ceRNAs在甲状腺癌中的研究进展及展望

甲状腺癌是世界上最为常见的内分泌恶性肿瘤之一,虽甲状腺癌患者总体生存率较佳,但发病率增速位列首位,故需深入了解甲状腺癌的发生发展机制,竞争内源性RNA（ceRNA）概念的提出进一步阐明了肿瘤发生的机制。目前研究表明环状RNA、长链非编码RNA、假基因转录本、mRNA均可作为ceRNAs参与ceRNA网络构建,它们拥有与...     

非编码RNA在痤疮中的作用机制及相关研究进展

目前，痤疮的发病机制未完全阐明，近年来研究表明非编码RNA中的微小RNA、长链非编码RNA和环状RNA等参与了痤疮发病机制中多种复杂的生物过程，包括痤疮丙酸杆菌失衡、免疫功能异常、炎症反应和角质形成细胞的异常分化增殖等，这些非编码RNA有望成为痤疮的生物标记物及治疗靶点。本文旨在对非编码RNA在痤疮中的作用机制和潜在临床应用进展进行综述。     

脊索瘤中microRNA的差异性表达及其RNA编辑

目的 :检测脊索瘤组织中micro RNA(mi RNA)的差异性表达情况,探讨其RNA编辑。方法 :使用RTq PCR(Real-time quantitative polymerase chain reaction)技术检测骶骨脊索瘤组织11种候选mi RNA的表达水平,将其与髓核组织中的表达水平进行比较,对表达异常的mi RNA前体(pri-mi RNAs)的DNA和c DNA序列进行对比,检测是否存在RNA编辑。使用蛋白印迹法(Western blot)检测脊索瘤组织中RNA编辑的关键酶RNA腺苷脱氨酶(adenosine deaminase acting on RNA,ADARs)的表达。构建ADAR的表达载体,同时构建ERBB2和HOXA1的3′-非翻译区报告载体并转染mi RNA模拟物和抑制物,将其和ADAR的表达载体共转染至人胚肾细胞293T(HEK293T细胞),用q RT-PCR检测mi RNA的表达水平,并通过荧光素酶报告基因活性分析法对已测得异常表达的mi RNA的靶基因ERBB2和HOXA1进行活性分析,检测ADAR与测得异常表达的mi RNA的靶基因的关系。结果:与髓核组织相比,脊索瘤组织中mi R-10a和mi R-125a的相对表达程度明显下调(P<0.05)。脊索瘤组织中mi R-10a和mi R-125a的前体c DNA序列中出现了腺苷酸向鸟苷酸(A-G)突变,而在髓核组织中mi R-10a和mi R-125a前体的c DNA序列中无此改变,mi R-10a和mi R-125a在成熟过程中出现了A-I RNA编辑。4组脊索瘤组织中有3组存在ADAR1过度表达,2组存在ADAR2过度表达。转染了mi RNA抑制物的HEK293T细胞中ADAR1表达出现上调,而mi R-10a和mi R-125a的表达出现下调,mi R-10a的靶基因ERBB2和mi R-125a的靶基因HOXA1的荧光素酶活性显著增高;相反,转染了mi RNA模拟物的HEK293T细胞中ADAR1表达出现下调,而mi R-10a和mi R-125a的表达出现上调,ERBB2和HOXA1的荧光素酶活性显著降低。结论:ADAR1的过度表达可能通过介导A-I RNA编辑影响mi R-10a和mi R-125a的成熟和表达,参与脊索瘤发生中的细胞异常增殖调控。     

化学修饰小干扰RNA研究进展

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指转录双链的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)能够高效、特异地抑制同源基因的表达。近年来,RNAi以其快速、简便、特异、高效等优势被广泛应用于基因功能研究,肿瘤治疗和抗病毒感染等领域。而采用胆固醇、锁核酸、二硝基苯酚等化学基团对双链小干扰RNA(siRNA)的正义或反义链进行化学修饰,可增强siRNA的稳定性,提高其干扰活性,克服siRNA传统载体(病毒、质粒等)对机体潜在的风险性,避免脱靶、利于被细胞摄取等,在基础研究和临床治疗方面具有非常广阔的应用前景。     

小干扰RNA在肝癌治疗中的应用

小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)是21～23 nt的短双链RNA,将哺乳动物细胞内特异基因的mRNA特异性降解而使基因失活,引起转录后沉默该基因的作用.siRNA技术在人类恶性肿瘤的基因治疗有特异而强烈的作用,具有非常广阔的情景,但其稳定性是有待解决的新问题.本文针对siRNA在肝癌治疗中的研究现状进行综述.     

环状RNA与骨科相关疾病研究进展

环状RNA是最近发现的一类非编码RNA,缺少5'帽子和3'多聚A尾,以反向剪接的方式形成一个共价闭合的环形结构。最初认为circRNA是由基因转录过程中的错误引起的,然而,经过进一步调查,科学家们认为circRNAs具有重要的生物学意义。circRNAs具有稳定性、保守性和组织特异性。它们还可以作为miRNA海绵起作用,调节基因表达,并与蛋白质相互作用以影响细胞行为,参与多种骨科疾病(包括骨性关节炎、骨肉瘤等)的发生和发展,有望成为诊断生物标志物和治疗靶标。笔者简要回顾了circRNA的特征、生物起源、分类和功能,特别关注circRNA在多种骨科疾病中的作用。     

RNA干扰与肿瘤治疗的研究进展

RNA干扰(RNA interference，RNAi)指与内源性mRNA编码区某段序列同源的双链RNA(double—stranded RNA，dsRNA)导入细胞时，该序列mRNA发生特异性的降解，并导致基因表达的沉默。小干扰RNA(small—imerfering RNA，siRNA)是RNAi作用的主要介质。其可经体外合成再转入细胞，也可通过各种载体内源性表达。RNAi在基因功能研究选择上具有独特的价值，在疾病的治疗上也有良好的应用前景。     

微小RNA-143与肿瘤的相关研究进展

微小RNA-143(miR-143)在多种人类肿瘤中低表达,其通过干扰mRNA翻译,下调靶基因表达,参与个体发育、细胞凋亡、细胞增殖和分化等生命活动,从而调控体内许多重要生命活动,尤其在肿瘤的生长、侵袭、转移、耐药及预后等疾病进程中发挥重要作用.本文对miR-143在肿瘤的生长、治疗中表达情况的最新研究进展作一综述.     

RNA干扰与肿瘤治疗的研究进展

RNA干扰 (RNAinterference ,RNAi)指与内源性mRNA编码区某段序列同源的双链RNA(double -strandedRNA ,dsRNA)导入细胞时 ,该序列mRNA发生特异性的降解 ,并导致基因表达的沉默。小干扰RNA(small-interferingRNA ,siRNA)是RNAi作用的主要介质。其可经体外合成再转入细胞 ,也可通过各种载体内源性表达。RNAi在基因功能研究选择上具有独特的价值 ,在疾病的治疗上也有良好的应用前景。     

糖尿病肾病患者外周血单个核细胞前列腺素E1受体EP2 mRNA表达及其对PGE1治疗的影响

目的 探讨糖尿病肾病患者外周血单个核细胞前列腺素E1受体EP2 mRNA的表达及其对PGE1治疗的影响.方法 选择临床诊断为糖尿病肾病的67例患者作为研究对象,均给予前列腺素E1治疗,疗程2周,逆转录聚合酶链反应检测患者治疗前后外周血前列腺素E1受体EP2 mRNA表达水平,同时比较血压、尿蛋白及血肌酐水平变化.结果 糖尿病肾病患者治疗后外周血单个核细胞前列腺素El受体EP2 mRNA的表达水平较治疗前升高,且受体活性增高显著者疗效较好.结论 在糖尿病肾病发病过程中,EP2受体可能参与了糖尿病肾病的发病过程.糖尿病肾病患者PGE1的治疗效果与受体EP2 mRNA的表达相关.     

MicroRNA与细胞自噬调控

细胞自噬是进化过程中高度保守的物质降解再循环过程,是细胞将异常蛋白质、受损细胞器转运至溶酶体降解再利用的活动。自噬过程受到精密的调控。自噬功能障碍与神经退行性疾病、心血管疾病、肿瘤、骨代谢疾病、衰老等的发生有关。MicroRNA是一类对基因进行转录后修饰的非编码单链小RNA。越来越多的证据表明,MicroRNA可以通过调控自噬相关基因及其调节因子来影响自噬水平,是治疗自噬功能障碍所引发疾病的潜在靶点。本文对有关MicroRNA参与自噬调控的最新动态进行综述。     

非编码RNA对脑功能的影响

背景 非编码RNA（noncoding RNAs,ncRNAs）包括短链非编码RNA（microRNAs,miRNAs）和长链非编码RNA（long noncoding RNAs,lncRNAs）,二者均参与基因表达的调控,从而影响脑功能。目的 探讨ncRNAs对脑功能的影响。内容 阐述ncRNAs对中枢神经系统发育及中枢神经系统疾病的影响。 趋向 随着新的ncRNAs被发现,其对脑功能影响的研究也将更加深入。     

小干扰RNA抑制人端粒酶逆转录酶基因对胃癌细胞增殖的影响

目的 应用小干扰RNA(siRNA)技术特异性抑制人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因在胃癌SGC7901细胞中的表达,观察其对细胞增殖的影响.方法 hTERT基因的RNA干扰表达重组体用脂质体介导方法转染SGC7901细胞.荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测hTERT基因表达.TRAP-PCR法检测端粒酶活性、噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖.结果 SGC7901细胞转染前后hTERT基因的表达强度分别为:转染pU6组平均表达量为6.5×105拷贝/μg RNA;转染pU6-hTERT-siRNA Ⅰ组平均表达量为4.1 × 104拷贝/μg RNA;转染pU6-hTERT-siRNAⅡ组平均表达量为5.4×104拷贝/μg RNA.转染pU6组与其余两组P值<0.01;转染pU6-hTERT-siRNA Ⅰ组和转染pU6-hTERT-siRNAⅡ组P值>0.05.端粒酶活性下降,细胞生长速度明显减慢.结论 小干扰RNA能有效抑制SGC7901细胞中hTERT基因表达,hTERT基因表达下调影响SGC7901细胞增殖.     

RNA编辑酶ADAR1在小鼠细胞免疫应答中的作用研究

目的通过siRNA质粒转染小鼠淋巴细胞，降低RNA编辑酶ADAR1的表达，观察其对淋巴细胞免疫功能的影响。方法反复冻融人肝癌细胞株，制备肿瘤细胞可溶性抗原，将分离出的小鼠原代淋巴细胞以ADAR1 siRNA质粒转染，然后以肿瘤细胞可溶性抗原致敏，以此作为实验组；设原代培养未经转染的致敏小鼠淋巴细胞为对照组，采用细胞毒性实验检测ADAR1对淋巴细胞免疫功能的影响。结果实验组淋巴细胞对靶细胞的杀伤作用明显弱于对照组（P〈0．05）。结论RNA编辑酶ADAR1在小鼠细胞免疫中有重要作用，下调RNA编辑酶ADAR1表达可以减弱淋巴细胞的杀伤作用。     

RNA干扰沉默酸性鞘磷脂酶1基因对人成纤维细胞凋亡的影响

目的为研发保护女性生殖细胞的小分子干扰RNA（siRNA）类药物,以人包皮成纤维细胞（HFF）为模型,检测靶向凋亡关键基因酸性鞘磷脂酶1（SMPD1）基因的siRNA对HFF凋亡的抑制作用。方法设计合成三对靶向SMPDI基因的siRNA并体外转染HFF细胞,转染后48h用丝裂霉素（MMC）诱导细胞凋亡。荧光定量逆转录-聚合酶链反应（O-RT-PCR）法及免疫印迹（Western blot）检测siRNA转染后SMPD1在mRNA水平和蛋白水平的变化,Annexin V—PI双染检测细胞凋亡率。用脂质体（lipofectamine 2000）和无干扰siRNA（NT siRNA）作为对照。结果siRNA1、2、3对SMPD1基因mRNA的抑制效率分别为（67．0±9．0）％、0％、（45．0±2．1）％,以siRNA1最高,蛋白水平的抑制也呈现相同变化。siR-NA1组细胞凋亡率为15．2％,明显低于MMC组（26．3％）。结论靶向SMPD1的siRNA可以抑制人包皮成纤维细胞凋亡。     

环状RNA的研究进展

环状RNA(circular RNA,circRNA)又称环形RNA,是新近确认的一类特殊的非编码RNA(ncRNA),主要由外显子和(或)内含子构成。近年来研究发现,在某些疾病(如肿瘤、动脉粥样硬化、糖尿病、神经系统疾病)的发生发展过程中circRNA起着重要的调控作用,这不仅使我们对环状RNA有了更好认识,而且在某些疾病的诊断、治疗及预防方面也为我们提供了新的研究方向。     

miRNA与LncRNA相互作用在骨关节炎中的作用

非编码RNA(ncRNA)包括微小RNA(miRNA)、长链非编码RNA(LncRNA)、核内小RNA(snRNA)、转运RNA(tRNA)、核糖体RNA(rRNA)、piwi互作RNA(piRNA)、核仁小RNA(snoRNA)等。ncRNA被转录后不被翻译成蛋白质,在RNA水平发挥其生物学功能,其中LncRNA在转录水平、转录后水平及表观遗传学水平调控基因表达。miRNA通过与靶mRNA的3’UTR互补配对,在转录后水平发挥生物学功能。越来越多的研究表明,LncRNA与miRNA相互作用在疾病进展中起至关重要的作用。该文主要对骨关节炎中LncRNA对miRNA的调控机制进行综述。     

小干扰RNA技术与骨质疏松症治疗

以骨量减少、骨微结构破坏为主要特征的骨折疏松症及其所致骨折严重影响人均寿命及生活质量，目前的治疗方法因多种原因并不能很好地解决相关问题。RNA干扰是一种序列特异的转录后基因沉默技术，通过小干扰RNA技术可以特异性调控蛋白表达，达到靶向治疗目的。该文就小干扰RNA技术在骨质疏松症治疗方面的研究作一综述。     

RNA干扰技术在前列腺癌病因学研究及治疗中的应用

RNA干扰技术（RNAi）是一种双链RNA分子在mRNA水平上诱发的转录后基因沉默机制.它在分析和研究基因功能、抗肿瘤及抗病毒研究方面发挥了重要作用.本文综述其在前列腺癌病因学研究及前列腺癌的基因治疗中的应用.     

shRNA抑制SGC7901胃癌细胞绿色荧光蛋白基因的表达

目的：观察针对绿色荧光蛋白(GFP)基因的发夹结构RNA(small hairpin RNA，shRNA)表达载体(SHi—pU6-GFP)对SGC7901胃癌细胞中GFP的抑制作用。方法：设计针对GFP基因的shRNA序列．构建SHi—pU6-GFP质粒。采用质粒pCX—GFP(5510bp)和含有鼠U6启动子pU6（3．3kb)质粒，应用Lipofectamine^TM2000将pCX-GFP质粒和SHi—pU6-GFP质粒转染SGC7901细胞。荧光显微镜观察转染效果和不同时间的转染效率。结果：质粒SHi-pU6-GFP经酶切电泳后，出现3．3kh和约350bp条带，与实验设计的针对GFP的shRNA长度相符。说明本实验已成功构建了针对绿色荧光蛋白GFP基因的SHi—pU6-GFP质粒。SGC7901细胞中观察到转染pCX—EGFP质粒和SHi—pU6-GFP质粒前后发绿色荧光的细胞数目明显减少：结论：shRNA可以有效地抑制SGC7901细胞中GFP基因的表达。