CIK细胞与LAK细胞对Lewis肺癌小鼠的抑瘤作用

目的观察CIK(cytokinc induced Killer)细胞及LAK(1ymphokine activated killer)细胞对Lewis肺癌小鼠的抑瘤作用。方法建立Lewis肺癌小鼠动物模型，静脉输入CIK细胞做抗肿瘤治疗，同时设LAK对照，用同位素法检测经治疗后荷瘤鼠T细胞增殖及NK细胞毒活性。结果CIK细胞对Lewis肺癌小鼠的抗肿瘤作用显著强于LAK细胞。结论CIK细胞对Lewis肺癌小鼠有明显的抗肿瘤作用，并且优于LAK细胞。     

榄香稀对肺癌细胞凋亡的影响

目的:研究榄香稀对肺癌细胞的凋亡作用。方法:采用MTT法和Annexin V/PI法检测榄香稀和顺铂作用于肺癌A549细胞株的毒性和凋亡情况,比较榄香稀和顺铂诱导凋亡的差异。结果:榄香稀细胞半数毒性浓度为102.21μg/m1,榄香稀具有细胞毒性,且呈量效关系,但弱于顺铂;榄香稀和顺铂均能促进肺癌A549细胞凋亡,两者间无明显差异。结论:榄香稀可有效诱导肺癌细胞凋亡,对临床用药具有指导意义。     

CIK细胞对人肺腺癌AS49／DDP耐药细胞株的抗增殖及诱导凋亡形态学研究

目的研究多种细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）对A549／DDP肺癌耐药细胞株的抗增殖和诱导凋亡作用。方法应用细胞计数法设计细胞浓度,通过相差显微镜下观察CIK细胞对A549／DDP肺癌耐药细胞株形态学影响。结果随着CIK细胞与肺癌细胞效靶比增加及作用时间延长,抑制率明显增强,CIK细胞作用于肺癌细胞24h后,形态学观察肺癌细胞发生凋亡或坏死。结论体外制备的CIK细胞对肺癌耐药细胞株A549／DDP具有抑制增殖和促进凋亡作用。     

CIK细胞过继免疫治疗肺癌的护理体会

目的探讨CIK细胞过继免疫治疗肺癌的护理方法选取我院2011年1月至2012年11月30采取CIK细胞治疗肺癌患者60例,按常规方法采集细胞,分离培养,12～15d收获。采用CIK细胞静脉输注治疗,严格遵守回输各项操作规程,观察其疗效及不良反应,并采取相应的护理措施。结果 CIK细胞过继性免疫治疗是治疗肿瘤的一个重要方法,它能改善患者的临床症状,高提生活质量。结论护理质量是影响细胞免疫疗效的重要因素,给予全方位的护理,能够确保治疗有效的进行。     

CIK维持治疗对中晚期肺癌患者生存质量的影响

目的探讨CIK维持治疗对中晚期肺癌患者生存质量的影响。方法将76例中晚期非小细胞肺癌患者随机分为两组,对照组实施TP方案化疗,观察组实施TP化疗+CIK维持治疗,治疗2周期后观察疗效,并采用EORTC-QLQ-C30量表评价患者生存质量。结果观察组总缓解率高于对照组(P<0.05);治疗后观察组CD3+、CD4+T细胞及CD4+/CD8+高于治疗前及对照组(P<0.05);观察组躯体、情绪、认知、社会功能及整体生活质量评分均高于对照组(P<0.05)。结论中晚期肺癌患者在常规化疗基础上,实施CIK维持治疗可改善患者生存质量。     

厚朴酚对人小细胞肺癌H446细胞凋亡的影响

目的研究厚朴酚对H446细胞凋亡的影响。方法倒置显微镜观察细胞的形态学改变,流式细胞分析技术测定亚二倍体峰。结果厚朴酚可明显诱导H446细胞凋亡,形态学观察可见凋亡小体的形成,流式分析提示亚二倍体峰出现。结论厚朴酚可诱导H446细胞凋亡。     

绿原酸对Lewis肺癌小鼠及人A549肺癌的实验研究

目的 研究绿原酸对肺癌的影响及联合用药后对化疗药物的增敏作用.方法 采用MTT法研究绿原酸对人肺癌A549细胞增殖的影响,绿原酸对移植瘤的影响及对化疗药物的增敏作用.结果 绿原酸对人肺癌A549细胞增殖无影响,对Docetaxel(1.6 μg·mL-1)无增敏作用;对A549肺癌有一定抑制趋势,可明显抑制Lewis肺癌的生长;联合用药在一定程度上可提高抗肿瘤作用,但对化疗药物的抗肿瘤作用无协同性.结论 绿原酸对人肺癌A549细胞无细胞毒作用;对A549肺癌无明显抑制作用,但可明显抑制Lewis肺癌的生长,联合阿霉素用药对抗肿瘤无增敏作用.     

加热诱导肺癌细胞凋亡的体外实验研究

目的:探讨同一温度不同时间和同一时间不同温度加热对凋亡坏死、survivin、caspase基因表达的影响及其作用机制.方法:对数生长期肺癌A549细胞.分别在同一温度不同时间和同一时间不同温度加热,用流式细胞仪检测细胞凋亡百分比和坏死百分比,用RT-PCR检测survivin和caspase基因的表达.结果:加热后细胞凋亡增加,加热温度42℃和加热时间2h最为明显.随加热温度升高和加热时间增加坏死增加.加热明显加强Casepase-3的表达和降低Survivin的表达,且42℃加热不同时间时,2h效果最明显,不同温度加热1h时42℃效果最明显.结论:(1)加热能明显抑制肺癌细胞生长,促进肺癌细胞的凋亡.(2)加热明显增强Casepase-3的表达和降低Survivin的表达,从而促进肺癌细胞的凋亡.(3)加热温度42℃、加热时间2h为肺癌细胞热疗的最佳条件.     

自体 CIK 细胞联合化疗二线治疗晚期非小细胞肺癌疗效观察

目的：观察自体细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）联合培美曲塞二线治疗晚期非小细胞肺癌的疗效。方法回顾性分析经病理学确诊的晚期非小细胞肺癌患者71例,一线化疗后复发或进展。随机分为2组,治疗组35例,采用 CIK 细胞联合培美曲塞单药化疗。患者每1个化疗周期结束后序贯1个周期的自体 CIK 细胞回输为1个疗程治疗,连续2个疗程;对照组36例,采用单药培美曲塞化疗,疗程为2周期。治疗结束后对2组的近期疗效、免疫功能、不良反应进行评价。结果治疗组客观缓解率（ORR）为48．57％,对照组为41．67％,差异无统计学意义（P ＞0．05）;治疗组疾病控制率（DCR）为85．71％,对照组为63．89％,差异有统计学意义（P ＜0．05）。治疗组 T 细胞亚群CD ＋3、CD ＋4、CD56升高,CD ＋4／CD ＋8比值上升,差异有统计学意义（P ＜0．05）;CD ＋8治疗前后变化不大（P ＞0．05）。在不良反应方面,治疗组白细胞减少、血红蛋白减少和胃肠反应发生率明显低于对照组,差异有统计学意义（P ＜0．05）。结论自体 CIK 细胞回输安全,副作用小,与培美曲塞联合二线治疗晚期非小细胞肺癌可以提高近期疗效,减轻化疗不良反应,提高患者免疫功能,值得临床推广。     

姜黄素诱导肺癌细胞凋亡机制的研究进展

姜黄素作为一种传统中药,以其毒性低、耐受性好、药理作用广泛等特点日益受到广泛关注。其中抗肿瘤作用已被大量的动物实验及体外细胞实验研究所证实。对于不同组织、不同来源的肿瘤细胞,其发挥抗肿瘤作用的机制也不尽相同,本文就姜黄素诱导肺癌细胞凋亡的主要机制做一简要综述。     

中药对Fas/FasL细胞凋亡系统的作用

Fas及其配体FasL是近年来研究得最为深入的有关细胞凋亡的膜表面分子,而中药因其作用广,疗效好,毒副作用小而成为目前药物研究最为热门的领域之一。现选择中药对Fas/FasL细胞凋亡系统作用进行了综述,希望能因此为中药影响细胞凋亡机制作为疗效的中药新药研发提供参考。     

芸香苷静脉输注对大鼠急性胰腺炎腺泡细胞凋亡的影响及机制

目的探讨芸香苷(Rutoside,Ru)静脉输注给药对实验性急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)腺泡细胞凋亡的影响及作用机制。方法3%牛磺胆酸钠(sodium taurocholate,STC)逆行胆胰管注射诱导大鼠AP模型,取胰腺做病理学检查。应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的末端标记(terminadeoxynucleotidyl transferase biotin-dUTP nick end labeling,TUNEL)方法检测胰腺组织中的腺泡细胞凋亡。用免疫组化法检测Fas、FasL蛋白的表达。结果Ru15、30、60mg·kg-1·h-13个静脉输注剂量组可改善胰腺的病理组织学变化,且凋亡指数(apoptosis index,AI)高于模型组〔6h Ru大、中、小剂量治疗组分别为(23·33%±3·49%)、(21·56%±3·81%)、(16·24%±2·83%),6h模型组(8·54%±1·28%),P<0·01〕;Fas蛋白阳性表达细胞的灰度值低于模型组〔6h Ru大、中剂量治疗组分别为(189·17±5·79)、(203·83±10·94),6h模型组(226·86±10·37),P<0·01〕;FasL在各组腺泡细胞中均有不同程度的表达,但各治疗组的阳性表达细胞的灰度值高于模型组〔6h Ru大、中、小剂量治疗组分别为(220·63±7·41)、(218·72±4·48)、(207·22±22·67),6h模型组(181·70±9·01),P<0·05,P<0·01〕,各组的AI在各时间点均与Fas阳性表达细胞的灰度值呈正相关,与FasL阳性表达细胞的灰度值和胰腺严重程度呈负相关(P<0·05,P<0·01)。结论Ru对实验性AP的保护作用可能与促腺泡细胞凋亡有关,Fas/FasL系统可能参与此过程而诱导细胞凋亡。     

戊地昔布诱导人食管癌Eca109细胞凋亡的机制研究

目的探讨特异选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂戊地昔布诱导人食管癌Eca109细胞凋亡及其作用机制。方法流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布;电子显微镜进一步检测细胞凋亡;采用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒测定Eca109细胞的LDH含量;流式细胞术检测p-p38MAPK及凋亡基因Fas和FasL蛋白的表达。结果戊地昔布(25~400μmol.L-1)可诱导人食管癌Eca109细胞发生凋亡,,凋亡率由(2.95±0.83)%增加到(48.46±0.73)%;50~400μmol.L-1时增殖指数和S期的细胞比例则明显降低,G0/G1期的细胞比例增加;同时,流式细胞术显示,25μmol.L-1戊地昔布即可上调人食管癌Eca109细胞p-p38MAPK蛋白的表达,并随剂量的增加而增强;50~400μmol.L-1的戊地昔布可上调Eca109细胞Fas及FasL的表达。结论戊地昔布可诱导人Eca109细胞凋亡,其诱导凋亡的机制可能部分是通过激活p-p38MAPK/Fas、FasL途径实现的。     

地塞米松对SLE患者外周血淋巴细胞凋亡及Fas、FasL表达的影响

目的观察活动期系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血淋巴细胞(PBL)凋亡状态及Fas、FasL的表达,探讨地塞米松(Dex)对其的影响。方法分离19例SLE患者及10例健康人PBL,植物血凝素(PHA)刺激培养72h,流式细胞仪检测其凋亡率及Fas、FasL的表达。SLE患者的PBL,再经Dex作用后检测上述指标。结果SLE患者PBL在PHA刺激培养72h后凋亡率(42.81±7.52)%,较健康对照组(4.74±0.59)%明显升高(P<0.01),Fas表达SLE组(47.67±4.80)MFI,较健康对照组(21.70±5.16)MFI增高(P<0.01),FasL表达阳性细胞百分率与健康对照无明显差别(2.48±0.24)%,(2.64±0.31)%(P>0.05);SLE患者PBL经Dex培养后凋亡率(63.92±7.58)%较未处理组增高;Fas表达、FasL阳性细胞百分率两组间差异无统计学意义。结论SLE患者存在PBL凋亡及Fas、FasL表达的异常;Dex可加速SLE患者PBL的凋亡,且可能是通过Fas/FasL以外的途径实现。     

Celastrol induces apoptosis in non-small-cell lung cancer A549 cells through activation of mitochondria- and Fas/FasL-mediated pathways

Celastrol is a natural compound extracted from the traditional Chinese medicinal herb, Tripterygium wilfordii Hook. It has attracted interests for its potential anti-inflammatory and antitumor effects. However, the molecular mechanisms of celastrol-induced apoptosis in cancer cells remain unclear. In this study, we investigated the effects of celastrol on the human non-small-cell lung cancer (NSCLC) cell line A549 in vitro. Celastrol caused a dose- and time-dependent growth inhibition of A549 cells with an IC₅₀ of 2.12 μM at 48 h treatment. Celastrol induced A549 cells apoptosis as confirmed by annexin V/propidium iodide staining and DNA fragmentation. Celastrol-induced apoptosis was characterized by cleavage of caspase-9, caspase-8, caspase-3, and PARP protein, increased Fas and FasL expression, and a reduction in the mitochondrial membrane potential. Furthermore, celastrol induced the release of cytochrome c. Celastrol also up-regulated the expression of pro-apoptotic Bax, down-regulated anti-apoptotic Bcl-2, and inhibited Akt phosphorylation. These results demonstrate that celastrol can induce apoptosis of human NSCLC A549 cells through activation of both mitochondria- and FasL-mediated pathways.     

急性心肌梗死合并糖尿病患者血清细胞凋亡因子sFas和sFasL的变化及意义

目的了解糖尿病对急性心肌梗死患者血清细胞凋亡因子sFas和sFasL的影响。方法急性心肌梗死患者根据是否合并糖尿病将其分为非糖尿病组和糖尿病组。应用ELISA方法测定两组患者血清sFas和sFasL的含量。结果AMI合并DM患者血清sFas和sFasL的浓度明显高于非糖尿病患者,P〈0.01。心功能killip3/4级患者血清sFas和sFasL的浓度也高于killip1、2级患者,P〈0.05。结论急性心肌梗死合并糖尿病患者血清细胞凋亡因子sFas和sFasL的浓度高于非糖尿病患者。糖尿病可能通过促进Fas/FasL系统的激活而加速急性心肌梗死时心肌细胞凋亡的发生。     

Sodium hydrosulfide alleviates lung inflammation and cell apoptosis following resuscitated hemorrhagic shock in rats

Aim： To investigate the protective effects of hydrogen sulfide （H2S） against inflammation, oxidative stress and apoptosis in a rat model of resuscitated hemorrhagic shock. Methods： Hemorrhagic shock was induced in adult male SD rats by drawing blood from the femoral artery for 10 min. The mean arterial pressure was maintained at 35-40 mmHg for 1.5 h. After resuscitation the animals were observed for 200 min, and then killed. The lungs were harvested and bronchoalveolar lavage fluid was prepared. The levels of relevant proteins were examined using Western blotting and immunohistochemical analyses. NariS （28 pmol/kg, ip） was injected before the resuscitation. Results： Resuscitated hemorrhagic shock induced lung inflammatory responses and significantly increased the levels of inflammatory cytokines IL-6, TNF-a, and HMGB1 in bronchoalveolar lavage fluid. Furthermore, resuscitated hemorrhagic shock caused marked oxidative stress in lung tissue as shown by significant increases in the production of reactive oxygen species H202 and OH, the translocation of Nrf2, an important regulator of antioxidant expression, into nucleus, and the decrease of thioredoxin I expression. Moreover, resuscitated hemorrhagic shock markedly increased the expression of death receptor Fas and Fas-ligand and the number apoptotic cells in lung tissue, as well as the expression of pro-apoptotic proteins FADD, active-caspase 3, active-caspase 8, Bax, and decreased the expression of Bcl-2. Injection with NariS significantly attenuated these pathophysiological abnormalities induced by the resuscitated hemorrhagic shock. Conclusion： NariS administration protects rat lungs against inflammatory responses induced by resuscitated hemorrhagic shock via suppressing oxidative stress and the Fas/FasL apoptotic signaling pathway.     

Isoliquiritigenin inhibits the proliferation and induces the apoptosis of human non-small cell lung cancer a549 cells

1. Isoliquiritigenin (ISL) is a natural pigment with the simple chalcone structure 4,2',4'-trihydroxychalcone. In the present study, we report, for the first time, ISL-induced inhibition of the proliferation of the human non-small cell lung cancer A549 cell line. 2. The results showed that ISL not only inhibited A549 cell proliferation, but also induced apoptosis and blocked cell cycle progression in the G1 phase. An ELISA assay demonstrated that ISL significantly increased the expression of p53 and p21/WAF1 protein, which caused cell cycle arrest. 3. An enhancement in Fas and its two ligands, namely membrane-bound Fas ligand (mFasL) and soluble Fas ligand (sFasL), may be responsible for the apoptotic effect induced by ISL. 4. Taken together, the results indicate that the p53 and Fas/FasL apoptotic system may participate in the antiproliferative activity of ISL in A549 cells.     

清热化瘀滋阴方对系统性红斑狼疮外周血淋巴细胞凋亡及Fas、FasL基因表达的影响

目的：探讨中药清热化瘀滋阴方对系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血淋巴细胞凋亡及Fas、FasL基因表达的影响。方法：临床筛选SLE患者80例,完全随机分为治疗组（清热化瘀滋阴方配合激素组）和对照组（单用激素组）各40例,服药3个月,淋巴细胞分离液分离治疗前后SLE患者外周血淋巴细胞,采用流式细胞仪检测淋巴细胞凋亡率;采用RT-PCR法检测淋巴细胞Fas、FasL基因表达情况。结果：清热化瘀滋阴方治疗后SLE患者外周血淋巴细胞凋亡率较治疗前明显下降（P〈0.01）,并明显低于对照组（P〈0.01）;两组治疗后Fas、FasL基因的表达均明显下降,治疗组Fas基因的表达明显低于对照组（P〈0.01）。结论：清热化瘀滋阴方可能通过降低SLE患者外周血淋巴细胞凋亡率,下调淋巴细胞Fas、FasL基因的表达水平,改善免疫紊乱而发挥作用。