酶联免疫吸附法(ELISA)在Ⅲ型脊髓灰质炎病毒McAb的筛选以及抗原分析中的应用

用Ⅱ型脊髓灰质炎(Polio)有毒株Saukett及疫苗株Sabin Leon 12a_1b分别免疫BALB/C小鼠。取脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞作Ⅲ次融合。第一次用Saukett株,共获120个杂交瘤,用间接免疫荧光法(IF)筛出9个阳性瘤,阳性率7.5％,其中1个还分泌中和抗体(NT)(阳性率11％);第二次用Leon 12a_1b疫苗株,共获60个杂交瘤,用ELISA法选出20个阳性瘤,阳性率33.3％,其中3个还可分泌中和抗体(阳性率15％)。还用IF法从这60个杂交瘤中选出10个阳性瘤(阳性率16.6％);第三次再用Saukett株     

应用单克隆抗体对脊髓灰质炎病毒进行型内分析的报告

本文报告以脊髓灰质炎（以下简称脊灰）病毒SabinⅠ、Ⅱ、Ⅲ型参考株、已定型的阳性标本与相同型别不同毒株特异的单克隆抗体进行微量中和试验。结果表明，我省Ⅰ型分离株中90％为野毒株，Ⅱ型分离株60％为疫苗相关株，40％为野毒株，Ⅱ到分离株50％为疫苗相关株，50％为野毒株，说明我省近年引起脊灰暴发流行仍以Ⅰ型野毒株为主，但Ⅱ、Ⅲ型疫苗株引起的病例也在逐渐增多。     

斑点ELISA筛选单克隆抗体的研究

在抗日本血吸虫单克隆抗体的制备过程中，探索了用斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）作为筛选方法，成功地获得了一株针对血吸虫循环抗原的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）。初步结果表明：该株单抗３Ｃ２在ＰＶＦ－环卵沉淀试验中呈阳性；其检测４０例急性血吸虫病患者血清中循环抗原均呈阳性反应，２０例健康人对照血清无假阳性反应。Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ用作筛选具有操作简单、快速，无需特殊仪器等优点。     

ABC—ELISA在抗胃癌单克隆抗体筛选中的应用

我们利用ABC—ELISA方法检测抗胃癌单克隆抗体,并与常规ELISA方法进行比较。ABC—ELISA方法的敏感性比常规ELISA方法高110～100倍,但非特异性并没有增加。重复5次检测杂交瘤上清液的效价,结果基本一致。本文所有结果表明,ABC—ELISA方法用于筛选和检测抗胃癌单克隆抗体不但灵敏度高,而且特异性和重复性好,是值得作为筛选和检测单克隆抗体的新方法而进行推广。     

应用单克隆抗体对流行性出血热病毒抗原组份的分析

应用流行性出血热病毒(EHFV)单克隆抗体(McAb)对不同来源的EHFV抗原组份进行了研究,结果McAb A_(25-1)和A_(35)可与7株EHFV的49.6ku(50kd)多肽发生反应,McAb5H_5仅识别6株EHFV的49.6ku多肽,提示EHFV这一多肽上可能具有属特异性抗原决定簇。     

应用单克隆抗体Dot—ELISA检测血吸虫病循环抗原…

将抗血吸虫多肽表位的单克隆抗体ＳＪＡ１１１与辣根过氧化物酶结合，用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ直接法检４６２例确诊的血吸虫病人循环抗原，阳性率为７８．５７％（３６３／４６２）；３１例肝吸虫病人，２３例肺吸虫病人和１１８例正常人中，仅１例肺吸虫病人出现交叉反应。循环抗原的阳性检出率与每克粪便虫卵数（ＥＰＧ）呈正相关（ｒ＝０．９７５２，Ｐ〈０．０２５）。血吸虫病人经吡喹酮治疗后６月，循环抗原阴转率为７５．８６％     

用McAb进行Ⅰ型脊髓灰质炎病毒抗原分析

应用I型Sabin毒株(Lsc,2ab)和I型标准强毒株(Brunhilde)分别免疫BALB/C小鼠,获得32个抗I型Polio的McAb。用4株Polio标准毒株(Brunhilde、Mahoney、Sabin-1和中I_9对上述McAb作交叉中和试验,结果可将其分为六个类型:A型,仅对Sabin-1株有保护作用;B型,仅对Brunhilde株有保护作用;C型,对Mahoney、Brunhilde和中I_9都有保护作用;D型,对Sabin-1、中I_9和Mahoney有保护作用;E型,对Sabin-1和Ma-     

双单克隆抗体ELISA间接夹心法检测HFRS病毒抗原的实验研究

间接荧光抗体技术(IFAT)已广泛用于肾综合征出血热(HFRS)病毒抗原的检测,其不足之处是需用荧光显微镜,有一定主观性及不能检测可溶性抗原。本文建立了以同样的抗HFRS病毒单克隆抗体(McAb)作为包被和第二抗体,以酶标葡萄球菌A蛋白(SpA)作指示抗体的双McAb ELISA间接夹心法,初步用于感染细胞培养上清及组织标本中HFRS病毒抗原的检测,获得较满意结果。     

改良单克隆抗体Dot—ELISA检测血吸虫循环抗原

用抗趋阴极循环抗原单克隆抗体建立的Dot-ELISA检测血吸虫循环抗原显示有高度的敏感性和特异性,极少交叉反应。68份急性血吸虫病患者血清的阳性检出率为98.5%,216份慢性血吸虫病血清的阳性检出率为83.3%。225份正常人血清仅1份阳性。48例血吸虫病治愈者的阴转率为97.9%。实验性血吸虫病家兔治疗后8周,16只治愈的家兔中12只阴转。     

ELISA 叠加试验检测单克隆抗体的抗原结合位点

在研究抗原抗体反应过程中,单克隆抗体(McAb)具有高度特异性,能识别抗原分子上的不同抗原应点。检测McAb 的决定簇特异性,过去用两种方法,—是化学或酶学的检测,一是竞争性抑制试验,这两种方法操作复杂、费时。1983年Friguet 等报告了用酶联免疫吸附检测(ELISA)叠加试验鉴定     

应用红细胞花环形成试验筛选肿瘤膜抗原单克隆抗体

0引言红细胞花环形成试验(rosette assay)中被检细胞处于生长状态,表面抗原表达密度较高,并保持在一种天然分子的构象,因此与免疫组化方法相比,敏感性高,特异性好.在用肿瘤细胞或新鲜组织为免疫原制备和筛选mAb中有很大的应用价值[1].我们对花环形成试验在肿瘤膜抗原mAb制备上的应用进行了探讨,并与间接免疫荧光染色和流式细胞术分析的筛选方法进行了比较.     

单克隆抗体夹心ELISA定量检测日本血吸虫循环抗原

目的反映日本血吸虫病活动性感染程度,探讨建立定量测定循环抗原的方法。方法筛选和制备单克隆抗体,将其进行优化组合,建立双抗体夹心ELISA,计算标准曲线,测试检测能力,检测样本。结果获6个抗日本血吸虫单克隆抗体,经优化组合试验,选择其中3个抗日本血吸虫虫卵TCA可溶性抗原和成虫TCA可溶性抗原进行搭配,用于检测日本血吸虫病患者血清中循环抗原效果较理想。检测慢性血吸虫病118例,阳性61例,阳性率51．7％;急性患者30例,全部阳性;正常人187例,5例阳性,特异性97．3％。单盲法检测一批血清,结果也较满意。法论定量检测日本血吸虫病患者血清中循环抗原,对提示活动性感染的程度和疫苗保护作用的评估具有一定的应用价值。     

抗脊髓灰质炎Ⅰ型病毒Brunhilde株的单克隆抗体

近两年来,应用杂交瘤技术制备抗脊髓灰质炎(Polio)病毒的单克隆抗体(McAb),国内外均有报道。我们继1981年建立7株分泌抗Polio Ⅱ型病毒McAb的杂交瘤细胞系后,又进行了抗PolioⅠ型病毒McAb的研究,获得阳性杂交癌细胞19株。 材料与方法 (一)病毒株 PolioⅠ型的Brunhilde、Mahoney、LSc2ab和中Ⅰ_0株,Ⅱ型MEF_1株和Ⅲ型Saukett株,均为本所保存毒株。     

ELISA法在检测流行性出血热病毒抗原中的应用

采用ELISA和IFA法检测细胞培养中EHFV抗原,检出时间分别在病毒感染细胞后第4d 和第6d,对 EHFV 抗原的定量检测提示病毒释放的高峰期在其感染细胞后10～12d,患者血浆标本 EHFV 抗原的检出率为26.6%。以上结果指出 ELISA 法用于 EHFV 抗原的检测比 IFA 法优越,适用于实验室对 EHFV 繁殖的监测,而检测 EHFV 抗原用于临床诊断则敏感性太低。     

抗脊髓灰质炎病毒单克隆抗体测定糖丸疫苗中病毒含量的研究

常规免疫血清系多克隆抗体。型别之间常有交叉中和反应。采用抗脊髓灰质炎(Polio)病毒免疫血清测定三价糖丸疫苗中的病毒含量时,由于存在着型间交叉中和反应,严重地干扰了Ⅰ,Ⅲ型病毒的准确测定。本实验室采用单克隆抗体来测定Polio三价糖丸疫苗中的病毒含量,结果证明它显著优于常规的免疫血清。 实验用抗Polio病毒单克隆抗体(McAb)系本所中心实验室制备。中和病毒时使用的最终效价为1:80。常规免疫血清(SAb)系本所肠道病毒研究室用绵羊制备。中和病毒时使用的最终效价为Ⅰ型     

用ELISA法筛选针对细胞表面抗原的单克隆抗体

本文按照Kenett等的方法,经过修改,采用国产40孔聚苯乙烯板,预先经过超声洗涤处理,选择本实验室最佳工作条件,以血小板作为抗原细胞。细胞悬液加入聚苯乙烯板孔内,离心后经0.25%戊二醛固定,包被     

单克隆抗体对柯萨奇病毒A24型抗原分析

1988年北京急性出血性结膜炎(AHC)流行,用从病人眼结膜拭子标本分离出的一株柯萨奇病毒A24型变异株(CA24V),制备了单克隆抗体.结果获得5个细胞株分泌的抗体具有中和作用,但免疫荧光试验阴性,另8个细胞株分泌的抗体免疫荧光试验阳性,但对病毒无中和作用.使用这些单克隆抗体对具有代表性的10株病毒作了抗原分析.