一类新的甾体激素受体的鉴定

已克隆了多种甾体激素受体家族成员,如人糖皮质激素受体(hGR),盐皮质激素受体(hMR)、雌激素受体(hER)、孕酮受体(hPR)等的cDNA序列和氨基酸序列,它们基本上分为DNA结合区、激素结合区及M区。本文用hER cDNA的DNA结合区作为杂交探针,分离出两个cDNA克隆,它们表达的蛋白具有甾体激素受体的结构,但它们参与     

糖皮质激素受体结构与功能研究进展

糖皮质激素受体 (GR)是核受体超家族中的重要成员 ,也是一种典型的激素依赖性转录调节因子 ,与激素结合后通过与靶基因糖皮质激素反应元件 (GRE)相互作用 ,从而调节靶基因的表达 ,引起各种生物学效应。近年对人 GR(h GR)的分子结构与生物学作用的研究有一定进展     

转录因子MAZ对c1orf109基因转录表达调控的体外研究

目的:本文旨在研究转录因子Myc相关锌指蛋白(MAZ)在体外对人类1号染色体开放阅读框109(c1orf109)基因的转录表达调控。方法:体外条件下,采用凝胶电泳迁移实验筛选c1orf109基因启动子区MAZ的结合位点,并利用本室构建的由c1orf109启动子驱动的增强型绿色荧光蛋白报告载体与MAZ和转录因子特化蛋白1(Sp1)的表达质粒共转染He La细胞,24 h后,用激光共聚焦显微镜和流式细胞术检测c1orf109基因的转录表达情况。结果:c1orf109启动子区可与MAZ结合,且有与Sp1共享的结合位点;MAZ与Sp1皆可抑制c1orf109的转录表达,且Sp1的抑制作用大于MAZ(P0.05)。结论:MAZ与Sp1两个转录因子共同调控c1orf109基因在生理及病理条件的表达,且调控方向一致。这种冗余机制调控方式的存在提示该基因的精确表达调控对于细胞行使其生物学功能可能具有重要意义     

甾体激素受体磷酸化

甾体激素受体是细胞内能与甾体激素发生紧密、特异性结合的蛋白质。当把未经甾体激素处理的细胞做成匀浆,再进行超离心分离时发现,受体主要存在于胞浆中。然而,最近得到的证据提示,在完整的细胞,未结合的甾体激素受体主要位于核中。在甾体激素与受体结合后,受体发生温度依赖性转化,形成能与核以及一些多聚阴离子紧密结合的转化形式。在核内,转化后的(或被激活的)甾体激素-受体复合物能增强或抑制特定基因的转录。最近,一些非常令人感兴趣的研究显示,甾体激素-受体复合物与靠近调节基因的特异DNA区域相结合。关于甾体激素受体研究的另一进展是提示了部     

FcRL基因家族的研究进展

越来越多的细胞表面受体被确认具有能通过T细胞受体或B细胞受体调节免疫应答的能力.Fc受体样(Fc receptor like or homolog,FcRL/H)基因是近年发现的基因,自Georgia等[1]对骨髓瘤易位染色体(1;14)(q21;q23)断点区进行克隆发现了两个新的基因,即FcRL4(IRTA1)和FcRL5(IRTA2)后,相继有新的类似基因被发现.     

类法尼醇X受体的功能及其配体的研究进展

类法尼醇X受体 (FXR)是一种细胞核激素受体 ,属孤儿核受体家族。胆汁酸和类法尼醇 (farnesoid)都是FXR的配体。FXR在调节胆固醇化合物中起重要作用 ,其作用机理与许多基因的调控有关。从印度香胶树中发现的天然产物guggul固醇 (GS)是一种FXR拮抗剂 ,具有很好的降脂作用。研究天然产物与FXR等细胞核受体的关系将会发现更多类似GS的降脂化合物     

COL1A1基因PCOL2和Sp1结合位点多态与先天性髋脱位的关联分析

目的 研究Ⅰ型胶原a1链(collagen type Ⅰ alpha 1，COL1A1)基因PCOL2和Sp1结合位点多态性在中国北方人群中的分布，并探讨其与先天性髋脱位(congenital dislocation of the hip，CDH)的关系。方法 在81个CDH核心家系的243名成员中，采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析方法，对位于COLIAI基因启动子内的PCOL2多态(-1997G／T)和转录调控区第1内含子内的Sp1多态(1546G／T)进行基因分型，并进行传递不平衡检验。结果COL1A1，基因PCOL2结合位点G／T多态与CDH不存在明显关联(P=0．537)，中国人PCOL2多态位点的基因型和等位基因频率分布与西班牙白人群和美国白人群差异存在统计学意义；Sp1结合位点只检测到SS基因型，未检测到Ss或ss基因型。结论 COL1A1基因PCOL2和Sp1结合位点多态存在种族差异，PCOL2和Sp1结合位点多态可能与中国人CDH的发病风险无关。     

基于TMT技术的激素性股骨头坏死硬化带修复模式探索及临床验证

背景：股骨头内硬化带是激素性股骨头坏死疾病发展过程中重要的影像学特征并与预后相关。过氧化物酶体增殖物活化受体γ协同刺激因子1α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1α,PGC-1α)被证明具有成骨、促血管形成、抗线粒体凋亡等生物活性，与激素性股骨头坏死的骨修复可能存在紧密关联。目的：筛选激素性股骨头坏死硬化带区与正常区的差异蛋白，筛选出硬化带的关键蛋白，并验证关键蛋白在激素性股骨头坏死股骨头标本中的差异表达；探索激素性股骨头坏死硬化带修复模式。方法：取激素性股骨头坏死行人工全髋关节置换术取出的股骨头标本，通过串联质谱标签技术筛选硬化带区与正常区的差异表达基因，并进行GO与KEGG信号通路分析，构建关键靶点的蛋白互作网络、筛选关键基因。观察关键蛋白在激素性股骨头坏死硬化带中的表达，通过Western blotting、免疫组化验证关键蛋白在硬化带中的表达。结果与结论：(1)通过串联质谱标签定量蛋白质谱检测发现：相比于正常区骨组织，股骨头硬化带骨组织中具有显著差异表达(Log2FC>1.20、Lo...     

新的小分子活性肽intermedin／adrenomedullin-2

Interm ed in(IMD)/adrenom edu llin-2(ADM2)是最近克隆出来的降钙素基因相关肽(CGRP)超家族成员,其结构类似于CGRP、肾上腺髓质素,通过降钙素受体样受体/受体活性修饰蛋白起作用。IMD/ADM2是一种内源性心脏-肾脏保护因子,作为循环激素和旁/自分泌因子在多种组织中发挥广泛生物学功能,具有降低血压、扩张冠脉、抗心脏缺血/再灌注损伤、调节水和电解质平衡、调节垂体激素分泌等生物学效应。     

促性腺激素释放激素信号转导研究进展

促性腺激素释放激素(gonadotropinreleasinghormone,GnRH)与垂体前叶细胞膜上特异的G蛋白偶联受体(Gproteincoupledreceptor,GPCR)结合,激活胞内一系列信号分子,最终使特定的基因表达,合成并分泌黄体生成素和卵泡刺激素。此外,GnRH脉冲频率的变化可影响胞内信号通路组件和下游基因反应的模式。促性腺激素基因自身结构的差异及各自启动子结构的不同,可部分解释GnRH受体下游基因反应的频率敏感性。     

Intrinsic cellular defense mechanisms targeting human cytomegalovirus

In recent studies we and others have identified the cellular proteins PML, hDaxx, Sp100 and ATRX, which form a subnuclear structure known as nuclear domain 10 (ND10) or PML nuclear bodies (PML-NBs), as host restriction factors that counteract cytomegalovirus infections by inhibiting the initiation of viral immediate-early (IE) gene expression. The antiviral function of ND10, however, is antagonized by viral regulatory proteins which either induce a proteasomal degradation of ND10 proteins or a disruption of the subnuclear structure. This review will summarize our current knowledge on the inhibition of cytomegalovirus replication by ND10 proteins. Furthermore, viral strategies to defeat this host defense mechanism are discussed.     

Autoantibodies to the Nuclear Sp100 Protein in Primary Biliary Cirrhosis and Associated Diseases: Epitope Specificity and Immunoglobulin Class Distribution

Sp100, a protein with a dot-like intranuclear localization in immunofluorescence microscopy, is a major target for patient autoantibodies in primary biliary cirrhosis (PBC) and occasionally in rheumatic disorders. The human Sp100 cDNA has recently been cloned, and the deduced amino acid sequence was found to contain sequence similarities with an MHC class I domain and several transacting regulatory proteins, including HIV-1 nef proteins. In this study, recombinant Sp100 fusion proteins were used to differentiate the immunoglobulin isotypes and to map the epitopes involved in the anti-Sp100 autoimmune response. PBC patients developed IgG as well as IgM and/or IgA class anti-Sp100 autoantibodies whereas most patients with rheumatic diseases developed IgG class autoantibodies only. For epitope mapping, truncated versions of the Sp100 protein were probed for immunoreactivity in ELISA and immunoblotting. With 55 sera, 17 different reaction patterns were obtained, and at least three non-overlapping major autoantigenic domains were recognized by the majority of sera. One domain, which contains the sequence similarity with HIV nef proteins, was recognized by all anti-Sp100 sera and harbours multiple, in part discontinuous, epitopes. These data demonstrate a heterogeneous and patient-specific anti-Sp100 autoimmune response which is antigen-driven and, at least in terms of isotype composition, different in PBC and non-PBC patients.     

流体剪切力调节内皮细胞组织因子表达的初步探讨

目的探讨流体剪切力调节内皮细胞组织因子(tissue factor,TF)表达的机制。方法将脐静脉内皮细胞置于平行板流动腔中接受1．2 Pa(1 dyn／cm2=0．1 Pa)剪切力作用20 min后,采用凝胶电泳迁移率改变法(electorohoretic mobility shift analysis,EMSA)和蛋白免疫印迹分析(Western Blot,WB)检测转录因子Egr-1和Sp1在TF基因表达过程中的表达情况。结果 (1)静止组可见Sp1表达而无Egr-1表达;(2)剪切力组Sp1磷酸化水平和Egr-1表达水平均明显增高;(3)EMSA显示,对于Sp1／Egr-1结合位点,Egr-1对Sp1具有较强的竞争抑制作用。结论流体剪切力调节TF基因表达过程中,不同转录因子起着不同的作用:Sp1主要维持内皮细胞TF基因的基础表达;Egr-1竞争靶位点上的Sp1和磷酸化Sp1可能共同参与流体剪切力诱导TF基因表达。