艾滋病患者支气管肺泡灌洗液标本中三种卡氏肺孢子菌检测方法的比较

卡氏肺孢子菌肺炎(pneumocystis Carinii pneumocystis)是获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者最常见的机会性感染[1].卡氏肺孢子菌(以往称为卡式肺囊虫,缩写为PCP)虽然广泛分布在土壤等周围环境中,但是很少感染免疫系统功能正常的人.     

双氢青蒿素对卡氏肺孢子虫肺炎大鼠肺泡巨噬细胞凋亡的影响

目的：检测双氢青蒿素对卡氏肺孢子虫肺炎（PCP）大鼠肺泡巨噬细胞凋亡的影响。方法：以醋酸可的松皮下洲Wistar大鼠建立PCP动物模型，对60mg/kg双氢青蒿素治疗实验大鼠，杀鼠取肺，用胶原酶消化法分离肺泡巨噬细胞，可PI和TUNEL法检测其凋亡，同时设有正常大鼠对照组。结果：感染组和治疗组大鼠肺泡巨噬．细胞凋亡率显著高于正常对照组，治疗组大鼠肺泡巨噬细胞凋亡率明显低于感染组。结论：卡氏肺孢子虫感染引起大鼠肺泡巨噬细胞发生凋亡，经双氢青蒿素治疗后PCP大鼠肺泡巨噬细胞凋亡降低。     

卡氏肺孢子虫的分类、命名、体外培养及其动物模型的建立

以往所称的“卡氏肺孢子虫” (Pneumocystiscarinii,Pc)能感染包括人和实验动物在内的多种哺乳动物 ,免疫力低下的宿主感染后能引起致命的卡氏肺孢子虫肺炎 (Pneumocystiscariniipneumonia,PCP )或称肺孢子虫病(Pneumocystosis)。国际上已将原感染人体的卡氏肺孢子虫 (Pneumocystiscarinii)更名为Pneumocystisjeroveci,国内张瑞娟、朱淮民( 2 0 0 3)将其译为耶氏肺孢子虫 ,然尚未被广泛应用。其生物学分类也由原来动物界的原虫定为真菌界的真菌类。重新命名和跨界的分类归属具有重要意义 ,然而 ,国内有关“卡氏肺孢子虫”的报道 ,尚未启…     

双氢青蒿素对卜氏肺孢子虫肺炎大鼠TNF—α水平的影响

目的 研究双氢青蒿素对卡氏肺孢子虫肺炎大鼠血清和肺泡巨噬细胞培养上清液TNF－α水平的影响。方法 以醋酸可的松皮下注射Wistar大鼠建立卡氏肺孢子虫肺炎动物模型，用60mg/kg双氢青蒿素治疗实验大鼠，杀鼠取肺，用胶原酶消化法分离肺泡巨噬细胞，用LPS刺培养72h，同时设有感染组和正常对照，用TNF－α水平则低于感染组。结论 卡氏肺孢子虫感染引起大鼠肺泡巨噬细胞分泌高水平的TNF－α，但双氢青蒿素治疗后PCP大鼠肺泡巨噬细胞产生TNF－α水平降低。     

mtLSU-巢式PCR检测实验大鼠卡氏肺孢子虫的实验研究

目的对mtLSU-巢式PCR方法检测大鼠卡氏肺孢子虫的应用价值以及基因序列进行评价。方法采用地塞米松免疫抑制法诱导大鼠感染肺孢子虫;实验组10只,对照组1只;诱导至第7周时收集实验组及对照组大鼠肺组织和支气管肺泡灌洗液（BALF）标本,采用mtLSU-巢式PCR方法对人源与鼠源肺孢子虫共有的基因进行扩增和序列测定,同时采用镜检法对实验组大鼠肺组织和肺泡灌洗液标本进行检测,评估两种方法的敏感性。结果采用mtLSU-巢式PCR方法对实验感染大鼠肺组织和BAL进行检测,卡氏肺孢子虫DNA阳性率分别为100%（10/10）、90%（9/10）。而GMS染色镜检法检测的阳性率分别为80%（8/10）、60%（6/10）。所测Wistar大鼠卡氏肺孢子虫mtLSU基因序列长度为155bp,与GenBank的大鼠源肺孢子虫（U20170）及人源肺孢子虫（DQ473446）同源性均为100%（154/154、155/155）。结论 mtLSU-巢式PCR方法应用于大鼠卡氏肺孢子虫检测敏感性高,特异性强;获得与人源耶氏肺孢子虫相同的Wistar大鼠卡氏肺孢子虫mtLSU的基因序列。     

卡氏肺孢子虫肺炎大鼠血清中TNF—α、IL-8和sICAM-1水平的变化

目的检测卡氏肺孢子虫肺炎（PCP）大鼠血清中TNF-α、IL-8和sICAM-1水平。方法建立清洁级SD大鼠PCP动物模型,同时设正常对照组,检测血清中TNF-α、IL-8和sICAM-1含量。并观察肺脏病理学的变化。结果PCP模型组血清中TNF-α、IL-8和sICAM-1含量分别是（3．65±0．73）ng／mL、（0．65±0．12）ng／mL和（1247．39±288．57）pg／mL,正常对照组的含量分别是（0．70±0．21）ng／mL、（0．14±0．10）ng／mL和（261．40±53．21）pg／mL,并且PCP模型组肺组织炎症反应明显。结论卡氏肺孢子虫肺炎大鼠血清中TNF-α、IL-8和sICAM-1的含量均升高,并且肺组织炎症反应明显。     

双氢青蒿素对卡氏肺孢子虫肺炎大鼠TNF-α水平的影响

目的研究双氢青蒿素治疗对卡氏肺孢子虫肺炎大鼠血清和肺泡巨噬细胞培养上清液 TNF- α水平的影响。方法以醋酸可的松皮下注射 Wistar大鼠建立卡氏肺孢子虫肺炎动物模型 ,用 60 m g/ kg双氢青蒿素治疗实验大鼠 ,杀鼠取肺 ,用胶原酶消化法分离肺泡巨噬细胞 ,用 L PS刺激培养 72 h,同时设有感染组和正常对照。用 TNF- α试剂盒分别检测血清和培养上清液 TNF- α的水平。结果感染组和治疗组 TNF- α水平均高于正常对照 ,治疗组 TNF- α水平则低于感染组。结论卡氏肺孢子虫感染引起大鼠肺泡巨噬细胞分泌高水平的 TNF- α,但双氢青蒿素治疗后 PCP大鼠肺泡巨噬细胞产生 TNF- α水平降低。     

复方磺胺甲恶唑对肾移植后卡氏肺孢子虫肺炎的预防作用

背景：卡氏肺孢子虫肺炎是由卡氏肺孢子虫寄生于肺部引起的一种严重的致命性肺炎。复方磺胺甲恶唑是目前用于治疗卡氏肺孢子虫肺炎的一线药物,治疗量往往有明显的不良反应,小剂量预防用药临床疗效及毒副作用尚不清楚。 目的：观察复方磺胺甲恶唑对肾移植后卡氏肺孢子虫肺炎的预防效果。 方法：选择肾移植后1个月且无复方磺胺甲恶唑过敏者。肾移植后1个月至半年或1年常规服用复方磺胺甲恶唑(0.48 g/d)。观察移植肝肾功能,感染情况,药物不良反应。 结果与结论：2006年起,随访125例肾移植术后早期患者,73例术后1个月起常规服用复方磺胺甲恶唑(0.48 g/d)至术后半年者,1例停药4个月后感染卡氏肺孢子虫肺炎死亡,47例服用复方磺胺甲恶唑(0.48 g/d)至术后1年者,无感染卡氏肺孢子虫肺炎者,5例因复方磺胺甲恶唑过敏或医从性差未服用复方磺胺甲恶唑者,2例分别在术后4,5个月感染卡氏肺孢子虫肺炎,1例死亡。结果提示,肾移植术后1个月至1年常规服用复方磺胺甲恶唑(0.48 g/d),可有效预防卡氏肺孢子虫肺炎,临床无明显不良反应。     

系统性红斑狼疮并发肺孢子虫肺炎的临床病例报告

目的探讨系统性红斑狼疮并发肺孢子虫肺炎（PCP）的诊断和防治措施。方法研究1例系统性红斑狼疮并发肺孢子虫肺炎患者的临床表现、实验室检查结果、影像学资料以及诊断和治疗的方法。结果患者出现发热、干咳、无痰、胸闷、伴阵发性呼吸困难等症状,血氧饱和度下降,胸部CT显示两肺部毛玻璃状改变,肺泡灌洗液找到肺孢子虫。给予复方新诺明、卡泊芬净、调整免疫抑制剂及其它支持对症治疗,痊愈出院。结论免疫功能抑制患者有发热、干咳、呼吸困难等临床症状,应考虑PCP并及时做病原学检查。     

加味补中益气汤治疗大鼠肺孢子虫肺炎的疗效观察

目的探讨加味补中益气汤治疗大鼠肺孢子虫肺炎（PCP）的疗效。方法按国内公认的PCP造模方法，建立大鼠PCP动物模型。设中药治疗组和预防组，同时建立西药对照组、PCP模型对照组及正常对照组。通过观察各组大鼠存活率、体重、肺内肺孢子虫包囊的数量和肺组织病理学变化考核药物疗效。结果中药组大鼠存活率高于PCP模型组，但低于正常组；中药治疗组和预防组大鼠平均体重高于PCP模型组，包囊数低于PCP模型对照组；中药治疗组和预防组大鼠肺组织炎症反应明显轻于PCP模型对照组。结论加味补中益气汤对大鼠肺孢子虫肺炎，有一定的疗效。     

卡氏肺孢子虫肺炎大、小鼠低死亡率动物模型的建立

为建立低死亡率卡氏肺孢子虫肺炎 (PCP)SD大鼠和ICR小鼠动物模型 ,本试验将雌性SD大鼠和ICR小鼠分别随机分为实验组和对照组 ,实验组采用按体重定量皮下注射地塞米松的方法 ,免疫抑制诱导建立PCP动物模型 ,对照组注射与地塞米松等体积的生理盐水。分别制作肺印片 ,经瑞 姬氏复合染色后 ,检查卡氏肺孢子虫包囊。制作肺组织病理切片 ,经HE染色后观察肺组织病理变化。用地塞米松诱导后 ,实验组SD大鼠和ICR小鼠死亡率均为 0 ,肺印片阳性率均为 76 7% (2 3 30和 2 3 30 )。肺组织出现典型的病理变化 ,并可观察到Pc包囊。实验组SD大鼠体重下降明显 ,与对照组体重比较具有极显著性差异 (P <0 0 1)。ICR小鼠经诱导后 ,体重变化不显著。采用按体重定量皮下注射地塞米松的方法可建立低死亡率PCP动物模型     

肾小球肾炎患者免疫抑制治疗后并发卡氏肺孢子虫肺炎

目的 研究糖皮质激素联合细胞毒药物治疗肾小球肾炎并发卡氏肺孢子虫肺炎（PCP）的临床表现。方法 回顾性分析3例糖皮质激素联合细胞毒药物治疗肾小球肾炎并发PCP的临床，并复习相关文献资料。结果 3例患者年龄为28～67岁，男性2例，女性1例。1例为原发性肾小球肾炎、1例为狼疮性肾炎、1例为显微镜下多血管炎致新月体肾炎。PCP表现均出现在接受糖皮质激素联合细胞毒药物（包括环磷酰胺、雷公藤多甙片、甲氨喋呤）过程中，其中1例曾给予甲基强的松龙冲击治疗。3例均表现为发热、进行性呼吸困难、Ⅰ型呼吸衰竭，影像学检查提示双肺弥漫性间质病变；2例痰涂片发现号氏肺孢子虫（PC）包囊，1例痰聚合酶链反应检测Pc阳性。2例经复方新诺明治疗后痊愈，1例死亡。结论 肾小球肾炎患者免疫抑制治疗后出现进行性低氧血症应考虑PCP的可能性，需早期诊断、治疗。     

卡氏肺大鼠肺泡巨噬细胞TNF-α、IL-1β、IL-6基因表达的变化

目的探讨卡氏肺孢子虫肺炎(Pneumocysitis carinii pneumonia,PCP)大鼠肺泡巨噬细胞(Alveolar macrophage,AM)TNF-α、IL-1β、IL-6基因表达的变化。方法采用AM体外培养技术,应用RT-PCR法分别测定脂多糖(LPS)诱导的AM中TNF-α、IL-1β、IL-6基因表达的动态变化。结果肺泡巨噬细胞受LPS刺激后,PCP模型大鼠TNF-αmRNA在1、4 h表达高于正常组(P<0.05),IL-1βmRNA表达在4、8 h时表达高于正常组(P<0.01),IL-6mRNA表达在8 h时PCP高于正常(P<0.05),表达峰值都提前,并且在4 h达到峰值。结论LPS刺激后,PCP大鼠肺泡巨噬细胞在早期可能更易分泌TNF-α、IL-1β、IL-6作为免疫分子,起免疫防御和免疫损伤作用。     

免疫组化和GMS染色对AIDS合并肺孢子菌肺炎的临床诊断价值

目的 探讨免疫组化及六胺银(gomori's methenamine silver nitrate stain,GMS)染色法对AIDS合并肺孢子菌肺炎(pneumocystis pneumonia,PCP)的临床诊断价值.方法 选择50例临床确诊为合并PCP的AIDS患者作为实验组(PCP组)、25例非PCP的呼吸道感染患者作为对照组,分别采用单克隆抗体免疫组化法和GMS染色法对两组患者的支纤镜肺活检标本进行肺孢子菌(pneumocystis jiroveri,Pj)检测,并比较两种方法的敏感性和特异性.结果 免疫组化法检测Pj的敏感性为66%(33/50),特异性为100%(25/25);GMS染色法检测Pj的敏感性为42%(21/50),特异性为92%(23/25).结论 免疫组化法检测Pj的敏感性和特异性均高于GMS染色法,这将有助于提高Pj的检出率及PCP的确诊率.     

实验性卡氏肺孢子虫肺炎的病理学研究

Ｗｉｓｔａｒ大鼠皮下注射醋酸考的松诱发卡氏肺孢子虫肺炎，自第６～１２周，每周解剖病鼠２只观察，全部给药鼠均发病。肺部病变表现为：（１）肺印片查见卡氏肺孢子虫包囊和滋养体。（２）组织病理学改变：第６～８周ＨＥ染色切片呈间质性肺炎伴中度淋巴细胞浸润，肺泡内缺乏泡沫样渗出物，第９～１２周肺泡内出现泡沫样渗出物，ＰＡＳ染色该渗出物呈阳性反应，ＧＭＳ染色查见染成黑色的包囊。（３）停用醋酸考的松后４～６周，肺部炎症明显好转，提示大鼠卡氏肺孢子虫肺炎有自愈可能。电镜显示包囊、滋养体及受损肺泡上皮细胞的超微结构。     

肾移植后并发卡氏肺孢子虫肺炎36例资料回顾(英文)

背景:卡氏肺孢子虫肺炎是常见的肾移植后早期并发症,起病隐匿,进展快,若诊治不及时,死亡率高,认识和掌握肾移植后卡氏肺孢子虫肺炎的发生发展规律和干预措施具有重要的临床意义。目的:回顾性分析肾移植后并发卡氏肺孢子虫肺炎的病因、临床特点、诊疗措施及预后。方法:回顾分析36例南方医科大学珠江医院器官移植科收治的肾移植后并发卡氏肺孢子虫肺炎患者的临床资料,分析一般状况、临床表现、治疗方案及人、肾预后情况,总结和认识该病诊断干预措施。结果与结论:36例患者中男22例,女14例,33例痊愈且移植肾功能保持良好,3例患者并发严重急性呼吸窘迫综合征死亡。36例患者卡氏肺孢子虫肺炎发生在肾移植后6个月内31例,7～18个月5例。15例(41.7%)通过纤维支气管镜下支气管灌洗液或肺组织活检检出卡氏肺孢子虫,21例未检出。多数患者经过减少免疫抑制剂、给予复方磺胺甲恶唑及支持治疗后痊愈且移植肾功能良好。提示卡氏肺孢子虫肺炎多发生在肾移植后6个月内,临床症状典型,病原体难以发现,早期诊断主要依据临床病史、症状和影像学检查,尽早、足量给予复方磺胺甲恶唑,减少免疫抑制剂,充分的支持治疗能改善预后。     

人源肺孢子虫纯培养株的建立及基因鉴定

目的建立人源肺孢子虫（PneUmOCySaSj／rovec／，Pj）纯培养株。方法从肺孢子虫肺炎（PCP）患者的支气管肺泡灌洗液（BALF）中分离巧，用改良IMDM培养基做原代、传代和冻存复苏培养；以四胺银染色计数法观察虫体增殖情况；以线粒体rRNA大亚基特异引物扩增培养物中的目的基因，与基因库中的鼠源和人源肺孢子虫基因做序列比较。结果用添加S-腺苷甲硫氨酸（SAM）等辅助剂的IMDM培养基从2例PCP患者的BALF中分离出2个巧纯培养株。分离培养的巧可进行冷冻保存和复苏培养。培养120h的巧包囊可增殖3．2倍。基因序列分析证实分离出的巧株与鼠源性肺孢子虫的线粒体rRNA大亚基同源性为67．8％，与GenBank中巧的同源性为93．2％。结论用本法建立了2个Pj纯培养株。     

中国耶氏肺孢子虫基因型的初步分析

为研究我国耶氏肺孢子虫的基因分型,利用巢式PCR方法扩增24例肺孢子虫肺炎(PCP)患者支气管肺泡灌洗液中的耶氏肺孢子虫(Pneumocystis jiroveci)核糖体DNA内转录间隔区(ITS1-5.8S rDNA-ITS2)基因。纯化回收目的片段,将其克隆到PMD18-T载体,并导入JM109细胞系中,每个标本制备3~5个克隆,提取质粒测序。从19例患者的标本中检出ITS1-5.8S rDNA-ITS2基因,其中12份标本的25个克隆的测序结果可用于基因分型。经与Lee等(1998)的分型标准进行比对,本组病例耶氏肺孢子虫的ITS1分为B、E、I、N4型,最常见的为E型;ITS2分为a、b、e、h、i、n6型,最常见的为i型;ITS基因分9型,以Bi多见,有2份标本存在混合感染。     

先天性免疫缺陷合并肺孢子虫性肺炎一例尸解报告

肺孢子虫性肺炎过去曾称卡氏肺囊虫病及浆细胞性肺炎。是由肺孢子虫感染而引起的一种肺组织特殊炎性病变。肺孢子虫系Chagas氏1909年在豚鼠肺中发现,1910年Carinii氏在大鼠肺中见到同样虫体,人体肺孢子虫性感染最早是由Vander Meer氏等所发现并报告的。第二次世界大战后,本病曾在欧洲流行,以后美洲、大洋洲、非洲及亚     

肾移植后合并卡氏肺孢子虫肺炎：10年同一机构378例中的12例

背景：在肾移植后早期,由于免疫抑制剂用量较大,患者的免疫功能明显受到抑制,卡氏肺孢子虫肺炎在此期间相对高发。 目的：分析肾移植后并发卡氏肺孢子虫肺炎的临床特点、诊治及预防。 方法：收集佛山市第一人民医院肾内科2000-11/2010-07肾移植378例中并发卡氏肺孢子虫肺炎12例患者的临床资料,分别对其发病时间、易感因素、诊断方法、临床表现及治疗方案、预防效果进行回顾性分析。 结果与结论：发病时间为移植后5.3(3~11)个月。12例患者均有发热,体温达38.0~40.2 ℃,气促及紫绀。9例轻微咳嗽,5例少量白痰,1例红色泡沫痰。5例合并细菌感染,2例合并真菌感染,2例合并巨细胞病毒感染,1例合并结核。服用他克莫司患者感染发生率为7.8%(7/89),服用环孢素A患者感染发生率为1.7%(5/289)。9例使用呼吸机,2例使用呼吸机无创性连续鼻或口鼻面罩治疗。8例痊愈,2例治疗中出现血小板减少致脑出血死亡,1例合并真菌感染死亡,1例合并血气胸死亡。治疗期间,无排斥反应发生。说明早期诊断,联合用药,减少免疫抑制剂用量是提高卡氏肺孢子虫肺感染治愈率的关键。