HSP90基因在前列腺癌细胞凋亡中的相关研究

目的：克隆全反式维甲酸诱导前列腺癌细胞系DU-145细胞产生凋亡的相关基因。探讨前列腺癌细胞产生凋亡的分子机制。方法：应用全反式维甲酸诱导前列腺癌DU-145细胞凋亡，建立细胞凋亡模型，采用基于PCR的改良消减杂交技术克隆与凋亡相关的基因。结果：在前列腺癌DU-145细胞凋亡过程中，克隆出包括HSP90基因在内的多个基因序列。结论：全反式维甲酸诱导的前列腺癌细胞DU-145凋亡有多基因参与其中．其中HSP90基因可能与前列腺痛细胞凋亡关系密切。     

HSP70单抗联合反义寡核苷酸诱导前列腺癌细胞凋亡的研究

目的：探讨ＨＳＰ７０单抗及反义寡核苷酸对前列腺癌细胞株ＬＮＣａＰ和ＰＣ－３ｍ调亡在诱导作用及差异。方法：用流式细胞术分析了ＨＳＰ７０单抗（２μｌ）、反义寡核苷酸（１０μｍｏｌ／Ｌ）及单抗联合反义寡核苷酸分别处理ＬＮＣａＰ和ＰＣ－３ｍ２４、４８、７２、９６ｈ后,细胞凋亡的发生率。结果：在４８、７２、９６ｈ时单抗联合反义寡核苷酸诱导的凋亡发生率高于单抗或反义寡核苷酸单独诱导时的调亡率,差异显著（分别为     

细胞表面热休克蛋白90在人前列腺癌细胞中的表达及其对侵袭能力的影响

目的 观察细胞表面热休克蛋白90(HsPgo)在高侵袭性人前列腺癌细胞PC3中的表达,及其对细胞侵袭能力的影响,探讨其可能的作用机制.方法 采用免疫荧光染色和膜蛋白生物素标记法,检测HSPgO在PC3细胞表面的表达;采用Boyden小室侵袭实验观察细胞侵袭能力的改变;采用Western blot和免疫共沉淀法,检测局部黏着斑激酶(FAK)、c-Src蛋白磷酸化水平及其两者相互作用的变化;采用RNA干扰技术下调FAK蛋白表达,应用抑制剂PP2抑制Src激酶活性,观察细胞FAK/Src信号通路及其侵袭能力的改变.结果 PC3细胞表面表达HSP00.HSPg0特异性抗体可显著降低PC3细胞体外侵袭能力,且伴有FAK tyr 397、576、577、925及c-Src tyr 416磷酸化水平的显著下降,以及FAK与c-Src蛋白相互结合的明显减弱.经小分子干扰RNA(siRNA)有效干扰FAK表达,或采用PP2抑制Src激酶活性,均可显著抑制PC3细胞的侵袭性,但同时联合应用抗HSPg0抗体,未有协同作用.小室侵袭实验结果显示,PC3细胞经抗HSPg0抗体作用后,穿膜细胞数为(39.57 4±7.54)个,而对照组和lgG对照组分别为(105.70±12.16)个和(110.60 4±11.61)个,差异均有统计学意义(P<0.001).结论 细胞表面HSP90可经FAK/c-Src信号通路促进体外培养前列腺癌细胞的侵袭,提示其可能是潜在的对肿瘤转移实施防治的一个靶点.

Abstract：

Objective To investigate the expression of heat shock protein 90 (HSP90) on the cell surface of highly invasive human prostate cancer cells PC3 and its possible molecular mechanisms of its effect on cell invasion through analyzing FAK/Src signaling pathway. Methods The expression of cell surface HSP90 on PC3 cells was studied by immunofluorescence staining and surface biotinylation assay respectively. A specific HSP90 antibody was used to inhibit the cell surface HSP90. In vitro cell invasion was assessed by modified Boyden chambers. Phosphorylated FAK on tyr 397, 576, 577 and 925, and phosphorylated c-Src on tyr 416 were examined by Western blot assay. The association between FAK and c-Src was analyzed by immunoprecipitation. The effects of FAK knockdown by siRNA or Src kinases inhibitor PP2, with or without anti-HSP90 antibody, on PC3 cell invasion were also evaluated. Results A pool of HSP90 was detected on the cell surface of PC3 cells. A specific HSP90 antibody significantly retarded tumor cell invasion. Concomitant with this finding, targeting cell surface HSP90 significantly inhibited the phosphorylations of FAK and c-Src, and also the interactions between FAK and c-Src. FAK knockdown or PP2 dramatically suppressed cell invasion, however, anti-HSP90 antibody didn't further inhibit cell invasion. Conclusions Cell surface HSP90 promotes human prostate cancer cell invasion through a FAK/c-Src signaling, with may be a novel therapeutic target against metastatic tumors.     

细胞表面热休克蛋白90在人前列腺癌细胞中的表达及其对侵袭能力的影响

目的 观察细胞表面热休克蛋白90(HsPgo)在高侵袭性人前列腺癌细胞PC3中的表达,及其对细胞侵袭能力的影响,探讨其可能的作用机制.方法 采用免疫荧光染色和膜蛋白生物素标记法,检测HSPgO在PC3细胞表面的表达;采用Boyden小室侵袭实验观察细胞侵袭能力的改变;采用Western blot和免疫共沉淀法,检测局部黏着斑激酶(FAK)、c-Src蛋白磷酸化水平及其两者相互作用的变化;采用RNA干扰技术下调FAK蛋白表达,应用抑制剂PP2抑制Src激酶活性,观察细胞FAK/Src信号通路及其侵袭能力的改变.结果 PC3细胞表面表达HSP00.HSPg0特异性抗体可显著降低PC3细胞体外侵袭能力,且伴有FAK tyr 397、576、577、925及c-Src tyr 416磷酸化水平的显著下降,以及FAK与c-Src蛋白相互结合的明显减弱.经小分子干扰RNA(siRNA)有效干扰FAK表达,或采用PP2抑制Src激酶活性,均可显著抑制PC3细胞的侵袭性,但同时联合应用抗HSPg0抗体,未有协同作用.小室侵袭实验结果显示,PC3细胞经抗HSPg0抗体作用后,穿膜细胞数为(39.57 4±7.54)个,而对照组和lgG对照组分别为(105.70±12.16)个和(110.60 4±11.61)个,差异均有统计学意义(P<0.001).结论 细胞表面HSP90可经FAK/c-Src信号通路促进体外培养前列腺癌细胞的侵袭,提示其可能是潜在的对肿瘤转移实施防治的一个靶点.     

细胞表面热休克蛋白90在人前列腺癌细胞中的表达及其对侵袭能力的影响

目的 观察细胞表面热休克蛋白90(HsPgo)在高侵袭性人前列腺癌细胞PC3中的表达,及其对细胞侵袭能力的影响,探讨其可能的作用机制.方法 采用免疫荧光染色和膜蛋白生物素标记法,检测HSPgO在PC3细胞表面的表达;采用Boyden小室侵袭实验观察细胞侵袭能力的改变;采用Western blot和免疫共沉淀法,检测局部黏着斑激酶(FAK)、c-Src蛋白磷酸化水平及其两者相互作用的变化;采用RNA干扰技术下调FAK蛋白表达,应用抑制剂PP2抑制Src激酶活性,观察细胞FAK/Src信号通路及其侵袭能力的改变.结果 PC3细胞表面表达HSP00.HSPg0特异性抗体可显著降低PC3细胞体外侵袭能力,且伴有FAK tyr 397、576、577、925及c-Src tyr 416磷酸化水平的显著下降,以及FAK与c-Src蛋白相互结合的明显减弱.经小分子干扰RNA(siRNA)有效干扰FAK表达,或采用PP2抑制Src激酶活性,均可显著抑制PC3细胞的侵袭性,但同时联合应用抗HSPg0抗体,未有协同作用.小室侵袭实验结果显示,PC3细胞经抗HSPg0抗体作用后,穿膜细胞数为(39.57 4±7.54)个,而对照组和lgG对照组分别为(105.70±12.16)个和(110.60 4±11.61)个,差异均有统计学意义(P<0.001).结论 细胞表面HSP90可经FAK/c-Src信号通路促进体外培养前列腺癌细胞的侵袭,提示其可能是潜在的对肿瘤转移实施防治的一个靶点.     

HSP90抑制剂在肿瘤临床中的研究进展

0 引言 分子靶向抗肿瘤治疗是目前肿瘤治疗研究领域的热点,并取得了令人瞩目的疗效.最著名的例子是BCR-ABL特异性抑制剂格列卫在慢性髓系白血病中的应用[1].作为靶点的分子通常是与致癌信号通路相关的蛋白激酶,但是研究发现单个蛋白激酶分子的靶向治疗通常只对少数肿瘤细胞有效,而且敏感的肿瘤细胞通常会发展为获得性抵抗.分子靶向治疗的最新进展提示有效的控制肿瘤需要同时抑制多个致癌信号通道[2].HSP90是一类普遍存在于各种细胞的分子伴侣蛋白,在肿瘤细胞中,HSP90通过调节多种癌蛋白的功能,从而参与调节肿瘤细胞的增殖、生存、侵袭、转移和血管生成等多种重要过程.由于HSP90对多种癌蛋白具有调控作用,通过对HSP90的抑制可以实现同时对多种肿瘤信号通路的调控,从而有效控制肿瘤.HSP90抑制剂的开发研究已经成为分子靶向抗肿瘤治疗的一个热点,近年来国外大量研究开发出了多种HSP90抑制剂,本文对HSP90抑制剂在多种肿瘤的临床研究进展讲行综述.     

热休克蛋白HSP90α、HSP70、HSP27在急性白血病中的表达

运用ＲＮＡ分子杂交的方法，观察了热休克蛋白（ｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎ，ＨＳＰ）９０α、７０、２７在２２例白血病病人细胞、正常血细胞及Ｋ５６２红白血病细胞系中的表达。结果表明：１６例白血病病人中，血细胞呈现ＨＳＰ２７高水平表达，较正常血细胞显著增多１３例，其中急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）４例，急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）６例，慢性粒细胞白血病急变期（慢粒急变）１例和骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）２例，ＡＬＬ（５例）与ＡＮＬＬ（７例）白血病细胞ＨＳＰ２７表达水平无明显改变。检测了７例白血病细胞ＨＳＰ７０的表达水平，除１例ＡＬＬ及１例ＭＤＳ明显升高外，其余５例（包括１例ＡＬＬ，３例ＡＮＬＬ和１例慢性急变）显著低于正常血细胞。１７例白血病病人细胞（包括ＡＮＬＬ９例、ＡＬＬ５例、慢粒急变２例和ＭＤＳ１例）ＨＳＰ９０α表达水平均升高，明显高于正常。结果提示；白血病细胞ＨＳＰ９０α表达水平的升高可能与白血病细胞活跃异常增殖有关，而ＨＳＰ２７基因的高表达可能不是某种急性白血病的特殊标志。     

survivin基因在胰腺癌组织中的表达及与HSP27表达的关系

目的:探讨胰腺癌组织中survivin基因的表达及其与热体克蛋白(HSP27)表达的关系。方法:用RT-PCR法检测62例胰腺癌、12例慢性胰腺炎及10例正常胰腺组织中survivinmRNA的表达,免疫组织化学法检测胰腺癌组织中HSP27的表达。结果:survivin在胰腺癌中的表达率为74.2%,而在慢性胰腺炎及正常胰腺组织中未见表达;survivin表达与胰腺癌的肿块大小、分化程度、临床分期及淋巴结转移无相关性;survivin与HSP27的表达有相关性。结论:survivin在胰腺癌中过度表达,提示其在胰腺癌的发生和发展中起重要作用;survivin和HSP27通过抗凋亡机制协同参与胰腺癌的发生。     

FK228阻断细胞生存信号通路诱导前列腺癌细胞凋亡

目的：研究组蛋白去乙酰化酶（HDAC）抑制剂FK228诱导前列腺癌细胞系DU145凋亡的作用机制。方法：MTT比色法测定FK228抑制DUl45细胞增殖及其对细胞的杀伤效应；瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态的变化；流式细胞术分析细胞周期的改变；蛋白印迹实验检测细胞内蛋白表达水平的变化。结果：FK228明显抑制DU145细胞体外增殖，并介导细胞死亡；12．5ng／ml FK228作用细胞48h后，细胞存活率降至63．7％；伴有细胞形态改变及细胞周期阻滞于G0／G1期；细胞内多种重要的激酶蛋白，包括EGFR、Her2、Raf-1、Src、Cdk4、Akt及凋亡抑制蛋白Survivin均发生了不同程度的降解，细胞内两条重要的生存信号通路Raf-MEK—ERK及P13K／Akt被阻断，细胞发生凋亡。结论：FK228可以通过清除细胞内重要信号蛋白、阻断细胞生存信号通路来诱导DU145细胞发生凋亡。     

全反式维甲酸诱导前列腺癌DU-145细胞凋亡的研究

目的 :应用全反式维甲酸作用于前列腺癌细胞系DU 145细胞 ,观察维甲酸对前列腺癌细胞生长的影响。方法 :应用全反式维甲酸 (10 -5mol L)分别作用于前列腺癌DU 145细胞 36h及 72h ,分别应用光学显微镜、电子显微镜观察细胞形态及超微结构的改变 ,并用流式细胞仪检测细胞周期的改变。结果 :全反式维甲酸作用前列腺癌DU 145细胞 36h后 ,细胞生长开始减缓 ,肿瘤细胞超微结构出现细胞核固缩、染色质凝集于核膜周边等细胞凋亡早期改变。作用 72h后 ,流式细胞仪检测肿瘤细胞出现典型的亚二倍体“凋亡小峰” ,部分肿瘤细胞出现凋亡。结论 :全反式维甲酸可以诱导前列腺癌细胞产生凋亡 ,凋亡的产生与药物的作用时间密切相关     

维甲酸对小鼠前胃癌细胞恶性表型及抑癌基因表达的调控作用

采用全反式维甲酸（ＲＡ）对小鼠前胃癌细胞系进行了体外加药处理及将处理的细胞接种于近交系６１５小鼠皮下的实验观察。结果表明：经维甲酸处理的瘤细胞基本丧失在软琼脂中生长形成集落的能力，将该处理细胞接种于小鼠皮下，可见其自发性转移能力明显降低。ＲＮＡ狭线杂交显示经ＲＡ处理的瘤细胞其抑癌基因ｐ５３和转移抑制基因ｎｍ２３的表达明显增强，提示ＲＡ可能通过调控抑癌基因的表达，降低肿瘤细胞的转移能力。     

Effect of Root Extracts of Medicinal Herb Glycyrrhiza glabra on HSP90 Gene Expression and Apoptosis in the HT-29 Colon Cancer Cell Line

Colorectal cancer is one of the most common lethal cancer types worldwide. In recent years, widespread and large-scale studies have been done on medicinal plants for anti-cancer effects, including Glycyrrhiza glabra. The aim of this study was to evaluate the effects of an ethanol extract Glycyrrhiza glabra on the expression of HSP90, growth and apoptosis in the HT-29 colon cancer cell line. HT-29 cells were treated with different concentrations of extract (50,100,150, and 200 μg/ml). For evaluation of cell proliferation and apoptosis, we used MTT assay and flow cytometry technique, respectively. RT-PCR was also carried out to evaluate the expression levels of HSP90 genes. Results showed that Glycyrrhiza glabra inhibited proliferation of the HT-29 cell line at a concentration of 200 μg/ml and this was confirmed by the highest rate of cell death as measured by trypan blue and MTT assays. RT-PCR results showed down-regulation of HSP90 gene expression which implied an ability of Glycyrrhiza glabra to induce apoptosis in HT-29 cells and confirmed its anticancer property. Further studies are required to evaluate effects of the extract on other genes and also it is necessary to make an extensive in vivo biological evaluation and subsequently proceed with clinical evaluations.     

Up-regulating of RASD1 and Apoptosis of DU-145 Human Prostate Cancer Cells Induced by Formononetin in Vitro

Prostate cancer is one of the most prevalent malignant cancers in men. The isoflavone formononetin is a mainactive component of red clover plants. In the present study, we assessed the effect of formononetin on humanprostate cancer DU-145 cells in vitro, and elucidated posssible mechanisms. DU-145 cells were treated withdifferent concentrations of formononetin and cell proliferation was assessed by MTT assay, cell apoptosis byHoechst 33258 and flow cytometry, and protein levels of RASD1, Bcl-2 and Bax by Western blotting. The resultsshowed that formononetin inhibited the proliferation of DU-145 cells in a dose-dependent manner. DU-145 cellstreated with different concentrations of formononetin displayed obvious morphological changes of apoptosisunder fluorescence microscopy. In addition, formononetin increased the proportion of early apoptotic DU-145cells, down-regulated the protein levels of Bcl-2 and up-regulated those of RASD1 and Bax. The level of RASD1reached its maximum at 48h post-treatment, and rapidly decreased thereafter. Together, we present evidence thatformononetin triggered cell apoptosis through the mitochondrial apoptotic pathway by up-regulating RASD1.     

脱落酸诱导Tca8113细胞株的动物实验研究

目的: 检测不同剂量的植物激素脱落酸对人舌鳞癌Tca8113细胞株细胞凋亡的体内诱导。 方法: 通过人舌鳞癌Tca8113细胞株建立裸鼠移植瘤并随机分为对照组和实验组,实验组(0.5mmol/L和1mmol/L)局部肿瘤内直接注射脱落酸。检测其肿瘤生长抑制率,常规HE组织学观察和Caspase-3 mRNA原位杂交检测。 结果: 实验组移植瘤组织中癌细胞密度减少,细胞皱缩,胞浆红染,癌组织分化渐成熟,出现角化细胞,有角化珠形成趋势;间质结缔组织增多,淋巴细胞浸润。对照组瘤周组织中,有大量新生血管形成。0.5mmol/L和1mmol/L脱落酸对裸鼠移植瘤的抑制率分别为26.7%、36.1%,两者间存在显著差异(P<0.01)。实验组脱落酸作用后的瘤重与对照组间存在显著差异(P<0.001)。0.5mmol/L和1mmol/L脱落酸实验组经原位杂交检测Caspase-3 mRNA阳性表达位于胞浆呈棕黄色,部分细胞胞核也呈棕黄色,其阳性表达率分别为0.27±0.02、0.22±0.02,两者间有统计学意义(P<0.001);而对照组移植瘤的胞浆基本上不着色。实验组间与对照组间Caspase-3 mRNA的表达量也存在着统计学意义(P<0.01)。裸鼠的全身重要脏器(如肺、肾等)无器质性改变。 结论: 脱落酸不仅能抑制人舌癌Tca8113移植瘤的生长,而且还对移植瘤有分化诱导作用,导致Caspase-3的活性增加,促进细胞发生凋亡,为以后的临床应用研究提供了实验数据。     

逆转录病毒介导的凋亡素基因诱导人结肠癌细胞Lovo的凋亡

目的 构建强力霉素诱导型重组凋亡素基因逆转录病毒载体,观察强力霉素诱导凋亡素基因表达的情况及对人结肠癌细胞的影响。方法 构建重组逆转录病毒表达载体pRevTRE-VP3。调节载体pRevTet-on和表达载体pRevTRE-VP3分别转染PT67包装细胞后,收集包装好的病毒依次感染人结肠癌细胞系Lovo,用抗生素筛选出抗性细胞株Lovo/on-vp3。通过向培养液中加入或去除强力霉素调控凋亡素基因在Lovo/on-vp3细胞中的表达,Annexin V-FITC/PI双染色后,以流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 经酶切和测序鉴定,重组逆转录病毒载体pRevTRE-VP3构建成功,并添加了kozak序列。筛选出可经四环素调控凋亡素基因表达的人结肠癌细胞株Lovo/on-vp3,经PCR和RT-PCR证实凋亡素基因已整合入细胞DNA,并得到了表达;Lovo/on-vp3细胞在1mg/L强力霉素培养环境中培养24h、48h和72h凋亡率明显高于无强力霉素环境中相同时间点的细胞凋亡率,两者差异有显著性。结论 凋亡素基因经RevTet系统导入人结肠癌细胞Lovo后,在强力霉素诱导下可表达凋亡素蛋白并诱导Lovo细胞凋亡。并随诱导时间延长凋亡素蛋白表达增加、细胞凋亡增多。     

Constitutively-active androgen receptor variants function independently of the HSP90 chaperone but do not confer resistance to HSP90 inhibitors

The development of lethal, castration resistant prostate cancer is associated with adaptive changes to the androgen receptor (AR), including the emergence of mutant receptors and truncated, constitutively active AR variants. AR relies on the molecular chaperone HSP90 for its function in both normal and malignant prostate cells, but the requirement for HSP90 in environments with aberrant AR expression is largely unknown. Here, we investigated the efficacy of three HSP90 inhibitors, 17-AAG, HSP990 and AUY922, against clinically-relevant AR missense mutants and truncated variants. HSP90 inhibition effectively suppressed the signaling of wild-type AR and all AR missense mutants tested. By contrast, two truncated AR variants, AR-V7 and ARv567es, exhibited marked resistance to HSP90 inhibitors. Supporting this observation, nuclear localization of the truncated AR variants was not affected by HSP90 inhibition and AR variant:HSP90 complexes could not be detected in prostate cancer cells. Interestingly, HSP90 inhibition resulted in accumulation of AR-V7 and ARv567es in both cell lines and human tumor explants. Despite the apparent independence of AR variants from HSP90 and their treatment-associated induction, the growth of cell lines with endogenous or enforced expression of AR-V7 or ARv567es remained highly sensitive to AUY922. This study demonstrates that functional AR variant signaling does not confer resistance to HSP90 inhibition, yields insight into the interaction between AR and HSP90 and provides further impetus for the clinical application of HSP90 inhibitors in advanced prostate cancer.     

甲基莲心碱增强环磷酰胺诱导小鼠Lewis肺癌细胞凋亡的作用

目的评价甲基莲心碱(Nef)对环磷酰胺(CTX)诱导小鼠Lewis肺癌细胞凋亡作用的影响。方法Lewis肺癌移植瘤小鼠40只,雄性,体重18～22g,随机分成CTX+Nef、CTX、Nef、NS4个组,每组10只。通过检测瘤重抑制率及瘤细胞凋亡率,观察Nef联合CTX对小鼠Lewis肺癌的疗效和诱导癌细胞凋亡的影响。结果CTX+Nef、CTX组的瘤重抑制率分别为80.08%、58.95%,明显高于Nef组(6.78%),P<0.01;而CTX+Nef组较CTX组也有增高(P<0.05);流式细胞术检测CTX+Nef、CTX组的癌细胞凋亡率分别为53.50%、25.92%,明显高于Nef、NS组(7.09%,5.63%),P<0.01;CTX+Nef组也高于CTX组(P<0.05);TUNEL法检测CTX+Nef、CTX组的癌细胞凋亡指数分别为(10.24%±11.08%),(5.36%±6.24%),较Nef、NS组明显增加(1.45%±1.98%,1.03%±1.65%),P<0.05;CTX+Nef组的凋亡指数较CTX组也有明显增加(P<0.05)。结论甲基莲心碱能增强环磷酰胺诱导的小鼠Lewis肺癌细胞凋亡作用,且两者具有协同效应。     

反义ras基因增强足叶乙甙对白血病K562细胞的诱导凋亡作用

目的 研究ras p21蛋白在bcr-abl p210蛋白抗凋亡信号传导通路中的作用。方法 应用逆转录病毒载体pLXSN将反义N－ras1 cDNA转导到K562细胞系中后，通过足叶乙甙对细胞进行诱导凋亡。结果 转导反义N－ras1 cDNA的K562细胞内N－ras p21表达下降。反义N－ras转民细胞较对照细胞K562易发生凋亡，对药物的敏感性显著增高。结论 ras p21蛋白是bcr-abl p210蛋白介导抗凋亡信号的重要的下游蛋白，阻断该蛋白的功能有可能成为治疗人类慢性髓性白血病的1个选择点。     

康莱特注射液诱导人肝癌细胞凋亡的研究

目的：探讨康莱特注射液诱导人肝癌细胞凋亡的作用。为康莱特注射液治疗肝癌提供理论依据。方法：采用免疫组织化学及透射电镜技术观察康莱特注射液对肝癌细胞凋亡的影响。结果：肝癌细胞经康莱特注射液培养24h后,其凋亡的百分率明显高于对照组和空白组,有显著性差异（P＜0．05）,且组织细胞凋亡在50％以上者占44．12％（15／34）,而对照组及空白组无1例凋亡超过50％;电镜相可见较为典型的细胞凋亡的形态学变化,细胞核固缩,染色质凝集,呈新月型紧贴于核膜周边,核碎裂,凋亡小体形成等。结论：康莱特注射液能诱导肝癌细胞发生凋亡;诱导细胞凋亡可是康莱特注射液治疗作用的重要机制。