丙戊酸钠对体外培养许旺细胞增殖及相关蛋白GAP-43、MAG和MBP表达的影响

目的 观察丙戊酸钠(VPA)对体外培养的大鼠坐骨神经许旺细胞的影响,探讨其促进周围神经再生的作用机制.方法 取SD幼鼠坐骨神经体外培养许旺细胞,应用免疫荧光技术鉴定许旺细胞纯度.将体外培养的许旺细胞分为实验组和对照组,分别给以含与不含VPA( 1.0 mmol)的血清培养液,处理后分别于0、12、24、36、48和72 h采用4-甲偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,免疫组化法检测雪旺细胞特异性蛋白(S-100)、生长相关蛋白(GAP-43)、髓鞘相关蛋白(MAG)和髓鞘碱性蛋白(MBP)表达,以及蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测GAP-43、MAG和MBP表达.结果 与对照组相比,在24、36 h和48 h实验组许旺细胞增殖率显著增加,以48 h两组差别最为明显(P＜0.01);在24、36 h和48 h实验组GAP-43和MAG蛋白表达水平显著增加(P＜0.05);在36 h和48 h实验组MBP蛋白表达水平显著增加(P＜0.05).结论 临床使用剂量的VPA促周围神经再生的作用机制可能与其诱导许旺细胞增殖、上调GAP-43、MAG和MBP蛋白表达水平有关.     

应用丙戊酸钠抗休克的研究进展

在战争、突发事故与灾害现场,由于交通破坏、后送延迟、医疗资源匮乏等原因造成常规静脉液体复苏难以实施或延迟实施,致使90％的休克伤员在被送往有条件实施常规抗休克治疗地点之前已经死亡。     

丙戊酸钠诱导人脑胶质瘤细胞分化的靶细胞与靶分子研究

目的探讨丙戊酸钠诱导人脑胶质瘤细胞分化时作用的靶细胞和靶分子。方法丙戊酸钠治疗位于裸小鼠皮下的可移植性人脑胶质瘤,半定量RT-PCR检测移植瘤中HDAC1和Tob的表达;CD133免疫磁珠分离胶质瘤组织中的CD133^＋细胞,在分别含血清或不含血清加生长因子培养的条件下,加丙戊酸钠作用21d,流式细胞仪检测和共聚焦显微镜观察分化标志物表达。结果丙戊酸钠能明显抑制位于裸小鼠皮下移植瘤的增殖（P〈0．05）,使HDAC1表达下降（P〈0．01）,Tob表达升高（P〈0．05）。流式细胞仪检测丙戊酸钠作用21d的细胞,在含血清条件下,GFAP或β-tubulinⅢ阳性细胞数显著增加（P〈0．01）,而无血清加生长因子条件下两标志物表达均无显著差异（P〉0．05）;共聚焦显微镜观察显示上述的GFAP^＋或β-tubulinⅢ^＋细胞共表达Nestin。结论丙戊酸钠逆转人脑胶质瘤细胞分化抑制的靶分子有HDAC1和Tob,靶细胞为处于分化过程中的脑肿瘤干细胞。     

吡咯喹啉醌充填导管诱导外周神经再生的实验研究

目的观察吡咯喹啉醌(PQQ)充填导管诱导缺损外周神经再生的作用。方法24只SD大鼠随机分入PQQ组与对照组,每组各12只。所有动物均实施手术,运用硅胶导管桥接1.0cm坐骨神经缺损。PQQ组导管内充填0.03mmol/LPQQ(10μl),对照组充填等体积生理盐水。各组动物于术后12周测定运动神经传导速度(MCV)、进行再生神经光镜及电镜观察,并通过图像分析系统比较再生轴突数目及髓鞘厚度。结果两组动物MCV(m/s)分别为23.95±2.47和19.46±2.46;再生轴突数目为3060±223和2300±250;髓鞘厚度(μm)为0.437±0.059和0.290±0.031。PQQ组上述各指标均明显优于对照组(P<0.01)。形态学观察,PQQ组动物导管内有更多成熟再生纤维。结论吡咯喹啉醌可有效诱导缺损外周神经的再生。     

丙戊酸钠联合拉莫三嗪治疗成人难治性癫痫的疗效分析

目的探讨丙戊酸钠联合拉莫三嗪治疗成人难治性癫痫的临床疗效及安全性。方法将笔者所在医院收治的118例难治性癫痫患者随机分为治疗组和对照组,各59例。对照组单纯给予VPA,治疗组在此基础上加用LTG。结果治疗组总有效率为96.6%,显著优于对照组的84.8%,差异有统计学意义（P〈0.05）;且未见明显不良反应。结论 VPA联合LTG治疗成人难治性癫痫疗效确切,安全性高,可提高患者的生存质量。     

丙戊酸钠增强免疫细胞对人膀胱癌细胞的杀伤作用

目的:探讨丙戊酸钠(VPA)对膀胱癌细胞MICA表达的影响以及所产生的肿瘤免疫作用,以期为防治膀胱癌复发和浸润提供新的治疗方法。方法:采用不同浓度VPA处理人膀胱尿路上皮癌T24细胞后,用半定量RT-PCR和流式细胞术检测癌细胞中MICA mRNA和蛋白表达。用乳酸脱氢酶法检测外周血单个核细胞(PBMCs)对经VPA处理的T24细胞的杀伤作用。结果:VPA从mRNA和蛋白水平诱导T24细胞表达MICA,并增强T24细胞对PBMCs细胞毒作用的敏感性。结论:VPA能增强膀胱癌对免疫细胞杀伤作用的敏感性,可作为防治膀胱癌的辅助药物。     

FK506缓释膜片促进外周神经再生的实验研究

目的观察神经断伤吻合口局部植入FK506缓释膜片对神经再生的影响.方法取Wistar大鼠60只,随机平均分为A、B、C、D 4组.切断大鼠右侧坐骨神经后间断吻合,将免疫抑制剂FK506溶入聚乳酸(PLA)后制成15 mm×8 mm×1 mm大小的膜片,植入神经吻合口周围作为生物降解缓释制剂,可稳定、持续释放FK506约3周.A组为对照组,膜片内不含FK506;B、C、D组设计释放率分别为1 mg@kg-1@d-1、2 mg@kg-1@d-1和5 mg@k-1@d-1.术后第3、6、10周观察神经吻合口质量、测定坐骨神经功能指数以及电生理学和组织学检查的定性、定量分析.结果B、C组测定结果明显优于A组,C组优于B组.D组神经连接及再生不良.结论适量FK506神经吻合口植入,缓释应用对周围神经再生的速度和质量均有明显的促进作用.     

丙戊酸钠联合癫痫平序贯治疗癫痫的临床观察

目的：观察丙戊酸钠联合癫痫平序贯治疗癫痫的临床疗效,探讨其有效性及安全性,以期更有效地控制癫痫发作。方法76例癫痫患者随机分为治疗组和对照组,治疗组在常规治疗基础上联合癫痫平的剂量调整,对照组为丙戊酸钠常规疗法。观测两组患者临床疗效、不良反应、治疗时间与发作频率的相互关系。结果治疗组（40例）有效控制发作,较对照组（36例）临床疗效显著提高,不良反应发生率降低;两组治疗后癫痫发作严重程度积分值比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论在抗癫痫治疗过程中,丙戊酸钠联合癫痫平序贯疗法,中西药作用机制协同、时间互补、效应增强,疗效优于单用丙戊酸钠。     

银杏叶提取物促进大鼠坐骨神经再生的实验研究

研究显示 ,银杏叶提取物 (ｅｘｔｒａｃｔｏｆｌｅａｖｅＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａ,ＥＧｂ)具有良好的神经保护作用[1 4 ] 。我们进行了ＥＧｂ对神经再生影响的研究。1.材料与方法 :雄性ＳＤ大白鼠 48只 ,随机分成损伤实验组 (ｎ =2 4)和对照组 (ｎ =2 4) ,ＥＧｂ由美国ＰＨＡＲＭＡＮＥＸＩＮＣ公司提供。制作坐骨神经挤压伤模型 ,术后对照组给予生理盐水 2ｍｌ灌胃 ,实验组给予ＥＧｂ 2 0ｍｇ (溶于 2ｍｌ生理盐水中 )灌胃。分别于术后第 2、4、6周作以下观察 :坐骨神经功能指数(ＳＦＩ) ;电生理检测 :用ＥｓａｏｔｅＰｈａｓｉｓ肌电仪测…     

柱前衍生化HPLC法测定人血清中丙戊酸钠的浓度

目的:建立测定人血清中丙戊酸钠浓度的方法.方法:采用2-溴-对硝基苯乙酮为衍生化试剂,以高效液相色谱法进行测定.色谱柱为大连依利特Hypersil ODS2色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相为甲醇-水(80:20),流速为1mL.min-i,检测波长为265nm,柱温为30℃,内标为环己烷羧酸.结果:丙戊酸钠血药浓度在8.96～134.4mg.L-1范围内线性关系良好(r=0.9992,n=6),最低检测浓度为2 mg.L-1;平均回收率为99.8％～102.4％,日内与日间RSD均＜6.7％(n=5).结论:本方法快速、简便、准确,适用于临床丙戊酸钠的血药浓度监测.     

胶质细胞源性神经营养因子对周围神经再生的作用

目的研究胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)对周围神经再生的作用.方法硅管套接大鼠坐骨神经,术中一次性将GDNF、生理盐水(nor-mal saline solution,SAL)分别加入硅管中.术后4周,应用溃变神经纤维染色法、辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)逆行追踪技术观察GDNF对轴突再生的影响.结果与SAL组相比,GDNF组渍变神经纤维面积明显减少,溃变神经纤维面积百分率由17.3%降低到1.9%(P＜0.01);GDNF组脊髓标记胞体显著增加,HRP标记胞体数的百分率由43.5%上升到68.3%(P＜0.01).结论外源性GDNF能明显促进周围神经再生.     

模拟膈神经脉冲电刺激促进周围神经再生的研究

目的　研究膈神经生物电脉冲 (BIPN)对周围神经再生的促进作用。方法　新西兰家兔 18只平均分为 3组 ,切断双侧坐骨神经后端端缝合予以电刺激。A组以BIPN刺激与无刺激对照 ;B组以BIPN刺激与方波脉冲刺激对照 ;C组以方波脉冲刺激与无刺激对照。刺激 4周后行足底溃疡直径、神经电生理、胫前肌肌湿重、组织学和电镜超微结构检测。结果　A、B组BIPN侧足底溃疡直径分别为 (16.3 3± 17.17)mm和 (2 2 .3 3± 7.5 0 )mm ,均优于对照侧 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ;复合肌肉诱发电位 (CMAP)潜伏期分别为 (1.98± 0 .2 0 )ms和 (1.92± 0 .16)ms ,均优于对照侧 (P <0 .0 5 ) ;A组CMAP波幅为 (0 .18± 0 .0 7)mV ,优于对照侧 (P <0 .0 5 ) ;远端有髓纤维通过率分别为 (62 .44± 6.68) %和 (5 4.48± 5 .0 5 ) % ,均优于对照侧 (P <0 .0 1) ;胫前肌肌湿重分别为(1.67± 0 .2 4)g和 (1.71± 0 .2 5 )g ,均优于对照侧 (P <0 .0 1) ;超微结构观察示BIPN侧再生髓鞘成熟度优于方波脉冲侧 ,更优于无刺激侧。结论　膈神经电脉冲能较明显地促进周围神经再生。     

电针对大鼠坐骨神经再生影响的功能评价

目的从功能恢复评价电针对神经再生的促进作用。方法建立大鼠坐骨神经损伤模型，将９０只ＳＤ大鼠随机分为损伤对照组和电针组两组。分别于术后２、４、６、１０周测定运动神经传导速度、小腿三头肌肌力及坐骨神经功能指数，并以自身健侧作对照得出其恢复率。同时测定术后１周感觉神经再生的距离。结果电针组术后１周感觉神经再生距离及２、４、６、１０周运动神经传导速度、肌力、ＳＦＩ等的恢复率均明显优于对照组。结论电针可以促进损伤神经的再生，明显提高神经功能的恢复     

促红细胞生成素促进大鼠坐骨神经再生作用的实验研究

目的 探讨促红细胞生成素(Erythoropoietin,EPO)对大鼠坐骨神经损伤修复后神经再生的影响,为周围神经损伤的临床治疗提供实验依据.方法 雄性SD大鼠40只,随机分为两组,即EPO组和神经生长因子(NGF)组,用硅胶管桥接10 mm的坐骨神经缺损,EPO组和NGF组分别注射EPO和NGF.术后4周和8周时每组分别提取10只大鼠,以坐骨神经功能指数(SFI)、运动神经传导速度(MNCV)、形态学观察和蛋白基因产物9.5(PGP 9.5)免疫组织化学染色,评估EPO对大鼠坐骨神经再生的影响.结果 术后4周SFI,EPO组为[(-78.85±3.87),x-±s,下同],NGF组为(-79.98±4.58),差异无统计学意义(P>0.05);术后8周SFI,EPO组为(-60.26±2.91),NGF组为(-64.65±4.11),差异有统计学意义(P<0.05).术后4周和8周时,EPO组MNCV、有髓神经纤维数目以及PGP9.5免疫阳性神经纤维的平均光密度和积分光密度均优于NGF组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 EPO 能促进大鼠坐骨神经损伤后的修复与再生.     

同轴共纺复合神经生长因子导管修复大鼠坐骨神经缺损的实验研究

目的 观察同轴共纺复合神经生长因子(NGF)导管对大鼠坐骨神经缺损修复的促进作用.方法 以复合NGF的牛血清白蛋白为芯层、乳酸.己内酯共聚物[P(LLA-CL)]为壳层,采用同轴共纺技术制备具有"壳-芯"结构的可降解纳米纤维复合神经导管.取SD大鼠72只,随机分为四组:自体神经移植组(A组),单纯[P(LLA-CL)]导管组(B组),单纯导管内一次性汴射NGF组(C组)和复合NGF导管组(D组),每组18只.制作大鼠坐骨神经10 mm缺损模型,四组大鼠分别采用白体神经移植、单纯[P(LLA-CL)]导管、单纯导管内一次性注射NGF、复合NGF导管桥接修复缺损.于术后第1、2、3个月行大体观察、坐骨神经功能指数、小腿三头肌湿重恢复率测量、电生理检测和组织学检查. 结果术后复合NGF导管逐渐开始吸水膨胀并降解,3个月时,虽然管壁已经出现裂隙,但依然保持良好的外形,没有对再生神经形成卡压.术后1个月,再生神经均已通过缺损,连接两断端,但较细小;随着时间的延长,再生神经逐渐增粗.各组间比较发现,D组再生神经取得了和A组相似的效果,明显优于B组和C组(P<0.05).尽管D组与A组之间比较.差异无统计学意义(P>0.05),甚至D组的有髓神经纤维计数还稍高于A组,但其髓鞘的厚度和直径不如A组,并且坐骨神经功能指数和腓肠肌湿重恢复率也比A纽稍差. 结论同轴共纺复合NGF神经导管具有良好的组织相容性、生物活性和机械强度,能够有效地促进神经再生,效果接近自体神经移植.     

Large-area irradiated low-level laser effect in a biodegradable nerve guide conduit on neural regeneration of peripheral nerve injury in rats

This study used a biodegradable composite containing genipin-cross-linked gelatin annexed with β-tricalcium phosphate ceramic particles (genipin-gelatin-tricalcium phosphate, GGT), developed in a previous study, as a nerve guide conduit. The aim of this study was to analyse the influence of a large-area irradiated aluminium-gallium-indium phosphide (AlGaInP) diode laser (660 nm) on the neural regeneration of the transected sciatic nerve after bridging the GGT nerve guide conduit in rats. The animals were divided into two groups: group 1 comprised sham-irradiated controls and group 2 rats underwent low-level laser (LLL) therapy. A compact multi-cluster laser system with 20 AlGaInP laser diodes (output power, 50 mW) was applied transcutaneously to the injured peripheral nerve immediately after closing the wound, which was repeated daily for 5 min for 21 consecutive days. Eight weeks after implantation, walking track analysis showed a significantly higher sciatic function index (SFI) score (P < 0.05) and better toe spreading development in the laser-treated group than in the sham-irradiated control group. For electrophysiological measurement, both the mean peak amplitude and nerve conduction velocity of compound muscle action potentials (CMAPs) were higher in the laser-treated group than in the sham-irradiated group. The two groups were found to be significantly different during the experimental period (P < 0.005). Histomorphometric assessments revealed that the qualitative observation and quantitative analysis of the regenerated nerve tissue in the laser-treated group were superior to those of the sham-irradiated group. Thus, the motor functional, electrophysiologic and histomorphometric assessments demonstrate that LLL therapy can accelerate neural repair of the corresponding transected peripheral nerve after bridging the GGT nerve guide conduit in rats.     

Vascular endothelial growth factor promotes peripheral nerve regeneration after sciatic nerve transection in rat

Objective：To evaluate the local effect of vascular endothelial growth factor （VEGF） on transected sciatic nerve regeneration.Methods：Sixty male white Wistar rats were divided into four experimental groups randomly （n=15）.In transected group the left sciatic nerve was transected and the stump was fixed to adjacent muscle.In treatment group the defect was bridged using a silicone graft filled with 10μL VEGF.In silicone group the graft was filled with phosphate-buffered saline.In sham-operated group the sciatic nerve was exposed and manipulated.Each group was subdivided into three subgroups with five animals in each and nerve fibers were studied 4,8 and 12 weeks after operation.Results：Behavioral test,functional study of sciatic nerve,gastrocnemius muscle mass and morphometric indices confirmed a faster recovery of regenerated axons in VEGF group than in silicone group （P〈0.05）.In immunohistochemical assessment,reactions to S-100 in VEGF group were more positive than that in silicone group.Conclusion：Local administration of VEGF will improve functional recovery and morphometric indices of sciatic nerve.     

不同断面神经束组吻合对周围神经再生影响的实验研究

目的 观察不同断面神经束组吻合对大鼠坐骨神经再生的影响。方法 将32只SD大鼠随机分为四组，各组大鼠均切断双侧坐骨神经后立即在显微镜下左侧施行不同断面神经束组吻合(实验侧)；右侧行同一断面神经束组吻合(对照侧)。分别于第2、4、6、8周检测两侧坐骨神经运动诱发电位的潜伏期、波幅和有髓神经纤维数。结果 各指标经统计学处理，术后第2周，实验侧和对照侧之间差异无统计学意义，术后第4、6、8周实验侧各项指标优于对照侧。结论 不同断面神经束组吻合在神经恢复后期有加速神经再生作用，优于同一断面神经束组吻合。     

Local effect of celecoxib on peripheral nerve repair com- bined with silicone tubulization in rat

Objective： To assess local effect of celecoxib on nerve regeneration in a rat sciatic nerve transec- tion model. Methods： Forty-five male healthy white Wistar rats were randomly divided into three experimental groups （n= 15 for each）： sham-operation （SHAM）, control （SIL） and celecoxib treated （SIL/CLX） groups. In SHAM group after anesthesia left sciatic nerve was exposed and after homeo- stasis muscle was sutured. In SIL group the left sciatic nerve was exposed in the same way and transected proximal to tibioperoneal bifurcation leaving a 10 mm gap. Proximal and distal stumps were each inserted into a silicone tube and filled with 10 gl phosphate buffered solution. In SIL/CLX group defect was bridged using a silicone tube filled with 10 μl celecoxib （0.1 g/L）. Results： Functional study and gastrocnemius muscle mass confirmed faster and better recovery of regenerated axons in SIL/CLX than in SIL group （P〈0.05）. Morphometric indices of regenerated fibers showed number and diameter of the myelinated fibers in SIL/CLX were significantly greater than those in control group. In immunohistochemistry, lo- cation of reactions to S-100 in SIL/CLX was clearly more positive than that in SIL group. Conclusion： Response to local treatment ofcelecoxib demonstrates that it influences and improves functional re- covery of peripheral nerve regeneration.