骨保护素防治骨质疏松症的研究进展

骨保护素(osteoprotegerin, OPG)、核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand, RANKL)、核因子-κB受体活化因子(receptor activator of NF-κB, RANK)是调节骨吸收和骨形成的重要的调控因子.骨质疏松症是多种原因使破骨细胞功能活跃,破坏骨的动态平衡造成的.OPG与RANK竞争性结合RANKL,从而抑制破骨细胞的分化、激活,促进其凋亡.应用重组OPG蛋白和OPG基因治疗的方法 是目前防治骨质疏松症的关注热点.笔者针对这方面的研究现状作简要的综述.     

维持性血液透析患者血清骨保护素与肾性骨营养不良的关系

骨保护素（OPG）是近年来在肿瘤坏死因子受体超家族中发现的一种具有调控破骨细胞产生和活化作用的生物活性物质。它与核因子κB活化子受体配体（RANKL,亦称骨保护素配体OPGL）和核因子κB活化子受体（RANK）组成的分子调控系统是体内维持骨代谢平衡的重要分子机制。在正常的骨转化中成骨细胞表面表达RANKL．它与破骨细胞前体或破骨细胞表面的RANK结合后启动了信号转导，使破骨细胞增殖和活化．溶骨活动增强。同时成骨细胞分泌OPG，它与RANK竞争性的抑制RANKL使溶骨作用不致过度强烈。     

骨碎补通过骨髓间充质干细胞调节RANKL/OPG抑制破骨细胞的实验研究

目的　研究骨碎补对绝经后骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)RANKL/OPG及破骨细胞分化成熟的影响并探查其可能的作用机制。方法 实验大鼠去双侧卵巢造模,分为实验组（OVXDF,造模+骨碎补水煎液灌胃）、模型组（OVX,造模+0.9%生理盐水灌胃）、假手术组（SHAM,假手术+0.9%生理盐水灌胃）,造模成功后提取BMSCs,将BMSCs和骨髓单核细胞共培养于Transwell小室的上室和下室,分为实验组+破骨细胞（OVXDF+OC）、模型组+破骨细胞（OVX+OC）、假手术组+破骨细胞（SHAM+OC）。下室加入破骨细胞诱导剂,倒置相差显微镜观察破骨细胞的分化成熟情况并计数,酶联免疫吸附剂测定（ELISA）检测下室培养液中骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、RANKL的含量,并计算RANKL/OPG,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测BMSCs中Wnt10b、β-catenin、RANKL、OPG mRAN及蛋白表达并计算RANKL/OPG。结果 在共培养系统中,与去卵巢灌胃大鼠BMSCs共培养的破骨细胞（OVXDF+OC）数量较单纯模型组+破骨细胞（OVX+OC）明显减少（P＜0.05）。下室培养液OPG含量及共培养BMSCs中Wnt10b、β-catenin、OPG mRAN及蛋白表达模型组+破骨细胞（OVX+OC）最低,RANKL及RANKL/OPG最高,经骨碎补灌胃后（OVXDF+OC）培养液中OPG含量及BMSCs细胞中Wnt10b、β-catenin、OPG mRAN及蛋白表达明显升高,培养液及BMSCs细胞中RANKL及RANKL/OPG明显降低（P＜0.05）。结论 骨碎补可调节BMSCs细胞OPG、RANKL的表达,激活OPG/RANKL/RANK信号通路抑制破骨细胞的分化和成熟,此作用可能与BMSCs的Wnt/β-catenin信号通路的激活有关。     

LC调节人成骨样MG-63细胞表达OPG、RANKL分子机制的研究

目的 探讨大黄酸哌嗪雌酚酮（rhein-piperizinyl-estrone,命名为 LC）调节人成骨样MG-63细胞表达骨保护素(osteoprotegerin, OPG)、NF-κB激活受体配体(receptor activator of NF-κB ligand, RANKL)的分子机制。方法 在原工作基础上,选择兼有两种雌激素受体(estrogen receptor, ER)亚型表达的人成骨样MG-63细胞为研究模型,采用RT-PCR、免疫印迹及小RNA干扰等技术,探讨LC对人成骨细胞产生的骨吸收调节因子OPG、RANKL表达的作用及作用机制。结果 LC可上调MG-63细胞OPG表达及下调RANKL表达,该作用可被纯ER阻断剂ICI 182,780完全阻断,应用小RNA干扰技术进一步证实LC对成骨细胞OPG、RANKL表达的调节作用主要是由ERα介导的。结论 LC调节成骨细胞表达OPG、RANKL是经ER途径、主要是由ERα介导的。     

护骨素及配体在卵巢切除大鼠骨组织的蛋白表达和细胞定位

目的对卵巢切除和假切大鼠骨组织中护骨素（OPG）和配体（RANKL）的表达进行比较，观察不同分化阶段成骨细胞的OPG和RANKL表达变化，深入地探讨成骨细胞对破骨细胞发生的调控作用。方法9月龄雌性大鼠分为卵巢切除组和假切组，相同条件喂养3月后处死，取材制作骨病理切片，用免疫组织化学方法测定大鼠股骨OPG和RANKL的蛋白表达，用图像分析软件对蛋白表达情况半定量分析，对各组数据和组织形态进行分析比较。结果OPG和RANKL蛋白在骨组织表达相对稳定。RANKL主要表达在增殖活跃的成骨细胞和幼稚的骨细胞，OPG主要表达在成熟骨细胞和静息骨衬里细胞。与假切组相比，卵巢切除组骨组织内RANKL表达升高（P〈0．01），OPG表达降低（P〈0．05）。结论卵巢切除后骨组织中RANKL/OPG升高，破骨细胞活性增强，骨转换加快。不同发育阶段的成骨细胞对破骨细胞有不同的调节作用，幼稚阶段表现出对破骨细胞的诱导作用，而成熟阶段则表现为抑制作用。     

OPG/RANKL/RANK系统在成骨细胞和破骨细胞相互调节中的作用

骨组织平衡由行使骨形成和骨吸收的成骨细胞(osteoblast,OB)和破骨细胞(osteoclast,OC)共同维持。在骨重建中两种细胞之间相互调节,一方面,OB、前体细胞、基质细胞调节OC的数量和活性;另一方面,OC反过来也可以调节OB的功能,从而形成一个反馈通路。OB和OC之间的相互调节有助于骨重建过程中骨吸收和骨形成的偶联。近年来,OB对OC骨吸收的调节已有较多研究,尤其是,OPG/RANKL/RANK信号系统的发现对于理解OB对OC骨吸收的调节是一个巨大的飞跃。但OC对OB的调节研究相对较少。本综述讨论了OB和OC之间的相互调节作用,综述了RANKL/RANK/OPG系统在骨形成和骨重建中的作用。     

流体剪切力对MC3T3-E1细胞OPG、RANKL蛋白表达的实验研究

目的探讨流体剪切力(fluid shear stress,FSS)作用下,两种调节骨骼重建的重要分子骨保护素(osteoprotegerin,OPG)和细胞核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)的蛋白表达情况。方法采用体外模型对MC3T3-E1细胞加载流体剪切力,细胞经不同时间加力后(0,30,60,90,120min),对细胞分别进行染色和裂解,运用免疫荧光和蛋白印迹法对OPG和RANKL的蛋白表达水平进行定量分析。结果 FSS作用30,60,90,120min后能够显著增加OPG的蛋白表达(P0.05),减少RANKL的蛋白表达(P0.05)。两者共同作用使得OPG/RANKL值显著增高(P0.05)。结论流体剪切力刺激提示OPG/RANKL的比值可能在成骨细胞和破骨细胞联合调节骨骼形成和吸收的过程中起着重要的调节作用。     

正五聚蛋白3在骨质疏松和骨折愈合中的研究进展

正五聚蛋白3(pentraxin 3,PTX3)作为一种多功能糖蛋白,在调节炎症反应、促进组织损伤部位修复、诱导乳腺等骨外部位的异位钙化及维持骨内稳态等生理病理过程中发挥重要作用。其在骨密度中的影响可能受到多种因素的作用,在PTX3基因敲除小鼠及骨质疏松症(osteoporosis,OP)患者中,PTX3的缺失会导致骨密度的下降,而在韩国社区“Dong-gu研究”中则发现血浆PTX3水平与男性老年患者的股骨颈骨密度呈负相关。在骨相关细胞方面,对于成骨细胞(osteoblast,OB)来说,PTX3在维持OP状态下OB的表型与功能具有重要作用;对于破骨细胞(osteoclast,OC)来说,炎症状态下的PTX3可通过刺激核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)生成及与TNF刺激基因6 (TNF-stimulated gene 6,TSG-6)结合提高破骨细胞活性以促进骨吸收;对于间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)来说,PTX3可通过PI3K/Akt信号通路促进...     

OPG/RANKL/RANK系统与软骨及软骨下骨

OPG/RANKL/RANK系统在调节骨代谢和骨重塑方面具有重要作用。成骨细胞表达的核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)与破骨细胞表面的核因子-κB受体活化因子(RANK)结合促进破骨细胞分化成熟,骨保护素(OPG)则结合RANKL而抑制这一功能。研究表明,OPG/RANKL/RANK系统在软骨及软骨下骨内也有表达,可能成为类风湿关节炎及骨关节炎的治疗靶点。该文就OPG/RANKL/RANK系统在软骨及软骨下骨内表达及其作用研究进展作一综述。     

去势大鼠骨组织中OPG、VEGF在雌激素治疗前后的变化

目的 制备去卵巢大鼠骨质疏松模型,比较去势6、8周后胫骨上VEGF mRNA、OPG的表达,及雌激素治疗后的变化.方法 53只6月龄的SD雌性大鼠随机分成3组:ovx组(去势组),sham组(假手术组),ovx+E2组(雌激素治疗组);分别在去势后6周末和8周末股动脉放血处死大鼠,每组各8只.取右侧胫骨脱钙后,行组织形态学观察及VEGF原位杂交和OPG免疫组化镜下观察.结果 去势6周和8周后,可见:(1)OPG蛋白表达情况:①OPG阳性细胞主要表达在大鼠胫骨的关节软骨细胞,骺板肥大区软骨细胞,及骺板下初级骨小梁的黏合线上.成骨细胞和骨细胞呈弱阳性表达.骨髓腔间充质细胞表达弱或没有表达,巨核细胞可有弱阳性的表达;②与sham组相比, ovx组中关节软骨细胞,骺板肥大区软骨细胞阳性表达有升高趋势;③与ovx组相比,ovx+E2组关节软骨细胞,骺板肥大区软骨细胞阳性表达有升高趋势;(2)VEGF mRNA表达情况:①VEGF mRNA阳性细胞主要表达于关节软骨细胞、骺板肥大区细胞和增生区细胞、成骨细胞和骨细胞及骨髓间充质细胞和巨核细胞、皮质外侧的成纤维细胞;②与sham组相比, ovx组骺板肥大区软骨细胞、关节软骨细胞、骨髓间充质细胞阳性表达有升高趋势;③与ovx组相比,ovx+E2组关节软骨、骺板肥大区软骨细胞阳性信号有降低趋势;骨髓间充质细胞的阳性信号有升高趋势.结论 (1)去势后雌激素降低,骨重建加强,骨吸收和骨形成均增加,OPG一过性升高可调节破骨细胞的募集和形成.雌激素治疗后OPG表达增高提示OPG可能具有一定的雌激素依赖性.(2)去势后雌激素降低,VEGF生成增多,并参与到骨的血管形成过程中,参与骨丢失.VEGF可能作为破骨细胞的诱导物,促使破骨细胞形成.给予雌激素治疗后,雌激素可使VEGF参与血管形成过程,调节成骨细胞的骨形成过程.     

神经肽催产素与男性不育关系的研究

目的:分析特发性男性不育患者催产素(oxytocin,OT)水平及其受体的表达。方法:选取特发性少精子症(oligozoospermia group,OG)(含无精子)、弱精子症(asthenozoospermia group,AG)及少精子合并弱精子症(oligoasthenozoospermia group,OAG)男性不育患者共65例,年龄20～45岁;对照组(control group,CG)选取有自然生育史的健康男性志愿者20例(精液参数正常),年龄20～45岁。检测各组血清黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、睾酮(testosterone,T)及OT含量,进一步通过检测催产素受体启动子功能序列(oxytocin receptor promotor fuctional sequence,OTRP)、催产素受体羧基端部分mRNA序列(OTRmR-NA)以及OTR蛋白构象、组成来分析OTR表达情况。OTR蛋白印迹分析结果经灰度软件处理后转化为计数资料;统计方法采用单因素方差分析。结果:①男性生殖内分泌激素含量分析:OT:各病例组均高于CG[(79.30±3.83)pg/ml],具有统计学意义(F0.05/2(2,82)=8.29,P<0.001);LH:AG[(4.26±0.31)IU/L]及OAG[(4.55±0.40)IU/L]均低于OG[(6.77±0.57)IU/L]和CG[(7.19±0.50)IU/L](F0.05/2(2,82)=11.64,P<0.01);FSH:AG[(5.02±0.39)IU/L]低于CG[(8.91±0.91)IU/L]、OG[(11.86±1.76)IU/L]及OAG[(8.82±1.03)IU/L](F0.05/2(2,82)=7.22,P<0.01);T:各组间无统计学差异(F0.05/2(2,82)=0.42,P=0.739)。②OTR基因转录分析:OTR启动子功能序列和OTR成熟mRNA序列未发现明显的变异。③OTR构象分析:人OTR以单体和寡聚体同时存在,以寡聚体为主,常见为四聚体和六聚体;AG(0.41±0.03)和OAG(0.13±0.01)的单体明显多于OG(0.05±0.004)和CG(0.05±0.003)(F0.05/2(2,82)=115.50,P<0.01);AG中20%病例存在寡聚体明显减少现象。结论:男性不育患者血清OT含量及OTR表达的差异提示OT与男性不育间存在一定的联系,OTR单体表达升高及寡聚体表达降低为进一步探索OT与男性不育间的关系提供了新的方向。     

Expression of oxytocin receptor in diabetic rat penis

Oxytocin receptor (OTR) expressed in the rat penis and mediated the contractility of the corpus cavernosum smooth muscle both in vitro and in vivo, and OTR could maintain penile detumescence; however, the expression of OTR in diabetic rat penis remains unknown. In the present study, we investigated the expression of OTR in diabetic rat penis. The experimental rats were randomly divided into control group and STZ-diabetic rats group. The expressions of mRNA and protein were examined by real-time quantitative PCR, Western blotting and immunohistochemistry respectively. Erectile function was evaluated by measuring intracavernous pressure following electrostimulation of the cavernous nerves. mRNA and protein expression of OTR significantly increased in diabetic rats group compared with the control group. Erectile function of diabetic rats group significantly decreased compared with the control group. Our data showed that the expression of OTR significantly increased in diabetic rats group and OTR may involve in the development of diabetic erectile dysfunction.     

Oxytocin Receptor Signaling in Myoepithelial and Cancer Cells

Oxytocin (OT) plays a crucial role as a mediator of breast myoepithelial cell contraction, the process responsible for the ejection of milk during lactation, and is also involved in myoepithelial cell proliferation and postpartum mammary gland proliferation. Furthermore, although a number of breast cancer cells have oxytocin receptors (OTRs), it has been reported that OT stimulates, inhibits, or has no effect on cell proliferation. As these different effects seem to be mediated by different signaling pathways elicited by OTR stimulation, we here review the regulation of OTR signaling in different cell systems and discuss how understanding the molecular basis of receptor coupling specificity has become extremely important for understanding the role played by OTRs in regulating cell growth.     

A study of the pharmacokinetics and pharmacodynamics of oxytocin at elective caesarean delivery

Oxytocin is widely used to prevent atonic postpartum haemorrhage after caesarean delivery. Initial treatment failure rates are high and inadequate dosing may contribute. Excessive doses, however, are associated with serious adverse effects. The pharmacokinetic data from this context are sparse and there is a lack of data in the immediate postpartum minutes after an initiating bolus. The pharmacodynamic data from this context are exclusively from dose-effect studies, with some suggesting that higher doses of oxytocin are required to provide adequate uterine tone in obese compared with non-obese women. We aimed to perform a pharmacokinetic and pharmacodynamic study that would facilitate more precise weight-based oxytocin dosing. We measured arterial oxytocin concentration, uterine tone and haemodynamic parameters in 25 women in the first 40 min after exogenous oxytocin administration at elective caesarean delivery. Serum oxytocin concentrations varied considerably between individuals. We constructed a one-compartment pharmacokinetic model of exogenous oxytocin deposition, after its administration with an initiating bolus and a maintenance infusion, at elective caesarean delivery. Body weight was evaluated as a potential covariate but was not included in the model due to lack of statistically significant reduction in the objective function. We calculated the volume of distribution and clearance (mean [coefficient of variation]) as 156.1 l [18%] and 83 ml.s⁻¹ [32%] but found no within-individual correlation between serum oxytocin concentration and uterine tone or haemodynamic parameters. In conclusion, we observed a large variation in serum oxytocin concentrations between individuals receiving similar doses of oxytocin and were unable to establish weight-based dosing of exogenous oxytocin at caesarean delivery. Our findings suggest that future studies on oxytocin pharmacokinetics would need large sample sizes. In the absence of such data, oxytocin dosing should continue to be guided by uterine tone assessments and adjusted according to a strategy based on the best evidence from dose-effect studies.     

Anaphylactoid reaction to oxytocin in pregnancy

A case of an allergic reaction to Syntocinon (synthetic oxytocin) administered during Caesarean section is reported.     

缩宫素与男性性功能

缩宫素是一种女性激素,其主要功能是参与子宫收缩及乳汁排泄。但是近年来发现,缩宫素参与多种中枢及外周信号通路,主要调控生殖生理及生殖行为,包括男性生殖及性行为。缩宫素对于阴茎勃起功能的调控是双向的,在中枢是促进而在海绵体内则抑制阴茎勃起,也参与射精及射精后阴茎疲软,以及射精后阴茎长久不应期。中枢性缩宫素及其受体可作为开发治疗阴茎勃起功能障碍药物的新靶点,而缩宫素海绵体内注射可望成为治疗阴茎异常勃起的有效药物之一。本文综述缩宫素在男性性功能方面的作用。     

米索前列醇预防产后出血的效果观察

:为了预防产妇产后出血 ,将 2 90例单胎、头位、无妊娠合并症、无前列腺素禁忌证、经阴道分娩的产妇随机分为 3组 : 组 98例 ,胎儿前肩娩出后口服米索前列醇 6 0 0 μg; 组 93例 ,胎儿娩出后静脉注射缩宫素 2 0 U; 组 99例 ,上述两种药物相继应用。观察不同时段出血量、产后出血发生率及生命体征变化。结果产后 2 4h出血量及出血发生率分别为 : 组 (4 43.71± 12 9.0 0 ) ml,2 0 .41% ; 组 (5 6 6 .0 0± 134.0 1) ml,40 .86 % ; 组 (4 5 3.35±16 3.5 4) ml,32 .32 %。 组与 组比较 ,差异有显著性 (均 P<0 .0 5 ) ; 组与 组比较 ,差异无显著性 (均 P>0 .0 5 ) ; 组与 组比较 ,前者差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ,后者差异无显著性 (P>0 .0 5 )。提示单独应用米索前列醇可有效预防产后出血 ,降低产后出血发生率 ,其作用优于缩宫素     

Effect of intratesticular administration of oxytocin on testicular steroidogenesis in immature rats

Summary.  The possible physiological role of testicular oxytocin in testicular steroidogenesis was studied in immature rats. In 5-, 9-, and 25-day–old animals one of the testes was injected with 20, 50, and 200 ng of oxytocin, respectively, then the contralateral gonad was removed. Rats were killed 1 h, 1 day or 7 days post-surgery. In each age group studied intratesticular injection of oxytocin resulted in a significant increase in basal testosterone secretion in vitro and/or serum testosterone concentration. Data indicate that in immature rats oxytocin of testicular origin might act as a local stimulator of steroidogenesis.     

血清催产素浓度与绝经后女性骨密度相关性研究

目的探讨催产素与绝经后妇女骨代谢指标以及腰椎和髋部骨密度之间相关性。方法检测185例骨密度正常和132例患骨质疏松症女性的血清催产素、瘦素、雌激素和骨代谢指标浓度。腰椎和股骨颈的BMD通过双能X线吸收法测量。结果患骨质疏松症女性的血清催产素浓度低于骨密度正常的女性(P0.05)。骨质疏松症组中血清催产素浓度与年龄、绝经年限、体质量指数(body mass index,BMI)和血清PINP、BLAP和CTX浓度呈负相关;与瘦素和雌激素具有明显正相关性;在正常骨密度组中,血清催产素浓度和各种指标未发现明显的相关性。调整年龄和BMI后,腰椎和股骨颈骨密度仍然与绝经年限以及血清PINP、BLAP和CTX浓度呈负相关,与雌激素、瘦素和催产素浓度呈正相关。对年龄和BMI进行调整后,进行多元回归分析显示绝经年限、血清催产素、PINP和CTX是腰椎和股骨颈骨密度的显著预测因子。结论绝经后女性患者较高的血清催产素水平与较高的腰椎和股骨颈骨密度有关。