乳猪肝胶原水解物的制备及其对荷瘤小鼠肿瘤生长影响的实验研究

目的:从乳猪肝中提取可溶性胶原,经水解后制备肝胶原水解物(HCH),观察其对荷瘤小鼠S180纤维肉瘤和HepA肝瘤增殖的影响。方法:从乳猪肝中用生化方法提取可溶性胶原,经胃蛋白酶水解制备HCH;采用SDS-PAGE电泳和激光飞行时间质谱测定其分子量。设立生理盐水阴性对照和阿霉素阳性对照组,观察HCH对荷瘤昆明小鼠S180纤维肉瘤和HepA肝瘤增殖的影响。结果:电泳结果显示,HCH的分子量范围为3.494~8.702kD,质谱结果显示,其分子量为2.313~8.809kD。其对荷瘤小鼠S180纤维肉瘤生长的抑制呈剂量相关性,25、50、100mg·kg^-1·d^-1的抑制率为53.87%、76.53%、58.20%,而阿霉素(2mg·kg^-1·d^-1)阳性对照组的抑制率为62.41%;HCH能剂量依赖性地抑制HepA肝瘤生长,25、50、100、200mg·kg^-1·d-1的抑制率为43.26%、55.06%、74.71%、40.47%。结论:经此方法制备HCH,其分子量在2~9kDa之间,能抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长。     

CM36抗肿瘤的实验研究

中药提取物ＣＭ３６对小鼠Ｌｅｗｉｓ肺癌、小鼠肝癌（ＨＡＣ）抑瘤作用明显。实验初步表明，对ＨＡＣ的抑瘤作用优于抗癌药ＡＤＭ、ＴＳＰＡ、５ＦＵ以及ＶＰ－１６．似略优于ＭＭＣ。ＣＭ３６的产地不同，抑瘤作用不同，瘤株不同，抑瘤率亦异，ＣＭ３６对Ｓ１８０抑瘤作用差，动物品系不同，仰瘤效果有差别。对昆明种荷ＨＡＣ的抑瘤作用较强而对Ｂａｌｂ／ｃ荷ＨＡＣ的抑瘤作用差。用ＣＭ３６治疗小鼠移植性肿瘤，癌区内有淋巴样细胞及粒细胞与癌细胞紧密接触，癌细胞除坏死外，大量癌细胞退变，细胞浆与异染色质浓缩。ＣＭ３６还能使荷瘤小鼠总Ｔ细胞及其亚群升高，荷瘤小鼠（对照组）于后期Ｔ＿ｈ／Ｔ＿ｓ细胞之比有倒置现象而治疗组则没有，表明ＣＭ３６有免疫调节作用。     

高压氧对荷瘤鼠红、白细胞免疫功能的影响

高压氧对荷瘤鼠红、白细胞免疫功能的影响刘青乐郭峰柯安利金智锋季品芳凌厉为了解高压氧（ｈｙｐｅｒｂａｒｉｃｏｘｙｇｅｎ，ＨＢＯ）对正常和荷瘤小鼠免疫功能的影响，我们观察了荷Ｓ１８０细胞的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠暴露于ＨＢＯ后ＲＢＣ－Ｃ３ｂ受体花环率、ＲＢＣ免疫...     

胎肝提取物对培养中4株肝癌细胞增殖和分化的影响

目的：观察４月胎肝提取物对ＱＧＹ－７７０３、ＢＥＬ－７４０２、ＳＭＭＣ－７７２１人肝癌细胞和ＨｅｐＡ小鼠肝瘤细胞增殖和分化的影响。方法：从４月胎肝中制备提取物,采用［３Ｈ］－ＴｄＲ掺入法和ＭＴＴ比色法。结果：１００～５００ｍｇ／Ｌ的胎肝提取物能明显抑制ＱＧＹ－７７０３、ＢＥＬ－７４０２、ＳＭＭＣ－７７２１、ＨｅｐＡ等肝癌细胞的ＤＮＡ合成和脱氢酶活力。对ＤＮＡ合成的半数抑制浓度（ＩＣ５０）分别为３４６．９３、１５１．１８、１８２．３７、２３１．０３ｍｇ／Ｌ;对脱氢酶活力的抑制弱于对ＤＮＡ合成的抑制,ＩＣ５０分别为１３１８．１、１５９９．２、７９３．８、８１３．１ｍｇ／Ｌ。结论：胎肝提取物能够抑制上述４种细胞增殖和促进分化。     

应用重组质粒pAM－HBsAg在果蝇细胞中表达乙型肝炎病毒表面抗原及基因免疫的初步研究

应用果蝇（ＤＳ２）表达系统，构建了含有乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、摄金蛋白启动子（ＭＴｎ－ｐｒｏｍｏｔｅｒ）的共表达质粒ｐＡＭ－ＨＢｓＡｇ，转染细胞，经克隆，存活细胞株的培养上清液经硫酸铵沉淀、氯化铯（ＣＳＣｌ）密度梯度离心沉淀，获得的抗原用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）、放射免疫分析（ＲＩＡ）法检测抗体，免疫吸印法（Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ）和电泳凝胶银染显色证实分子量为２３０００和２７０００，免疫电镜观察显示表达产物为２２ｕｍ球型颗粒，通过重金属离子（ＣｕＳＯ４、ＺｎＳＯ４）的诱导可增加抗原的表达量。用共表达质粒ｐＡＭ－ＨＢｓＡｇ的ＤＮＡ，注射Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠的股四头肌。经ＥＬＩＳＡ、ＲＩＡ检测抗体产生情况，结果免疫后的小鼠经硫酸锌喂养抗体高于普通喂养的小鼠。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证实鼠肌肉细胞存在ＨＢｓＡｇ基因。小鼠免疫接种实验表明，ＤＳ２细胞表达的抗原与直接用ＤＮＡ含有ＨＢｓＡｇ的重组质粒）免疫小鼠均获抗ＨＢｓＡｇ的抗体。     

Ge-132对荷瘤小鼠肿瘤生长及免疫功能的影响

目的：探讨Ｇｅ－１３２对荷瘤小鼠的抑瘤作用及其抗肿瘤免疫效应机制。方法;以荷瘤小鼠为模型,采用腹腔注射Ｇｅ－１３２「１００,３００ｍｇ／（ｋｇ．ｄ）」,连续注射１４ｄ,观察肿瘤生长及Ｇｅ－１３２对小鼠免疫功能的影响。结果;Ｇｅ－１３２能显著抑制荷瘤小鼠Ｓ１８０肉瘤的生长,抑瘤率达５５％。     

白桦三萜类物质的抗肿瘤作用及其对免疫功能的增强效应

目的：研究白桦三萜类物质（ＴＢＰ）体内抗肿瘤作用及其对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法：利用小鼠体内移植瘤模型,测定ＴＢＰ对小鼠黑色素瘤Ｂ１６、肉瘤Ｓ１８０、Ｌｅｗｉｓ肺癌和艾氏腹水癌等肿瘤的抑瘤率。采用放射性掺入法检测ＣｏｎＡ诱导的脾细胞增殖反应;放射性释放法检测巨噬细胞细胞毒活性;中性红释放法检测ＴＮＦ和ＮＫ细胞活性,结果：ＴＢＰ对各瘤株的抑瘤率均达到３０％以上,对黑色素瘤Ｂ１６的效果最好,抑瘤率     

PA－MSHA菌苗的抗肿瘤活性和免疫调节作用

ＰＡ—ＭＳＨＡ菌苗为新型绿脓杆菌制剂，初步研究应用表明有抑制肿瘤生长和免疫调节作用。本文通过荷瘤（小鼠肝癌１６Ａ３）Ｂａｌｂ／ｃ小鼠动物实验，深入观察了其抗肿瘤作用和对植瘤小鼠免疫功能的影响。结果表明：①菌苗的免疫防御应用可显著增强植瘤小鼠抵抗局部移植瘤的生长和转移，免疫治疗则可提高存活率，延长平均存活期；②预先免疫接种苗苗，可提高植瘤小鼠脾ＣＤ３细胞和ＣＤ４细胞的百分率，调节ＣＤ３／ＣＤ４比值于正常状态中，刺激增强ＮＫ细胞的自然杀伤活性，诱导产生高效价多种抗体应答反应。提示ＰＡ－ＭＳＨＡ菌苗的抗肿瘤活性是通过影响Ｔ淋巴细胞，ＮＫ细胞的功能及体液免疫状态等多个途径实现的。     

Ⅳ型胶原氨基末端肽（7S）的提纯及抗血清制备

Ⅳ型胶原片段７Ｓ是反映慢性肝病肝纤维化程度的重要血清学指标之一。本研究报道自人胎盘组织中提取、纯化该７Ｓ片段，并制备了高效价的兔抗血清。７Ｓ经ＳＤＳ—ＰＡＧＥ电泳鉴定为一均匀条带，分子量为３６０ｋＤ，氨基酸组成分析提示其成分与文献报道基本一致。经间接血凝试验、放射免疫法分析，自制的兔抗血清效价较高，特异性强，可用于放射免疫测定。     

CD自杀基因联合GM-CSF基因治疗的抗肿瘤作用及免疫机理

目的研究自杀基因与粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）基因联合治疗抗肿瘤作用及免疫机理。方法小鼠皮下接种黑色素瘤Ｂ１６Ｆ１０细胞３天后,分别在肿瘤局部直接注射表达小鼠ＧＭ－ＣＳＦ的重组腺病毒ＡｄＧＭ－ＣＳＦ和表达大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶（ＣＤ）基因的腺病毒Ａｄ－ＣＤ,然后连续１０天腹腔注射５氟胞嘧啶（５ＦＣ）（ＡｄＣＤ／５ＦＣ／ＡｄＧＭＣＳＦ组）、单用ＡｄＣＤ／５ＦＣ组、单用ＡｄＧＭ－ＣＳＦ组、注射对照病毒ＡｄｌａｃＺ／５ＦＣ组或ＰＢＳ组。结果与接受ＡｄＣＤ／５ＦＣ、ＡｄＧＭ－ＣＳＦ、ＡｄｌａｃＺ／５ＦＣ或ＰＢＳ治疗的荷瘤小鼠比较,经联合治疗后荷瘤小鼠皮下肿瘤结节的生长明显受到抑制,荷瘤小鼠的存活期明显延长（Ｐ＜０．０１）。经ＡｄＣＤ／５ＦＣ／ＡｄＧＭＣＳＦ联合基因治疗后,肿瘤瘤体内或瘤周有大量树突状细胞、ＣＤ８＋Ｔ细胞浸润,黑色素瘤细胞表达ＭＨＣ－Ⅰ和Ｂ７－１分子明显增加,荷瘤小鼠脾细胞对Ｂ１６Ｆ１０黑色素瘤细胞特异性杀伤功能增强。结论联合应用自杀基因和ＧＭ－ＣＳＦ基因转移可以直接杀伤肿瘤细胞,又可提高机体对肿瘤的免疫应答,两者可协同发挥抗肿瘤作用     

紫草萘醌组分制剂逆转可移植肿瘤的免疫损伤效应

目的:观察紫草萘醌组分可溶性提取物的抗肿瘤和免疫调节作用.方法:紫草萘醌醇提物制备成可溶于水的微乳液(LE)制剂,给荷瘤模型小鼠灌胃;皮下接种HepA22肝癌细胞或S180肉瘤细胞制作荷瘤模型;观察其生存时间、瘤重和免疫学指标.结果:荷瘤小鼠胸腺和脾脏指数以及NK细胞毒、ConA诱导淋转和IL-2生成能力明显降低,胸腺皮质和脾脏生发中心严重萎缩;应用LE阻止荷瘤动物免疫器官形态改变的发生;提高其脾细胞免疫功能.结论:紫草萘醌组分制剂抑制可移植肿瘤原位增殖,逆转荷瘤对小鼠免疫系统的损害.     

Scid小鼠免疫重建及T,B和NK细胞CNE—2Z—H5移植瘤生长…

采用近系淋巴细胞输入或移植胸腺重建Ｓｃｉｄ小鼠免疫功能，以环磷酰胺抑ＢＡＬＢ／Ｃ裸鼠ＮＫ功能，然后移植ＣＮＥ－２Ｚ－Ｈ５。移植瘤生长速率及瘤重依次为：Ｓｃｉｄ小鼠组－ＮＫ功能抑制组－ＢＡＬＢ／Ｃ裸鼠组－免疫重建组；淋巴细胞输入组６／６、胸腺移植组１／３例于荷瘤２２天内移植瘤完全消退。表明免疫重建成功，有较强抗瘤效应。     

小柴胡汤对荷瘤鼠S180细胞生长和结构影响的研究

目的：通过体内实验，探讨小柴胡汤（ＸＣＨＴ）浸膏对荷瘤鼠Ｓ１８０的抑制作用。方法：采用透射电镜观察小柴胡汤对瘤细胞生长和结构的影响。结果：高、中和低浓度ＸＣＨＴ（１０００ｇ·Ｌ－１、５００ｇ·Ｌ－１、２５０ｇ·Ｌ－１）溶液治疗后，对荷瘤鼠Ｓ１８０细胞均有明显抑制作用，抑瘤率４０１９％～５８７３％，其中以高浓度组疗效最佳。同时可见经ＸＣＨＴ治疗后各组Ｓ１８０细胞均出现凋亡的特征，表现为细胞体积变小，核固缩，胞浆和核染色质凝集，密度增高，细胞间有大量凋亡小体，其中以低浓度组为甚，而高浓度组Ｓ１８０细胞则以坏死为主。结论：ＸＣＨＴ对荷瘤鼠Ｓ１８０有明显抑制作用，可诱导Ｓ１８０细胞凋亡及坏死，其中瘤细胞以哪种死亡方式为主，依用药的剂量不同而异     

玉竹提取物B对肿瘤的抑制作用

目的：玉竹提取物Ｂ（Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ Ｂ ｏｆ ｐｏｌｙ－ｇｏｎａｔｕｍ ｏｄｏｒａｔｕｍ,ＥＢ－ＰＡＯＡ）对肿瘤的抑制作用。方法：检测肿瘤细胞株ＣＥＭ增殖和表面分子表达以及观察对小鼠Ｓ－１８０移植瘤的抑制作用。结果：玉竹提取物Ｂ１０＾－３ｍｌ＾－１（Ｖ／Ｖ,以下同）浓度对ＣＥＭ的增殖有显著的抑制作用,并捉进ＣＥＭ表面分子ＨＬＡ－Ｉ分子、ＣＤ２和ＣＤ３的表达,尤其对ＣＤ２分子的表达作用更为显著     

Scid小鼠免疫重建及T、B和NK细胞对CNE－2Z－H_5移植瘤生长的影响

采用近系淋巴细胞输入或移植胸腺重建Ｓｃｉｄ小鼠免疫功能，以环磷酰胺抑制ＢＡＬＢ／Ｃ裸鼠ＮＫ功能，然后移植ＣＮＥ－２Ｚ－Ｈ＿５。移植瘤生长速度及瘤重依次为：Ｓｃｉｄ小鼠组→ＮＫ功能抑制组→ＢＡＬＢ／Ｃ裸鼠组→免疫重建组；淋巴细胞输入组６／６例、胸腺移植组１／３例于荷瘤２２天内移植瘤完全消退。表明免疫重建成功，有较强抗瘤效应。     

DCX对小鼠S180肉瘤和腹水型SP2／O骨髓瘤的治疗作用

ＤＣＸ对小鼠Ｓ１８０肉瘤和腹水型ＳＰ２／Ｏ骨髓瘤的治疗作用赵虎，宋岩峰ＤＣＸ是从粘质沙雷氏菌细胞壁中提取的一种类脂物质，因其对多种体外培养的肿瘤细胞具有直接杀伤作用而命名。我们用改良的化学抽提方法制备出脂溶性的ＤＣＸ，并超声乳化制成ＤＣＸ乳化剂，其中...     

树突状细胞在榄香烯复合瘤苗主动免疫保护效应中的作用

目的 :树突状细胞 (ＤＣ)是体内抗原提呈功能最强的抗原提呈细胞 (ＡＰＣ) ,是唯一能提呈抗原给初始型Ｔ细胞使之活化扩增为效应细胞的专职ＡＰＣ。ＤＣ在榄香烯复合瘤苗主动免疫保护效应中的作用如何 ,怎样提高其作用水平值得探讨。方法 :以ＨＣａ -Ｆ或Ｌ61 5榄香烯复合瘤苗 (Ｈ -ＴＣＶ或Ｌ -ＴＣＶ)、Ｈ -ＴＣＶ可溶性上清 (ＴＨ)、ＣＰ免疫小鼠 ,分离制备其脾脏ＤＣ ,在体外分别用相应瘤细胞上清 (Ｈ或Ｌ)和瘤苗上清 (ＴＨ或ＴＬ)冲激后 ,以ＭＴＴ法检测其诱导同系小鼠脾不粘附细胞增殖的能力。结果 :1 正常小鼠ＤＣ在体外可诱导同系…     

肾综合征出血热病毒结构蛋白的纯化及免疫学特性分析

应用从肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）患者血清中提取的ＩｇＧ与活化的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ偶联，制备亲和层析柱，用此亲和层析柱从ＨＦＲＳＶ感染的小白鼠乳鼠鼠脑中提取出２种分子量为６７０００和５５０００的病毒结构蛋白。经ＥＬＩＳＡ证明，此病毒结构蛋白能与ＨＦＲＳ患者血清ＩｇＧ及抗ＨＦＲＳ病毒的ＭｃＡｂ反应，效价为１６０。与６株抗ＨＦＲＳＶＭｃＡｈ试验表明，此病毒结构蛋白能与Ｈ７株反应。血凝试验证明，此病毒蛋白不能凝集鹅红细胞、鸽血球和人＂Ｏ＂型血红细胞。将纯化的病毒结构蛋白免疫家兔，证明其有较强的免疫原性，可刺激家兔产生特异性抗体；微量中和试验及乳鼠中和试验证明，中和效价为２５６，说明纯化的病毒结构蛋白具有中和抗原位点；免疫血清对感染乳鼠有一定保护作用。     

SRBC膜提取物及其对猪PBMNC激活作用的研究

胰酶水解绵羊红细胞（ＳＲＢＣ）膜得到粗提物，经离子交换层析部分纯化后，获得组分ＴＲＦ－Ⅲ（Ｔｒｙｐｓｉｎ－ｒｅｌｅａｓｅｄｆｒａｃｔｉｏｎⅢ）具有明显抑制ＳＲＢＣ与猪外周血淋巴细胞形成Ｅ玫瑰花的活性，花环形成率与ＴＲＦ－Ⅲ含量有明显的函数关系，电泳测定其分子量为６６ｋＤ。ＴＲＦ－Ⅲ单独作用尽管对ＰＢＭＮＣ的增殖无作用，但可增强ＰＨＡ刺激ＰＢＭＮＣ的增殖作用，ＴＲＦ－Ⅲ单独作用于ＰＢＭＮＣ可显著增强     

流行性出血热病毒核蛋白的血凝位点研究

流行性出血热病毒（ＥＨＦＶ）Ａ９株鼠脑抗原，经Ａ３５ＭｃＡｂ偶联于Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ制备的免疫吸附柱进行亲和层析纯化，并用高压液相色谱（ＨＰＬＣ）进一步纯化，获得了高纯度的病毒核衣壳蛋白（ＮＰ），其分子量为５００００，经不同特性的ＭｃＡｂ和ＥＨＦ患者血清通过间接ＥＬＩＳＡ和Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ鉴定，证实为ＥＨＦ病毒特异性的ＮＰ，且具有血凝活性。将ＨＰＬＣ纯化的ＮＰ免疫小鼠后，可诱导产生特异性血凝抑制抗体，但无中和抗体产生，由此证实ＥＨＦ病毒（Ａ９株）ＮＰ具有构型依赖性血凝活性结合位点。