G-CSF对帕金森病小鼠运动能力和黑质纹状体神经元的影响

目的:探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致小鼠帕金森病(PD)模型中脑黑质致密部(SNpc)及纹状体(STR)多巴胺(DA)能神经元的影响。方法:正常健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、MPTP组及MPTP+G-CSF组,采用腹腔注射MPTP法制作小鼠PD模型,MPTP+G-CSF组于最后一次MPTP注射后再腹腔注射G-CSF。爬杆实验观察小鼠的行为学改变;尼氏染色技术观察各组小鼠黑质致密部神经元数量及形态学变化;免疫组织化学法检测酪氨酸羟化酶(TH)在各组小鼠中脑黑质致密部及纹状体的表达; Western Blot法检测各组小鼠中脑TH蛋白的表达量。结果:与对照组相比,MPTP组小鼠较对照组爬杆用时显著延长(P 0. 05),尼氏染色显示黑质致密部神经元数量显著减少(P 0. 05),黑质致密部、纹状体TH表达量显著减少(P 0. 05); MPTP+G-CSF组较MPTP组爬杆用时显著缩短(P 0. 05),神经元丢失减少(P 0. 05),神经元形态较完整;与MPTP组比较,MPTP+G-CSF组黑质致密部、纹状体TH表达水平显著增高(P 0. 05)。结论:G-CSF能够改善PD小鼠运动功能,减少黑质致密部多巴胺能神经元丢失,增加TH表达水平。     

丹酚酸B对帕金森病小鼠肠功能紊乱的保护作用及机制研究

目的：探讨丹酚酸B(SalB)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）诱导的帕金森病（PD）模型小鼠的肠道功能紊乱的保护作用及机制。方法：48只C57BL/6成年雄性小鼠随机分为正常对照组（Control组）、SalB对照组（SalB组）、模型组（MPTP组）、SalB治疗组（MPTP+SalB组）。腹腔注射MPTP构建PD小鼠模型,腹腔注射SalB治疗;采用爬杆实验检测小鼠行为;通过测定首粒黑便排出时间、小鼠粪便含水量评估小鼠肠道功能;免疫组化分析小鼠中脑黑质酪氨酸羟化酶（TH）阳性细胞数量、结肠Toll样受体4(TLR4)表达水平;HE染色组织切片观察小鼠结肠黏膜病理改变;免疫组化法测定小鼠黑质TH及结肠TLR4表达水平,ELISA法测定小鼠结肠组织中钙卫蛋白（CP）、TNF-α含量;Western blot检测小鼠中脑及结肠TH、结肠紧密连接蛋白（ZO-1）及TLR4/MyD88/NF-κB信号通路蛋白表达水平。结果：与正常对照组比较,模型组小鼠爬杆及转弯时间均明显增加,首粒黑便排出时间显著延长,粪便含水量明显减少;中脑TH阳性细胞数量明显减少,结肠TLR4阳性...     

血管活性肠肽在MPTP帕金森病模型小鼠的抗氧化应激作用

目的:研究血管活性肠肽(VIP)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)模型小鼠发挥抗氧化应激和神经保护作用。方法:雄性C57BL/6J小鼠随机分为生理盐水(NS)组、MPTP组和MPTP+VIP组。Elisa法检测纹状体丙二醛(MDA)以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的变化;免疫组织化学法观察中脑黑质纹状体系统酪氨酸羟化酶(TH)、星形胶质细胞特异性标记物胶质细胞纤维酸性蛋白(GFAP)和小胶质细胞标志物离子钙结合蛋白(Iba-1)的表达变化;透射电子显微镜观察中脑黑质多巴胺能神经元的超微结构变化。结果:MPTP组与对照组相比,MDA水平显著增高,SOD和CAT的表达显著降低;给予VIP可显著抑制MDA的水平(P0.01),增强SOD和CAT的表达(P0.05)。与对照组相比,MPTP组小鼠GFAP和Iba-1的表达明显上升,TH表达明显下降;给予VIP可显著降低GFAP和Iba-1的表达(P0.05),而TH表达明显增强。透射电镜观察显示:NS组神经细胞和细胞器结构清晰完整;MPTP组神经细胞核膜内陷,线粒体空泡样变;MPTP+VIP组神经细胞和细胞器结构基本正常。结论:VIP能够抑制MPTP诱导PD小鼠中脑黑质星形胶质细胞和小胶质细胞的活化,对抗氧化应激,发挥神经保护作用。     

氯胺酮对帕金森病小鼠模型α-突触核蛋白表达的影响

目的:观察氯胺酮(ketamine,Ket)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)诱导的帕金森病(Parkinson's disease,PD)小鼠模型黑质-纹状体区α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)异常表达的影响。方法:选取48只健康雄性小鼠随机分为3组:对照组(NaCl组)、模型组(MPTP组)和治疗组(MPTP+Ket组)。采用rotarod实验和gait analysis system评价3组小鼠行为学差异;免疫组化染色观察黑质区酪氨酸羟化酶阳性神经元数目变化;免疫荧光染色和Western blot检测小鼠脑黑质-纹状体区α-Syn的表达。结果:(1)Rotarod实验及gait analysis system结果显示,MPTP组较NaCl组转棒仪圈数减少,步距减小(P0.05),MPTP+Ket组较MPTP组转棒仪圈数增加,步距增宽(P0.05);(2)免疫组化及免疫荧光实验结果表明,MPTP组较NaCl组多巴胺能神经元数目减少,黑质-纹状体区荧光强度增加(P0.05),MPTP+Ket组较MPTP组多巴胺能神经元数目增多,荧光强度减少(P0.05);(3)Western blot实验结果显示,MPTP组较NaCl组黑质-纹状体区的α-Syn表达增多(P0.05),而MPTP+Ket组较MPTP组的α-Syn表达量减少(P0.05)。结论:氯胺酮对PD小鼠黑质-纹状体区α-Syn异常表达具有抑制作用。     

Exendin-4通过抑制Toll样受体4/核因子κB信号通路对帕金森病小鼠保护作用的研究

目的：探讨exendin-4对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）诱导的帕金森病（PD）小鼠的保护作用及机制。方法：将48只雄性C57BL/6小鼠随机分为空白对照（control）组、exendin-4组、MPTP组和MPTP+exendin-4组,每组12只。MPTP和MPTP+exendin-4组腹腔注射MPTP(30 mg/kg),每天1次,连续5 d建立亚急性PD小鼠模型,造模成功后,exendin-4组及MPTP+exendin-4组小鼠给予腹腔注射exendin-4(2.5μg/kg),每天2次,连续7 d治疗;选择爬杆实验和挂线实验评估小鼠行为学变化。采用Western blot法检测各组小鼠中脑酪氨酸羟化酶（TH）、离子钙结合接头分子1(Iba-1)、Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)和核因子κB(NF-κB)p65蛋白表达水平,免疫组化法测定各组小鼠中脑黑质TH及TLR4的表达水平;酶联免疫吸附法测定中脑肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平。结果：与对照组比较,MPTP组小鼠转头时间及爬杆时间延长（P...     

重组人核糖核酸酶抑制因子对小鼠脑内多巴胺能神经元的保护作用

目的:观察重组人核糖核酸酶抑制因子对小鼠脑内多巴胺能神经元保护作用。方法:将重组的pGEX-6p-1-hRI转化到大肠杆菌Rosetta表达菌中,并对产物提纯得到谷胱甘肽核糖核酸酶抑制因子(GST-RI),选取健康C57BL/6品系小鼠,随机分为5组:模型对照组皮下注射MPTP(溶于三蒸水,pH8.5)20mg/kg,连续8d;实验给药组(低剂量组腹腔注射GST-RI0.5mg/kg);高剂量组(腹腔注射GST-RI1.0mg/kg);空白给药组(腹腔注射GST1.0mg/kg)每日分别2次注射,连续13d,同时予MPTP造模;空白对照组给等量生理盐水。各组同时进行爬杆、悬挂行为学实验。实验结果后,动物断头取脑,取纹状体,应用高效液相色谱法(HPLC)测定小鼠左侧纹状体内多巴胺(DA)和高香草酸(HVA)的含量;免疫组织化学方法检测黑质酪氨酸羟化酶(TH)的免疫反应活性。结果:PD模型小鼠均出现不同程度的行为障碍,得分较空白对照组明显降低;而实验给药组小鼠得分则显著回升,以高剂量组尤为明显。TH免疫组化结果显示:与空白对照组比较,PD模型小鼠中脑黑质致密部TH免疫反应阳性神经元明显减少;实验组TH阳性神经元数目明显多于对照组.HPLC结果显示:PD模型小鼠较空白对照组明显降低,HVA/DA比值升高,给药组小鼠纹状体内DA和HVA含量明显恢复,高剂量组HVA/DA比值降至正常。结论:GST-RI对PD小鼠黑质DA能神经元的形态与功能具有明显的保护作用。     

京尼平苷对MPTP所致帕金森病小鼠模型的神经保护作用研究

目的:观察京尼平苷对MPTP帕金森病小鼠黑质多巴胺能神经元的保护作用和对帕金森病的治疗作用。方法:制作MPTP帕金森病小鼠模型,将C57BL/6小鼠随机分为四组:对照组、京尼平苷组、MPTP组、和治疗组(MPTP+Geniposide)。通过行为学实验(转棒实验、游泳试验)、TH免疫组化实验和TUNEL染色,观察京尼平苷对MPTP小鼠行为学、黑质多巴胺能神经元数目和凋亡细胞数目的影响。结果:MPTP组出现了典型的PD行为学改变,小鼠掉落潜伏期和游泳行为评分均低于对照组(P0.01),黑质致密部TH阳性细胞数目较对照组明显减少(P0.001),凋亡细胞数目明显增多(P0.001)。治疗组与MPTP组相比,能明显改善MPTP诱导的C57BL/6小鼠的行为学异常,小鼠掉落潜伏期明显延长(P0.01),游泳行为评分亦显著提高(P0.01),同时,TH阳性细胞数目明显增多(P0.001),凋亡细胞数目明显减少(P0.001)。结论:京尼平苷能够明显改善MPTP引起的小鼠行为学改变,并能够抑制小鼠黑质TH阳性神经元的减少和凋亡细胞的增加。提示京尼平苷对MPTP帕金森病小鼠DA能神经元具有神经保护效应,这种保护作用可能与京尼平苷的抗凋亡作用有关。     

小鼠肠道菌群失调与帕金森病发生发展的相关性研究

目的:探索肠道菌群失调与帕金森病的发生、发展的相关性,揭示帕金森病的发病起因。方法:雄性C57BL/6小鼠80只,随机分为A组(正常对照组:灌胃生理盐水和腹膜腔注射生理盐水)、B组(肠道菌群失调组:只灌胃头孢曲松CRO)、C组(仅腹膜腔注射MPTP)、D组(灌胃CRO+腹膜腔注射MPTP),每组20只。在肠道菌群失调基础上,长期小剂量给予MPTP制备帕金森病小鼠模型;进行爬杆、悬挂和滚轴实验通过组间对比评估运动行为学改变;通过分析盲肠指数、肠道菌落数和观察盲肠的组织学改变来确定肠道菌群失调;通过Western Blot及免疫荧光组织化学双染方法检测中脑黑质酪氨酸羟化酶(TH)、α-突触核蛋白的表达及寡聚化和纤维化程度。结果:悬挂实验、滚轴实验显示:C、D组在给药2周后,与A组相比均出现明显的运动行为学改变,随着给药时间的延长,这种趋势的改变更加明显,且具有统计学意义(P0.01);其中D组比C组的改变更加明显,两者之间有显著性差异(P0.01)。B组与正常对照A组相比,无显著性差异(P0.05)。爬杆实验各组与A组相比均无明显差异(P﹥0.05)。Western Blot结果显示:C组、D组与同窝对照A组相比,TH的表达均出现了随给药时间推移而改变的明显降低趋势(P0.01);且D组比C组的改变要早而显著(P0.05);α-突触核蛋白未检测出。免疫荧光组织化学双标染色结果亦显示:肠道菌群失调的PD模型与同窝对照组相比,黑质TH阳性神经元的数目明显下降(P0.01),但α-突触核蛋白未检测出。结论:肠道菌群失调可加剧MPTP诱导的帕金森病小鼠模型提前出现运动行为学改变,证明肠道菌群失调在帕金森病发生发展过程中扮演着重要角色。     

MPTP处理的SAMP8小鼠黑质纹状体损伤中血红素加氧酶-1的表达变化

目的:研究1-甲基-4-苯基-1、2、3、6-四氢吡啶(MPTP)诱导6月龄快速老化小鼠(SAMP8)黑质纹状体急性损伤,以及血红素加氧酶-1(HO-1)的表达变化,探讨其与MPTP导致的SAMP8小鼠黑质纹状体系统损害的关系.方法:给6月龄健康雄性SAMP8小鼠背部皮下注射MPTP 20mg/(kg·次),连续注射4次,每次间隔2h;对照组注射等量生理盐水.在注射后6h、24h、3d和8d处死小鼠留取脑组织标本,用免疫组织化学技术检测小鼠黑质、纹状体的酪氨酸羟化酶(TH)和HO-1,以计数黑质多巴胺能神经元数量及其投射纤维的改变,及HO-1阳性细胞的变化;用Western blot方法检测TH和HO-1蛋白表达的变化.结果:MPTP致6月龄SAMP8小鼠各时间点TH阳性神经元分别减少14.23％(P＜0.05),23.85％ (P＜0.01),36.77％ (P ＜0.01),45.9％(P＜O.01),24 h与3d比较有显著性差异(P＜0.05),神经元的丢失以24 h至3d最为显著;MPTP组随时间延长纹状体区酪氨酸羟化酶免疫反应阳性染色逐渐变浅淡,不均匀,于注射后24h明显,第8天最为浅淡;同时TH蛋白表达具有相同变化.但仅在注射后3d小鼠纹状体区见到大量HO-1阳性细胞,同时HO-1蛋白表达增高,具有统计学意义,其余各时间点及对照组未见HO-1阳性细胞.中脑区HO-1阳性细胞及蛋白表达在各时间点均未见显著变化.结论:MPTP导致6月龄SAMP8小鼠黑质纹状体系统急性损伤,产生多巴胺能神经元数量减少及蛋白表达降低;其黑质纹状体HO-1的高表达是一过性短暂的,它在PD中的作用是有限的.     

Genistein对Parkinson病模型小鼠黑质纹状体通路的保护作用

为了研究大豆异黄酮活性成分genistein对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)制备的去卵巢(OVX)Parkinson病(PD)模型小鼠黑质纹状体通路的保护作用,我们将OVX PD小鼠随机分为对照组、MPTP组、genistein预处理组和雌激素预处理组,采用免疫组织化学染色结合逆转录-聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测黑质致密带(SNpc)神经元酪氨酸羟化酶(TH)的表达情况,采用高效液相色谱法(HPLC-ECD)检测小鼠纹状体(Str)多巴胺(DA)及其代谢物二羟基苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)的含量。结果显示:Genistein及雌激素用药组SN内TH阳性神经元数量及THmRNA的表达水平较MPTP组显著升高(P<0.01)。MPTP组Str内DA及其代谢产物DOPAC和HVA的含量较对照组明显降低(P<0.01)。genistein及雌激素用药组Str内DA、DOPAC及HVA含量较MPTP组显著升高(P<0.01)。上述结果提示genistein对MPTP制备的PD模型小鼠黑质DA能神经元有明显的保护作用。     

Level of functioning of siblings and parents of probands of varying degrees of retardation

A further analysis of already published data supports the position that retardates of low ability level less frequently have retarded siblings, retarded parents, and parents low in occupational level than do retardates higher in ability level. The analysis supports the position that there are two types of retarded individuals, persons retarded as a result of gene or chromosomal anomalies, brain injury, etc., who more frequently occur in the lower-level retardate group, and persons whose retardation represents polygenic segregation, who more frequently occur in the higher-level group.     

Modes of Inheritance of Errors of Refraction

Eighteen families in which both parents had refractions within the range of +4·0 D to −4·0 D and axial lengths seen in emmetropia (22·3-26·0 mm) showed coefficients of correlation of the order 0·5 indicative of polygenic inheritance. Such coefficients were seen for axial length (0·407) and for the cornea (0·487), but not for the lens (which is known to be yoked to the axial length). No such coefficients were seen in 19 families in which one of the parents had axial length outside the emmetropic range (nine families with long axes and 10 with short axes).

The pattern of polygenic inheritance for emmetropia (completely correlated optical components) and errors of refraction up to 4·0 D (inadequately correlated components: correlation ametropia) follows that seen in stature and other measurable characters. In contrast the high refractive errors with their abnormal axial lengths (component ametropia) are—like the extremes in stature—pathological anomalies with monofactorial inheritance.