γ IP-10和Mig 通过趋化因子CXC受体3激活嗜酸性粒细胞的NFAT

目的：研究γIP-10和Mig通过趋化因子CXC受体3（CXCR3）激活嗜酸性粒细胞的活化细胞核因子（nuclear factor of activated T lymphocytes,NFAT）作用。方法：嗜酸性粒细胞的纯化技术、流式细胞术、实时定量逆转录PCR（RT－PCR）、核提取物和电泳移动性转变测定等方法进行测定与分析。结果：CXCR3大量在嗜酸性粒细胞上表达。通过流式细胞仪及实时定量RT－PCR技术检测证明,IL－2和IL－10上调或下调嗜酸性粒细胞上CXCR3的蛋白和mRNA表达水平。其配体γIP-10和Mig可以引起嗜酸性粒细胞中的NFAT复合体的核易位而激活NFAT1和NFAT4。结论：CXCR3－γIP-10和－Mig受体－配体以及IL－2和IL－10对CXCR3表达的调节作用可能在过敏炎症过程（包括启动、发展和结局的病理生理过程）的细胞因子／趋化因子环境中发挥特别重要的作用。     

CXCR1/CXCR2拮抗剂G31P抗中性粒细胞介导的炎症作用研究

目的 建立肺炎动物模型,使用人CXCR1/CXCR2受体拈抗剂G31P,治疗与中性粒细胞相关的炎性疾病.方法 检测G31P能否阻断人IL-8对中性粒细胞趋化以及阻断支气管上皮细胞A549释放IL-8;建立pcDNA3.0-CXCR1、2、4转染的肾细胞HEK293,检测G31P阻断IL-8对细胞株的趋化作用;建立肺炎动物模型,计数肺泡灌洗液(BALF)中性粒细胞数,进行肺组织病理学观察.结果 实验证实G31P可以阻断中性粒细胞趋化和IL-8介导的CXCR1、CXCR2转染的HEK293细胞株的趋化作用,抑制A549释放炎性介质;G31P治疗组中性粒细胞比例下降,病理检测有明显差异.结论 G31P可以阻断ELR+CXC趋化因子对中性粒细胞的趋化作用,阻断ELR+CXC趋化因子与中性粒细胞表面受体CXCR2的结合,阻断肺泡上皮细胞和血管内皮细胞表面的CXCR2,从而进一步阻止中性粒细胞介导的炎症反应.     

激活α7烟碱型乙酰胆碱能受体(α7nAchR)增加小鼠海马组织M2型小胶质细胞数量并减轻脓毒症脑病

目的检测α7烟碱型乙酰胆碱能受体(α7nAchR)对M2型小胶质细胞的影响,探索其减轻脓毒症脑病(SAE)的机制。方法采用盲肠结扎穿刺术(CLP)于2月龄雄性C57BL/6小鼠构建SAE模型,比较两组小鼠学习记忆能力的改变。采用Western blot法检测海马组织中α7nAchR的表达变化。给予腹腔注射α7nAchR的激动剂二甲氧基苯亚胺基假木贼碱(GTS-21),观察给予激动剂后海马组织中α7nAchR的表达变化,同时探索GTS-21是否能减轻SAE小鼠的学习记忆障碍。通过免疫荧光细胞化学染色法检测精氨酸酶1(ARG1)、离子钙结合接头蛋白1(Iba-1)的表达确定SAE小鼠M2型小胶质细胞数量的变化,以及GTS-21对M2型小胶质细胞数量的影响。结果 SAE小鼠的新物体识别及恐惧记忆能力显著下降,小鼠海马组织中α7nAchR表达显著降低。GTS-21可改善SAE小鼠的学习记忆障碍,增加脑组织中α7nAchR的表达。同时,脓毒症小鼠海马组织中M2型小胶质细胞显著减少,而GTS-21可显著增加M2型小胶质细胞的数量。结论 SAE小鼠海马组织中α7nAchR表达降低,使抑制炎症反应的M2型小胶质细胞减少, GTS-21可显著增加M2型小胶质细胞数量,减轻SAE小鼠的学习记忆障碍。     

TNF-α、LPS、IL-1β促进内皮细胞表达中性粒细胞趋化因子(IL-8)基因

本文作者表明内皮细胞能分泌一种中性粒细胞趋化因子(NCF),其分子物理化学特征与单核细胞衍生的NCF(IL-8)相似。作者用RNA blot分析法测定NCF基因表达。发现重组的人TNF-α以浓度依赖性和时间依赖性方式促进内皮细胞NCF基因表达。TNF-α、IL-1β′或     

趋化因子基质细胞衍生因子1(SDF-1)及其受体CXCR4

趋化因子及其受体在免疫和炎症反应、造血以及HIV感染等方面发挥重要作用,其中基质细胞衍生因子-1SDF-1及其受体CXCR4由于在造血干细胞迁移、归巢以及HIV感染中的作用而受到关注,并对其作用机制进行了探讨,现就SDF-1及其受体CXCR4的有关内容作一综述。     

人单核细胞诱生的中性粒细胞趋化因子(IL-8)的基因结构

中性粒细胞在炎症部位的聚集是由多种不同来源的刺激分子所介导,包括C5a、血小板激活因子等,此外,我们和其它研究室还报导了一种新的多肽——中性粒细胞趋化因子(MDNCF),它是由LPS 或IL-1、TNF 激活外周血单核细胞或T 淋巴细胞、纤维母细胞、角质细胞和内皮细胞所产生。作者确定了其氨基末端的氨基酸序列、制备了CDNA 克隆、推断了整个氨基酸顺序并在     

一氧化氮合酶激活参与烧伤后Ca~(2 )介导的心肌线粒体损伤

目的 :探讨线粒体一氧化氮合酶 (mtNOS)在严重烧伤早期心肌线粒体损害中的作用。方法 :复制30 %TBSAⅢ°烧伤大鼠模型 ,取正常及伤后 1、3、6、12、2 4h大鼠心肌分离线粒体 ,测其呼吸功能、Ca2 浓度 ([Ca2 ]m)及细胞色素c氧化酶、mtNOS活性。结果 :①伤后 1h心肌线粒体呼吸控制率 (RCR)显著高于正常组 ,但 3、6、12、2 4h明显低于正常组 ,Ⅲ态呼吸速率 (ST3 )变化与RCR平行 ,ST4 仅于伤后 3h明显升高 ;②伤后各时点 [Ca2 ]m 均明显高于正常组 ,尤以 3、6h为甚 ,而mtNOS活性于伤后 3、6、12、2 4h显著高于对照组 ,细胞色素c氧化酶活性于伤后 3、6、12、2 4h显著低于正常组 ;③伤后mtNOS活性与 [Ca2 ]m 呈明显正相关 ,相关系数为 0 8945 (P <0 0 5 ) ,RCR与mtNOS活性呈显著负相关 ,相关系数为 - 0 934 7(P <0 0 5 )。结论 :伤后 [Ca2 ]m 升高激活mtNOS ,可能参与严重烧伤早期心肌线粒体损害。     

大麻素受体激动剂花生四烯酰氯乙胺(ACEA)通过抑制炎症反应改善小鼠脓毒症相关性脑病

目的 探讨大麻素受体激动剂花生四烯酰氯乙胺(ACEA)对脓毒症相关性脑病(SAE)小鼠认知功能的影响。方法C57BL/6小鼠随机分成人工脑脊液(ACSF)组和脂多糖(LPS)组,通过采用LPS侧脑室注射构建SAE模型,小鼠脓毒症严重程度评分(MSS)和体质量变化判断小鼠的基本情况;行为学范式评估小鼠运动能力(旷场实验)、认知功能(情景前置性条件恐惧实验、 Y迷宫实验)。评估ACEA干预效果中,小鼠随机分为ACSF组、 ACEA干预的ACSF组、 LPS组和ACEA干预的LPS组,ACEA干预组给与1.5 mg/kg ACEA,实时定量PCR检测小鼠海马组织白细胞介素1β(IL-1β)、 IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA表达水平;Western blot法检测小鼠海马组织IL-6、 TNF-α的蛋白表达水平;尼氏染色检测小鼠海马CA1区神经元损伤情况;行为学范式评估小鼠运动能力(旷场实验)、认知功能(情景前置性条件恐惧实验、 Y迷宫实验)。结果 侧脑室注射LPS 3 d后,小鼠存在显著认知功能障碍,证实SAE造模成功。与ACSF组相比,LPS组海马炎症因子IL-6、 TN...     

补体C5a对中性粒细胞和肾小球内皮细胞粘附行为的影响(摘要)

补体Ｃ５ａ对中性粒细胞和肾小球内皮细胞粘附行为的影响（摘要）齐洁１朱锡华１Ｃ５ａ具有多种生物学效应，为机体重要的炎症介质和过敏毒素。Ｃ５ａ除了参与机体免疫防御还参与了多种疾病的病理变化，并在病变中起了重要作用。Ｃ５ａ的各种生物学效应均通过Ｃ５ａＲ介导...     

Toll样受体2(TLR2)基因敲除减轻小鼠胰岛素抵抗并促进巨噬细胞M2极化

目的研究Toll样受体2(TLR2)基因缺失对小鼠胰岛素抵抗和巨噬细胞极化的影响。方法出生28 d雄性TLR2基因敲除(TLR2~(-/-))和野生型(WT)的C57BL/6小鼠各12只,采用PCR验证每只小鼠的基因型。基础饲养3个月后,进行葡萄糖耐量实验(GTT)和胰岛素抵抗实验(ITT);从外周血中分离单个核细胞,以粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)/γ干扰素(IFN-γ)和M-CSF/白细胞介素4(IL-4)/IL-13分别诱导培养为M1型和M2型巨噬细胞,流式细胞术检测CD11b、 F4/80、 CD11c、 CD206、早期生长反应蛋白2(EGR2),确定巨噬细胞表型。ELISA检测M1型巨噬细胞培养上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、 IL-6的含量; M2型巨噬细胞培养上清液中IL-10的含量。结果 PCR验证结果显示TLR2~(-/-)和WT小鼠的基因型正确;行GTT后比较, TLR2~(-/-)小鼠血糖调节能力比WT小鼠强,在30 min时最明显;行ITT后比较, WT小鼠比TLR2~(-/-)小鼠调节血糖的能力和胰岛素敏感性均降低,在15 min差异明显;与WT小鼠相比, TLR2~(-/-)小鼠M1型巨噬细胞的比率降低, M2型巨噬细胞比率增加;与WT小鼠相比, TLR2~(-/-)小鼠M1型巨噬细胞培养上清液IL-6、 TNF-α含量降低, TLR2~(-/-)小鼠M2型巨噬细胞培养上清液IL-10含量增加。结论 TLR2信号影响巨噬细胞的极化,使巨噬细胞倾向于M1表型,从而分泌促炎因子使机体处于低度炎症的状态,导致葡萄糖耐量和胰岛素敏感性的降低。     

一种新型荧光(mKate2)特异性标记中性粒细胞的转基因小鼠的构建及初步应用

目的构建在中性粒细胞中特异性表达mKate2红色荧光蛋白的转基因小鼠。方法本研究将人工合成的lysozyme M启动子及mKate2基因序列构建至pmini Tol2系统中,通过显微注射法把线性化的转基因载体注射到C57BL/6J小鼠的受精卵后并将其移植至假孕鼠体内,制备转基因小鼠。本研究使用PCR鉴定lyz-m Kate2转基因小鼠的成功构建和通过荧光显微镜和流式分析等方法鉴定该模型小鼠中荧光蛋白mKate2的表达及特异性。结果外源lyz-mKate2转基因盒在C57BL/6J小鼠体内成功表达。在外周血中检测到标记红色荧光信号的中性粒细胞,而且70%左右的mKate2阳性细胞是中性粒细胞。激光诱导血栓模型中血栓块可观察到mKate2阳性细胞。结论本研究成功构建了mKate2特异性标记中性粒细胞的新型转基因小鼠并验证了其在血栓模型中的应用价值。     

免疫荧光法检测小鼠脑内雌激素受体的分布(英文)

为检测雌激素受体在绝经后妇女可能的作用 ,采用免疫荧光法检测卵巢切除小鼠脑内雌激素受体 (ER)的分布。结果清楚表明 ,ERα除了存在于已知的下丘脑腹内侧核、下丘脑前区中央部和弓状核外 ,还见于室旁核和视上核 ,而文献报道 ERβ在该区域占主导地位。我们还首次报道 ERα在正中隆起的分布。如期所见 ,ERα还分布于终纹床核和杏仁核。尽管试用多种来源的商品化 ERβ抗体 ,也未检测到脑内 ERβ免疫反应阳性细胞 ,推测可能是脑内 ERβ蛋白含量稀少的原因。在脑内广泛存在 ER,并且 ER在不同核团有独特分布 ,这就有可能针对雌激素广泛作用中某一特殊功能设计药物。     

雷帕霉素促进自噬减轻脓毒症相关性脑病(SAE)小鼠认知功能障碍

目的 明确雷帕霉素促进自噬在脓毒症相关性脑病(SAE)小鼠认知功能障碍中的作用。方法 通过盲肠结扎穿孔术(CLP)建立SAE小鼠模型,采用小鼠脓毒症严重程度评分(MSS)评估SAE小鼠脓毒症的严重程度,条件恐惧记忆实验观察小鼠认知功能。Western blot法检测SAE小鼠海马组织微管相关蛋白1轻链3(LC3)与P62的表达水平,免疫荧光组织化学染色观察LC3在海马区神经元中的表达和分布。结果 CLP术后14 d小鼠死亡率高达41.7%,而幸存小鼠存在显著认知功能障碍。同时,CLP术后14 d小鼠海马组织自噬水平降低。雷帕霉素可促进SAE小鼠海马神经元自噬,减轻其认知功能障碍。结论雷帕霉素促进SAE小鼠海马神经元自噬,减轻其认知功能障碍。     

中性粒细胞胞外诱捕网通过上调MMP9表达激活黏着斑激酶促进小鼠结直肠癌细胞的增殖和迁移

目的 研究中性粒细胞胞外诱捕网(NET)对小鼠MC38结直肠癌细胞增殖、迁移能力的影响及其机制。方法 提取小鼠脾脏中性粒细胞,体外用离子霉素刺激获得NET。将NET与MC38细胞共孵育后,采用CCK-8法检测MC38细胞增殖,Transwell^TM和细胞划痕实验检测MC38细胞迁移能力。实时荧光定量PCR检测细胞基质金属蛋白酶2 (MMP2)、 MMP9的mRNA表达,Western blot法检测MC38细胞MMP2、 MMP9和黏着斑激酶(FAK)、磷酸化的FAK蛋白表达。使用小干扰RNA(siRNA)沉默MMP9后,采用前述方法检测NET对MC38细胞增殖、迁移能力的影响及相关分子表达的改变。结果NET促进MC38细胞增殖和迁移能力,并上调MMP9表达、促进FAK的磷酸化。沉默MMP9后,抑制NET对MC38细胞增殖和迁移的促进作用并抑制FAK磷酸化。结论 NET上调MC38细胞MMP9表达,激活FAK信号通路,促进肿瘤细胞增殖和迁移。     

小鼠单克隆抗体介导细胞因子激活的人嗜酸性细胞细胞毒功能的能力(文摘)

抗体依赖人嗜酸性细胞对肿瘤细胞、病毒感染细胞和寄生虫感染细胞产生的细胞毒反应,当嗜酸性细胞受肿瘤坏死因子(TNF)刺激时反应增强。本文探讨了小鼠单克隆抗体(McAb)介导的人嗜酸性细胞的细胞毒功能。     

缺氧缺血性脑病新生儿血清胰岛素(InS)及、中性粒细胞表面黏附分子CD_(11b)表达的变化

目的观察缺氧缺血性脑病(HIE)新生儿血清胰岛素(In S)的水平及中性粒细胞表面黏附分子CD11b的表达,探讨其在HIE中的临床意义。方法足月HIE患儿59例(轻度12例,中度30例,重度17例)及35例健康足月新生儿(健康对照组)分别于出生72h取静脉血采用化学发光法检测血清In S水平,同时采用流氏细胞术检测中性粒细胞表面黏附分子CD11b的表达,比较各组间的差异;并分析HIE各组中In S与CD11b水平的相关性。结果 1.HIE组血清In S水平及CD11b表达水平显著高于健康对照组(P均0.01);2.HIE各组血清In S水平及CD11b表达水平随HIE程度加重而增加,各组间差异均有统计学意义(P均0.05);3.HIE患儿血清In S水平及CD11b表达水平呈正相关(r=0.849,P0.05)。结论血清In S水平及CD11b表达水平可作为HIE新生儿病情严重程度早期指标;HIE的发生、发展可能是多因素联合参与的过程,其中免疫、炎症反应及神经内分泌系统的变化等异常同步发生,相互关联。     

阻断α_(2A)-肾上腺素能受体改善脓毒症大鼠的心功能

<正>目的:观察阻断α2A-肾上腺素能受体(AR)对脓毒症性心功能障碍的影响。方法:利用雄性大鼠和α2A-AR基因敲除小鼠,通过盲肠结扎穿孔(CLP)建立脓毒症模型,观察心功能和相关分子变化。结果:α2A-AR阻断剂BRL可改善CLP大鼠生存和心功能,明显降低CLP大鼠心肌TNF-α含量,抑制心肌中性粒细胞浸润,降低心肌MPO的表达,并减少p38、JNK、IκBα的磷酸     

中性粒细胞介导的抗体依赖性细胞的细胞毒作用:~(51)Cr释放伴随的形态学变化

近年来发现,中性粒细胞也具有抗体依赖性细胞的细胞毒活性(NADCC),但对这种细胞毒作用的许多特性尚不了解。本文研究了中性粒细胞与瘤细胞的凝聚物形成和解聚的动态变化及其与~(51)Cr释放的关系;并观察了~(51)Cr最大释放后瘤细胞的形态学变化。实验方法是将~(51)Cr标记的小鼠肝细胞瘤     

G蛋白偶联受体激酶相互作用蛋白2(GIT2)参与免疫调控的研究进展

G蛋白偶联受体激酶相互作用蛋白2(GIT2)是一类多结构域的信号支架蛋白。GIT2通过与不同蛋白质的相互作用调节细胞功能,主要参与整合素介导的细胞黏附、肌动蛋白细胞骨架组装以及胞内信号传递过程。GIT2在免疫系统中也扮演着重要角色,促进中性粒细胞趋化性,抑制其过度产生超氧化物,促进胸腺细胞的阳性选择和趋化性,抑制炎症性肠病,介导肝脏免疫性损伤,且GIT2敲除小鼠具有多种免疫缺陷症状。本文简述了GIT2在免疫体系中的调控作用。     

单核细胞产生的中性粒细胞趋化因子(MDNCF/IL-8)以其氨基末端序列的长度不同划分为三种类型

本文作者通过MDNCF/IL-8亲和层析(获率达65％)和高压液相层析(HPLC-CM)自LPS刺激的人外周血单核细胞培养上清纯化获得MDNCF/IL-8纯品(5.8×10~4μ/ml),并对其氨基末端核酸序列进行分析,发现存有3种类型,其结果如下所述。由亲和层析纯化的MDNCF/IL-8经HPLC-CM纯化(获率为85%)后,梯度洗脱可产生4个完全分