转化生长因子-β和调节性T细胞在动脉粥样硬化中的研究

近年来随着动脉粥样硬化(AS)症患者的增多,对于该病的研究逐渐深入,特别是固有和获得性的免疫炎症机制参与了此疾病的发生、发展过程,当在疾病的发生过程中起保护作用的免疫因素受到抑制时,使疾病向不利方向发展.最新研究提示,转化生长因子-β和调节性T细胞可能是机体内源性有效抑制AS的因子,它们介导的免疫反应消长控制着疾病的发...     

系统性红斑狼疮患者外周血调节性T细胞与TGF-β水平变化及其意义

目的 探讨调节性T细胞及TGF-β在系统性红斑狼疮（SLE）发病中的作用机制。方法 采用流式细胞仪检测54例SLE患者（SLE组）及20例健康人（对照组）外周血CD4^＋CD25^＋T细胞和CD＋CD25highT细胞比率．ELISA法定量检测血清TGF-β表达水平。结果 ①SLE组初发SLE者CD＋CD＋T细胞和CD4^＋CD25^＋T细胞比率照著低于对照组,抗ds—DNA（＋）者CD4＋CD25highT细胞比率低于对照组,抗ds—DNA（-）者CD4＋CD25＋T细胞和CD4＋CD25highT细胞比率与对照组比较无明显差异;②SLE组TGF—β水平较对照组显著降低。其中抗ds—DNA（＋）者较抗ds—DNA（-）者降低;③CD4＋CD25＋T细胞与抗C1q抗体呈负相关,与TGF—β无明显相关性。TGF—β的表达量与血红蛋白量、血小板量和红细胞量呈正相关。结论 调节性T细胞明显降低可能参与了SLE的发病。其免疫抑制功能的发挥可能有赖于TGF—β。     

Foxp3仍然是人调节性T细胞的标志？

CD4＋CD25＋调节性T细胞是维持机体免疫稳态和免疫耐受的一个重要机制。缺乏这群细胞与许多自身免疫性疾病的发生和发展密切相关。目前积累的证据表明，在啮齿类动物中，一个叉头样转录因子Foxp3基因及其编码产物（scurfin）是CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的特异性标志物。Foxp3基因控制着CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的发育,并且直接影响它的功能。虽然早期研究认为Foxp3也在人CD4^＋CD25^＋调节性T细胞上特异性表达，但是越来越多的研究发现Foxp3在人类激活的CD4^＋效应T细胞中也有表达。Foxp3是否也是人的调节性T细胞的特异性分子标志？本文对当前国际免疫调节领域相关方面的工作进展进行总结，以供同行参考。     

调节性T细胞在免疫耐受方面的研究进展

CD4+CD25+foxp3+调节性T细胞(CD4+CD25+foxp3+regu-latory T cell,以下简称"Treg")为一类具有免疫抑制功能的独立的T细胞群,约占外周CD4+T细胞的5%～10%,是机体维持自身免疫耐受的重要组成部分.自1995年日本学者Sakaguchi等[1]首次报道Treg细胞以来,越来越多的研究证明这群T细胞在免疫病理、移植物耐受、阻止自身免疫反应、肿瘤免疫和维持机体免疫平衡等方面发挥着重要作用.……     

肝癌大鼠肝组织中Treg细胞及TGF-β1表达变化及相关性

目的探讨肝癌大鼠肝组织中调节性T细胞(Treg细胞)及转化生长因子(TGF)-β1的表达情况及其相关性。方法采用随机数字表法将60只雄性Wistar大鼠分为肝癌组(20只)、生理盐水对照组(20只)和正常对照组(20只),采用腹腔注射二乙基亚硝胺制备肝癌模型,100 mg/kg,1次/w,连续注射8 w。对比三组大鼠的CD4~+CD25~+Treg细胞占CD4~+T细胞比例和TGF-β1灰度值,分析CD4~+CD25~+Treg细胞和TGF-β1表达的相关性。结果三组大鼠的CD4~+CD25~+Treg细胞占CD4~+T细胞比例情况和TGF-β1灰度值整体比较差异有统计学意义(P<0.05);肝癌组大鼠的CD4~+CD25~+Treg细胞占比显著高于正常对照组和生理盐水对照组,TGF-β1灰度值显著低于正常对照组和生理盐水对照组(均P<0.05);生理盐水对照组的TGF-β1灰度值显著低于正常对照组(P<0.05),CD4~+CD25~+Treg细胞占比与正常对照组比较无统计学意义(P>0.05)。肝癌组大鼠CD4~+CD25~+Treg细胞和TGF-β1表达水平呈正相关(r=0.823,P=0.000)。结论肝癌大鼠肝组织中CD4~+CD25~+Treg细胞及TGF-β1均呈现高表达,两者呈正相关,能对免疫微环境产生抑制作用,进而为肿瘤发展提供有利条件。     

调节性T细胞在特异性免疫治疗中的作用

调节性T细胞是一类具有免疫抑制作用的T细胞亚群,在变态反应性疾病的特异性免疫治疗中具有重要作用,其可能通过细胞与细胞之间直接作用及通过上调IL-10及转化生长因子β起免疫作用。     

弓形虫排泄-分泌抗原含糖组分对小鼠调节性T细胞的影响

目的观察弓形虫排泄-分泌抗原(ESA)含糖组分对小鼠CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的影响。方法采用刀豆蛋白A(ConA)琼脂糖凝胶亲和层析技术提取ESA中的含糖组分,经硫酸-苯酚法测定提取物糖含量,并采用BCA法进行蛋白定量测定。将20只雌性C57BL/6小鼠随机分为5组,分别对各组小鼠腹腔注射ESA、ConA结合ESA、ConA未结合ESA、完全RPMI-1640和甘露糖各100μl。4d后处死,流式细胞仪检测各组脾脏CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占脾细胞的比例。结果采用ConA琼脂糖凝胶亲和层析法成功提取弓形虫ESA中含糖成分。与对照组相比(RPMI-1640组和甘露糖组),ESA、ConA结合ESA、ConA未结合ESA注射组小鼠的CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占脾细胞的比例均明显下降(P均0.01)。结论弓形虫ESA中含糖组分和蛋白组分均能引起小鼠CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占脾细胞的比例下降。     

激素抵抗性哮喘患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞及IL-10、TGF-β1的变化及意义

目的 观察激素抵抗性哮喘(SRA)患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)及白介素10(IL-10)、转化生长因子β1(TGF-β1)的变化,分析其在SRA发病机制中的作用.方法 采用流式细胞术检测40例SRA患者(激素抵抗组)外周血单个核细胞CD4+CD25+Foxp3+ Treg数目,并计算CD4+CD25+Foxp3+ Treg占CD4+T淋巴细胞的百分比;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测其血清IL-10、TGF-β1水平,并与激素敏感性患者(激素敏感组,46例)及正常体检者(正常组,30例)进行对比.结果 激素抵抗组患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T淋巴细胞的百分比、CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对值及血清IL-10、TGF-β1水平均明显低于激素敏感组与正常组(P＜0.01,P＜0.05);激素敏感组患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T淋巴细胞的百分比、CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对值及血清TGF-β1水平明显低于正常组(P＜0.01,P＜0.05),血清IL-10无明显差异(P＞0.05);CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T及CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对数均与血清IL-10、TGF-β1水平呈明显正相关(P＜0.01).结论 SRA患者外周血CD4+CD25+Foxp3+ Treg数目减少及IL-10、TGF-β1含量减低可能与SRA的发生、发展有关.     

调节性T细胞和TGF-β1在自身免疫性甲状腺疾病中的作用

目的观察初发自身免疫性甲状腺疾病(AITD)患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)数量和功能变化及转化生长因子β1(TGF-β1)水平,探讨其在AITD发病机制中的作用。方法收集初发Graves病(GD)组30例、初发桥本甲状腺炎(HT)组20例、健康对照组20例,用流式细胞仪分析各组外周血CD4+T细胞及CD4+CD25+Treg占CD4+的百分比,RT-PCR法检测各组外周血PBMC中FOXP3 mRNA表达量,ELISA法检测血清TGF-β1含量。结果初发GD、初发HT患者外周血CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞的比率、FOXP3 mRNA表达水平均明显低于对照组(P均<0.05),初发GD、初发HT患者外周血清中TGF-β1水平较对照组均显著升高(P均<0.05)。结论 CD4+CD25+Treg、FOXP3及TGF-β1可能参与了AITD的发生、发展过程,Treg数量减少或FOXP3表达不足可反馈性引起血清TGF-β1水平升高。     

系统性红斑狼疮患者CD4~+CD25~+调节性T细胞及TGF-β1表达的临床意义

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)及转化生长因子(TGF)-β1表达的临床意义。方法 SLE患者88例,其中活动期者35例(活动组),稳定期25例(稳定组),肾病期28例(肾病组),另选同期在医院实施健康体检的志愿者30例为对照组,检测并对比各组CD4+CD25+Treg及TGF-β1水平,各组SLE病情活动度积分(SLEDAI)、红细胞沉降率(ESR)及补体C3水平,分析指标间的相关性。结果肾病组及活动组CD4~+CD25~+Treg及TGF-β1水平均明显低于稳定组和对照组,且肾病组明显低于活动组(均P<0.05)。肾病组及活动组SLEDAI积分及ESR水平明显高于稳定组和对照组,补体C3水平明显低于稳定组和对照组,且肾病组SLEDAI积分及ESR水平明显高于活动组,补体C3水平明显低于活动组(均P<0.05)。根据Spearman相关性分析,患者CD4+CD25+Treg及TGF-β1与SLEDAI积分和ESR均呈负相关,与补体C3呈正相关。结论 SLE患者CD4+CD25+Treg及TGF-β1水平可随疾病的进展而下调表达,且可以预测患者病情进展。     

激素抵抗性哮喘患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞及IL-10、TGF-β1的变化及意义

目的 观察激素抵抗性哮喘(SRA)患者外周血CD4+ CD25+ Foxp3+调节性T细胞(Treg)及白介素10(IL-10)、转化生长因子β1(TGF-β1)的变化,分析其在SRA发病机制中的作用.方法 采用流式细胞术检测40例SRA患者(激素抵抗组)外周血单个核细胞CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg数目,并计算CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg占CD4+T淋巴细胞的百分比;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测其血清IL-10、TGF-β1水平,并与激素敏感性患者(激素敏感组,46例)及正常体检者(正常组,30例)进行对比.结果 激素抵抗组患者外周血CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg占CD4+T淋巴细胞的百分比、CD4+ CD25+Foxp3+ Treg绝对值及血清IL-10、TGF-β1水平均明显低于激素敏感组与正常组(P＜0.01,P＜0.05);激素敏感组患者外周血CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg占CD4+T淋巴细胞的百分比、CD4+ CD25+ Foxp3+Treg绝对值及血清TGF-β1水平明显低于正常组(P＜0.01,P＜0.05),血清IL-10无明显差异(P＞0.05);CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg/CD4+T及CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg绝对数均与血清IL-10、TGF-β1水平呈明显正相关(P＜0.01).结论 SRA患者外周血CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg数目减少及IL-10、TGF-β1含量减低可能与SRA的发生、发展有关.     

调节性T细胞在感染性疾病中的作用及其机制

调节性T细胞具有免疫抑制功能,对于维持机体自身耐受具有重要作用。调节性T细胞表达多种分子如CD25、CTLA-4、GITR、CD103和Foxp3等,其中Foxp3为其特异性标志物。多种病原体可诱导宿主产生调节性T细胞,调节性T细胞可作为窗口有利于病原体逃避宿主免疫攻击。使用单克隆抗体封闭调节性T细胞则有利于宿主清除病原体,同时伴有宿主的病理损伤。     

负向调控调节性T细胞对小鼠动脉粥样硬化形成的影响

目的通过干扰FOXP3基因来研究负向调控天然调节性T细胞对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响。方法构建FOXP3-siRNA慢病毒载体和获取Foxp3hight+CD4+CD25+Treg细胞分别通过尾静脉注入不同组小鼠体内;利用流式细胞仪检测小鼠体内CD4+CD25+Treg细胞数目;利用ELISA法检测各组脾细胞炎性因子浓度;取小鼠升主动脉动脉行病理分析其粥样斑块大小。结果注入FOXP3-siRNA慢病毒载体的小鼠CD4+CD25+Treg细胞数目减少,动脉粥样斑块面积显著增大。而注入Foxp3hight++CD4+CD25+Treg细胞则相反,小鼠CD4+CD25+Treg细胞数目增加,动脉粥样斑块面积减小。结论负向调控天然调节性T细胞能促进动脉粥样硬化的形成。     

瑞舒伐他汀对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化中调节性T细胞的影响

目的观察瑞舒伐他汀对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化中调节性T细胞的影响。方法 C57BL/6J ApoE-/-小鼠18只,高脂饮食饲养8周建立动脉粥样硬化模型。随机分为高剂量组[瑞舒伐他汀5mg/（kg.d）灌胃]、低剂量组[瑞舒伐他汀2.5 mg/（kg.d）灌胃）]与模型组[生理盐水5 ml/（kg.d）灌胃）]。8周后处死小鼠取心脏及主动脉根部组织,Western blot检测病变处Foxp3、CD68、IL-6、IL-10表达。结果与模型组相比,高剂量组及低剂量组病变处Foxp3、IL-10表达增多,CD68、IL-6表达减少（P〈0.05）。高剂量组与低剂量组相比Foxp3、IL-10表达增多,CD68、IL-6表达减少（P〈0.05）。结论瑞舒伐他汀能阻止高脂饮食饲养的ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化进展,其机制可能与增加病变处调节性T细胞的表达有关。     

Foxp3+调节性T细胞与心肌缺血再灌注损伤概述

心肌缺血再灌注损伤与心肌梗死的面积密切相关,减少心肌缺血再灌注损伤有助于改善心肌梗死患者的预后。炎症在心肌缺血再灌注损伤中发挥重要作用。及时消除炎症渗入,将炎症反应和修复反应在空间上限制在心肌梗死区,是实现梗死区最佳愈合的关键。Foxp3+调节性T细胞参与调节各种生理和病理的免疫炎症反应。心肌梗死后,Foxp3+调节性T细胞可促进心肌组织的再生和修复,加速心肌梗死的恢复过程。现系统综述Foxp3+调节性T细胞在心肌缺血再灌注损伤中的作用,旨在深入了解Foxp3+调节性T细胞的功能,这可能有助于设计有效的方法来控制免疫反应,为心肌梗死提供新的潜在治疗方案。     

调节性T细胞在布鲁氏菌感染中的变化特点研究

目的 明确调节性T细胞(Treg),Foxp3基因,白细胞介素10(IL-10)在布鲁菌病中的变化特点及相关性。方法 收集新疆维吾尔自治区人民医院2019年6月-2019年12月期间20例急性布鲁菌病患者、29例慢性布鲁菌病患者和52例健康对照人群的外周血,使用流式细胞术检测Treg细胞数量,提取PBMC使用荧光定量PCR检测Foxp3的mRNA水平,使用AimPlex法检测血浆中IL-10含量。对Treg细胞与Foxp3 mRNA,IL-10的相关性进行分析。结果 与正常对照组相比,急性布病组的Treg细胞比例增加(t=2.87,P=0.01),Foxp3的mRNA水平增高(t=3.42,P<0.01),IL-10水平增高(t=7.90,P<0.01);慢性布病组的Treg细胞数量增加(t=10.82,P<0.01)、Foxp3的mRNA水平增加(t=6.89,P<0.01)和IL-10水平均明显增高(t=21.42,P<0.01)。与急性布病组相比,慢性布病组的Treg细胞数量增加(t=4.96,P<0.01),Foxp3的mRNA水平增加(t=2.38,P=0.02),IL-10水平明显增高(t=7.64,P<0.01)。布鲁菌病患者的Foxp3的mRNA表达水平与Treg数量呈正相关(R=0.72,P<0.01),IL-10水平与Treg数量呈正相关(R=0.71,P<0.01)。结论 布鲁氏菌感染后出现Treg细胞数量增多,Foxp3基因表达上调以及IL-10水平增高的现象,这可能是导致布鲁氏菌持续感染的原因。     

Th17细胞/调节性T细胞偏倚在类风湿关节炎中的意义

目的 探讨白细胞介素(IL)-17+CD4+炎症性T细胞(Th17细胞)和Foxp3+CD4+调节性T细胞在类风湿关节炎(RA)的相互关系及可能机制.方法 采用前瞻性随机开放研究.测定RA患者外周血IL-17+CD4+T细胞及Foxp3+CD4+T细胞的比例变化及其相关细胞因子转化生长因子(TGF)-β、IL-6、IL-23和IL-17水平.结果 RA患者外周血IL-17+CD4+T细胞明显升高(P<0.01),而Foxp3+CD4+T细胞明显降低(P<0.01).同时,血清中IL-6、IL-23和IL-17水平明显升高(均P<0.01),而TGF-β水平无明显变化(P>0.05).结论 RA患者Th17细胞数量增高,而调节性T细胞数量减少,体内相关细胞因子的变化是引起上述改变的重要原因.     

高龄肝癌患者CD4+CD25+调节性T细胞及转化生长因子-β1检测的临床意义

目的 探讨检测老年原发性肝癌患者外周血CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg)及血清转化生长因子(TGF)-β1的临床意义. 方法 应用流式细胞学方法和酶联免疫吸附测定方法分别检测80岁以上老年健康者20例、原发性肝癌患者22例、转移性肝癌患者25例外周血Treg占总CD4+T细胞的比例和血清TGF-β1浓度. 结果 老年原发性肝癌、转移性肝癌患者外周血Treg占总CD4+T细胞的比例与老年健康对照组比较均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01).老年原发性肝癌患者外周血T reg总CD4+T细胞比例较老年转移性肝癌患者亦明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).老年原发性肝癌、转移性肝癌患者血清TGF-β1浓度与老年健康对照组比较均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01).老年原发性肝癌患者血清TGF-31浓度较老年转移性肝癌患者亦明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01).相关分析显示,原发性肝癌患者外周血Treg占总CD4+T细胞的比例与病理分期、血清TGF-β1浓度呈正相关(r=0.782、r=0.698,P＜0.01),与Karnofsky功能状态(KPS)评分负相关(r=-0.643,P＜0.01). 结论 高龄原发性肝癌患者外周血Treg比例明显升高,且与血清TGF-β1浓度、病理分期及KPS评分具有一定的相关性.检测老年原发性肝癌患者外周血Treg占总CD4+T细胞的比例,可能有助于评估老年原发性肝癌患者病情进展情况及判断其预后.     

联合应用TGF-β、TGF-βR siRNA对小鼠急性肝损伤TGF-β/Smad信号传导通路相关基因表达的抑制

目的: 探讨TGF-β1、TGF-β1R siRNA联合应用对小鼠急性肝损伤TGF-β/Smad信号传导通路的干预作用.方法: 清洁级健康大鼠36只分为2组: 正常对照组(n=6, 注射生理盐水)与实验组(n =30).实验组动物在实验第1天和第5天腹腔注射CCl4花生油溶液6 mL/kg, 造成急性肝损伤并启动TGF-β/Sma d信号传导通路.实验分为TGF-β1 shRNA干预组(T);TGF-β1siRNA+TβRⅠshRNA干预组(T+R1);TGF-β1shRNA+TβRⅡ siRNA干预组(T+R2);TGF-β1siRNA+TβRⅠshRNA+TβRⅡ shRNA干预组(T+R1+R2)和模型对照组(M).观察各实验组血清ALT、AST、HA;肝组织学RT-PCR和免疫组织化学检测肝组织中α-SMA、COL-1、COL-3、TGF-β1、Smad3、PCNA和TGF-αmRNA及蛋白的表达.结果: 经shRNA质粒DNA干预的4个治疗组与模型组比较, 均能显著降低血清ALT, AST及HA的水平(ALT: 592.80±98.4 IU/L, 440.80±91.9 IU/L, 461.61±120.0 IU/L, 284.00±49.0IU/L vs 949.5±196.1 IU/L;AST: 686.80±112.3IU/L, 591.00±99.87 IU/L, 607.50±84.8 IU/L,398.30±61.9 IU/L vs 985.67±274.8 IU/L;HA:5682.80±824.14 μg/L, 2871.26±394.68 μg/L,3004.29±354.25 μg/L, 1982.12±402.71 μg/Lvs 8444.65±812.15 μg/L, P<0.05)的测定值;4个治疗组两两比较, T+R1+R2组疗效明显高于其他3组(P<0.01).与模型组比较.shRNA质粒DNA干预能明显抑制TGF-β1, Smad3, α-SMA,COL-1及COL-3的mRNA与蛋白的表达(均P<0.05).其抑制效果以T+R1+R2组最明显.对蛋白水平表达的作用也有相似趋势.结论: 针对TGF-βRⅠ及其Ⅰ型受体(TβRⅠ)、Ⅱ型受体(TβRⅡ)的siRNA联合治疗对小鼠肝损伤中TGF-β/Smad信号传导通路相关的基因表达的抑制具有协同作用.     

糖蛋白A为主重复序列蛋白通过调节性T细胞参与调控结核病发病的初步研究

目的探讨糖蛋白A为主重复序列蛋白(glycoprotein A repetitions predominant, GARP)通过调节性T细胞(regulatory T cell, Treg)参与调控结核病发病的作用, 以期为结核病治疗提供新靶点。方法纳入2021年1月至9月复旦大学附属华山医院和无锡市第五人民医院收治的60例活动性肺结核患者, 同时招募6例结核潜伏感染患者和16名健康对照者。应用流式细胞术检测入组对象外周血淋巴细胞中Treg的占比, 以及Treg上GARP和转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)的表达。统计学分析采用曼-惠特尼U检验。结果 60例活动性肺结核患者中, 23例未进行抗结核药物治疗, 17例患者治疗<3个月, 10例患者治疗3～<6个月, 10例患者治疗≥6个月。活动性肺结核未治疗组CD4+CD25+叉头样转录因子3(forkhead box protein 3, Foxp3)+Treg占外周血淋巴细胞总数的7.50%(5.67%, 9.00%), 高于健康对照组的5.57%(5.03%,...