miR-214-5p靶向PAK4对缺血再灌注大鼠的心肌损伤和免疫反应的调节作用

目的:探讨微小RNA-214-5p(miR-214-5p)靶向p21活化蛋白激酶4(PAK4)对缺血再灌注(I/R)大鼠的心肌损伤和免疫反应的作用。方法:将健康雄性SD大鼠随机分为假手术(sham)组、I/R组、Ad-Scramble组和Ad-miR-214组(n=9)。在大鼠左心室前壁6个不同的位点注入腺病毒;4 d后,缝合左前部下行冠状动脉构建I/R模型。RT-qPCR检测miR-214的表达水平,HE染色观察心肌损伤,ELISA检测心肌损伤标志物(CK-MB、Mb和cTnI)和炎症因子(IL-6、IL-1β和TNF-α)的水平,流式细胞术检测心肌细胞凋亡率,试剂盒检测MDA含量和SOD活性,基因软件预测靶基因并通过双萤光素酶报告验证,Western blot检测caspase-3、caspase-9、Bcl-2、Bax、PAK4、p-Akt和p-mTOR表达水平。结果:miR-214在I/R大鼠心肌细胞中低表达(P<0.01);miR-214-5p过表达减轻I/R大鼠心肌损伤程度,下调CK-MB、Mb和cTnI表达,降低心肌细胞凋亡率,上调Bcl-2表达,下调Bax、caspase-3和caspase-9表达,提高SOD活性,降低MDA、IL-6、IL-1β和TNF-α的含量(P<0.01);miR-214-5p与PAK4在3’-UTR存在结合位点,miR-214-5p过表达上调PAK4、p-Akt和p-mTOR表达(P<0.01)。结论:miR-214-5p过表达靶向PAK4减轻I/R大鼠的心肌损伤,并抑制心肌细胞凋亡、氧化应激反应和炎症反应,同时激活PI3K/Akt/mTOR通路。     

羽扇豆醇缓解氧化应激对心肌缺血再灌注大鼠心脏功能和心肌组织的保护作用

目的:探索羽扇豆醇对心肌缺血再灌注损伤(MI/RI)大鼠心脏功能、心肌损伤以及氧化应激的影响。方法:将SD雄性大鼠随机分为健康对照组(Ctrl)、模型组(I/R)、阳性对照组(Diltia 5 mg/kg)、羽扇豆醇组(Lupeol分别为10、20、50 mg/kg),药物连续灌胃1周后,健康对照组除外,余下各组均采取结扎左冠状动脉前降支方法制备大鼠MI/RI模型,观察各组大鼠心脏功能,HE染色观察心肌细胞结构变化,ELISA法检测心肌损伤标志物以及氧化应激相关因子水平,RT-PCR检测心肌组织中的Ki67、Survivin表达量,Western blot检测氧化应激相关蛋白水平。结果:与I/R组相比,Ctrl、Diltia、20 mg/kg Lupeol组、50 mg/kg Lupeol组的HR、LVSP、LVEF、FS、LVWT、心肌组织Ki67与Survivin mRNA含量、SOD与LDH活性、心肌组织Nrf1、PGC-1α及TFAM水平均增加(P0.05),CK-Mb、Mb、cTnI、心肌组织Caspase-3阳性率、TNF-α、IL-1β、iNOS、IL-6及MDA含量降低(P0.05)。HE染色结果显示I/R组的心肌纤维结构紊乱,损伤程度严重,20 mg/kg Lupeol组的心肌组织损伤较I/R模型组减轻。结论:羽扇豆醇降低MI/RI大鼠氧化应激及炎症反应,上调心肌组织Ki67、Survivin表达,降低Caspase-3阳性率,提高细胞能量代谢,对心脏功能及心肌组织有保护作用。     

中脑星形胶质细胞源性神经营养因子蛋白对脓毒性心肌病大鼠的心脏保护作用机制

目的探究中脑星形胶质细胞源性神经营养因子(MANF)蛋白对脓毒性心肌病(SIC)大鼠的心脏保护作用机制。方法 45只SD大鼠随机分为对照组、模型组、MANF组,每组15只,通过盲肠结扎穿刺制备脓毒症心肌病大鼠模型,对照组盲肠不结扎不穿孔,MANF组大鼠从造模开始给予200μg/kg外源MANF蛋白腹腔注射,12 h重复给药,24 h时观察大鼠一般情况,采血,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠血清中心肌标志物(CK-MB、cTnI)水平及炎性因子(TNF-α、IL-6)水平,采血后处死大鼠取其心肌组织伊红-苏木素(HE)染色,观察各组大鼠心肌病理学改变,采用蛋白质印迹法(Western blot)检测心肌细胞中内质网应激(ERS)相关蛋白葡萄糖调节蛋白94(GRP94)、CAAT区/增强子结合蛋白环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(Caspase-12)蛋白表达。结果 HE染色显示,MANF组病理损伤较模型组明显减轻,心肌细胞形态结构趋于正常,心肌细胞轻度肿胀,横纹清楚,间质充血水肿不明显,少量炎性细胞浸润。模型组大鼠血清中TNF-α、IL-6、CK-MB、cTnI及心肌细胞中GRP94、CHOP、caspase-12蛋白水平显著高于对照组(P0.05);MANF组大鼠血清中TNF-α、IL-6、CK-MB、cTnI及心肌细胞中GRP94、CHOP、caspase-12蛋白水平显著低于模型组(P0.05);MANF组大鼠血清中TNF-α、IL-6、CK-MB、cTnI及心肌细胞中GRP94、CHOP、caspase-12蛋白水平较对照组差异有统计学意义(P0.05)。结论 MANF蛋白可能通过抑制ERS激活的GRP94、CHOP、caspase-12表达而减少心肌细胞凋亡,减轻心肌损伤,从而起到保护心脏的作用,这可能为脓毒性心肌病的新治疗靶点。     

新生儿窒息血清肌酸激酶、肌酸激酶同工酶、肌钙蛋白I和肌红蛋白检测的临床意义

目的 探讨新生儿窒息后肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白I( cTnI)和肌红蛋白在心肌损伤早期诊断的临床意义.方法 采用免疫化学发光法和酶动力学法来对60例窒息新生儿及30例健康足月新生儿进行CK、CK-MB、cTnI和Mb检测.结果 窒息新生儿组CK、CK-MB、cTnI和Mb值与健康新生儿组比较均显著升高(P＜0.01),且随窒息程度加重而升高.结论 窒息对新生儿心肌产生损伤,CK、CK-MB、cTnI和Mb能较好地反映心肌损害程度.     

SIRT1激活ERK1/2通路抑制大鼠心肌缺血再灌注时内质网应激相关蛋白的表达

目的 研究大鼠心肌缺血再灌注时沉默信息调节因子1(SIRT1)对心肌内质网应激相关凋亡的影响及其与ERK1/2信号通路的关系.方法 将大鼠随机分为6组:假手术组、缺血再灌注组、白藜芦醇+缺血再灌注组、白藜芦醇+ EX527+缺血再灌注组、白藜芦醇+PD98059+缺血再灌注组、PD98059+缺血再灌注组,每组12只.结扎大鼠冠状动脉左前降支建立大鼠心肌I/R损伤模型.TUNEL法检测心肌细胞凋亡;比色法检测LDH、CK-MB活性.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测心肌GRP78、caspase-12和CHOP mRNA的表达;Western印迹检测SIRT1、caspase-12、CHOP、磷酸化ERK1/2和总ERK1/2蛋白的表达.结果 Res+ I/R组与I/R组相比,心肌凋亡指数降低(P＜0.05),血清LDH及CK-MB活性降低,内质网应激相关凋亡的指标GRP78、caspase-12及CHOP的蛋白表达量和mRNA均降低(P＜0.05);给予SIRT1抑制剂后与Res+ I/R组相比,以上指标升高;Res+ I/R组与I/R组相比,SIRT1及磷酸化ERK1/2蛋白的表达量均增加(P＜0.05);而Res+ EX+ I/R组与Res+ I/R组相比,SIRT1、磷酸化ERK1/2蛋白的表达量又降低(P＜0.05).结论 SIRT1能够抑制大鼠在体缺血再灌注心肌的内质网应激凋亡相关蛋白表达,发挥保护心肌的作用,其机制可能与ERK1/2通路激活有关.     

柚皮素减轻重症急性胰腺炎小鼠心肌损伤

目的探讨小鼠重症急性胰腺炎(SAP)相关性心肌损害的发生机制和柚皮素的保护作用。方法将小鼠随机分为:对照组(control组)、模型组(SAP组)和柚皮素干预组(Nar组),每组12只。应用L-精氨酸(8%,4 mg/kg,p H=7. 0,间隔1h腹腔注射2次)制备小鼠SAP模型,Nar(200 mg/kg)溶于0. 5%CMC-Na中制备混悬液,在首次注射L-精氨酸后0、24和48 h腹腔注射。试剂盒检测血浆c Tn I、CK-MB及LDH浓度。实时荧光定量PCR和Western blot检测心脏组织NLRP3、caspase-1、ASC、IL-1βmRNA及蛋白表达。结果与对照组比较,SAP组小鼠胰腺组织水肿、腺泡细胞坏死、大量炎性反应细胞浸润。心肌细胞肿胀、部分细胞崩解、心肌纤维结构消失,并有较多炎性反应细胞浸润。血浆CK-MB、LDH及c Tn I水平明显升高(P0. 05),心肌NLRP3、caspase-1、ASC及IL-1βmRNA和蛋白表达显著增高(P0. 05)。柚皮素干预可以降低SAP小鼠血浆淀粉酶和脂肪酶水平、减轻胰腺组织损伤和心肌组织损伤,降低血浆CK-MB、LDH及CTn I水平(P0. 01),下调心肌组织NLRP3、caspase-1、ASC及IL-1βmRNA (P0. 01)和蛋白表达(P0. 05)。结论柚皮素可能通过抑制心脏中NLRP3炎性小体激活保护SAP相关的心肌损伤。     

miR-145介导Notch2/Jagged-2信号通路改善心肌缺血-再灌注大鼠心肌损伤

目的 探讨miR-145对心肌缺血再灌注(I/R)大鼠心肌损伤的保护作用及可能的机制.方法 按随机数字表法将30只SD大鼠分为假手术组(Sham)、模型组(I/R)和miR-145 mimic组(miR-145);HE染色检测各组大鼠心肌组织病理变化;TUNEL染色检测各组大鼠心肌细胞凋亡情况;ELISA试剂盒检测大鼠肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)、血清乳酸脱氢酶(LDH)、白介素-6(IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;qPCR检测各组大鼠心肌miR-145、Notch2及Jagged-2 mRNA的表达;Western blot检测大鼠心肌中Notch2及Jagged-2蛋白表达.结果 miR-145可减轻大鼠心肌病理损伤,降低心肌细胞凋亡,使大鼠体内CK-MB、cTnT及LDH水平显著降低,抑制炎症反应,降低IL-6、IL-1β及TNF-α水平,抑制Notch2及Jagged-2 mRNA及蛋白表达.结论 miR-145对I/R大鼠心肌组织损伤有一定的改善作用,可能是通过抑制Notch2/Jagged-2信号通路活性实现的.     

冬凌草甲素对大鼠糖尿病心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的以糖尿病诱导大鼠心肌缺血再灌注(ischemia reperfusion,I/R)损伤模型为研究对象,探讨冬凌草甲素(oridonin,Ori)对心肌I/R模型大鼠心肌病理损伤、抗炎等方面的治疗作用及其可能机制。方法将大鼠随机分为Ctrl组、I/R组(模型组)、I/R+Ori(5 mg)组、I/R+Ori(10 mg)组和I/R+Ori (20 mg)组,前2组灌胃给予生理盐水,后3组灌胃给予冬凌草甲素溶液;检测大鼠平均动脉压(mean ventricular systolic pressure,MAP)、左室收缩压(left ventricular systolic pressure,LVSP)、心率(heart rate,HR);HE染色和TUNEL染色检测心肌损伤和细胞凋亡情况;ELISA检测大鼠血清中心损标记物肌红蛋白(myoglobin,Mb)、肌钙蛋白-Ⅰ(troponin-Ⅰ,cTnⅠ)和肌酸激酶同工酶(creatine kinase-MB,CK-MB)表达水平,氧化应激因子谷胱甘肽(glutathione,GSH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(MDA)的含量,以及心肌炎标记分子白介素-1β(inerleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)的含量;免疫组织化学检测心肌组织中白介素-6(inerleukin-6,IL-6)的表达水平;蛋白印迹检测心肌组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、磷酸化核转录因子p65(p-NF-κB p65)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)蛋白表达情况。结果冬凌草甲素能上调模型大鼠MAP、HR和LVSP(P0.01);减少心肌组织病理损伤(P0.01);抑制CK-MB、cTnⅠ和Mb表达(P0.01);上调SOD、GSH活性,下调MDA含量(P0.01);减少IL-6、TNF-α和IL-1β表达水平(P0.01);且抑制TGF-β1、P-NF-κB和TNF-α蛋白表达(P0.01)。结论冬凌草甲素能改善糖尿病心肌缺血再灌注损伤模型大鼠的心脏功能、减少心肌损伤和细胞凋亡、降低氧化应激和炎症分子表达,其机制可能与抑制NF-κB信号通路活化有关。     

肌酸激酶同功酶肌钙蛋白Ⅰ肌红蛋白的变化

目的射频消融术(RFCA)可造成微小心肌损伤,本文旨在通过对血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌红蛋白(Mb)的检测,进一步探讨其对RFCA所致心肌损伤的诊断价值.方法选择30例室上性心动过速患者,分别于RFCA前、电生理检查后、术后即刻、术后1天、2天采外周静脉血,采用美国德普公司自动免疫化学发光分析仪分别测定血清CK-MB、 cTnI、Mb.结果 CK-MB术后1天较术前增高(P<0.01);cTnI与术前相比术后1天、2天明显增高(P<0.05);与术前相比术后即刻Mb明显增高(P<0.01).结论 RFCA所造成心肌损伤属微小心肌损伤,可使血清心肌损害标志物有不同程度的升高,CK-MB 、cTnI、Mb可用于RFCA对心肌损伤的监测.     

依达拉奉对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨依达拉奉(ED)预先给药对大鼠离体心肌缺血再灌注(I/R)损伤的作用及其机制。方法:制作Langendorff主动脉逆行灌注心脏I/R模型。24只雄性大鼠随机分为三组(n均=8):对照组(C组)、I/R组、ED组。观察各组大鼠I/R后心功能指标:左室收缩峰压(LVSP)、左室压上升最大速率(+dp/dtmax)、左室压下降最大速率(-dp/dtmax)、冠脉流量(CF)、心肌细胞乳酸脱氢酶(LDH)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性、心肌组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:与基础值和C组比较,I/R组再灌注时各时点的CF、LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax降低(P<0.05);与I/R组比较,ED组再灌各时点的CF、LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax增高(P<0.05);ED组心肌SOD活性明显高于I/R组(P<0.05),LDH及CK-MB活性、MDA含量低于I/R组(P<0.05)。结论:ED对I/R心肌有保护作用,能促进心功能恢复。其机制与清除自由基和减轻氧化应激有关。     

沉默miR-26a减轻缺血/再灌注大鼠心肌损伤

目的探讨微核糖核酸(miR-26a)对大鼠心肌缺血/再灌注损伤(I/R)的影响。方法将大鼠随机分为对照组(n=20)、I/R组(n=20)和siRNA组(n=20)。建立大鼠I/R模型前7 d,尾静脉注射miR-26a siRNA沉默内源性miR-26a。超声心动图检测心脏射血分数(EF%)和缩短分数(FS%);2,3,5-三苯基四唑氯化物(TTC)染色测定心肌梗死面积;HE染色法检测心肌细胞形态;TUNEL法检测心肌细胞凋亡水平;Western blot检测心肌组织中促凋亡蛋白Bcl-2相关X蛋白(Bax)和活性半胱天冬酶-3(caspase-3)和Rho/RhoA信号通路相关蛋白表达。结果 I/R组心肌组织中miR-26a的表达明显高于对照组(P0.05)。siRNA组心功能不全显著改善,大鼠的EF%和FS%均提高(P0.05)。此外,siRNA组I/R所致的心肌梗死程度明显减轻,心肌梗死面积百分比由43.08%±2.43%减小到21.54%±1.82%(P0.05)。siRNA组肌丝排列较整齐,心肌坏死程度较低,细胞水肿较I/R组明显减轻。siRNA组大鼠心肌细胞凋亡水平明显低于I/R组(P0.05),Bax和caspase-3表达水平也明显下降(P0.05)。miR-26a抑制可以显著降低I/R时Rho/RhoA信号通路蛋白表达(P0.05)。结论 miR-26a沉默可能通过降低Rho/RhoA信号通路蛋白表达抑制I/R所致心肌细胞凋亡。     

心肌再灌注对抑郁大鼠心肌细胞凋亡以及bcl-2、bax和caspase-3表达的影响

目的: 探讨心肌缺血再灌注(I/R)对抑郁大鼠心肌细胞凋亡及凋亡基因bcl-2、bax和 caspase-3 的影响。方法: Wistar大鼠32只,随机分为4组,每组各8只。A组:非抑郁大鼠假手术组;B组:抑郁大鼠假手术组;C组:非抑郁大鼠心肌I/R组;D组:抑郁大鼠心肌I/R组。采用慢性轻度不可预知性应激结合孤养制备抑郁模型,用敞箱实验和液体消耗实验观察大鼠行为改变;运用结扎左冠状动脉前降支的方法复制心肌I/R模型。运用 TUNEL法检测心肌凋亡细胞;运用免疫组化法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测bcl-2、bax和 caspase-3 的表达。结果: (1)与A、B组比较,C、D组心肌细胞凋亡数量显著增加(P<0.01),A、B两组间比较无显著差异;与C组比较,D组心肌细胞凋亡数量显著增加(P<0.05)。(2)与A、B组比较,C、D组Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白和mRNA表达显著增加(P<0.01),A、B两组间比较无显著差异; 与C组比较,D组Bcl-2蛋白和mRNA表达显著减少(P<0.05),而Bax和caspase-3蛋白和mRNA表达显著增加(P<0.05)。结论: 心肌缺血再灌注可加重抑郁大鼠缺血心肌细胞凋亡,其机制可能与上调bax和 caspase-3 基因表达、下调 bcl-2 基因表达有关。     

miR-499通过靶向调控PTEN基因减轻大鼠心肌损伤

目的:探究微小RNA-499(miR-499)对PTEN基因的靶向作用以及在大鼠心肌损伤中的作用机制。方法:构建大鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤模型,RT-qPCR检测miR-499表达水平的变化;分离培养原代心肌细胞,分别转染miR-499模拟物和siR-PTEN,加入过氧化氢刺激后用CCK-8法检测细胞活力,试剂盒检测LDH释放量;分别使用TargetScan和萤光素酶实验预测验证miR-499和PTEN的靶向关系;RT-qPCR和Western blot检测miR-499模拟物和抑制剂对PTEN的mRNA和蛋白表达水平的影响;共转染anti-miR-499和siR-PTEN至细胞内,CCK-8和LDH检测试剂盒检测心肌细胞在过氧化氢刺激下细胞活力和LDH的变化。结果:在大鼠心肌I/R损伤模型中,miR-499表达水平显著迅速提升,之后逐渐呈时间依赖性下降(P0.05);miR-499模拟物和siR-PTEN使过氧化氢刺激下的心肌细胞活力显著提升,LDH释放量显著减少(P0.05);miR-499可靶向调控PTEN,miR-499模拟物促使PTEN表达显著下调,miR-499抑制剂则使PTEN表达显著上调(P0.05);转染siR-PTEN能够回补miR-499抑制剂对细胞的抑制作用(P0.05)。结论:miR-499可通过靶向PTEN减轻大鼠心肌细胞损伤。     

科罗索酸增强右美托咪定对链尿佐菌素诱导的糖尿病大鼠心肌氧化应激和凋亡的保护作用

目的:探究科罗索酸对右美托咪定抗链尿佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠心肌氧化应激和心肌细胞凋亡作用的影响。方法:将60 只雄性SD 大鼠随机分为对照(Ctrl)组、STZ 组,科罗索酸(CA)组、右美托咪定(DEX)组和CA+DEX 组,除Ctrl 组外,其余组大鼠腹腔注射STZ(60 mg/ kg)诱导糖尿病大鼠模型。模型复制成功后分别给予DEX (20 μg/ kg)和CA (20 mg/ kg),7 d 后处死大鼠,HE 染色检测心肌损伤情况,试剂盒检测血清肌红蛋白(Mb)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白I(cTnI)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA) 的浓度;Western blot 检测Ki67 和Caspase-3 的表达;ELISA 检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)的含量。结果:与Ctrl 组比较,STZ 组大鼠心肌组织损伤加重;与STZ 组比较,DEX 组大鼠心肌损伤有所减轻,CA 组效果甚微;但CA+DEX 组大鼠心肌损伤明显轻于DEX 组;同时,DEX 能显著降低模型大鼠血清Mb、CK-MB 和cTnI 浓度,并能升高血清SOD 浓度、降低MDA 浓度,CA 效果较弱,但CA 能显著增强DEX 对Mb、CK-MB、CTNI、SOD 和MDA 分泌的调控作用;此外,与STZ 组比较,DEX 组大鼠Ki67 表达明显上调,Caspase-3 表达明显减少,CA 对Ki67 和Caspase-3 的调控作用较弱,但能显著增强DEX 对Ki67 和Caspase-3 表达的调控作用。DEX 还能显著抑制炎症因子TNF-α和IL-6 的分泌,CA 能增强DEX 对TNF-α和IL-6 分泌的抑制作用。结论:CA 能增强DEX 对STZ 诱导的糖尿病大鼠心肌氧化应激和心肌细胞凋亡的抑制作用。     

肌红蛋白、心肌肌钙蛋白和肌酸激酶同工酶检测对新生儿窒息心肌损害的诊断价值

探讨肌红蛋白(Mb)、心肌肌钙蛋白(cTnI)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)测定在诊治窒息新生儿心肌损害的价值.采用免疫化学发光法和酶动学法对35名正常足月新生儿、50例窒息新生儿进行Mb、cTnI和CK-MB检测.结果表明: 与正常新生儿比较, 患儿组Mb、cTnI和CK-MB值均显著升高(P＜0.01),且随窒息程度加重而升高, 其中Mb灵敏度最高, cTnI特异性最强.研究表明: 新生儿窒息对患儿心肌功能产生损伤, Mb、cTnI和CK-MB三项指标能较好反映心肌损害程度.     

丹参酮IIA磺酸钠注射液对心肌缺血再灌注大鼠心功能和免疫反应的调节作用

目的　本文研究丹参酮IIA磺酸钠注射液（Sodium tanshinone IIA sulfonate,TIIA）对心肌缺血再灌注（ischemia-reperfusion,I/R）大鼠心功能和免疫反应的调节作用及其机制。 方法　采用冠状动脉结扎法建立心肌缺血再灌注大鼠模型;随机分成5组：Ctrl组、I/R组、I/R+TIIA（0.5 mL）组、I/R+TIIA（1 mL）组和I/R+TIIA（2 mL）组;测定平均动脉压（mean ventricular systolic pressure,MAP）、左室收缩压（left ventricular systolic pressure,LVSP）和心率（heart rate,HR）;采集血清Elisa检测心损标记物表达水平和氧化应激指标含量;HE染色和TUNEL染色观察心肌损伤情况;流式分选外周血CD4+iNOS+,CD4+IL-10+凋亡变化;蛋白印迹法检测凋亡相关蛋白和P65、IL-8及TNF-α表达情况。 结果　丹参酮ⅡA磺酸钠注射液能上调MAP、HR和LVSP水平以改善I/R模型大鼠心功能(P＜0.01);降低血清中CK-MB、cTnΙ和Mb的表达上调;减少MDA、LDH表达,增加SOD水平;改善心肌组织的病理改变,抑制心肌细胞凋亡,上调Bcl-2、下调Bax蛋白表达(P＜0.01);减少iNOS+和增加IL-10+细胞凋亡而改善Th1/Th2平衡(P＜0.01);抑制P-P65、IL-8和TNF-α的表达下调(P＜0.01)。 结论 丹参酮IIA磺酸钠注射液对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制与改善心功能,调节免疫反应有关。     

丹参酮IIA磺酸钠注射液对心肌缺血再灌注大鼠心功能和免疫反应的调节作用

目的　本文研究丹参酮IIA磺酸钠注射液（Sodium tanshinone IIA sulfonate,TIIA）对心肌缺血再灌注（ischemia-reperfusion,I/R）大鼠心功能和免疫反应的调节作用及其机制。 方法　采用冠状动脉结扎法建立心肌缺血再灌注大鼠模型;随机分成5组：Ctrl组、I/R组、I/R+TIIA（0.5 mL）组、I/R+TIIA（1 mL）组和I/R+TIIA（2 mL）组;测定平均动脉压（mean ventricular systolic pressure,MAP）、左室收缩压（left ventricular systolic pressure,LVSP）和心率（heart rate,HR）;采集血清Elisa检测心损标记物表达水平和氧化应激指标含量;HE染色和TUNEL染色观察心肌损伤情况;流式分选外周血CD4+iNOS+,CD4+IL-10+凋亡变化;蛋白印迹法检测凋亡相关蛋白和P65、IL-8及TNF-α表达情况。 结果　丹参酮ⅡA磺酸钠注射液能上调MAP、HR和LVSP水平以改善I/R模型大鼠心功能(P＜0.01);降低血清中CK-MB、cTnΙ和Mb的表达上调;减少MDA、LDH表达,增加SOD水平;改善心肌组织的病理改变,抑制心肌细胞凋亡,上调Bcl-2、下调Bax蛋白表达(P＜0.01);减少iNOS+和增加IL-10+细胞凋亡而改善Th1/Th2平衡(P＜0.01);抑制P-P65、IL-8和TNF-α的表达下调(P＜0.01)。 结论 丹参酮IIA磺酸钠注射液对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制与改善心功能,调节免疫反应有关。     

多巴胺受体2减轻离体大鼠心肌缺血/再灌注损伤

目的 观察多巴胺受体2(DR2)对离体大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤的影响及其可能机制.方法 将大鼠40只,每组n=10,随机分成对照组(control)、I/R组、10 pmol/L Bromocriptine(DR2激动剂)组(Bro),10 μmol/L Haloper-idol(DR2抑制剂)组(Hal).用Langendorff离体灌流装置,复制大鼠心肌I/R损伤模型.Powerlab生理记录仪记录心功能;比色法测定冠脉流出液LDH、CK活性和心肌组织匀浆SOD活性以及MDA含量;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡;Western blot检测DR2、Bcl-2、caspase-3和caspase-9蛋白的表达.结果 与对照组比较,I/R组DR2、Bcl-2、caspase-3和cmpase-9蛋白表达、LDH和CK活性、MDA含量和细胞凋亡率均增加(P＜0.01),唯有SOD活性降低,心功能减弱(P＜0.01).与I/R组比较,Bro降低LDH和CK活性、MDA含量、细胞凋亡率、caspase-3和caspase-9的表达,升高SOD活性,改善心功能和进一步增加Bcl-2的表达(P ＜0.01);Hal对上述指标影响不显著.结论 DR2可减轻心肌I/R损伤,其机制与抗氧化、清除自由基、上调Bcl-2表达以及下调caspase-3和caspase-9的表达有关.     

大鼠活体心肌缺血再灌注损伤模型的建立与综合评估

目的: 构建并评估大鼠活体心肌缺血再灌注损伤(I/R)的实验动物模型。 方法: 将清洁级成年SD雄性大鼠72只,随机分为正常组、假结扎组和I/R模型组, 手术的两组全麻下开胸暴露心脏,假结扎组只过线不结扎,模型组使用"U形金属管"进行冠状动脉左前降支结扎,持续心电图监测,并于再灌注2 h与4 h后进行血浆生化﹑心肌组织学的检测。结果: 与正常组和假结扎组比较,I/R模型组心电图有明显ST-T改变和再灌注后病理性Q波,再灌注2 h和4 h时存在比较明显的ST-T改变;血标本检测示心肌型肌酸激酶同功酶(CK-MB)、心肌钙蛋白I(cTnI)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平显著升高(P<0.05或P<0.01),T-SOD水平在2 h和4 h也应激性升高(P<0.05);心肌组织病理学检测显示模型组左心室心肌损伤疤痕明显,且2 h模型组左室心肌存在间隔性梗死区域,4 h模型组心肌组织区域性梗死和梗死面积明显增加;TUNEL法与Bcl-2﹑Bax蛋白实验显示2 h和4 h心肌细胞凋亡数量明显增加;Bcl-2/Bax蛋白表达阳性细胞比值下降显著(P<0.01)。 结论: 成功建立大鼠活体心肌I/R模型,模型大鼠的心电图、血清学、心梗面积﹑心肌细胞凋亡和心肌组织病理学等发生显著改变。     

外源性H_2S恢复老龄大鼠心肌缺血后适应对I/R损伤的缓解作用

目的探讨外源性硫化氢(H_2S)恢复缺血后适应(PC)对老龄大鼠心肌的保护作用及相关机制。方法将青年和老龄大鼠随机分别分为对照组、缺血/再灌注(I/R)组和PC组,老龄大鼠另加Na HS干预组。用Langendorff离体灌流装置,复制大鼠心肌I/R损伤和PC模型。比色法测定冠脉流出液LDH、CK活性和心肌组织匀浆SOD活性、MDA含量及H_2S产率;透射电镜检测心肌超微结构;TTC染色测定心肌梗死面积;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡;Western blot检测caspase-3、caspase-9、Bcl-2及胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)的表达。结果无论青年还是老龄大鼠,与对照组比较,I/R降低H_2S产率、SOD活性和CSE表达,增加LDH和CK活性、MDA含量、心肌损伤、细胞凋亡、心肌梗死面积、caspase-3、caspase-9及Bcl-2的表达(P0.01);与I/R组比较,青年大鼠的PC减轻I/R损伤及细胞凋亡(P0.01),而老龄大鼠的PC丧失了对心肌的保护作用;外源性H_2S恢复了老龄大鼠的PC对I/R损伤的保护作用。结论外源性H_2S能够恢复老龄大鼠PC对心肌的保护作用,其机制与抗氧化、清除自由基、抑制细胞凋亡有关。