7评分可以评估RA的疾病活动度,是监测RA疾病活动度简单、有效的影像学检查方法。     

类风湿关节炎晚期累及髋关节18例临床病理分析

目的探讨类风湿关节炎(RA)晚期累及髋关节的临床病理学特征、诊断、鉴别诊断。方法收集18例晚期RA累及髋关节行人工关节置换股骨头,回顾性分析其临床及影像学资料、组织形态,并复习相关文献。结果18例患者中,男性8例,女性10例,年龄18~81岁。临床症状主要为多发关节肿痛伴髋关节疼痛。影像学检查关节间隙变窄,关节面下骨质吸收,股骨头半脱位。组织形态表现为关节面变形较轻,较少骨赘形成,股骨头软骨面毛球样粗糙,软骨明显纤维化。软骨表面血管翳形成,侵蚀软骨,并可侵蚀骨质。股骨颈软骨与骨质交接处血管翳和滑膜相延续。股骨头骨质广泛的骨质疏松改变。骨内囊肿壁常为纤维血管肉芽组织,伴有较多的慢性炎细胞浸润,中心常有类似类风湿结节的纤维素样坏死。滑膜表面纤维素样坏死,细胞毛刺状突起,表面间质常有细碎的软骨,增生的乳头间质纤维化。结论晚期RA股骨头在组织形态学上有其特征性病理改变,可与髋关节骨关节炎、强直性脊柱炎、髋关节结核、股骨头坏死等鉴别。病理组织学的深入观察,可为该病的诊断和早期的防治提供理论依据。     

苦杏仁苷对Ⅱ型胶原诱导关节炎大鼠关节滑膜ASIC3表达的影响

目的 类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)病程中由于炎症导致关节局部组织酸化,酸敏感离子通道(acid-sensitive ion channels,ASICs)表达与大鼠关节软骨的破坏密切相关。本研究从多途径观察苦杏仁苷对胶原诱导性关节炎(type Ⅱ collagen induced arthritis,CIA)大鼠关节滑膜的免疫应答调节,探讨苦杏仁苷抗RA的作用机制。 方法 选取45只Wistar雌性大鼠,随机抽取8只为空白对照组。35只造模成功的CIA大鼠又随机分为模型组5只,雷公藤多甙组(即阳性对照药组)、苦杏仁苷高剂量组、苦杏仁苷低剂量组各10只。空白对照组和CIA模型组予以0.9%生理盐水,雷公藤多甙组予以雷公藤多甙1 mg/(kg·d),苦杏仁苷高剂量组予以120 mg/(kg·d),苦杏仁苷低剂量组予以60 mg/(kg·d),1次/d连续灌胃给药28 d。经腹腔麻醉,股动脉采血,常规分离血清用于IL-1β、sICAM-1检测;分离左膝关节滑膜组织用40 g/L多聚甲醛固定作为HE染色标本;分离右膝关节滑膜组织-80℃中保存用于Western blot ASIC3蛋白检测。同时提取脑组织于-80℃中保存作为阳性对照。 结果 HE染色显示CIA模型组滑膜细胞排列疏散、紊乱、增生,大量的炎细胞浸润;苦杏仁苷高剂量组、低剂量组和雷公藤多甙组滑膜轻度增生,炎性细胞浸润明显减少,外周血中IL-1β、sICAM-1水平均有明显下降,滑膜中ASIC3蛋白表达也明显下降,与CIA模型组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);与空白组比较,差异均无统计学意义(均P＞0.05)。 结论 苦杏仁苷能有效通过抑制CIA大鼠外周血中炎性细胞因子IL-1β、sICAM-1的表达水平,以及下调滑膜ASIC3蛋白的表达,干扰对关节滑膜的损伤,起到抗炎和免疫抑制作用,可能是苦杏仁苷的抗炎镇痛和保护软骨作用的机制之一。      

高频彩超对类风湿性关节炎踝关节病变诊断价值分析

目的 探讨高频超声检查对类风湿关节炎（Rheumatoid Arthritis,RA）踝关节病变的诊断价值.方法 对30例RA患者的60个踝关节行高频彩色多普勒超声检查,并与健康组对比分析.结果 高频彩色多普勒超声检出研究组踝关节滑膜增生55个,占91.7％,同时对增生滑膜内血流信号进行分级,血流信号为3级者26个,占47.3％,2级者21个,占38.2％,1级者8个,占14.5％.关节腔积液60个,占100％.骨侵蚀14个,占23.3％.关节周围软组织肿胀及肌腱腱鞘炎47个,占78.3％.研究组与健康组对比超声结果有显著差异.结论 高频超声能显示RA踝关节的滑膜炎症、血管翳形成、软骨或骨侵蚀及关节腔积液等病理改变,通过分级诊断为临床诊断、治疗及疗效观察提供翔实的影像学资料,是诊断RA病人踝关节病变的首选方法之一.