抑制性ODN对溃疡性结肠炎小鼠Th1/Th2免疫失衡的调节作用

目的 研究抑制性ODN对溃疡性结肠炎小鼠Th1/Th2免疫失衡的调节作用.方法 首先利用我们已发表的研究[1]中的方法建立小鼠溃疡性结肠炎模型.建模成功后将结肠炎小鼠随机分为两组,分别给予腹腔内注射PBS、A151,记作PBS＋UC组、A151＋UC组,同时设一组健康小鼠对照并给予腹腔注射PBS,记作PBS＋健康对照组.每组分别连续注射7天,末次注射后7天取小鼠血清并分离小鼠结肠组织制备匀浆.利用ELISA方法检测血清及结肠匀浆中IL-6、TNF-α、IL-10 、IL-4水平.结果经检测发现抑制性ODN能明显下调IL-6和TNF-α的水平,而上调IL-10和IL-4水平.结论 抑制性ODN对小鼠溃疡性结肠炎的抑制作用或许是通过调节Th1/Th2平衡来实现的.     

紧密连接蛋白occludin在三硝基苯磺酸诱导大鼠结肠炎肠黏膜屏障中的作用研究

目的探讨紧密连接蛋白occludin在三硝基苯磺酸（trinitro-benzen-sulfonic acid,TNBS）诱导大鼠结肠炎肠黏膜屏障中的作用。方法建立大鼠结肠炎模型。SD大鼠18只,按随机数字表法分为TNBS诱导大鼠结肠炎模型组（n=10）和正常对照组（n=8）,进行疾病活动指数（DAI）和组织学损伤评分,用ELISA法测定结肠组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-10（IL-10）和血清内毒素,采用免疫组织学染色检测紧密连接（tight junction,TJ）相关蛋白occludin的分布。结果TNBS诱导大鼠结肠炎后,和正常组比较,TJ结构遭到破坏,TJ相关蛋白的表达亦减少,结肠组织TNF-α水平升高、IL-10水平降低和血清内毒素水平升高（P〈0.05）。结论TNBS诱导大鼠结肠炎肠黏膜上皮细胞TJ相关蛋白occludin表达下降,肠黏膜上皮屏障的完整性被破坏,导致肠黏膜屏障功能低下,促发炎症反应。     

调肠消炎片对大鼠溃疡性结肠炎的治疗机制探讨

目的:研究调肠消炎片对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的大鼠溃疡性结肠炎(UC)的治疗作用机制.方法:利用TNBS制造UC大鼠模型,从结肠组织形态学、炎症因子水平、抗氧化损伤作用方面考察调肠消炎片对TNBS诱导的大鼠UC的治疗作用以及作用机制.结果:调肠消炎片可减轻溃疡性大鼠结肠组织病理学变化;显著减轻结肠组织损伤(P＜0.05或P＜0.01);显著降低血清与结肠组织丙二醛(MDA)含量(P＜0.01),显著提高血清与结肠组织超氧化物歧化酶(SOD)水平(P＜0.05或P＜0.01);显著抑制血清白细胞介素6(IL-6)及肿瘤坏死因子(TNF-α)炎症因子的表达(P＜0.05或P＜0.01).结论:调肠消炎片对TNBS诱导的大鼠UC有较好的治疗作用.其作用机制可能与促进结肠修复,降低自由基损伤,抗炎修复、调节细胞因子水平有关.     

调节性T细胞对LPS诱导的小鼠早产模型胎盘炎症反应的影响

目的研究调节性T细胞对脂多糖(LPS)诱导的小鼠早产模型胎盘炎症反应的影响。方法孕17 d小鼠分组为腹腔注射PBS组(Control组),腹腔注射LPS(LPS组),腹腔注射LPS并尾静脉注射PBS组(LPS+PBS组),腹腔注射LPS并尾静脉注射Treg组(LPS+Treg组)。构建LPS腹腔注射诱导的17 d孕小鼠早产模型。在第2剂LPS注射后1、6、12 h及出生时留取胎盘组织,检测Treg细胞标志物叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)、白血病抑制因子(LIF)、血红素加氧酶-1(HO-1)和白介素6(IL-6)mRNA及蛋白表达水平。结果 1 LPS组早产率100%,Control组未发生早产,LPS+Treg组早产率与LPS组和LPS+PBS组差异无统计学意义(P0.05)。2 LPS组与LPS+PBS组胎盘组织中Foxp3、HO-1、LIF在第二剂LPS注射后1、6、12 h及出生时表达显著下降,IL-6表达显著增高;LPS+Treg组Foxp3、HO-1、LIF表达明显增高,IL-6表达显著降低。结论在LPS腹腔注射诱导的早产小鼠模型中,胎盘组织Treg减少可能是早产的机制之一,HO-1、LIF参与了Treg在母胎界面维持的独特的免疫微环境;Treg过继治疗可通过降低IL-6的表达减轻胎盘组织炎症反应。     

海南萝芙木提取物对葡聚糖硫酸钠小鼠结肠炎作用研究

目的探讨海南萝芙木提取物对葡聚糖硫酸钠(DSS)小鼠结肠炎的作用及机制。方法 80只BALB/c小鼠随机分为:(1)正常对照组;(2)模型组;(3)模型+柳氮磺胺嘧啶治疗组;(4)模型+海南萝芙木提取物治疗组。实验结束后剖取各组小鼠结肠炎症组织,HE染色,组织学评分;免疫组化方法检测各组小鼠肠黏膜组织中NF-κB抑制蛋白(IκB-α)阳性细胞表达率,ELISA方法检测定小鼠结肠组织白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-13(IL-13)表达。结果柳氮磺胺嘧啶治疗组和海南萝芙木提取物治疗组小鼠一般情况好于DSS模型组,DAI积分低于DSS模型组;结肠组织显微镜检查,动物结肠炎症程度低于DSS模型组;动物结肠黏膜细胞中IκB-α阳性细胞表达率显著高于DSS模型组;小鼠结肠组织中IL-4、IL-13水平均显著高于DSS模型组。结论海南萝芙木提取物果胶多糖可能通过于预IκB-α蛋白表达,进而抑制溃疡性结肠炎症细胞中NF-κB活性,抑制IL-4、IL-13等炎症因子,产生抗炎效果。     

抑制性ODN对实验小鼠溃疡性结肠炎的抑制作用研究

目的研究抑制性ODN对小鼠溃疡性结肠炎的抑制作用。方法首先利用我们已发表的研究[1]中的方法建立小鼠溃疡性结肠炎模型。建模成功后将结肠炎小鼠随机分为三组,分别给予腹腔内注射PBS、A151及A151对照,记作PBS＋UC组、A151＋UC组和A151对照＋UC组,同时设一组健康小鼠对照并给予腹腔注射PBS,记作PBS＋健康对照组。每组分别连续注射7天,末次注射后每天观察各组小鼠的状态、大便性状及便隐血情况,并作DAI评分;于末次注射后第7天处死小鼠,分离结肠组织进行组织学评分。结果经A151免疫的溃疡性结肠炎小鼠体重明显增加,而且状态逐渐好转,DAI及结肠组织学评分明显降低,且在末次免疫后7天降低到正常水平。结论说明A151对小鼠溃疡性结肠炎具有抑制作用,展现出治疗溃疡性结肠炎的潜力。     

熊果酸通过靶向STAT3信号通路对葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠溃疡性结肠炎的保护作用（英文）

目的:研究熊果酸(UA)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的实验性小鼠结肠炎模型的抗炎作用,旨在阐明其对肠上皮细胞(IEC)作用的可能分子机制。方法:在体内研究中,将体质量为20～22 g的雄性BALB/c小鼠15只采用随机数字表法分为正常对照组、DSS模型组、DSS+熊果酸治疗组。通过3%DSS诱导8 d,制备小鼠结肠炎模型;其中一组DSS诱导的小鼠结肠炎模型采用UA预处理。各实验组的小鼠体质量和结肠长度分别采用物理天平和游标卡尺测定;参照临床疾病活动指数(DAI)评分法对小鼠进行评分。采用HE染色观察各组结肠组织病理学变化;通过ELISA法测定各组小鼠血液中血清淀粉样蛋白酶A和结肠组织中IL-6的水平。以IL-6刺激分化的Caco-2细胞制备体外人肠上皮细胞炎症模型,通过Western blot检测UA对肠上皮细胞IL-6/STAT3信号通路中STAT3磷酸化的影响。结果:(1)与正常对照组比较,DSS模型组的DAI评分增加、结肠长度缩短和组织损伤明显,差异均具有统计学意义(P0.05);与DSS模型组比较,UA显著抑制了DSS诱导的DAI评分增加、结肠长度缩短和组织学损伤,差异均具有统计学意义(P0.05)。(2)与正常对照组比较,DSS模型组的血清淀粉酶(SAA)水平和结肠组织中IL-6水平升高明显,差异均具有统计学意义(P0.05);与DSS模型组比较,UA可显著逆转DSS诱导的血清淀粉酶(SAA)水平和结肠IL-6水平的升高,差异均具有统计学意义(P0.05)。(3)与正常肠上皮细胞比较,IL-6刺激显著上调STAT3的磷酸化水平;而UA可显著抑制肠上皮细胞中IL-6诱导的STAT3磷酸化水平的增加,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:熊果酸可通过阻断IL-6/STAT3信号通路改善了DSS诱导的结肠炎,提示熊果酸在靶向治疗溃疡性结肠炎中可能具有临床应用潜力。     

BALB/c小鼠噁唑酮结肠炎模型的建立

目的:建立BALB/c小鼠噁唑酮结肠炎模型,评价其作为人类溃疡性结肠炎(UC)模型的可靠性.方法:模型组第1天和第2天用3％噁唑酮溶液200 μL涂搽BALB/c小鼠皮肤以致敏,第6天用1％噁唑酮溶液150μL行保留灌肠,对照组给予等体积乙醇溶剂涂搽皮肤、灌肠,对2组BALB/c小鼠进行疾病活动指数(DAI)评分,评估病变结肠的病理组织学炎症程度,用荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定结肠组织IL-5和IL-13 mRNA的表达水平.结果:模型组小鼠的DAI评分和病理炎症评分显著高于对照组(P＜0.05),模型组病变结肠组织IL-5和IL-13 mRNA的表达水平亦显著高于对照组(P＜0.05).结论:BALB/c小鼠噁唑酮结肠炎模型类似于人类UC,可作为研究UC的理想模型.     

熊果酸通过靶向STAT3信号通路对葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠溃疡性结肠炎的保护作用

目的:研究熊果酸(UA)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的实验性小鼠结肠炎模型的抗炎作用,旨在阐明其对肠上皮细胞(IEC)作用的可能分子机制。方法:在体内研究中,将体质量为20~22 g的雄性BALB/c小鼠15只采用随机数字表法分为正常对照组、DSS模型组、DSS+熊果酸治疗组。通过3%DSS诱导8 d,制备小鼠结肠炎模型;其中一组DSS诱导的小鼠结肠炎模型采用UA预处理。各实验组的小鼠体质量和结肠长度分别采用物理天平和游标卡尺测定;参照临床疾病活动指数(DAI)评分法对小鼠进行评分。采用HE染色观察各组结肠组织病理学变化;通过ELISA法测定各组小鼠血液中血清淀粉样蛋白酶A和结肠组织中IL-6的水平。以IL-6刺激分化的Caco-2细胞制备体外人肠上皮细胞炎症模型,通过Western blot检测UA对肠上皮细胞IL-6/STAT3信号通路中STAT3磷酸化的影响。结果:①与正常对照组比较,DSS模型组的DAI评分增加、结肠长度缩短和组织损伤明显,差异均具有统计学意义(P<0.05);与DSS模型组比较,UA显著抑制了DSS诱导的DAI评分增加、结肠长度缩短和组织学损伤,差异均具有统计学意义(P<0.05)。②与正常对照组比较,DSS模型组的血清淀粉酶(SAA)水平和结肠组织中IL-6水平升高明显,差异均具有统计学意义(P<0.05);与DSS模型组比较,UA可显著逆转DSS诱导的血清淀粉酶(SAA)水平和结肠IL-6水平的升高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。③与正常肠上皮细胞比较,IL-6刺激显著上调STAT3的磷酸化水平;而UA可显著抑制肠上皮细胞中IL-6诱导的STAT3磷酸化水平的增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:熊果酸可通过阻断IL-6/STAT3信号通路改善了DSS诱导的结肠炎,提示熊果酸在靶向治疗溃疡性结肠炎中可能具有临床应用潜力。     

美沙拉嗪对结肠炎大鼠肠黏膜完整性的影响

目的探讨美沙拉嗪对结肠炎大鼠肠黏膜完整性的影响。方法 40只SD大鼠随机分为正常对照组、结肠炎组、美沙拉嗪1组、美沙拉嗪2组,采用三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇法制备溃疡性结肠炎大鼠模型,观察其结肠黏膜病理改变及美沙拉嗪的治疗作用。结果三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇诱导大鼠结肠炎症状与人临床结肠炎病理特点类似。美沙拉嗪1组和2组能不同程度地修复结肠炎模型大鼠的结肠黏膜病理改变,且具有剂量依赖性。结论美沙拉嗪治疗结肠炎疗效确切,可改善TNBS诱导的结肠炎大鼠DAI、CMDI、TDI评分,上调结肠炎大鼠肠黏膜EGF、下调GFAP表达,促进损伤肠壁愈合。     

胸腺肽α1对C57BL/6结节病肉芽肿模型小鼠的疗效分析

目的：探讨胸腺肽α1（Tα1）对结节病肉芽肿的作用。方法：将25只C57BL/6小鼠随机分为2组：模型组15只,空白对照组10只。模型组用分枝杆菌过氧化物歧化酶多肽A (superoxide dismutase A ,Sod A) 诱导结节病;空白对照组给予等剂量的磷酸盐缓冲液（PBS）。建模开始第22天,每组随机取5只小鼠处死。第22～35天,将模型组剩余的10只小鼠随机分为模型组和给药组,每组5只。给药组每天给予10 μg Tα1腹腔注射;模型组、空白对照组每天给予0.5 mL PBS腹腔注射。建模开始第36天,处死小鼠,评价肺、淋巴结的组织学改变;免疫组化法检测肉芽肿中CD4+T细胞和巨噬细胞的改变;流式细胞术检测外周血辅助性T细胞（Th1）、Th2、Th17、调节性T细胞（Treg）、CD4/CD8,并采用ELISA法检测血浆、肺组织匀浆中白细胞介素17A（IL-17A）、IL-10水平。 结果：模型组小鼠可见肉芽肿性变,肉芽肿中存在巨噬细胞和CD4+T细胞浸润;给药组组织病理学改善。给药组、模型组小鼠外周血Th1及Th17比例升高（P<0.05）;各组外周血中Treg比例、Th2比例及CD4/CD8水平差异无统计学意义。模型组小鼠血浆IL-10水平降低（P<0.05）;模型组小鼠血浆IL-17A水平升高（P<0.05）。3组小鼠肺组织IL-10含量差异无统计学意义;模型组小鼠肺组织IL-17A含量升高（P<0.05）。 结论：Tα1能减轻结节病肉芽肿小鼠病情,Tα1的治疗效应可能与降低结节病肉芽肿小鼠中较高水平的Th17相关,但结论尚须验证。     

肠易激综合征患者Th细胞表型改变研究

目的 探讨肠易激综合征(IBS)患者结肠黏膜中Th1细胞因子,干扰素(IFN-r)与白细胞介素(IL)-12和Th2细胞因子IL-4与IL-10袁达的变化.方法 经结肠镜钳取60例IBS患者及20例对照组的升结肠、降结肠和直肠的黏膜标本,HE染色观察组织学表现.应用RT-PCR方法检测肠道各部位组织中IFN-r、IL-12、IL-4和IL-10的mRNA的表达量.结果 IBS患者结肠黏膜组织学表观与对照组比较无明显改善;腹泻型IBS患者升结肠、降结肠和直肠的黏膜Th1细胞因子IFN-r、IL-12的mRNA表达显著增高,IL-12的mRNA表达在直肠较对照组显著增高,升结肠、降结肠有升高趋势,但差异无显著性.Th2细胞因子IL-4mRNA的表达与对照组比较差异无显著性,IL-10mRNA的表达与对照组比较呈降低趋势,但差异无显著性.腹泻型IBS患者中感染后IBS(PI-IBS)和非感染后IBS Th1和Th2细胞因子的比较,PI-IBS中Th1细胞因子IFN-r mRNA的表达在升结肠、降结肠和直肠均显著高于对照组,IL-12 mRNA的表达在升结肠、直肠亦显著增高;Th2细胞因子IL-4与IL-10较对照组有下降趋势.非感染后IBS患者Th1和Th2细胞因子的表达较对照组差异无显著性.便秘型IBS患者Th1和Th2细胞因子的表达与对照组比较差异无显著性.结论腹泻型IBS患者结肠黏膜内存在Th1/Th2平衡飘移,Th1反应增强,感染因素可影响腹泻型Th平衡,为PI-IBS的治疗提供新方法.     

ERK1/2通过调控NADPH氧化酶和线粒体分裂在结肠炎中的作用

目的 研究细胞外信号调节激酶1和2(ERK1/2)通过调控NADPH氧化酶（Nox）和线粒体分裂在结肠炎中的作用。方法 3%葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导小鼠急性结肠炎。将30只C57BL/6J小鼠用随机数表法分为6组：Control组、3%DSS组、1%二甲亚砜（DMSO）组、ERK1/2抑制剂（PD98059）组、3%DSS+1%DMSO组、3%DSS+PD98059组，每组5只。评估Control组和3%DSS组小鼠体重变化、结肠长度改变、疾病活动指数和结肠组织病理学改变，检测小鼠结肠黏膜ERK1/2、磷酸化（p）-ERK1/2、Nox1和Nox2表达水平。1%DMSO组、3%DSS+1%DMSO组给予腹腔注射1%DMSO;PD98059组、3%DSS+PD98059组小鼠给予腹腔注射PD98059。评估4组小鼠结肠组织病理学改变，检测Nox1、Nox2、动力相关蛋白1(DRP1)、p-DRP1-S616和p-DRP1-S637等线粒体分裂相关蛋白表达水平的改变。透射电镜观察Control组和3%DSS组小鼠结肠上皮细胞线粒体分裂情况。免疫荧光双染分析2组小鼠结肠黏膜中Nox2与线粒...     

肠愈灌肠方对溃疡性结肠炎大鼠炎症相关因子及DOR、β-arrestin1、Bcl-2表达影响

目的:探讨肠愈灌肠方对溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis,UC)大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)及δ阿片受体(DOR)、β-抑制蛋白1(β-arrestin1)、Bcl-2表达的影响。方法:SD大鼠60只,随机分为正常组、模型组、肠愈灌肠方组和美沙拉嗪组,除正常组外,其余大鼠采用5%TNBS灌肠建立大鼠溃疡性结肠炎模型。肠愈灌肠方组、美沙拉嗪组分别予肠愈灌肠方药液和美沙拉嗪悬浊液灌肠,正常组和模型组给予蒸馏水灌肠,连续15d,第16d处死大鼠,取结肠标本。分别采用Elisa和Western Blotting法检测结肠组织中TNF-α、T GF-β1及DOR、β-arrestin1、Bcl-2蛋白的表达。结果:模型组大鼠体重下降、精神萎靡,出现不同程度的腹泻及便血,造模3d后DAI评分高于正常组(P0.01),大鼠结肠肠管变粗、肠壁增厚,黏膜水肿、充血。肠愈灌肠方能明显改善模型大鼠的结肠炎症损伤,与正常组比较,模型组的大鼠结肠黏膜组织抑炎因子TGF-β1显著降低(P0.01),炎症因子TNF-α及DOR、β-arrestin1、Bcl-2表达水平显著增高(P0.01);与模型组比较,肠愈灌肠方组与美沙拉嗪组抑炎因子TGFβ1明显升高(P0.01),炎症因子TNF-α及DOR、β-arrestin1、Bcl-2蛋白表达明显下降(P0.01,P0.05),但肠愈灌肠方组和美沙拉嗪组之间比较无显著差异。结论:在实验性溃疡性结肠炎大鼠结肠组织中抑炎因子TGF-β1减少,炎症因子TNF-α及DOR、β-arrestin1、Bcl-2的表达升高,炎症相关因子及DOR-β-arrestin1-Bcl-2信号转导通路可能参与了溃疡性结肠炎的发展过程,肠愈灌肠方对其改善作用的机制可能与调节该信号通路有关。     

Lnk基因敲除对葡聚糖硫酸钠诱导小鼠结肠炎的影响

目的比较Lnk基因敲除小鼠与野生型小鼠在葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导结肠炎后的表现。方法将周龄相近的C57BL/6小鼠分为野生型组(WT)、野生型小鼠结肠炎组(WT+DSS)、Lnk敲除鼠组(KO)和Lnk敲除鼠结肠炎组(KO+DSS)。WT和KO小鼠正常饮水,WT+DSS及KO+DSS组小鼠自由饮用2. 5%DSS水溶液。实验进行7 d,每日观察小鼠体质量变化、粪便软硬度及肠道出血情况,评估疾病活动指数(DAI)。7 d后取外周血,采用流式细胞技术检测WT小鼠和KO小鼠外周血中调节性B细胞(Breg)频率。处死小鼠,取肠观察外形、颜色,测量肠的长度。结肠组织制作为组织学切片,进行HE染色,显微镜下观察组织学改变。结果 WT和KO组小鼠排便正常,KO+DSS组小鼠与WT+DSS组小鼠较早出现腹泻及排血便情况。KO+DSS组小鼠的体质量在实验周期内较其他3组有显著降低,KO+DSS组DAI随时间显著增加。KO组Breg细胞频率显著低于WT组。KO+DSS组结肠明显变短,HE组织切片镜检糜烂出血、淤血,多病灶浅溃疡,炎性细胞浸润黏膜及黏膜下层并累及肌层,提示炎症反应加重。结论 Lnk缺失可加重DSS诱导的小鼠结肠炎表现,可能与Lnk KO小鼠体内Breg细胞频率降低、对炎症反应的负调控作用减弱有关。     

垂体肿瘤转化基因1通过调控肠上皮细胞焦亡在结肠炎症中的作用

目的 明确垂体肿瘤转化基因1(PTTG1)通过调控肠上皮细胞的焦亡水平在结肠炎症中的作用机制。方法 PTTG1野生型（WT）小鼠和PTTG1基因敲除（KO）小鼠各10只,随机分为4组,每组5只,分别为PTTG1 WT对照组（control组）和实验组（3%DSS组）,PTTG1 KO对照组和实验组。实验组小鼠自由饮用3%葡聚糖硫酸钠（DSS）6 d诱导急性实验性结肠炎,对照组给予无菌双蒸水。观察并记录各组小鼠的疾病活动指数（DAI）。收集小鼠结肠组织,用免疫组织化学和蛋白免疫印迹法检测焦亡相关蛋白NLRP3、ASC、GSDMD的表达水平。在人源结肠上皮细胞系（HcoEpic）中,通过shRNA沉默PTTG1的表达,TNF-α刺激细胞以诱导细胞炎症模型,检测GSDMD的表达水平。结果 DSS诱导的结肠炎小鼠结肠黏膜组织中PTTG1表达减少（P <0.01）,PTTG1敲除加重小鼠结肠炎症,PTTG1 KO实验组小鼠的结肠黏膜上皮焦亡相关蛋白表达水平上调（P <0.05）。在HcoEpic中沉默PTTG1的表达,TNF-α刺激后,细胞的GSDMD蛋白表达水平上调（P <0...     

八肽胆囊收缩素抑制脂多糖诱导急性肺损伤小鼠的炎症反应

目的探讨八肽胆囊收缩素(cholecystokinin octapeptide,CCK-8)对脂多糖(lipopo- lysaccharide,LPS)诱导急性肺损伤(acute lung injury,ALI)小鼠炎症反应的影响。方法复制LPS致ALI小鼠模型。实验动物随机分为生理盐水对照组、LPS组(腹腔注射LPS)、LPS CCK-8组(注射LPS前30 min腹腔注射CCK-8)及CCK-8组(单独注射CCK-8)。用酶联免疫吸附法(ELISA)及逆转录-聚合酶链反应(PT-PCR)检测不同时间点各组小鼠血清、肺组织中白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6的含量及mRNA表达情况。观察各组肺组织光镜病理改变。结果腹腔注射LPS可成功复制ALI小鼠模型,肺组织病理显示,在LPS组12h时可见肺间质充血、水肿,大量炎性症细胞浸润,腹腔预注射CCK-8可明显改善肺组织病理变化;腹腔注射LPS可使小鼠血清及肺组织中IL-1β、IL-6表达增加,分别于注射后2h及4h达到高峰,预先注入CCK-8可显著抑制IL-1β、IL-6的表达。结论CCK-8可能通过抑制ALI小鼠IL-1β、IL-6的表达参与抗炎反应过程,从而减轻LPS诱导的ALI小鼠肺组织炎症反应。     

二烯丙基三硫对急性肺损伤小鼠血清细胞因子IL-18的影响

目的：探讨二烯丙基三硫（DATS）对急性肺损伤小鼠血清IL-18的影响。方法：30只健康昆明小鼠,随机分为5组：（1）ALI组：腹腔注射大肠杆菌脂多糖（LPS）;（2）预防组：腹腔注射DATS 7 d后注射LPS;（3）治疗组：腹腔注射LPS后30 min注射DATS;（4）DATS组,腹腔注射DATS 7 d;（5）对照组：腹腔注射等量氯化钠溶液。光镜观察12 h点肺组织形态学改变。测定血清中IL-18在2 h和6 h含量。结果：DATS预防组肺泡间渗出及炎性细胞浸润较ALI组明显减轻。其血清中IL-18含量均明显低于ALI组（P〈0.01）。结论：预防性应用DATS可减轻LPS诱导的ALI小鼠肺组织炎症反应,及抑制LPS诱导的小鼠血清中炎性细胞因子IL-18的生成。     

温针联合温肠汤保留灌肠治疗脾肾阳虚型溃疡性结肠炎及其机制研究

目的观察温针联合温肠汤保留灌肠法对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎患者的治疗作用及对血清炎症因子水平的影响,探讨温针联合温肠汤保留灌肠治疗脾肾阳虚型溃疡性结肠炎的可能机制。方法选取符合脾肾阳虚型溃疡性结肠炎诊断标准的病例90例,随机分为灌肠组、温针组、温针联合灌肠组(联合组),分别进行相应治疗。观察各组患者黏膜愈合率,酶联免疫吸附法检测患者治疗前后血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、细胞粘附因子(ICAM-1)、白介素-10(IL-10)水平。结果联合组黏膜总有效率为100%,高于灌肠组86.6%及温针组46%;各组患者相应方法治疗后TNF-α、IL-6、IL-8、ICAM-1水平均显著低于治疗前,IL-10水平显著高于治疗前,差异有统计学意义(P0.05);联合组治疗后TNF-α、IL-6、IL-8、ICAM-1水平均显著低于灌肠组及温针组,IL-10水平显著高于灌肠组及温针组,差异有统计学意义(P0.05)。结论温针联合温肠汤保留灌肠法治疗脾肾阳虚型溃疡性结肠炎疗效优于单纯灌肠组及温针组,其机制可能与其降低TNF-α、IL-6、IL-8、ICAM-1水平、提高IL-10水平有关。     

脐带源间充质干细胞移植对慢性结肠炎小鼠环氧化酶2表达的影响

目的探讨人脐带源间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)移植对慢性实验性结肠炎小鼠肠黏膜炎症的治疗作用及其机制。方法 55只C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、右旋葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)+vehicle组(溶剂对照组)和DSS+hUC-MSCs组,其中正常对照组15只,其余两组各20只。通过饮用2%DSS建立慢性实验性结肠炎模型,DSS+hUC-MSCs组在造模第14天时经尾静脉注射1×106/200μl的hUC-MSCs,正常对照组与DSS+Vehicle组则给予等体积磷酸盐缓冲液(Phosphate BufferedSaline,PBS)作为对照,分别于hUC-MSCs移植后1、2和4周处死动物。结肠黏膜炎症改变的评估包括每天体质量改变、疾病活动指数(disease activity index,DAI)、结肠长度等指标,以及结肠形态学改变和组织病理学评分,同时应用免疫组织化学方法检测结肠组织中环氧化酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)的表达。结果与正常对照组比较,DSS+Vehicle组小鼠DAI、结肠形态学评分及结肠组织病理评分均显著增加(P<0.01),经过hUC-MSCs移植各项指标均显著降低(P<0.01);免疫组织化学染色显示DSS+Vehicle组较正常对照组小鼠结肠组织COX-2蛋白表达明显增加(移植1周0.387±0.013vs 0.065±0.015,移植2周0.548±0.037vs 0.065±0.015,移植4周0.606±0.034vs0.065±0.015,P<0.01),经过hUC-MSCs移植,结肠组织COX-2蛋白表达较DSS+Vehicle组明显降低(移植2周0.446±0.030vs 0.548±0.037,移植4周0.331±0.026vs 0.606±0.034,P<0.01)。结论 hUC-MSCs移植可减轻慢性结肠炎肠黏膜炎症,其机制可能与抑制结肠组织炎症因子COX-2表达有关。