多药耐药相关蛋白在大肠癌中的表达及其临床意义

多药耐药（ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ,ＭＤＲ）的产生是大肠癌化疗失败的重要原因．已有研究表明ｍｄｒ１基因编码的Ｐｇｐ表达是大肠癌ＭＤＲ的机制之一［１］．最近发现的另一个ＭＤＲ相关蛋白－多药耐药相关蛋白（ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ,ＭＲＰ）,成为肿瘤耐药和逆转耐药的热点［２］．我们的初步研究显示,ＭＲＰ在胃肠癌组织中过度表达［３］,但目前国内未见其他有关大肠癌ＭＲＰ表达的报道．我们应用免疫组化方法研究ＭＲＰ在大肠癌中的表达情况,并进一步…     

胃癌组织DCC基因（VNTR）的杂合性丢失和Bcl—2蛋白的表达

目的：为了研究ＤＣＣ基因的杂合性丢失（ＬＯＨ）和Ｂｃｌ－２蛋白过度表达在胃癌发生中的作用，方法：采用ＰＣＲ方法及免疫组织化学技术检测了胃癌组织ＤＣＣ基因的ＬＯＨ和Ｂｃｌ－２蛋白的表达。结果：结果发现，胃癌（信息个体）ＬＯＨ发生率为５４５％（１８／３３），Ｂｃｌ－２蛋白表达阳性率为６０％（３０／５０）；ⅢⅣ期胃癌ＬＯＨ发生率（８２２％，１５／１８）显著高于ⅠⅡ期胃癌２０％，３／１５）（Ｐ＜００１）；Ｂｃｌ－２蛋白的表达与ＤＣＣ基因的ＬＯＨ及胃癌大小、分化、淋巴结转移、浆膜浸润、临床分期及Ｌａｔｌｒｅｎ’ｓ分型无显著相关。结论：以上结果提示，ＤＣＣ基因的ＬＯＨ和Ｂｃｌ－２蛋白的高表达均参与了胃癌的发生，ＤＣＣ基因的ＬＯＨ是胃癌发生的晚期事件，其致癌机制与Ｂｃｌ－２有所不同     

C-myc,Bcl-2与胃癌生物学行为和细胞凋亡

目的探讨癌基因Ｂｃｌ２，Ｃｍｙｃ的表达变化与胃癌生物学行为和细胞凋亡的关系．方法采用免疫组化ＬＳＡＢ法，检测６０例原发性胃癌组织（男３８例，女２２例，年龄３７岁～７５岁）癌基因Ｂｃｌ２，Ｃｍｙｃ蛋白的表达变化；在普通光学显微镜下对受检组织的ＨＥ片进行形态学测量和凋亡细胞计数．结果受检组织６０例中，Ｃｍｙｃ阳性表达３７例（６２％），其表达与分化程度和临床分期呈显著性相关，且Ｃｍｙｃ阳性组织细胞凋亡指数（０７±０３）明显高于阴性组织（０３±０２）；所检标本中，Ｂｃｌ２阳性表达率为６８％（４１／６０），其中高分化胃癌的阳性表达率明显高于低分化胃癌（３２％ｖｓ９％）（Ｐ＜００５），阳性Ｂｃｌ２组织与阴性Ｂｃｌ２组织比较，前者凋亡指数明显低于后者（０４±０３ｖｓ０９±０５）（Ｐ＜００５）．结论Ｃｍｙｃ与Ｂｃｌ２基因的异常表达是胃癌生物学行为的重要影响因素，二者在胃癌形成过程中均起着一定的作用，并对细胞增生与凋亡有重要调节作用．     

p53 C-myc和P-gp蛋白在胃癌细胞中表达

目的研究胃癌组织中ｐ５３和Ｃｍｙｃ的表达与多药耐药性（ＭＤＲ）的关系．方法应用ＬＳＡＢ免疫组织化学方法研究６７例（男４１例，女２６例，平均年龄４６±１５８岁）胃癌标本中ｐ５３，Ｃｍｙｃ和Ｐｇｐ的表达．结果本组胃癌中ｐ５３阳性３２例（４７８％），Ｃｍｙｃ阳性３７例（５５２％），Ｐｇｐ阳性３９例（５８２％）．淋巴结转移阳性胃癌ｐ５３阳性率（５６９％）和Ｃｍｙｃ阳性率（６４７％）显著高于淋巴结转移阴性的胃癌（Ｐ＜００５）．ｐ５３的异常表达与ｍｄｒ１基因表达呈显著正相关（ｒ＝０６３，Ｐ＜００５），而Ｃｍｙｃ和ｍｄｒ１的表达无明显相关．结论ｐ５３异常表达可增加ｍｄｒ１基因的表达，从而使胃癌细胞获得ＭＤＲ表型     

硒对慢性乙型肝炎患者PBMC功能的影响

乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染慢性化的机制十分复杂,细胞免疫功能紊乱,尤其是白介素２（ＩＬ２）及其受体（ＩＬ２Ｒ）系统异常被认为是主要原因之一,但目前尚无十分肯定的治疗方法［１］．Ｒｏｙｅｔａｌ［２］研究表明,微量元素硒能增强小鼠脾细胞增殖及ＩＬ２Ｒ的表达,可作为免疫调节剂用于肿瘤的治疗．故我们观察硒对慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）ＩＬ２分泌水平及ＩＬ２Ｒ表达阳性细胞百分率的影响,探讨补硒治疗慢性乙型肝炎的可能性．１　材料和方法１．１　材料　慢性乙型肝炎患者３６例,均为本院１…     

胃癌组织mdr1基因表达的临床意义

目的探讨多药耐药基因（ｍｄｒ１基因）在人胃癌组织中的表达及其与临床病理的关系．方法应用ＲＴＰＣＲ法检测了２９例手术切除人胃癌组织中的ｍｄｒ１ｍＲＮＡ．术前未用过化疗．结果ｍｄｒ１ｍＲＮＡ的阳性率为４８３％（１４／２９）,ｍｄｒ１ｍＲＮＡ的表达在肿瘤浸润浆膜者为３３３％（７／２１）,明显低于未浸润浆膜者（７／８）,基因的表达与年龄、性别、肿瘤大小、组织学类型、淋巴结转移及ＴＮＭ分期等无关．结论化疗前胃癌组织中ｍｄｒ１基因即存在较高的表达率,这为选用化疗药物和ＭＤＲ逆转剂提供了参考指标．ｍｄｒ１ｍＲＮＡ表达减少似与肿瘤进展相关．     

大肠癌跨膜糖蛋白的表达及其生物学意义

大肠癌是最常见恶性肿瘤之一。肿瘤多药耐药现象（ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，ＭＤＲ）是近年来基础及临床肿瘤学科研究热点之一，ＭＤＲ是指肿瘤细胞对结构功能作用机制各不相同的多种抗肿瘤药物产生交叉耐药。现已证实人类肿瘤ＭＤＲ主要是由ｍｄｒ１基因编码的跨膜糖蛋白Ｐｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ（Ｐｇｐ）引起的，Ｐｇｐ由ＡＴＰ供能能主动地将细胞内药物泵至细胞外，使细胞内药物蓄积下降，导致化学治疗失败［１］。本文采用免疫组化法研究国人大肠癌组织Ｐｇｐ表达情况及其与病者年龄性别、肿瘤大小形态及Ｄｕｋ…     

卵蛋白致敏豚鼠外周血淋巴细胞凋亡及凋亡相关基因蛋白的表达

Ｔ淋巴细胞在哮喘气道炎症的发生和发展中起枢纽作用。哮喘时激活的Ｔ淋巴细胞增加［１］,白细胞介素３（ＩＬ３）、ＩＬ５、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子ｍＲＮＡ（ＧＭＣＳＦｍＲＮＡ）表达增强,除了抗原反复刺激外,与Ｔ淋巴细胞凋亡障碍,生存时间延长可能也有一定的关系。目前,已证实凋亡的发生是受基因控制,发现了许多与凋亡有关的基因。我们的实验观察了哮喘豚鼠外周血淋巴细胞的凋亡及其相关基因Ｂ细胞淋巴瘤（ｂｃｌ２）、白细胞介素１β转化酶（ＩＣＥ）的表达。材料与方法　哮喘豚鼠模型：雄性豚鼠４００～５００…     

原位PCR技术检测胃癌胃粘膜中Hp cag A感染

幽门螺杆菌（Ｈｐ）与胃癌发生的关系日益受到广泛的重视。目前随着对Ｈｐ研究的逐步深入,有关Ｈｐ细胞毒素相关基因Ａ（ＣｙｔｏｔｏｘｉｎａｓｓｏｃｉａｔｅｄｇｅｎｅＡ,ｃａｇＡ）与胃癌关系的研究已成为当前的热点［１］。本文采用原位ＰＣＲ技术研究ＨｐｃａｇＡ感染与胃癌发生的相关性。材料和方法选自１９９７年经病理诊断的６９例患者病变胃粘膜,包括慢性浅表性胃炎３０例,胃癌３９例。两组间性别、年龄差异无显著性。ＨｐｃａｇＡ引物设计参照文献［２］,由上海生工生物工程有限公司合成。引物序列：１：５′ＧＡＴＡＡＣ…     

溃疡性结肠炎患者淋巴细胞凋亡调控蛋白的表达

溃疡性结肠炎（ＵＣ）的病因和发病机制尚未完全阐明,已知免疫功能紊乱在ＵＣ发病机制中有重要作用［１－３］,但对发生免疫功能紊乱的基因调控机制以及皮质激素对参与ＵＣ免疫调控基因表达的影响还不了解,由于淋巴细胞凋亡发生异常是导致免疫紊乱和一些疾病发生的重要原因［４－７］,为此,我们应用免疫荧光标记和流式细胞技术动态分析了调控淋巴细胞凋亡的３个关键性蛋白ＣＤ９５（Ａｐｏ－１／Ｆａｓ）,Ａｐｏ－２－７,Ｂｃｌ－２在ＵＣ患者外周血淋巴细胞（ＰＢＬＣ）中的表达如下．１　材料和方法１．１　材料　ＵＣ患者３４例,…     

DNA聚合酶a反义寡聚脱氧核苷酸抑制人胃癌细胞生长的研究

肿瘤的特异性治疗一直是医学上的难题，常规的化疗药物对肿瘤的治疗效果不满意，而且副反应明显．近年来，应用人工合成的反义寡聚脱氧核苷酸（ａｎｔｉｓｅｎｓｅｏｌｉｇｏｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ，ＡＳＯＤＮ）与靶基因或ｍＲＮＡ特异性互补结合，通过抑制与肿瘤发生及发展密切相关的基因产物的表达而达到特异性治疗目的［１，２］．我们设计并合成了互补于ＤＮＡ聚合酶ａ（ＤＮＡｐｏｌｙｍｅｒａｓｅａ，ＤＮＡｐｏｌａ）的ＡＳＯＤＮ，作用于人胃癌细胞系ＳＧＣ７９０１和ＭＧＣ８０３，并用正常人脐静脉内皮细胞（Ｈ…     

急性白血病bcl-2、p53基因蛋白细胞表达水平及与化疗效果的关系

为探讨ｂｃｌ－２、ｐ５３基因蛋白在急性白血病（ＡＬ）细胞表达水平、相互关系及对化疗药耐受的影响，采用免疫组化方法检测ｂｃｌ－２及ｐ５３蛋白阳性水平，临床及体外实验以细胞凋亡为指标观察ｂｃｌ－２蛋白与ＡＬ对ＤＮＲ的耐受。结果：ｐ５３和ｂｃｌ－２蛋白在４６例ＡＬ细胞的阳性率分别为２１７％和６３０％（Ｐ＞００５），与细胞类型、病情有关。ｂｃｌ－２阳性在耐药组多于在缓解组（８８５％、３５０％，Ｐ＜００１）。两种蛋白均阳性的８例均不缓解，均阴性者的缓解率为１１／１３。１例ｂｃｌ－２低表达ＡＬ细胞与ＤＮＲ（１０ｍｇ／Ｌ）共育后有明显的细胞凋亡，４例高表达者加大药物剂量才发生。结果提示，成人ＡＬ细胞有ｂｃｌ－２和ｐ５３蛋白异常表达，且与ＡＬ类型、病情及耐药有关，联合检测基因蛋白更有助于对化疗效果的预测。克服ｂｃｌ－２所致的耐药应设法下调ｂｃｌ－２的表达     

人结肠癌HCT_（V2000）细胞系耐药机制的初步研究

目的研究人结肠癌耐药细胞系的耐药机制．方法采用抗Ｐ糖蛋白单抗ＪＳＢ１和ＭＲＫ１６以免疫细胞化学染色法（ＡＢＣ）检测ＨＣＴＶ２０００及亲本ＨＣＴ８细胞的Ｐ糖蛋白表达；提取两种细胞的ＤＮＡ和ＲＮＡ，与探针ＰＨＤＲ５Ａ杂交检测耐药基因ｍｄｒ１的表达和扩增；ＭＴＴ法测定ＶＣＲ对两种细胞的细胞毒作用．结果细胞系ＨＣＴＶ２０００对抗Ｐ糖蛋白单抗呈阳性反应，编码Ｐ糖蛋白的多药耐药基因ｍｄｒ１过度表达，但未见扩增或重排．异博定（１０μｇ／ｍｌ）使ＨＣＴｖ２０００细胞内３ＨＶＣＲ蓄积增加将近４倍，对ＶＣＲ的敏感性提高８４倍，可部分逆转耐药．结论多药耐药基因ｍｄｒ１ｍＲＮＡ过度表达是ＨＣＴＶ２０００细胞耐药的重要原因，但还有其他机制参与     

胰腺癌Bcl-2,P53蛋白表达和细胞凋亡

目的　探讨ｂｃｌ２ ,ｐ５３ 基因和细胞凋亡在胰腺癌发病机制中的作用以及它们之间相互关系．方法　应用ＡＢＣ 免疫组化技术检测５０ 例胰腺癌中Ｂｃｌ２ 和Ｐ５３ 蛋白表达,运用原位末端标记法观察肿瘤中细胞凋亡数量．结果　Ｐ５３ 蛋白表达阳性率为５４ ％ ,临床Ⅰ期阳性率（２６－７ ％ ）却显著低于Ⅱ期（６１－１ ％ ） 和Ⅲ＋ Ⅳ期（７０－６ ％ ,Ｐ＜ ０－０５） ;Ｂｃｌ２蛋白表达阳性率为６４ ％ ,临床Ⅰ期阳性率（９３－３ ％ ） ,显著高于Ⅱ期（５５－６ ％ ） 和Ⅲ＋ Ⅳ期（４７－１ ％ ,Ｐ＜ ０－０５） ;组织学Ⅲ级癌细胞中凋亡指数明显高于Ⅰ,Ⅱ级（ Ｐ＜ ０－０５） ,Ｂｃｌ２ 蛋白阴性病例中凋亡指数明显高于Ｂｃｌ２ 阳性者（ Ｐ＜ ０－０１） ．结论　Ｂｃｌ２ 是通过抑制细胞凋亡参与肿瘤的生长过程,Ｂｃｌ２和Ｐ５３ 蛋白表达之间 存在密切负相关（τ＝ － ０－１７４７ ,Ｐ＜ ０－０５） ．     

HLA-DR-DQ连锁基因单倍体与成人缓慢进展型和速发型1型糖尿病的相关性研究

目的探讨ＨＬＡＤＲＤＱ连锁基因单倍体与成人缓慢进展型１型糖尿病（ＳＰＩＤＤＭ）和速发型１型糖尿病（ＦＰＩＤＤＭ）的相关性。方法利用ＰＣＲ／ＳＳＰ技术检测了５２例ＳＰＩＤＤＭ患者、３０例ＦＰＩＤＤＭ患者和１３０例正常人的ＨＬＡＤＲＤＱ连锁基因频率。结果①ＨＬＡＤＱＡ１０３０１ＤＱＢ１０２０１和ＤＱＡ１０５０１ＤＱＢ１０２０１连锁基因单倍体与ＳＰＩＤＤＭ（Ｐｃ＜０．００１）和ＦＰＩＤＤＭ（Ｐｃ＜０．００１）均呈显著正相关；②ＨＬＡＤＱＡ１０３０１ＤＱＢ１０３０１和ＤＱＡ１０３０１ＤＱＢ１０６０２连锁基因单倍体与ＳＰＩＤＤＭ呈显著正相关（Ｐｃ＜０．００１）；③ＨＬＡＤＱＡ１０３０１ＤＱＢ１０３０２，ＤＱＡ１０３０１ＤＱＢ１０３０３及ＤＲＢ１０３０１ＤＱＡ１０３０１ＤＱＢ１０２０１连锁基因单倍体与ＦＰＩＤＤＭ呈显著正相关（前二者Ｐｃ＜０．０１，后者Ｐｃ＜０．００１）。结论ＳＰＩＤＤＭ和ＦＰＩＤＤＭ虽然均为自身免疫性糖尿病，但其ＨＬＡ表型并不完全相同，不同的ＨＬＡ表型可能是决定患者起病方式及病情发展不同的因素之一。     

胆囊肿瘤组织中细胞凋亡及bcl-2基因的研究

目的探讨细胞凋亡及其调控基因ｂｃｌ２在胆囊癌发生发展中的作用．方法用原位末端标记法（ＩＳＥＬ）和免疫组化ＡＢＣ法对２４例胆囊癌和１６例胆囊腺瘤中的凋亡细胞及其调控基因ｂｃｌ２的表达产物进行了检测．同时观察胆囊癌中的调亡细胞与胆囊癌病理类型、分化程度和浸润转移的关系，分析ｂｃｌ２基因对细胞凋亡的调控作用．结果胆囊癌、胆囊腺瘤中的细胞凋亡发生率分别为１００％和５６％；胆囊癌中的凋亡细胞数明显高于胆囊腺瘤（χ２＝３６１１１，Ｐ＜００１）；低分化腺癌及Ｎｅｖｉｎ分期Ｓ１～Ｓ３胆囊癌中的凋亡细胞数明显高于高分化及Ｎｅｖｉｎ分期Ｓ４，Ｓ５者（χ２＝１９０５１，Ｐ＜００１）．高分化腺癌中的凋亡细胞多呈点状分布，低分化腺癌及转移性胆囊癌中的凋亡细胞呈片状或块状分布．ｂｃｌ２基因在胆囊癌和胆囊腺瘤中的表达无显著差异（χ２＝１１１１，Ｐ＞００５）．在胆囊癌中，ｂｃｌ２产物阳性表达与细胞凋亡密切相关（χ２＝１１８２，Ｐ＜００１）．结论细胞凋亡ｂｃｌ２基因在胆囊癌发生发展中起重要作用     

幽门螺杆菌cagA基因株与胃癌p53,bcl—2表达的研究

目的　通过研究幽门螺杆菌（Ｈｐ）及细胞毒蛋白相关基因Ａ 株〔ｃａｇＡ（＋ ）株〕感染与胃癌组织ｐ５３、ｂｃｌ２ 表达的相互关系，以探讨Ｈｐ 的可能致癌机制。　方法　聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测９２ 例胃癌和２４ 例浅表胃炎组织石蜡标本Ｈｐ 和ｃａｇＡ（＋ ）株感染。用免疫组化方法检测全部标本的ｐ５３、ｂｃｌ２ 表达。　结果　（１）Ｈｐ 感染在胃癌和浅表胃炎病例间差异无显著性（７９４％ 及６６７％ ，Ｐ＞ ００５），而ｃａｇＡ（＋ ）株感染前者高于后者（９３２％ 及５００％ ，Ｐ＜ ００１）；（２）ｐ５３、ｂｃｌ２ 的表达在Ｈｐ（＋ ）与Ｈｐ（－ ）组之间差异无显著性，而ｃａｇＡ（＋ ）株感染组均显著高于ｃａｇＡ（－ ）株组（Ｐ＜００１）。　结论　胃癌的发生可能与不同Ｈｐ 菌株感染有关。产生细胞毒素的Ｈｐ 菌株〔ｃａｇＡ（＋ ）株〕与胃癌关系更密切，它可能是导致ｐ５３ 基因突变和ｂｃｌ２基因过度表达的原因之一。     

胃舒胶囊治疗慢性萎缩性胃炎癌前病变的临床研究

慢性萎缩性胃炎（ＣＡＧ）伴肠上皮化生（ＩＭ）和（或）异型增生（Ｄｙｓ）是胃癌的癌前病变（ｐｒｅｃａｎｃｅｒｏｕｓｌｅｓｉｏｎｓ）［１］,为目前的研究重点．１９９５０８以来我们开展了胃舒胶囊治疗慢性萎缩性胃炎癌前病变的临床研究,总结如下．１　材料和方法１．１　材料　参照１９８２１０重庆全国胃炎诊治座谈会制定的《慢性胃炎的分类及纤维内镜诊断标准及萎缩性胃炎的病理诊断标准》（试行方案）［２］及１９８９１１中国中西医结合研究会消化系统疾病专业委员会南昌会议制定的《慢性胃炎中西医结合诊断、辨证和疗效…     

BCL—2,Fas基因蛋白在胃癌及癌前病变组织中的表达

探讨基因蛋白ｂｃｌ－２,Ｆａｓ的表达变化与胃癌及癌前病变之间的关系。方法采用免疫组化ＳＰ法,分别检测浅表性胃炎组织２０例,萎缩性胃炎３２例,肠化生３２例,胃癌３６例基因蛋白ｂｅｌ－２,Ｆａｓ的表达变化。结果Ｆａｓ基因蛋白的表达,浅表性胃炎组６５％（１３／２０）较肠化生组２１．８％（７／３２）及胃癌组１９．６％７／３６）明显增高（Ｐ＜０．００５）;ｂｃｌ－２基因蛋白表达,胃癌组织３３．３％（１２／３６）,其中高一中分化腺癌阳性表达５６．２５％（９／１６）较低分化腺癌１６．６％（２／１２）及未分化癌１２．５％（１／８）明显增高（Ｐ＜０．０５）,浅表性胃炎组无回例表达;胃炎与胃癌组之间Ｆａｓ和ｂｃｌ－２表达呈负相关,两者比较有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。结论ｂｃｌ－２基因的异常表达对胃癌及癌前病变的形成发挥一定作用;Ｆａｓ基因的过度表达诱导胃炎发生,而弱表达又为胃粘膜细胞癌变提供了条件;ｂｃｌ－２与Ｆａｓ基因的表达失衡可能与胃癌的发生有关。     

Cx32在胃癌中的表达

连接蛋白基因（Ｃｏｎｎｅｘｉｎｇｅｎｅ）是一个多基因家族,目前研究较多的有Ｃｘ３２,Ｃｘ４３,Ｃｘ３７等．我们采用ＲＴＰＣＲ及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交技术研究Ｃｘ３２基因在胃癌中的表达．１　材料和方法１．１　材料　３０例未经过放疗或化疗确诊为胃癌的手术标本及配对癌旁组织,正常组织,冻存于液氮中,其中２４例为低分化腺癌,４例印戒细胞癌,２例高分化腺癌．Ｃｘ３２基因ＰＣＲ引物及内对照ＧＡＰＤＨ引物由中科院上海细胞生物学研究所合成．Ｃｘ３２,ＰＣＲ引物：正义链：５＇ＡＡＣＴＧＧＡＣＡＧＧＴＣＴＡＴＡＣ…