川乌的纤维素酶酶解提取工艺研究

目的 比较纤维素酶、半仿生、乙醇回流提取方法对川乌中乌头碱、乌头总碱的影响,筛选最佳方法.方法 利用纤维素酶辅助提取川乌生物碱,以乌头碱、乌头总碱提取率为指标,正交试验优化纤维素酶的最佳提取条件,再与半仿生、乙醇提取方法进行比较.结果 提取乌头碱、乌头总碱的最佳酶解条件为:温度45℃,pH值4.5,酶用量8mg/g,酶解时间5 h,乌头碱提取率为0.002 447%,乌头总碱提取率为0.244 410%,半仿生提取乌头碱、乌头总碱的提取率分别为0.001 735%、0.189 340%,乙醇回流提取乌头碱、乌头总碱提取率分别为0.001 869%、0.200 720%,纤维素酶提取法具有明显的优势.结论 酶解提取法可显著提高乌头碱、乌头总碱的提取率,可在实际生产中推广应用.     

铁牛七生物碱提取工艺研究

目的:优选铁牛七中生物碱的提取工艺。方法:采用L16(45)正交设计并结合单因素轮换法,以酸性染料比色法测定总生物碱含量,以高效液相色谱法测定乌头碱含量,对铁牛七中生物碱的提取条件进行优化。结果:总碱和乌头碱具有不同的最佳提取条件。采用6倍量酸性乙醇溶液(无水乙醇∶pH 3.0 HAc=85∶15,v/v)回流提取1 h时总生物碱提取量最高,3次提取基本可将其完全提出,测得总生物碱含量为0.980%;采用4倍量酸性乙醇溶液(无水乙醇∶pH 3.0 HAc=15∶85,v/v)回流提取0.5 h时乌头碱提取量最高,3次提取基本可将其完全提出,测得乌头碱含量为0.109%。结论:实验证明该提取工艺科学、合理。     

浙贝母总生物碱提取工艺优化研究

目的:优化浙贝母中总生物碱提取工艺.方法:以总生物碱含量为指标,采用酸性染料比色法测定浙贝母总生物碱含量,以乙醇用量、乙醇浓度、回流时间为主要影响因素开展正交试验,以回流次数单因素考察优化提取工艺.结果:最佳提取工艺为70%乙醇,6 倍量溶媒,提取2 次,每次2 h.结论:所优选出的提取工艺方法合理可行,稳定可靠.     

酸性染料比色法测定川乌、草乌中总乌头生物碱的含量

目的：摸索快速简便的毒性中药川乌、草乌的含量测定。方法：用酸性染料比色法测定川乌、草乌中的总乌头生物碱含量。结果：在浓度１．８５～１８．５２μｇ／ｍｌ范围内线性关系良好,加样回收率为１０１．２３％,ＲＳＤ为１．４２％。结论：建立的方法可用于川乌、草乌的定量测定。     

洋金花总生物碱提取工艺研究

洋金花为茄科植物白蔓陀罗ＤａｔｕｒａｍｅｔｅｌＬ .的干燥花 ,有平喘止咳、镇痛、解痉的功效。其主要成分为莨菪烷型生物碱[1] 。我们设计研究了其总生物碱的提取工艺并对其中间体进行质量控制。1　工艺设计依据提取工艺 :洋金花的主要化学成分为生物碱。游离生物碱及其盐类一般都能溶于乙醇中 ,故用乙醇为溶剂。醇提取方法有冷浸、渗漉、回流 ,本处方中药材经预试验 ,分别采用醇回流法或酸醇渗漉法。基本工艺为 :分别醇提 ,回收乙醇 ,酸水溶解 ,去除不溶物 ,碱化 ,萃取纯化得总生物碱。2　提取工艺优选根据文献 ,目前多用酸性乙醇提取洋…     

正交试验设计优化桑叶总生物碱提取工艺

目的:利用正交试验设计研究桑叶总生物碱的最佳提取工艺。方法:以煎煮时间和加水量为考察因素,以总生物碱含量为评价指标,采用正交试验优选最佳水煎煮提取工艺条件。结果:优选的最佳提取工艺为用12倍量水煎煮1h。结论:优选得到的工艺稳定、可行,提取得到桑叶总生物碱含量高。     

正交试验优化板蓝根总生物碱的提取工艺

目的:优选板蓝根中总生物碱的超声提取工艺.方法:以总生物碱提取量为指标,采用L9(34)正交试验考察乙醇体积分数、超声时间,料液比对提取工艺的影响,确定最佳提取工艺.结果:各因素对超声提取工艺的影响顺序为乙醇体积分数＞超声时间＞料液比;最佳提取工艺为乙醇体积分数80％,提取时间20 min,料液比1∶10.结论:优选的提取工艺稳定可行,提取率高.     

浙贝母总生物碱对乌头生物碱在兔体内药动学的影响

目的探讨“乌头反贝母”的科学内涵。方法建立血浆固相萃取富集方法及合适的HPLC条件流动相由甲醇水氯仿三乙胺(70∶30∶2∶0.2)组成,流速1.0mL·min-1,检测波长235nm,柱温40℃;对家兔静脉给药动物血浆中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱进行测定。结果新乌头碱、乌头碱与浙贝母总生物碱配伍应用前后,其药动学参数变化二种乌头生物碱与浙贝母总生物碱配伍应用后,其消除半衰期均比单用延长(P<0.05),血浆清除率均比单用减慢(P<0.05),AUC均比单用增大(P<0.05);次乌头碱与浙贝母总生物碱配伍应用后,其药动学参数与单用次乌头碱比,主要参数差异不显著(P>0.05)。结论乌头生物碱与浙贝母总生物碱配伍应用后在动物体内的滞留时间延长和效用时间延长。从药动学角度初步验证了“乌头反贝母”理论的科学性。     

沙塘木总生物碱提取工艺研究

目的:探讨沙塘木药材中总生物碱的提取工艺。方法:通过对沙塘木总生物碱提取参数中乙醇浓度、固液比、提取时间及提取次数进行单因素试验,采用正交优化试验法进一步优化,以沙塘木总生物碱提取率作为考察指标。优化沙塘木总生物碱的提取工艺。结果:经过正交试验得出的最佳工艺条件为:乙醇浓度50%,固液比1:120,提取时间1.25h,水浴回流提取4次,在此条件下沙塘木总生物碱的平均提取率为59.88μmol/g,平均浸膏得率为8.17%。结论:经优化得到的沙塘木总生物碱的提取工艺稳定、可行,沙塘木提取物中总生物碱提取率最高。     

东风桔总生物碱提取工艺优化

目的：建立东风桔总生物碱的含量测定方法并优选其提取工艺。方法：采用酸性染料比色法测定东风桔总生物碱含量,选择Buxifoliadine-B为指标成分,检测波长410 nm。以总生物碱提取量为指标,通过正交试验考察乙醇体积分数、乙醇用量、回流时间及提取次数对提取工艺的影响。结果：Buxifoliadine-B含量测定的线性范围0.034~0.34 g·L^-1,加样回收率（99.16±1.81）%。最佳提取工艺为加10倍量80%乙醇回流提取2次,每次1.5 h;总生物碱提取量4.88 mg·g^-1。结论：建立的东风桔总生物碱含量测定方法稳定可靠,优选的提取工艺方法合理可行。     

附子双酯型生物碱的提取工艺研究

目的:探讨附子中3种双酯型生物碱提取的影响因素,确定适宜的提取条件。方法:采用HPLC法测定中乌头碱、乌头碱和次乌头碱的含量,采用单因素试验法,对附子双酯型生物碱的提取工艺进行研究。结果:最佳双酯型生物碱提取工艺为:在15℃条件下,将附子粗粉置于10倍无水乙醇中冷浸3次,每次1 d,双酯型生物碱收率为0.57%,质量分数为18.81%,其中中乌头碱、乌头碱和次乌头碱收率分别为0.16%、0.032%和0.38%。结论:该提取方法高效、低毒、经济、操作方便,适合工业化生产。     

干姜与附子配伍减毒的物质基础探讨

目的探讨干姜与附子共煎减小附子毒性的有效部位及其机理。方法取干姜的水提物及醋酸乙酯、氯仿和石油醚的提取物分别与附子共煎,取各种煎液进行小鼠口服给药的急性毒性实验及用HPLC法测定煎液中乌头碱,次乌头碱的含量。结果干姜与附子合煎有减小附子毒性的作用,但共煎液中的乌头碱含量增加,次乌头碱含量减小。干姜的氯仿提取物及石油醚提取物与附子共煎可明显减小附子的毒性,同时煎液中乌头碱含量明显减小。尤其是石油醚提取物同时使次乌头碱的煎出量也明显减小。干姜的醋酸乙酯提取物与附子共煎,可明显减小附子的毒性,但煎液中的乌头碱、次乌头碱含量均增加。干姜的水提物与附子共煎毒性略增大,乌头碱与次乌头碱的煎出量略有增加。结论干姜与附子共煎有减轻附子毒性作用。干姜中的氯仿、石油醚提取物可能通过减少乌头碱等有毒物质的煎出量而减小附子的毒性,干姜中的醋酸乙酯提取物可能具有同附子中的有毒生物碱发生某种结合而抑制其吸收的作用,也可能具有吸收后在体内发挥拮抗附子所含有毒生物碱毒性作用。     

甘草与附子配伍对乌头碱、新乌头碱、次乌头碱大鼠药动学的影响

目的:建立HPLC-MS同时测定大鼠血浆中的乌头碱、新乌头碱、次乌头碱含量的方法,并用于研究大鼠口服3种含附子煎液后乌头碱、新乌头碱、次乌头碱的药动学变化。方法:3组大鼠分别灌胃附子煎液(A液)、甘草附子单煎合并液(B液)、甘草附子合煎液(C液),附子剂量均为1.5 g/kg,HPLC-MS法测定乌头碱、新乌头碱、次乌头碱的血药浓度,用DAS 2.0数理统计软件分别计算其药动学参数。结果:甘草与附子配伍后,三种乌头碱的Cmax、AUC均降低,MRT、t1/2均延长,Tmax无明显变化。甘草附子合煎液相比于甘草附子单煎合并液,Cmax、AUC更低,MRT、t1/2更长。结论:甘草能够显著影响附子中三种乌头碱的药动学。     

HPLC法测定草乌中新乌头碱、乌头碱和次乌头碱的含量

[目的]建立HPLC法测定草乌中新乌头碱、乌头碱和次乌头碱含量的方法。[方法]采用Agilent C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);以甲醇-0.1%氨水(磷酸调pH9.0)梯度洗脱,检测波长235nm,柱温30℃,流速1.0mL/min。[结果]三种生物碱得到有效分离,线性范围分别为新乌头碱0.1944～1.1664μg(r=0.9997)、乌头碱0.9920～5.9520μg(r=0.9998)、次乌头碱0.0792～0.4752μg(r=0.9994);平均加样回收率分别为98.3%(RSD=0.97%,n=6)、99.2%(RSD=0.84%,n=6)、98.1%(RSD=1.1%,n=6)。[结论]该方法重复性好,可操作性强,能够用于对草乌的质量控制。     

生乌头与制乌头提取物的药理评价

目的:开展生乌头与制乌头提取物的药理研究与处方原料选择的评价,促进乌头类制剂的发展和临床应用。方法:按照乌头注射液的工艺,制得生草乌与生川乌(合称生乌头)以及制草乌与制川乌(合称制乌头)的混合提取物,以生药0. 152 5 mg·g~(-1)为基础,配得生乌头与制乌头的不同剂量组,开展了镇痛、减慢心率、抑癌等药效和急性毒性、脏器观察等毒理实验,进行系统的分析与评价。结果:与空白组比较,生乌头与制乌头提取物均具有显著的镇痛作用,给药剂量相同时,生乌头注射液的疼痛抑制率(60. 91%)比制乌头注射液的(53. 42%)大,口服给药的生乌头提取物疼痛抑制率(73. 94%)远大于制乌头提取物(29. 97%)(P 0. 01)。减慢心率实验,大鼠给药后第30 min的心率与0 min心率相比,随着给药剂量的增加,生乌头组依次呈现减慢、平稳、加快的趋势,制乌头组则表现为平稳、减慢、加快的顺序,表明生乌头提取物低剂量时可达到减慢心率的作用。噻唑蓝(MTT)比色法结果显示,生乌头与制乌头提取物均具有明显抑制胃癌AGS细胞增殖的作用,剂量相同时,生乌头提取液的抑制作用较制乌头的更强。大鼠急性毒性实验测得生乌头与制乌头提取液的半数致死量(LD_(50))分别为3. 9,21. 0 g·kg~(-1),相当于临床剂量的4,20倍,制乌头的LD_(50)是生乌头的5倍。中毒致死大鼠的解剖发现,肝、肾等脏器均已发黑,中毒症状明显,而临床及其以下剂量的大鼠,各脏器均为正常。结论:生乌头安全性比制乌头的小,但镇痛、减慢心率与抑癌作用来的大,建议乌头注射液等制剂在治疗胃、肝癌晚期等重症疼痛时,原料选用生乌头,治疗一般疼痛的乌头制剂选用制乌头提取物为处方,做到真正安全与疗效相结合地辨证施治。     

桔梗提取工艺的研究

以桔梗中总皂甙含量和浸膏率为考察指标，应用正交设计优选桔梗的提取工艺，选择乙醇浓度、乙醇用量、提取次数和提取时间为影响因素，每个因素取三个水平。结果表明，最佳提取条件为：70％乙醇用量为药材量的3倍，回流提取5次，每次60min，优选得到的工艺稳定可行。     

柴胡提取工艺的研究

以柴胡中总皂苷和浸膏率为考察指标,应用正交设计优选柴胡的提取工艺,乙醇浓度、乙醇用量、回流提取次数、提取时间为影响因素,每个因素取三个水平.结果表明,最佳提取条件为:80%乙醇用量为药材量的4倍,回流提取4次,每次60 min,优选得到的工艺稳定可行.     

附子神经毒性研究进展

传统中药的安全性是指导其临床应用的坚实基础。附子为"百药之长",具有多种功效,但对机体也表现出明显的神经毒性。附子以酯型生物碱为主要毒性物质基础,可作用于中枢神经系统和周围神经系统,其毒作用机制主要涉及离子通道、神经递质、信号转导和能量代谢等。为提高附子临床应用的安全性,降低神经不良反应,本文基于临床研究和动物实验,从附子毒性物质基础、神经毒作用靶器官和神经毒作用机制3个方面具体阐述附子神经毒性的研究现状。     

川乌HPLC指纹图谱的研究

目的:建立不同产地川乌药材的高效液相指纹图谱。方法:实验以Phenemonex Gemini-NX C18为色谱柱,流动相乙腈-0.2%乙酸(浓氨水调pH 10.00),采用梯度洗脱,流速0.8 mL.min-1,柱温35℃,检验波长235 nm,洗脱时间75 min。结果:建立了川乌药材HPLC指纹图谱共有模式,标定了12个共有峰,鉴别出6个色谱峰的归属,指纹图谱的相似度基本都在92%以上,通过系统聚类分析,10批不同产地川乌药材可分为3类。结论:川乌指纹图谱的特征性及专属性强,可结合含量测定用于全面控制川乌的质量。     

甘草与附子配伍煎液的甘草黄酮含量测定

以甘草素与异甘草素为对照品,建立了ＨＰＬＣ法测定甘草黄酮含量的方法,并对甘草与附子配伍前后水煎液中甘草酮的含量进行测定,结果表明：甘草与附子配伍煎煮的黄酮含量明显高于甘草单煎液。单煎液含量为１．１８％,配伍液含量为１．８５％。