肝纤维化大鼠转化生长因子β1及I,Ⅲ型胶原表达的动态研究

目的 探讨肝纤维化形成不同阶段ＴＧＦβ１和Ｉ,Ⅲ型胶原表达的变化规律及相互关系,方法 建立肝纤维化动物模型,分别用免疫组化法和斑点杂交法检测肝纤维化不同阶段ＴＧＦβ,Ｉ,Ⅲ型胶原蛋白及其ｍＲＮＡ表达。结果 随着肝纤维化程度的加重,ＴＧＦβ１,Ⅰ,Ⅲ型胶原蛋白及其ｍＲＮＡ表达量都逐渐增高,各实验组与对照组相比,其差异均有显著性（Ｐ〈０．０５）。结论 肝纤维化时,肝内ＴＧＦβ１和Ⅰ,Ⅲ型胶原蛋白的表达     

转化生长因子β_1对纤维母细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原及胶原酶mRNA表达的影响

目的纤维母细胞是重要的胶原合成细胞，观察转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）对纤维母细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原及胶原酶ｍＲＮＡ表达的影响，以了解ＴＧＦ－β１在肝纤维化中的作用机制。方法首先对含有Ⅰ、Ⅲ型前胶原及胶原酶ｃＤＮＡ片段的质粒进行扩增、提纯及酶切，然后用自由引物延伸法进行地戈辛标记，并对探针进行检测；其次对纤维母细胞进行培养，加用ＴＧＦ－β１孵育后收集细胞并提取细胞总ＲＮＡ，最后将ＲＮＡ点样于尼龙膜上，并与上述探针进行斑点杂交。结果杂交结果显示ＴＧＦ－β能明显促进纤维母细胞Ⅰ型前胶原ｍＲＮＡ的表达（Ｐ＜０．０５），也能促进其Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ的表达（Ｐ＝０．０９）；而对其胶原酶ｍＲＮＡ的表达则起抑制作用（Ｐ＜０．０５）。结论ＴＧＦ－β可以从细胞及分子水平发挥其抗纤维化作用。     

TGF—β单抗对NIH／3T3细胞增殖及前胶原Ⅲ表达的影响

ＴＧＦ－β在肝纤维化的形成中起着重要作用。以ＭＴＴ法及原位杂交检测法研究ＴＧＦ－β单抗对ＮＩＨ／３Ｔ３细胞增殖及Ⅲ型前胶原表达的影响。结果表明，ＴＧＦ－β单抗抑制３Ｔ３细胞增殖，并显著抑制细胞Ⅲ型前腺原ｍＲＮＡ的表达，提示离体培养的成纤维细胞可能存在ＴＧＦ－β自分泌，ＴＧＦ－β单抗能显著阻断其效应，阻止细胞增殖及胶原表达。     

转化生长因子β1对纤维母细胞I,Ⅲ型前胶原及胶原酶mRNA表达？…

目的 纤维母细胞是重要的胶原合成细胞，观察转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）对纤维母细胞Ｉ，Ⅲ型前胶原及胶原酶ｍＲＮＡ表达的影响，以了解ＴＧＦ－β１在肝纤维化中的作用机制。方法 首先对含有Ｉ，Ⅲ型前胶原及胶原酶ｃＤＮＡ片段的质粒进行了扩增，提纯及酶切，然后用自由引物延伸法进行地戈辛标记，并对探针进行检测；其次对纤维母细胞进行培养，加用ＴＧＦ－β１孵育后收集细胞并提取细胞总ＲＮＡ，最后将ＲＮＡ点样于尼     

TGF－β单抗对NIH／3T3细胞增殖及前胶原Ⅲ表达的影响

ＴＧＦ－β在肝纤维化的形成中起着重要作用。以ＭＴＴ法及原位杂交检测法研究ＴＧＦ－β单抗对ＮＩＨ／３Ｔ３细胞增殖及Ⅲ型前胶原表达的影响。结果表明，ＴＧＦ－β单抗抑制３Ｔ３细胞增殖，并显著抑制细胞Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ的表达，提示离体培养的成纤维细胞可能存在ＴＧＦ－β自分泌，ＴＧＦ－β单抗能显著阻断其效应，阻止细胞增殖及胶原表达。     

风湿性心脏病瓣膜胶原及转化生长因子β1改变的初步研究

为了解风湿性心脏病（风心病）病变二尖瓣和主动脉瓣组织中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原及转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）基因表达的改变。用斑点杂交法测定９例风心病人和３例尸检中除外心血管病与胶原系统疾病者的二尖瓣和主动脉瓣中Ⅰ型胶原α１链［α１（Ⅰ）］ｍＲＮＡ、Ⅲ型胶原α１链［α１（Ⅲ）］ｍＲＮＡ、ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ的含量。结果显示：以对照组值为１．００，风心病人二尖瓣α１（Ⅰ）ｍＲＮＡ为２．３１±０．４８（Ｐ＜０．０１），α１（Ⅲ）ｍＲＮＡ为１．５９±０．１７（Ｐ＜０．０１），ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ为１．５７±０．２１（Ｐ＜０．０１）；主动脉瓣的结果分别为２．１０±０．４９（Ｐ＜０．０１），１．６６±０．２７（Ｐ＜０．０１），１．５２±０．１８（Ｐ＜０．０１）。结论：提示风心病病变瓣膜成纤维细胞胶原基因表达增强，使胶原合成增加，导致瓣膜纤维化。ＴＧＦ－β１基因表达增强的意义尚需进一步研究。     

γ-干扰素基因修饰肝细胞对感染日本血吸虫小鼠TGF-β_1及其受体的影响

目的： 探讨γ－干扰素 （ＩＦＮ－γ） 基因治疗对感染日本血吸虫小鼠转化生长因子－β１ （ＴＧＦ－β１） 及其受体的影响与抗肝纤维化作用的关系。方法： 将小鼠ＩＦＮ－γ基因重组腺病毒载体转染的肝细胞经脾移植到感染日本血吸虫尾蚴１６ ｗｋ 的小鼠, 采用ＥＬＩＳＡ、免疫组化和斑点杂交方法分析小鼠血清ＩＦＮ－γ与ＴＧＦ－β１ 表达的关系, 小鼠肝内ＩＦＮ－γ、ＴＧＦ－β１、ＴＧＦ－βＲＩＩ与Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的关系。结果： ＩＦＮ－γ基因修饰的肝细胞经脾移植后能有效地表达, 显著地降低ＴＧＦ－β１ 、ＴＧＦ－βＲＩＩ的表达和Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量。结论： ＩＦＮ－γ基因治疗能有效地发挥抗血吸虫病肝纤维化作用, 可能与降低ＴＧＦ－β１及其受体有关。     

转化生长因子β1及虫草多糖对大鼠肝纤维化形成的影响

目的探讨转化生长因子β１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒβ１，ＴＧＦβ１）及其受体１（ＴＧＦβＲ１）在免疫性大鼠肝纤维化形成中的作用及虫草多糖对其影响。方法以牛血清白蛋白（ｂｏｖｉｎｅｓｅｒｕｍａｌｂｕｍｉｎ，ＢＳＡ）制备免疫性大鼠肝纤维化，攻击注射８周后给予虫草多糖（６０ｍｇ／ｋｇ）保护，继续攻击注射４次，用药至末次注射３周后（共３４天）；用免疫组化法观察ＴＧＦβ１、ＴＧＦβＲ１、肝星状细胞及Ⅰ、Ⅲ型胶原的变化。结果攻击注射ＢＳＡ８月后，大鼠已形成典型的肝纤维化；纤维隔中ＴＧＦβ１及ＴＧＦβＲ１阳染增强，后者阳染强度与胶原增生程度有相关性；肝星状细胞显著增多，Ⅰ、Ⅲ型胶原及肝羟脯氨酸含量显著增加。虫草多糖组对应指标的变化均显著轻于对照组。结论ＴＧＦβ１与ＴＧＦβＲ１表达的增加是ＢＳＡ免疫性大鼠肝纤维化发生发展的病理基础之一；虫草多糖可显著改善免疫性大鼠肝纤维化的病理变化。     

γ-干扰素基因修饰肝细胞对感染日本血吸虫小鼠TGF-β_1及其受体的影响

目的： 探讨γ－干扰素 （ＩＦＮ－γ） 基因治疗对感染日本血吸虫小鼠转化生长因子－β１ （ＴＧＦ－β１） 及其受体的影响与抗肝纤维化作用的关系。方法： 将小鼠ＩＦＮ－γ基因重组腺病毒载体转染的肝细胞经脾移植到感染日本血吸虫尾蚴１６ ｗｋ 的小鼠, 采用ＥＬＩＳＡ、免疫组化和斑点杂交方法分析小鼠血清ＩＦＮ－γ与ＴＧＦ－β１ 表达的关系, 小鼠肝内ＩＦＮ－γ、ＴＧＦ－β１、ＴＧＦ－βＲＩＩ与Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的关系。结果： ＩＦＮ－γ基因修饰的肝细胞经脾移植后能有效地表达, 显著地降低ＴＧＦ－β１ 、ＴＧＦ－βＲＩＩ的表达和Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量。结论： ＩＦＮ－γ基因治疗能有效地发挥抗血吸虫病肝纤维化作用, 可能与降低ＴＧＦ－β１及其受体有关。     

血小板源生长因子对动脉平滑肌细胞增殖,Ⅰ、Ⅲ型前胶原信使核糖核酸的表达及胶原蛋白合成的调节作用

目的：研究血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）对培养的人主动脉平滑肌细胞增殖、胶原蛋白合成、分泌及Ⅰ、Ⅲ型前胶原信使核糖核酸（ｍＲＮＡ）表达和转移生长因子βｍＲＮＡ表达的调节作用。方法：氚胸腺嘧啶脱氧核苷（３ＨＴｄＲ），氚脯氨酸参入及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析。３ＨＴｄＲ，氚脯氨酸参入的比较采用ｔ检验。结果：ＰＤＧＦ能促进人主动脉平滑肌细胞脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）合成和胶原蛋白合成、分泌；ＰＤＧＦ能上调Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达和转移生长因子βｍＲＮＡ表达。结论：血小板源生长因子能通过上调Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达和转移生长因子βｍＲＮＡ表达促进平滑肌细胞胶原蛋白的合成、分泌。     

转化生长因子－β对人胚肺成纤维细胞胶原表达的影响

转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）是一族多功能的细胞因子，具有调节细胞外基质代谢的功能，在肺间质纤维化的形成中具有重要作用。胚原是细胞外基质的主要成分。胶原积聚是肺间质纤维化的一个重要特征。为了进一步探讨肺间质纤维化形成的机制，在体外观察了ＴＧＦ－β对人胚胎肺成纤维细胞胶原蛋白合成及胶原Ｉ、胶原ＩＩｌｍＲＮＡ表达的影响。结果发现：ＴＧＦ－β能刺激胶原蛋白的合成，胶原Ｉ、胶原ＩＩＩｍＲＮＡ的表达。而对成纤维细胞的增殖影响不明显。因此认为ＴＧＦ－β可能与肺间质纤维化时胶原积聚有关。ＴＧＦ－β胶原合成的调节是通过ｍＲＮＡ水平。     

转化生长因子β1 与病毒性肝炎肝纤维化的关系

研究转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）与病毒性肝炎肝纤维化的关系。对４５例慢性病毒性肝炎 病毒人肝组织进行了ＴＧＦβ１免疫组织化学检测,同时检测其中２１例血清ＴＧＦβ１及血清透明质酸（ＨＡ）,层粘蛋白（ＬＮ）、Ⅳ型胶原、（Ⅳ－Ｃ）Ⅲ型前原肽（ＰⅢＰ）水平。结果：随着肝纤维化程度加重,ＴＧβ１血清水平上升,肝内表达逐渐明显,二者呈正相关;ＴＧＦβ１的血清水平及肝内表达ＨＡ、ＬＮⅣ－Ｃ、ＰⅢＰ四项肝纤维化     

虫草多糖脂质体对肝纤维化大鼠转化生长因子β_1基因表达的影响

探讨冬虫夏草多糖脂质体（ＣＰＬ）对肝纤维化大鼠肝组织转化生长因子（ＴＧＦ）β_１的影响。方法：动物分为３组,肝纤维化模型组、ＣＰＬ治疗组和正常对照组,采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交技术检测各组大鼠肝组织ＴＧＦ－β_１基因的表达。结果：ＣＰＬ治疗组大鼠肝脏中ＴＧＦ－β_１ｍＲＮＡ表达量明显下降,与模型组大鼠比较差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。结论： ＣＰＬ可明显下调实验性肝纤维化大鼠肝组织ＴＧＦ－β_１ｍＲＮＡ的表达。     

慢性病毒性肝炎患者肝组织转化生长因子β1及其mRNA分布的研究

目的了解慢性病毒性肝炎患者肝组织转化生长因β１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｅｌ,ＴＧＦβ１）蛋白及ＴＧＦβｌｍＲＮＡ的分布状况及其意义。方法用免疫组织化学方法检测了４５例慢性病毒性肝炎患者肝组织ＴＧＦβ１蛋白表达,并做其中２１例ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ原位杂交检测。结果ＴＧＦβ１蛋白肝组织表达阳性率为８８８９％,主要为间质细胞、汇管区及纤维化发生活跃部位阳性,且随肝纤维化程度加重而表达增强（ｒ＝０７３,Ｐ＜００５）;ＴＧＦβｌｍＲＮＡ检测阳性率为５７．１４％,不仅定位于间质细胞,某些肝细胞也有阳性信号。结论ＴＧＦβｌ与肝纤维化发生发展密切相关。在病毒性肝炎,不仅间质细胞能够产生ＴＧＦβ１,肝细胞本身也能分泌ＴＧＦβ１。     

中药861合剂对免疫损伤性肝纤维化大鼠肝脏Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及TGF－βmRNA的影响

深入研究活血化瘀中药８６１合剂的抗纤雏化机理。方法将２４只雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为正常对照组，人血白蛋白免疫损伤性肝纤雏化病理模型组及中药８６１合剂预防组。在用药２．５及５个月时取肝脏组织做病理学、免疫组化及斑点杂交。结果与病理模型组相比，８６１预防组大鼠肝脏纤维化分级明显减轻，肝脏Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型脐原面积比减小，Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及ＴＧＦ－βｍＲＮＡ水平明显降低（Ｐ值＜０．０５）。结论中药８６１合剂的抗人血白蛋白免疫损伤性大鼠肝纤维化机理之一可能是抑制了肝脏Ⅰ、Ⅲ．Ⅳ型胶原和ＴＧＦ－β的基因表达。     

干扰素α和甘草酸对肝纤维化鼠星状细胞胶原代谢的影响

动物实验证实干扰素α和甘草酸均可降低肝纤维化鼠星状细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达，减少Ⅰ、Ⅲ型胶原在肝脏的沉积［１，２］。但对两药联合应用治疗肝纤维化及其机制尚缺乏研究，本研究旨在观察联合应用甘草酸和干扰素α对不同阶段肝纤维化鼠星状细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原及胶原酶ｍＲＮＡ表达和肝脏Ⅰ、Ⅲ型胶原沉积的影响，以指导临床用药。 一、材料与方法 １．动物分组及模型复制：雄性ＳＤ大鼠，体重 ２５０ｇ左右，采用四氯化碳和乙醇复制肝纤维化鼠模型。将动物分为正常对照组、模型对照组、甘草酸治疗组、干扰素治疗组和干扰素＋甘…     

转化生长因子β1与病毒性肝炎肝纤维化的关系

目的：研究转化生长因子β＿１（ＴＧＦ－β＿１）与病毒性肝炎肝纤维化发生的关系。方法：对５４例病毒性肝炎肝组织进行ＴＧＦ－β＿１以及α－平滑肌肌动蛋白（α－ＳＭＡ）、Ⅳ型胶原（Ⅳ－Ｃ）免疫组织化学研究，并检测其中４９例血清Ⅲ型前胶原肽（ＰⅢＰ）、层粘蛋白（ＬＮ）、透明质酸（ＨＡ）、Ⅳ－Ｃ等。结果：随着肝纤维化程度的加重，ＴＧＦ－β＿１在肝组织中的表达逐渐明显。在慢性肝炎重度、肝硬变慢性重型肝炎中的表达强度明显高于慢性肝炎中度、轻度及急性肝炎。同时ＴＧＦ－β＿１在肝组织中的表达与血清ＰⅢＰ、ＬＮ、ＨＡ、Ⅳ－Ｃ以及α－ＳＭＡ和Ⅳ－Ｃ在肝组织中的表达呈明显的正相关。结论：ＴＧＦ－β＿１通过刺激贮脂细胞，大量合成细胞外间质，最终导致肝脏的纤维化。     

血吸虫病肝纤维化过程中肝脏前胶原mRNA的表达变化研究

目的阐明血吸虫病肝纤维化过程中,肝脏前胶原基因表达的动态变化规律。方法应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ核酸分子杂交技术,检测血吸虫感染小鼠在肝纤维化过程中肝脏前胶原ｍＲＮＡ表达量的变化。结果小鼠感染血吸虫后６周时,肝内α１（Ⅰ）和α１（Ⅲ）前胶原ｍＲＮＡ的表达量即有显著增加,８周时,α１（Ⅰ）前胶原ｍＲＮＡ的表达量已达高峰,α１（Ⅲ）和α１（Ⅵ）前胶原ｍＲＮＡ的表达高峰在１０周时出现。１２～１６周时,三者的表达量略有下降,２０周时均又回升。在整个肝纤维化过程中,α１（Ⅰ）前胶原ｍＲＮＡ呈优势表达,α１（Ⅲ）前胶原ｍＲＮＡ次之,α１（Ⅵ）前胶原ｍＲＮＡ的表达量较前二者稍低,但其表达水平的增幅最大。结论肝脏前胶原ｍＲＮＡ表达水平的检测能敏感地反映肝纤维化的趋向,α１（Ⅵ）前胶原ｍＲＮＡ的表达在肝纤维化形成中可能起重要作用。     

胃癌组织TGFβⅠ和TGFβⅡ型受体表达的临床意义

目的通过检测２９份胃癌标本ＴＧＦβⅠ和ＴＧＦβⅡ型受体的ｍＲＮＡ水平，探讨它们与胃癌浸润和转移的关联性。方法应用点杂交法和计算机灰度扫描分析组织的ｍＲＮＡ水平。结果 胃癌组的ＴＧＦβⅠｍＲＮＡ灰度均值明显高于癌旁对照组，浸润组或伴有淋巴结转移组分别明显高于膨胀组或无淋巴结转移组；而上述各组的ＴＧＦβⅡ型受体ｍＲＮＡ水平变化却与ＴＧＦβⅠ相反，并且二者具有明显的负相关性。结论。ＴＧＦβⅠ和ＴＧＦβⅡ     

原发性肝细胞癌患者转化生长因子β1的基因表达及临床意义

目的研究转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）ｍＲＮＡ在原发性肝细胞癌患者中的表达及其临床意义。方法用ＲＴ－ＰＣＲ加ＤｏｔＢｌｏｔ法检测原发性肝细胞癌患者肝组织和外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ水平，并以正常肝组织和正常人的ＰＢＭＣ为对照。结果ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ水平在原发性肝细胞癌患者组肝组织（２．２２±０．８４，ｎ＝１６）和ＰＢＭＣ中（１．８３±１．２，ｎ＝２５）比较，差异无显著性（Ｐ＞０．０５），但两者均高于正常肝组织（０．９４±０．７６，ｎ＝５）和正常人的ＰＢＭＣ（０．６２±０．４０，ｎ＝１６）水平。结论ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ水平与原发性肝细胞癌有关，ＰＢＭＣ中ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ检测可望作为一项代替肝组织活检的指标，其表达水平与肝癌有关。