济川煎对老龄小鼠老化相关酶的影响

1材料药品:中药饮片由黑龙江中医药大学第二附属医院提供。将中药饮片按济川煎方中药量的比例称重、混匀后,加14倍量水煎煮2次,每次1h,合并两次滤液,浓缩至150%浓度,备用。将六味地黄丸(由哈药集团世一堂制药厂生产,批号:0509164)水晶丸研成粉末,用蒸馏水配制成7.5%浓度的混悬液,备用。试剂:SOD、MDA和MAO测定试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。动物:雄性昆明小鼠40只,均由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。合格证号SYXD(黑)20050023。仪器:722型分光光度计、HP-2型紫外分光光度计均由上海光学仪器厂生产。2方法取体重38～42g雄…     

六味地黄汤、八味地黄汤调整小鼠腹腔巨噬细胞活性自由基的机理研究

小鼠水浸应激造成一定刺激后,腹腔巨噬细胞活性自由基产生亢进。六味地黄汤、八味地黄汤可抑制水浸应激与异丙肾上腺素所致的腹腔巨噬细胞活性自由基产生亢进。推测其作用机理可能与交感神经末梢所释放的儿茶酚胺类样物质有关。并提示中医补益方剂在提高机体免疫功能的同时还可抑制产生亢进的活性自由基。     

地黄饮子对快速老化小鼠SAMP8海马神经元凋亡相关蛋白影响的研究

目的观察地黄饮子对快速老化小鼠SAMP8海马神经元凋亡相关蛋白的影响,探讨地黄饮子治疗AD的作用机制。方法以快速老化小鼠SAMP8为研究对象,依据"补肾益髓,化痰行瘀,开窍醒神"的原则,给予地黄饮子灌胃,1次/d,连续灌胃28 d。采用免疫组化法观察地黄饮子对快速老化小鼠SAMP8小鼠海马组织凋亡相关蛋白bax、bcl-2及cyt-c的影响。结果与模型组比较,地黄饮子可降低快速老化小鼠bax、cyt-c的表达,提高bcl-2的表达。结论地黄饮子可改善SAMP8小鼠海马神经元的细胞凋亡情况。     

调心方对快速老化模型小鼠海马学习记忆有关基因表达的影响

目的：研究调心方对快速老化模型小鼠（senescence accelerated mouse,SAM)海马学习记忆有关基因表达的影响。方法：应用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）的方法，以β-actin为内参照，检测SAM海马盐皮质激素受体（MR），早老蛋白1（PS－1），早老蛋白2（PS－2），tau,APP,apoE及bcl-2等学习记忆有关基因表达水平的变化及调心方对其影响。实验中选用E2020为对照药物。结果：与同龄抗快速老化的R系（SAMR1）比较，5月龄快速老化亚系（SAMP8）海马MR，tau,PS-2,APP基因表达水平显著升高，apoE基因表达水平降低；而PS－1和bcl-2基因表达水平无明显变化；12月龄SAMP8海马MR,tau基因表达水平升高，bcl-2基因表达水平降低，而PS－1，PS－2，apoE,APP基因表达水平无明显变化。连续口服给予调心方对5月龄SAMP8海马MR，tau,apoE基因的异常表达具有纠正作用，对12月龄SAMP8海马MR,bcl-2基因的表达异常亦具有纠正作用。结论：连续口服给予调心方对5月龄及12月龄SAMP8海马学习记忆有关基因的异常表达有纠正或调节作用。     

调心方对快速老化模型小鼠学习记忆功能的改善作用

目的 :探讨调心方对快速老化模型小鼠 (senescenceacceleratedmice ,SAM )学习记忆行为的影响。方法 :采用跳台实验和水迷宫实验分别观察调心方对SAM被动回避反应能力和空间记忆能力的影响 ;采用小鼠自主活动仪测定其运动量。实验中选用E2 0 2 0为对照药物。结果 :跳台实验中 ,五月龄快速老化亚系SAM prone/8(SAMP8)的被动回避反应能力和空间记忆能力均较同龄SAM抗快速老化亚系SAM resistance/1(SAMR1)明显降低 ;运动量SAMP8较同龄SAMR1增高。连续口服调心方对SAMP8被动回避反应能力低下具有明显改善作用 ,但对其空间记忆能力无明显影响 ;大剂量 ( 6 9 4g/kg)给药组动物的运动量与对照组相比表现出减低的趋势。E2 0 2 0对SAMP8跳台学习记忆行为无改善作用 ,但对其空间记忆能力低下具有明显改善作用 ,对运动量无明显影响。结论 :连续口服调心方对 5月龄SAMP8被动性回避反应能力低下具有明显改善作用 ,提示其对衰老性学习记忆功能衰退具有改善作用。     

黄芪对自然衰老小鼠皮肤中ATP酶活力影响的实验研究

[目的]本项研究旨在观察黄芪提取波对自然衰老小鼠皮肤中ATP酶活力的影响,检测黄芪提取液在延缓小鼠皮肤自然衰老方面的作用。[方法]昆明种4月龄雌性小鼠12只作为青年对照组(A),18月龄雌性小鼠36只作为老年组,再随机分为3组,每组12只:老年空白对照组(B),老年阳性对照组(C),黄芪组(D)。用药30天,第31天处死动物并取材。[结果]与老年空白对照组(B)相比,黄芪组(D)小鼠皮肤组织中的ATP酶活力均明显升高(P<0.01)。[结论]中药黄芪提取液可以有效增加ATP酶的活性,达到延缓皮肤组织衰老的作用。     

百合地黄汤对抑郁模型小鼠脑内单胺类神经递质的影响

目的 :观察百合地黄汤对小鼠孤养加慢性温和不可预知应激(CUMS)抑郁模型的影响。 方法 :以孤养加慢性温和不可预知应激所致抑郁症小鼠为模型,灌服百合地黄汤21d,以荧光分光光度法测定脑组织中单胺类神经递质多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)含量。 结果 :与模型组相比,高剂量百合地黄汤可显著增加脑组织内单胺类神经递质DA,5-HT的含量( P <0.01);低剂量组能有效增加5-HT含量( P <0.05)。 结论 :百合地黄汤能显著增加脑组织内单胺类神经递质DA,5-HT含量。提示百合地黄汤有很好的抗抑郁作用,其机制可能是通过增加脑内单胺类递质含量来实现。     

绞股蓝总苷对老化小鼠脑中MAO和Na/K-ATP酶活性的影响

目的：研究绞股蓝总苷对老化小鼠脑中MAO和Na/K-ATP酶活性的影响。方法：采用连续眼球后注射D－半乳糖1个月,造成小鼠老模型,观察绞股蓝总苷对老化鼠脑中单胺氧化酶（MAO）和Na/K-ATP酶的活性影响。结果：老化小鼠可造成脑中MAO活性的升高和Na/K-ATP活力的降低,而绞股蓝总苷在造模型同时ig给药,每日剂量75和150mg/kg下,能逆转小鼠因老化而产生的上述二种酶活性的改变。结论：绞股蓝革能对抗老化小鼠因衰老引起的MAO和Na/K-ATP酶的活性改变,从生化酶学角度,进一步阐明绞股蓝总苷的抗衰老作用。     

六味地黄汤相关苷类单体对小鼠脾淋巴细胞增殖作用的研究

目的：研究六味地黄汤中芍药苷、薯蓣皂苷元、马钱苷、莫诺苷、桃叶珊瑚苷对小鼠T、B淋巴细胞增殖的影响。方法：制备脾淋巴细胞,MTT比色法检测不同浓度5种苷类单体单独作用及其与丝裂原（ConA、LPS）共同作用时对小鼠T、B淋巴细胞增殖作用的影响。结果：10-5M芍药苷能显著促进淋巴细胞增殖,对LPS诱导的B淋巴细胞增殖有明显的协同作用,10-7～10-6M芍药苷对ConA诱导的T淋巴细胞增殖有明显协同作用,与对照组比较有显著性差异（P〈0.01,P〈0.05）;薯蓣皂苷元有一定促进淋巴细胞增殖作用,但与对照组比较无显著性差异;10-7～10-5M马钱苷能显著促进淋巴细胞增殖,10-7M马钱苷对LPS诱导的B淋巴细胞增殖有显著协同作用,随剂量增加,增殖作用反而降低;10-7～10-5M莫诺苷能显著促进淋巴细胞增殖,对LPS诱导的B淋巴细胞增殖有明显的协同作用,对ConA诱导的T淋巴细胞增殖有明显协同作用,与对照组比较有显著性差异（P〈0.01）。10-7～10-5M桃叶珊瑚苷基本无促进淋巴细胞增殖作用1,0-5M桃叶珊瑚苷对LPS诱导的B淋巴细胞增殖有明显的协同作用,10-7～10-5M桃叶珊瑚苷对ConA诱导的T淋巴细胞增殖有明显协同作用,与对照组比较有显著性差异（P〈0.01,P〈0.05）。结论：六味地黄汤中5种苷类单体对T、B淋巴细胞均有不同程度增殖作用,莫诺苷作用最明显,马钱苷低剂量促进增殖,高剂量反而抑制。     

黄芪提取液对光老化无毛小鼠皮肤组织HYP MDA含量及SOD活力的影响

目的:实验旨在研究黄芪提取液是否具有抗皮肤光老化的作用及其机理。材料与方法:将昆明种无毛小鼠随机分成5组,除正常对照组外,模拟UV长期照射,造成皮肤光老化模型,给药组照射同时分别灌胃高、中、低剂量的黄芪提取液,模型组灌胃等剂量生理盐水。对其皮肤组织HYP含量、MDA含量、SOD活力进行测定,以40倍光镜观察真皮结构改变,结果:模型组无毛小鼠皮肤组织SOD活性明显降低,羟脯氨酸含量显著减少,MDA含量明显增加(P<0.05),病理切片呈现光老化状态。模型 黄芪高剂量组的皮肤羟脯氨酸及MDA含量与正常组无显著性差异。与模型组比较,模型 黄芪高剂量组对SOD活性有提高作用(P<0.05),模型 黄芪中剂量、模型 黄芪低剂量组可提高羟脯氨酸含量,降低MDA含量,并呈剂量依赖(分别是P<0.05,P<0.01)。结论:黄芪提取液对紫外线照射引起的无毛小鼠皮肤光老化具有保护作用。其机制可能是一方面黄芪本身具有清除自由基的作用;另一方面黄芪可以通过提高SOD活力来达到抗氧化的目的。     

六味地黄汤及其组方对小鼠血糖和肝糖元的影响

讨论了六味地黄汤及其组方的水煎剂对正常小鼠血糖和肝糖元的影响。三补、山茱萸加丹皮和山药加茯苓可降低血糖水平;全方、三补、熟地加泽泻及山茱萸加丹皮可增加肝糖元的含量。对六味地黄汤对糖代谢的影响及其配伍机理进行了初步的探讨。     

六味地黄汤对皮质酮所致小鼠下丘脑-垂体-卵巢轴紊乱的调节作用及其拆方研究

目的：研究比较六味地黄汤全方(LW)及其拆方三补(地黄、山茱萸、山药)和三泻(茯苓、泽泻、牡丹皮)对下丘脑-垂体-卵巢(HPO)轴的调节作用。方法：以肌肉注射外源性皮质酮(CORT)导致小鼠HPO轴功能紊乱为模型，用放射免疫分析法检测血清雌二醇浓度及下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)含量，用Western blot检测垂体促黄体生成素(LH)水平。结果：肌注CORT导致小鼠体重下降、卵巢重量减少，血清雌二醇、垂体LH及下丘脑GnRH水平下降，口服LW(5、10、15g／kg)对CORT所致的血清雌二醇、垂体LH及下丘脑GnRH水平下降具有不同程度的改善作用。LW及大、中剂量(9．6、6．4g／kg)三补对模型小鼠卵巢重量减轻的趋势无明显改善作用，而三泻及小剂量三补(3．2g／kg)却使小鼠卵巢重量进一步下降，单独应用三补和三泻对CORT处理小鼠血清雌二醇和垂体LH水平无明显调节作用。结论：外源性CORT导致小鼠HPO轴功能紊乱，LW对CORT所致的HPO轴功能紊乱具有改善作用，三补和三泻的作用不如LW，单独应用时存在产生不良反应的可能性。     

六味地黄汤和四物汤中诸元素的含量及煎出率

研究了六味地黄汤中和四物汤中各单味药的铜、锌、铁、钙、镁等元素的含量及煎出率,并与复方煎出率作了比较。实验结果表明,不同生药中诸元素的煎出率有很大差异,各生药中元素含量与煎剂中的含量不一定成正比。     

六味地黄汤中抗癌元素的研究

用荧光分光光度法测定了六味地黄汤中六味药材及煎剂,五种不同配伍的煎剂和全方煎剂的硒含量。结果表明,地黄对硒具有富集作用。硒在各药材通煎液中的溶出率约为30～40%。     

六味地黄汤对悬吊应激小鼠下丘脑-垂体-卵巢轴激素的影响

目的 :观察悬吊应激雌性小鼠下丘脑 垂体 卵巢 (HPO)轴功能的变化及六味地黄汤 (LW )对其影响。方法 :用悬吊方法应激雌性小鼠 (第 1～ 3d悬吊 30min ,以后每 3d增加 30min) ,建立动物HPO轴功能失常模型 ,用放射免疫分析法检测下丘脑促性腺激素释放激素 (GnRH)含量及血清雌二醇浓度 ,用Westernblot检测垂体促黄体生成素 (LH)水平。结果 :悬吊应激组小鼠体重下降 ,动情周期及动情间期延长 ,下丘脑GnRH、垂体LH水平下降 ,血清雌二醇浓度升高。口服LW对应激小鼠动情周期无明显影响 ,但能一定程度减少其体重的下降 ;同时 ,口服LW能显著提高应激小鼠下丘脑GnRH和垂体LH的水平 ,并能明显降低应激小鼠血清雌二醇的浓度。结论 :悬吊应激可导致雌性小鼠HPO轴功能紊乱 ,LW对应激小鼠HPO轴功能紊乱具有明显纠正作用     

六味地黄汤对雷公藤多甙损伤小鼠精子的影响

雄性小鼠灌胃雷公藤多甙２０、３０ｍｇ／ｋｇ,１４ｄ或２１ｄ均能引起精子损伤。六味地黄汤（剂量以ｇ生药／ｋｇ表示）以１５ｇ／ｋｇ或２５ｇ／ｋｇ灌胃能对抗雷公藤多甙以２０ｍｇ／ｋｇ灌胃１４ｄ所造成的精子损伤。通过对生育力的研究发现,雷公藤多甙以２０ｍｇ／ｋｇ灌胃雄性小鼠１４ｄ不能明显减少受孕雌性小鼠的只数,但能明显减少孕鼠的胎仔数。六味地黄汤分别以１５、２５ｇ／ｋｇ灌胃均能对抗雷公藤多甙降低胎仔数的作用。拆方研究表明：六味地黄汤全方与三泻（泽泻、丹皮、茯苓）、三补（熟地、山药、山茱萸）均有明显对抗雷公藤多甙损伤精子的作用。三泻与全方作用相当,而三补作用稍弱。     

六味地黄汤对大鼠巨噬细胞Ia抗原表达的影响

六味地黄汤能够明显提高正常大鼠腹腔Ｍψ表面Ｉａ抗原表达的阳性率，强度与阳性对照绵人参皂甙组相似，该方还能够使ＣＯＲＴ肌肉注射所致“阴虚”模型大鼠ＭψＩａ抗原表达率的抑制得以明显改善。方中三味补药六味地ＭψＩａ抗原表达的主要成功，三味泻药单用对正常及模型大鼠ＭψＩａ的抗原表达均无直接影响。但民三配伍后同能够提高其对ＭψＩａ抗原表达的阳性率。     

六味地黄汤对大鼠巨噬细胞Ia抗原表达的影响

六味地黄汤能够明显提高正常大鼠腹腔Ｍφ表面Ｉａ抗原表达的阳性率，强度与阳性对照的人参皂甙组相似；该方还能够使ＣＯＲＴ肌肉注射所致“阴虚”模型大鼠ＭφＩａ抗原表达率的抑制得以明显改善。方中三味补药是六味地黄汤促进ＭφＩａ抗原表达的主要成分，三味泻药单用对正常及模型大鼠的ＭφＩａ抗原表达均无直接影响，但与三补配伍后则能够明显提高其对ＭφＩａ抗原表达的阳性率