姜黄素对β-淀粉样肽（25-35）诱导去血清培养PC12

目的：探讨姜黄素（Cur）对β-淀粉样肽(25-35)（βamyloid peptide-25-35，Aβ25-35诱导体外去血清培养的PC12细胞周期异常与凋亡的影响。方法：PC12细胞用常用的去血清培养使细胞同步于G0期，用MTT比色法分析细胞存活率，流式细胞仪检测分析细胞周期与凋亡，Hoechst33258荧光染色观察细胞核凋亡的形态学改变，RT-PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测p21基因的变化。结果：用不同终浓度(0，1.25，2.5，5，10，20 μmol&#8226;L-1)Cur预处理去血清培养的PC12细胞1 h，再用Aβ25-35处理24 h，细胞存活率增加；Aβ25-35引起的S期细胞百分率明显减少，凋亡率明显降低(P<0.01)，亚二倍体峰消失；核固缩、碎裂减少； p21 mRNA表达和P21 蛋白表达增加。结论：Cur可以影响Aβ25-35诱导的去血清培养PC12细胞周期分布及减少凋亡，可能与上调p21的表达有关。     

姜黄素影响Aβ25-35诱导去血清培养PC12细胞周期变化与细胞凋亡的可能机制

目的：探讨姜黄素（Curcumin，Cur）对Aβ25—35诱导体外去血清培养PC12细胞周期异常与细胞凋亡的可能影响机制。方法种人培养瓶或板的PC12细胞贴壁后用常用的去血清培养法使细胞同步于G0期，每次实验分对照组（0）、诱导组和保护组；流式细胞仪检测分析细胞周期的改变与凋亡的时间关系；通过RT-PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测cyclin D1、cdk4、pRb、E2F1、bax等基因表达水平的变化。结果：（1）去血清培养24h．PC12细胞大约90％同步于G0／G1期；（2）25μmoL／L Aβ25-35处理8、16h。     

姜黄素对Aβ25-35诱导去血清培养PC12细胞p53、p21基因表达的影响

目的：在β-淀粉样肽（25—35）[βamyloid peptide-（25—35），Aβ25—35]诱导去血清培养PC12细胞周期异常模型的基础上．研究姜黄素（Curcumin，Cur）对Ap25-35诱导体外去血清培养的PC12细胞p53、p21基因表达的影响；方法：种入培养瓶的PC12细胞贴壁后用常用的去血清培养法使细胞同步于G0期，每次实验分对照组（0）、诱导组和保护组，通过RT—PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测p53、p2l基因表达水平的变化.结果用5μmol／LCur预处理细胞1h，再加入终浓度为25μmol／L Aβ25-35处理0～20h，与Aβ25-35诱导组比较，     

姜黄素对β-淀粉样肽(25-35)诱导去血清培养PC12细胞周期异常与细胞凋亡的影响

目的探讨姜黄素(Cur)对β-淀粉样肽(25-35)(βamyloid peptide-25-35,Aβ25-35)诱导体外去血清培养的PC12细胞周期异常与凋亡的影响.方法PC12细胞用常用的去血清培养使细胞同步于G0期,用MTT比色法分析细胞存活率,流式细胞仪检测分析细胞周期与凋亡,Hoechst33258荧光染色观察细胞核凋亡的形态学改变,RT-PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测p21基因的变化.结果用不同终浓度(0,1.25,2.5,5,10,20 μmol·L-1)Cur预处理去血清培养的PC12细胞1 h,再用Aβ25-35处理24 h,细胞存活率增加;Aβ25-35引起的S期细胞百分率明显减少,凋亡率明显降低(P＜0.01),亚二倍体峰消失;核固缩、碎裂减少;p21 mRNA表达和P21蛋白表达增加.结论Cur可以影响Aβ25-35诱导的去血清培养PC12细胞周期分布及减少凋亡,可能与上调p21的表达有关.     

姜黄素影响Aβ_(25-35)诱导PC12细胞周期变化与细胞凋亡的可能机制

目的探讨姜黄素(curcum in,Cur)对β-淀粉样肽(25-35)[β-amyloidpeptide-(25-35),Aβ25-35]诱导体外血清饥饿培养的PC12细胞周期异常与凋亡保护作用的可能机制。方法5μmol.L-1Cur预处理同步于G0期的PC12细胞,加入终浓度为25μmol.L-1Aβ25-35处理0～20h,用RT-PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测p21、CDK4、E2F1、bax的表达。结果与Aβ25-35诱导组比较,Cur保护组p21mRNA和p21蛋白的表达增加;CDK4、E2F1、baxmRNA和CDK4、Bax蛋白的表达降低。结论Cur可能通过上调p21的表达,下调CDK4、E2F1、bax的表达,对Aβ25-35诱导的PC12细胞周期异常与凋亡起保护作用。     

原花青素对Aβ25-35诱导去血清培养PC12细胞细胞周期相关基因表达变化的影响

目的探讨原花青素（Proanthocyanidins，PAC）对β-淀粉样肽（25—35）[βamyloid peptide-（25—35），Aβ25-35]诱导体外去血清培养PC12细胞周期相关基因p21、CDK4、磷酸化pRb、E2F1表达异常的影响。方法种入培养瓶的PC12细胞贴壁后用常用的去血清培养法使细胞同步于C0期，分为0对照组、Aβ25-35诱导组、PAC保护组，按实验需要分别在不同时间加入药物并收集细胞，通过RT—PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测p21、cdk4、pRb、E2F1基因表达水平的变化。     

原花青素对Aβ25-35诱导去血清培养PC12细胞CyclinD1、CDK4、E2F1基因表达的影响

目的：探讨原花青素（Proanthocyanidins,PAC）对β-淀粉样肽（25—35）[βamyloidpeptide-（25．35）,Aβ25-35]诱导体外去血清培养PC12细胞CyclinD1、CDK4和E2F1基因表达的影响。方法：种入培养瓶的PC12细胞贴壁后用常用的去血清培养法使细胞同步于G0期,分为0对照组、Aβ25-35诱导组、PAC保护组,按实验需要分别在不同时间加入药物并收集细胞,通过RT-PCR和Westernblot从mRNA及蛋白水平检测CyclinD1、CDK4和E2F1基因表达水平的变化。结果：本课题组在前面的研究中发现PAC对Aβ25-35诱导体外去血清培养PCl2细胞周期变化有逆转作用,但具体机制尚未清。     

梓醇保护L-谷氨酸和Aβ25-35损伤PC12细胞作用比较作用比较

目的观察梓醇对L-Glu和Aβ25-35损伤PC12细胞的保护作用的异同。方法常规培养神经元样PCI2细胞，预先加入梓醇及对照生理盐水24h后分别加L—Glu 5mmol／L和Aβ25-35 20μmol／L损伤24h，K252a干预组细胞在梓醇前1h加入200nmol／LK252a。MTT法测定细胞存活率，放射配基结合分析测定M2受体密度。结果梓醇100μmol／L明显提高细胞存活率（P〈0．01），10μmol／L、100μmol／L升高M2受体密度（P〈0．05，P〈0．01），K252a部分阻断梓醇对Aβ25-35损伤细胞的保护作用，对梓醇保护L—Glu损伤的阻断作用更强。结论梓醇对L—Glu和Aβ25-35损伤PC12细胞保护作用有差异。     

梓醇保护L-谷氨酸和Aβ25-35损伤PC12细胞作用比较作用比较

目的观察梓醇对L-Glu和Aβ25-35损伤PC12细胞的保护作用的异同。方法常规培养神经元样PCI2细胞，预先加入梓醇及对照生理盐水24h后分别加L—Glu 5mmol／L和Aβ25-35 20μmol／L损伤24h，K252a干预组细胞在梓醇前1h加入200nmol／LK252a。MTT法测定细胞存活率，放射配基结合分析测定M2受体密度。结果梓醇100μmol／L明显提高细胞存活率（P〈0．01），10μmol／L、100μmol／L升高M2受体密度（P〈0．05，P〈0．01），K252a部分阻断梓醇对Aβ25-35损伤细胞的保护作用，对梓醇保护L—Glu损伤的阻断作用更强。结论梓醇对L—Glu和Aβ25-35损伤PC12细胞保护作用有差异。     

丹参酮ⅡA抑制去血清培养诱导的PC12细胞凋亡(英文)

目的:研究丹参酮ⅡA对无血清培养诱致PC12细胞凋亡的抑制作用。方法:以噻唑兰(MIT)法测定PC12细胞存活率;用流式细胞术检测DNA含量及凋亡细胞百分率;DNA琼脂糖电泳法观察DNA断裂。结果:去血清培养(12h)可诱导PC12细胞凋亡(细胞凋亡率96.07％)。丹参酮Ⅱ A(0.1,1μmol·L~(-1))显著降低凋亡细胞百分率(细胞凋亡率分别为25.71％和4.89％),并减少DNA断裂。丹参酮ⅡA(0.01-10μmol·L~(-1))抑制氰化钠(20mmol·L~(-1))、谷氨酸钠(0.5mmol·L~(-1))和硝普钠(0.5mmol·L~(-1))所致的细胞毒性。结论:丹参酮Ⅱ A可抑制去血清培养引起的PC12细胞凋亡。     

姜黄素抑制宫颈癌细胞株增殖和诱导凋亡的体外研究

目的：探讨中药姜黄素（Cur）对子宫颈癌SiHa细胞株的增殖抑制和诱导凋亡的作用。方法：以不同浓度的姜黄素（10umol／L、20umol／L、30umol／L）,分12h、24h、48h、72h4个时间点处理SiHa细胞,光镜观察细胞形态变化;用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定细胞增殖抑制率;用透射电子显微镜及琼脂糖凝胶电泳检测凋亡的发生。结果：姜黄素可抑制SiHa细胞增殖,作用呈明显的时效和量效关系,差异有非常显著性（P〈0.01）;姜黄素可诱导SiHa细胞凋亡,透射电子显微镜下可见凋亡细胞;琼脂糖凝胶电泳出现细胞凋亡典型的DNA“梯状”条带。结论：姜黄素体外对SiHa细胞具有增殖抑制作用和促进凋亡作用。     

原花青素对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞凋亡的影响及其机制的研究

目的　探讨原花青素(Procyanidins,PC)对β淀粉样肽25~35(βamyloidpeptide25 -35, Aβ25-35 )诱导PC12细胞凋亡的影响及其机制。方法　采用MTT比色法分析细胞存活率, Hoechst33258 PI荧光染色法检测凋亡, RT PCR检测P53和bcl 2基因mRNA表达,Westernblot检测P53和Bcl 2蛋白表达。结果　不同剂量PC预处理PC12细胞 1h可剂量依赖性对抗Aβ25-35引起的凋亡,提高细胞的存活率,减少Aβ25-35引起的核固缩,凝聚和碎裂,降低P53mRNA表达以及P53蛋白表达,增加bcl 2mRNA表达以及Bcl 2蛋白表达。结论　PC可剂量依赖性对抗Aβ25-35对PC12细胞的毒性作用,其机制可能与下调凋亡基因P53和上调抗凋亡基因bcl 2表达有关。     

蛇毒神经生长因子对PC12细胞凋亡的保护作用

目的 建立β-淀粉样蛋白诱导大鼠嗜铬瘤PC12细胞凋亡的体外AD细胞模型,研究蛇毒神经生长因子(NGF)的保护作用.方法 以荧光显微镜观察细胞形态变化,四唑氮蓝(MTT)法,乳酸脱氢酶(LDH)释放法,流式细胞术等检测凝聚态β-淀粉样蛋白毒性片断Aβ25-35诱导的PC12凋亡,同时检测蛇毒NGF的干预作用.结果 MTT法、LDH释放率显示凝聚态Aβ25-35对PC12细胞的毒性作用呈剂量依赖,20μmol·L-1 Aβ25-35作用组细胞LDH释放率随NGF作用的浓度增高而降低;荧光显微镜观察20μmol·L-1 Aβ25-35作用于PC12细胞出现凋亡改变,NGF预处理细胞的形态明显改善;流式细胞仪分析,Aβ25-35作用PC12细胞凋亡率具有剂量依赖关系,100ng*mL-1NGF预处理的细胞凋亡率降低(P＜0.05).结论 凝聚态Aβ25-35对PC12 细胞具有毒性作用;蛇毒NGF有对抗Aβ25-35致PC12细胞凋亡的作用.     

H2O2诱导PC12细胞凋亡的作用机制

目的 探讨H2O2诱导PC12细胞凋亡的作用机制。方法用MTT比色法分析细胞存活率，Hoechst—PI荧光染色和流式细胞仪检测分析细胞凋亡情况；通过RT—PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测par-4、NF—KB、caspase-3基因表达水平的变化；用比色法检测Caspase-3相对活性。结果（1）用终浓度分别为0～400nmol／L H2O2处理PC12细胞8h，随H2O2浓度从25～400nmol／l。增加，PC12细胞存活率逐渐降低（P〈0．05）：     

木犀草苷对阿尔茨海默病模型细胞凋亡和炎性因子表达的研究

目的 探究木犀草苷通过下调有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶3(MEKK3)对阿尔茨海默病(AD)模型细胞凋亡和炎性因子表达的影响及可能机制。方法 体外培养PC12细胞，经不同剂量(6.25、12.5、25 mg/L)木犀草苷孵育24 h后，建立β淀粉样肽(Aβ)_25-35诱导的AD细胞模型；另转染MEKK3小干扰RNA或过表达载体至PC12细胞，经25 mg/L木犀草苷孵育24 h后，建立Aβ_25-35诱导的AD细胞模型。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞增殖抑制率，流式细胞术检测细胞凋亡率，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎性因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β]水平，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测MEKK3蛋白表达。结果 木犀草苷可降低Aβ_25-35诱导的PC12细胞增殖抑制率、凋亡率、炎性因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)水平，且降低细胞中MEKK3蛋白表达(P<0.05)；敲减MEKK3可降低Aβ_25-35诱导的PC12细...     

地塞米松和淀粉样β蛋白片段25-35对PC12细胞损伤和凋亡的影响

目的探讨地塞米松(DEX)和淀粉样β蛋白片段25-35(Aβ25-35)联合作用对PC12细胞损伤和凋亡的影响。方法采用单独或联合应用DEX 0.1～10μmol.L-1和Aβ25-35 1～5μmol.L-1作用PC12细胞24 h,MTT法测定细胞活力;膜联蛋白-Ⅴ,PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率,PI单染流式细胞仪检测细胞凋亡峰;逆转录-PCR检测胱天蛋白酶3 mRNA的表达水平。结果 MTT结果显示,与正常对照组相比,DEX 5和10μmol.L-1,Aβ25-35 1,5和10μmol.L-1,DEX 5+Aβ25-35 1,5和10μmol.L-1及DEX 10+Aβ25-35 5,10μmol.L-1组均可明显降低PC12细胞存活率,而DEX联合Aβ25-35能明显减少PC12细胞数(P<0.01)。流式细胞仪结果显示,DEX 5μmol.L-1和Aβ25-35 1μmol.L-1单独作用对PC12细胞凋亡率和亚二倍体凋亡峰有一定的增加作用(P<0.05),两者联合作用能明显增加PC12细胞早期和中晚期凋亡率,增加亚二倍体凋亡峰(P<0.01);RT-PCR结果显示,DEX 5μmol.L-1和Aβ25-35 1μmol.L-1单独作用对PC12细胞胱天蛋白酶3 mRNA的表达水平没有明显影响,它们联合作用能明显增加PC12细胞胱天蛋白酶3mRNA的表达水平(P<0.05)。结论 DEX和Aβ25-35联合作用能明显增加对PC12细胞的损伤,促进胱天蛋白酶3 mRNA表达,诱导PC12细胞凋亡。     

蒲公英总黄酮抑制Aβ25-35诱导的海马神经元细胞凋亡的研究

目的：研究蒲公英总黄酮用于防治阿尔兹海默症（AD）的机制,探讨蒲公英总黄酮对Aβ25-35诱导海马神经元细胞凋亡的影响,并进一步探究其潜在机制。方法：对海马神经元胞进行原代培养,经20 μmol·L-1 Aβ25-35诱导,细胞逐渐出现凋亡,用MTT法结合流式细胞仪,观察不同浓度的蒲公英总黄酮的细胞活力和细胞凋亡情况。用硫代巴比妥酸法、黄嘌呤氧化酶法来检测各组细胞中丙二醛（MDA）含量以及超氧化物歧化酶（SOD）活性。Western blot检测各组细胞凋亡相关的基因Bcl-2、Bax和Caspase-3的蛋白表达。结果：20 μmol·L-1 Aβ25-35组细胞比对照组活力下降,凋亡增加,MDA 含量上升,SOD 活性降低。与20 μmol·L-1 Aβ25-35组相比,各浓度下的蒲公英总黄酮均能够提高细胞活力,升高细胞内SOD活性,抑制细胞凋亡,降低MDA含量,同时上调Bcl-2表达,降低Bax和活化状态下的Caspase-3蛋白的表达,并呈浓度依赖性相关。结论：蒲公英总黄酮能够减少Aβ25-35诱导神经元细胞的细胞凋亡,这可能与拮抗其氧化损伤有关。     

转染过氧化氢酶-过氧化物酶基因对Aβ诱发PC12细胞凋亡的保护作用

目的观察转染过氧化氢酶-过氧化物酶(CPX)基因对神经毒物质β淀粉样肽(Aβ)诱发细胞凋亡的保护作用。方法转染并筛选稳定高表达CPX基因的PC12细胞系,用神经毒物质Aβ处理细胞,观察其抗逆变致凋亡的能力。通过电镜、DNA片段化的测定、MTT比色微量分析及流式细胞凋亡率分析观察转基因后对Aβ诱发细胞凋亡的保护作用。结果加入神经毒物质Aβ后,未转染CPX基因的PC12细胞出现凋亡的特征性形态学改变,电泳可见断裂的DNA片段,流式细胞仪检测细胞凋亡率较CPX基因转染组明显增加。MTT比色微量分析显示细胞活力下降(P<0.001)。结论Aβ诱导的神经细胞凋亡与活性氧的产生有关,转染CPX基因能对抗Aβ的神经毒性,保护Aβ所致的神经细胞凋亡。     

黄芩素通过抑制JAK2/STAT1通路减轻Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤

本研究旨在探讨黄芩素对Aβ25-35诱导PC12细胞损伤的保护作用及机制.采用20 μmol·L-1 Aβ25-35损伤PC12细胞,通过细胞形态观察、Hoechst 33342染色和炎症因子检测考察黄芩素对Aβ25-35损伤PC12细胞的保护作用,采用Western blotting方法检测凋亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨...     

盐藻β-胡萝卜素对60Co辐射引起小鼠胸腺淋巴细胞凋亡的影响

目的探讨盐藻β-胡萝卜素（β-C）对。^60Co辐射引起小鼠胸腺淋巴细胞凋亡的影响。方法建立^60Co辐射（强度为3Gry）体外培养的小鼠胸腺淋巴细胞损伤病理模型。透射电镜观察盐藻β—C对^60Co辐射引起小鼠胸腺淋巴细胞超微结构变化；MTT法测定小鼠胸腺淋巴细胞的活性；Brdu法测定盐藻β—C对小鼠胸腺淋巴细胞增殖状态的影响；琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡情况；Western blot测定p38及磷酸化p38蛋白的表达。结果盐藻β—C能减轻^60Co辐射所致的胸腺淋巴细胞凋亡的形态学改变；能显著提高细胞活性，使处于增殖状态的细胞显著增多；能减少^60Co辐射所致淋巴细胞DNA梯状带的出现．降低淋巴细胞凋亡率；能抑制^60Co辐射后小鼠胸腺淋巴细胞P38蛋白的磷酸化。结论盐藻β—C能抑制^60Co辐射诱导的淋巴细胞凋亡，对^60Co辐射损伤的小鼠胸腺淋巴细胞具有保护作用。其作用机制可能与盐藻β—C乳剂能清除氧自由基、减少DNA的断裂、抑制磷酸化p38蛋白的表达有关。