EMT和IGF-1R表达与吉非替尼二线治疗晚期非小细胞肺癌疗效的关系

目的探讨晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者中上皮-间质转化(EMT)和胰岛素样生长因子1型受体(IGF-1R)表达与吉非替尼二线治疗效果的相关性。方法收集76例接受吉非替尼二线治疗的Ⅳ期NSCLC患者的临床资料和病理标本。采用免疫组化染色法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和IGF-1R表达情况,将E-cadherin(-)、Vimentin(+)定义为EMT(+),E-cadherin(+)、Vimentin(-)定义为EMT(-)。采用液相芯片技术对其中43例标本进行EGFR基因突变检测;根据患者的CT资料进行疗效评价,计算客观有效率(ORR)和疾病控制率(DCR)。分析EMTI、GF-1R表达与患者临床病理特征的关系,EMT与IGF-1R表达的相关性,IGF-1R、EMT表达与EGFR突变的关系,以及在NSCLC患者中EMTI、GF-1R表达对吉非替尼疗效的影响。结果 76例患者中,IGF-1R、E-cadherin和Vimentin的阳性表达率分别为64.5%4、6.1%和53.9%。EMT表达与临床病理特征未显示出相关性,但IGF-1R表达与NSCLC的病理类型相关,非腺癌患者阳性率[22/28(78.5%)]显著高于腺癌患者[27/48(56.2%)]。EMT与IGF-1R表达呈弱相关(r=0.252,P=0.028)。EMT(-)多见于EGFR突变型患者,而IGF-1R表达与EGFR突变状态无关。DCR和ORR在EMT(-)者(65.7%3、7.1%)较EMT(+)者(24.3%9、.8%)显著提高(P<0.05),在IGF-1R(-)者(66.7%3、7.0%)较IGF-1R(+)者(30.6%、14.3%)显著提高(P<0.05)。在EGFR突变型患者中,EMT(-)者的ORR较EMT(+)者有升高的趋势。在EGFR野生型患者中,EMT与IGF-1R双阴性者的ORR最高。结论 EMT和IGF-1R表达可能与吉非替尼的疗效相关,可作为吉非替尼二线治疗NSCLC的疗效预测因子之一。     

影响吉非替尼治疗晚期肺腺癌患者疗效的临床因素分析

目的总结应用吉非替尼治疗的78例晚期肺腺癌患者,探讨影响疗效的各种临床因素。方法回顾性分析我院2010年1月～2011年12月接受吉非替尼治疗的78例晚期肺腺癌患者,分别对性别、分期、吸烟状况、PS评分、血清CEA及EGFR突变状况等临床资料进行总结,分析可能影响疗效的临床因素。结果①78例晚期肺腺癌患者经吉非替尼治疗3月后评价疗效,客观缓解率为48.7%,疾病控制率为83.3%。治疗前患者的吸烟状况、PS评分、血清CEA及EGFR突变状况与治疗获益有显著相关（P〈0.05）。②治疗获益的65例晚期肺腺癌患者,吸烟状况、PS评分、血清CEA及EGFR突变状况影响疾病进展时间（P〈0.05）;性别及临床分期虽然与疾病进展时间无统计学意义,但女性及分期较早的患者仍有较大获益趋势。结论吉非替尼对晚期肺腺癌患者表现出良好的抗肿瘤活性,不吸烟、PS评分低、CEA水平高及有EGFR突变的患者更易从吉非替尼治疗中获益。     

双氢青蒿素联合吉非替尼抑制肺腺癌细胞周期和迁移能力的体外研究

 目的 探究双氢青蒿素(dihydroartemisinin, DHA)联合吉非替尼(gefitinib, GEF)对肺腺癌细胞系的细胞周期和迁移能力的影响。方法 10 μM DHA和(或)50 μM GEF处理肺腺癌细胞系A549和SPC-A-1,四唑盐(methyl thiazolyl tetrazolim, MTT)比色法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,划痕实验检测细胞迁移,蛋白质印记法(western blot, WB)检测单独或联合应用DHA和GEF对细胞周期和迁移相关蛋白表达的影响。结果 MTT实验结果显示联合应用DHA和GEF(Com组)后,A549和SPC-A-1的增殖能力显著低于单药组和对照(NC)组,且具有时间依赖性(P＜0.05);碘化丙啶(propidium iodide, PI)单染流式细胞术检测细胞阻滞于G₀/G₁期;WB显示与NC组和单药组相比,Com组细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶4(cyclin dependent kinase 4,CDK4)和细胞周期素D1(Cyclin D1)表达显著下降;划痕实验中Com组细胞融合率显著低于NC组和单药组,并伴随基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)2和MMP9表达下降,差异均具有统计学意义(P＜0.05)。结论 DHA联合GEF可以显著抑制肺腺癌细胞的增殖和迁移,并阻滞细胞周期。     

埃克替尼治疗晚期非小细胞肺癌复发的临床疗效及安全性

目的 对比分析埃克替尼与吉非替尼治疗晚期非小细胞肺癌复发的临床疗效及安全性.方法 收治的52例复发性晚期非小细胞肺癌患者为研究对象,随机分为对照组和观察组,各26例.对比分析两组患者临床治疗效果、生存期和不良反应.结果 对照组:部分缓解9例、稳定10例、进展7例,近期有效率为50.0％,疾病控制率为73.1％;无进展生存期为(7.9±1.6)个月,不良反应率26.9％.观察组:部分缓解10例、稳定10例、进展6例,近期有效率为53.8％,疾病控制率为76.9％;无进展生存期为(8.7±1.4)个月,不良反应率57.7％.观察组生存期和不良反应率明显优于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 与吉非替尼比较,埃克替尼治疗晚期非小细胞肺癌复发临床疗效一致,但埃克替尼安全性更高,值得临床应用.     

埃克替尼治疗30例非小细胞肺癌脑转移疗效及不良反应的初步分析

目的 探讨埃克替尼治疗非小细胞肺癌(NSCLC)脑转移的疗效及不良反应.方法 对2011年9月-2015年11月入住武汉同济医院的30例晚期NSCLC脑转移患者进行随访研究,均单药使用埃克替尼治疗,中位随访时间24(5.5～49.0)个月,随访率100％,记录治疗有效性及不良反应数据.结果 共纳入30例患者,中位颅内病灶无进展时间(iPFS)为9.6个月,颅内病灶疾病控制率(DCR)为73.3％,客观缓解率(ORR)为26.7％;中位颅外病灶无进展生存时间(ePFS)为10.1个月,颅外病灶DCR为73.3％,ORR为36.7％.1年生存率为63.8％.治疗相关的不良反应主要为:皮疹(40.0％)、腹泻(16.7％)及转氨酶升高(3.3％),均为Ⅰ-Ⅱ度反应,未出现头痛、呕吐、乏力等不良反应.结论 埃克替尼治疗NSCLC脑转移具有一定疗效,且耐受性较好.     

吉非替尼联合化疗治疗表皮生长因子受体基因突变阳性非小细胞肺癌疗效及生存分析

目的探讨吉非替尼联合化疗治疗表皮生长因子受体(EGFR)基因突变阳性的非小细胞肺癌患者疗效及生存分析。方法选取自2011年12月至2014年12月收治的76例EGFR基因突变阳性的非小细胞肺癌患者为研究对象,采用随机数字表法分为A组(n=38)与B组(n=38)。A组采用单纯化疗治疗;B组给予吉非替尼250 mg/d联合化疗治疗。比较两组患者治疗总有效率、疾病控制率(DCR)、无进展存活时间(PFS)、总存活期(OS)、生活质量(QOL)评分以及不良反应发生情况。结果 B组患者总有效率为71.1%(27/38),高于A组的36.8%(14/38),组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。B组DCR为89.5%(34/38),高于A组的50.0%(19/38),组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。B组患者的PFS为(16.21±1.32)个月,高于A组的(12.21±1.32)个月;B组患者的OS为(29.21±1.32)个月,高于A组的(23.21±1.32)个月,组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。B组患者的QOL评分为(81.21±1.34)分,高于A组的(60.21±1.62)分,组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。B组不良反应发生率为10.4%(4/38),低于A组的23.6%(9/38),组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论针对EGFR基因突变阳性的非小细胞肺癌患者的治疗,采用靶向药物吉非替尼联合化疗治疗效果较好,可延长患者生存时间,减少不良反应。     

吉非替尼与培美曲塞治疗NSCLC脑转移的疗效比较

目的探讨吉非替尼和培美曲塞治疗非小细胞肺癌脑转移的疗效。方法对2007年1月~2009年12月我院肿瘤内科收治的35例进行吉非替尼和培美曲塞治疗的非小细胞癌脑转移患者资料进行总结,分析其总有效率和不良反应。结果吉非替尼组RR（CR＋PR）率高于培美曲塞组,两组治疗不良反应无明显差异。结论吉非替尼对非小细胞肺癌脑转移治疗有较好效果,但是要注意其不良反应如皮疹、腹泻等的控制。     

吉非替尼联合125I放射性粒子治疗肺腺癌有效性的动物研究

【摘要】　目的?研究吉非替尼联合125I放射性粒子治疗肺癌A549细胞裸鼠移植瘤有效性研究。方法?利用稳定表达荧光素酶的A549-luc人肺腺癌细胞建立裸鼠皮下移植瘤模型24只,20 d后成瘤大小8～10 mm。24只荷瘤裸鼠随机分为空白对照组6只、125I放射性粒子植入组6只,吉非替尼组6只,吉非替尼联合125I放射性粒子植入组6只。观察肿瘤生长情况,持续测量肿瘤大小变化。利用活体生物发光成像检测含荧光素酶报告基因的人肺腺癌A549-luc细胞在体内的生物发光活性。治疗前和治疗后1周行18F-FDG Micro-PET/CT检查。35 d后处死裸鼠,绘制肿瘤生长曲线。结果?4组治疗前肿瘤体积差异无统计学意义,治疗后5周4组（对照组,125I放射性粒子组,吉非替尼组,联合用药组）肿瘤体积分别为（1 509.25±709.93）、（840.45±43.35）、（1 052.96±247.42）和（317.34±52.08）mm3,联合组与另外3组比较差异有统计学意义（F=10.305,P＜0.05）。吉非替尼联合125I放射性粒子明显低于吉非替尼组、125I放射性粒子组和对照组,且明显低于治疗前;4组治疗前肿瘤生物荧光信号强度无明显差异,治疗后4周4组肿瘤生物荧光光子数分别为（198 605 000.0±12 976 503.00）、（99 263 333.33±49 293 480.57）、（87 419 500.0±24 039 740.21）、（48 433 333.33±14 417 910.62）P/sec/cm2/sr,差异有统计学意义（F=28.975,P＜0.05）,吉非替尼联合125I放射性粒子植入组明显低于单独125I放射性粒子组、吉非替尼组和对照组,且明显低于治疗前。4组治疗前SUVmax和SUVmean值差异无统计学意义,治疗后1周4组SUVmax和SUVmean值分别为0.79±0.14和0.54±0.06、0.76±0.33和0.47±0.41、0.79±0.15和0.48±0.11、0.74±0.14和0.57±0.74,差异无统计学意义（F=0.201, P＞0.05）。结论?吉非替尼联合125I粒子近距离治疗能显著抑制肿瘤的生长。     

结肠癌细胞对吉非替尼的敏感性与Akt、MAPK表达的关系

达最弱(P<0.05).结论 Akt、MAPK及其磷酸化蛋白的表达水平与结肠癌细胞对吉非替尼的敏感性不一致,提示结肠癌对吉非替尼的反应性不能完全由EGFR表达和活性决定,也与其下游信号蛋白Akt、MAPK无关.     

X射线诱导非小细胞肺癌A549细胞凋亡的适应性反应及相关miRNA筛选的研究

目的 研究X射线辐射诱导非小细胞肺癌（NSCLC）A549细胞凋亡的适应性反应,并筛选适应性反应相关的微RNA（miRNA）。 方法 将NSCLC A549细胞分为6组,包括 50 mGy+20 Gy、200 mGy+20 Gy、20 Gy、50 mGy、200 mGy照射组及对照组（0 Gy）,前2组细胞分别用50、200 mGy初始剂量进行照射,培养6 h后用20 Gy的效应剂量进行照射,20 Gy、50 mGy、200 mGy照射组同时进行照射。培养24 h后使用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。利用小RNA测序技术筛选差异表达miRNA,并对其靶基因进行基因本体（GO）及京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路的功能富集分析。采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）对部分差异表达miRNA进行验证。2组间数据的比较采用Welch t检验。 结果 50 mGy+20 Gy照射组和200 mGy+20 Gy照射组的A549细胞早期凋亡率分别为（1.81±0.11）%和（2.17±0.19）%,低于20 Gy照射组的（4.54±0.23）%,且差异均有统计学意义（t=10.680、8.006,均P<0.01）。与20 Gy照射组相比,50 mGy+20 Gy照射组和200 mGy+20 Gy照射组共同差异表达趋势miRNA有1个上调（miR-3662）、15个下调（miR-185-3p、miR-1908-5p、miR-1307-5p、miR-182-3p、miR-92a-3p、miR-582-5p、miR-501-3p、miR-138-5P、miR-1260b、miR-484、miR-378d、miR-193b-3P、miR-127-3p、miR-1303及miR-654-5p）。GO富集分析结果显示,差异表达miRNA调控靶基因功能显著富集于细胞通讯调节、代谢过程的正向调节、代谢信号的调节、酶结合及催化活性等过程。KEGG富集分析结果显示,靶基因相关信号通路显著富集于溶酶体、丝裂原活化蛋白激酶、Ras和内吞作用等信号通路。qRT-PCR检测结果显示,miRNA表达情况与基因芯片结果趋势一致（10个miRNA表达水平得到验证）。 结论 X射线50、200 mGy照射剂量均能诱导NSCLC A549细胞凋亡的适应性反应,并筛选到一组共同差异表达的miRNA,可能在X射线辐射诱导细胞凋亡的适应性反应中发挥了重要作用,有可能成为调节电离辐射生物效应的潜在靶点。     

降低B7-H3蛋白对受照肺癌细胞A549细胞周期和凋亡的影响

目的观察用小干扰RNA（siRNA）敲降B7-H3蛋白的表达对人肺癌细胞A549的细胞周期和凋亡的影响。 方法培养人肺癌A549细胞,将B7-H3蛋白siRNA瞬时转染于A549细胞（称为siB7-H3转染组）。实验分为4组,即对照组、siB7-H3转染组、照射组、照射+siB7-H3转染组。采用137Cs γ射线一次性照射,照射剂量为4 Gy;用Western blotting法和实时定量PCR分别检测B7-H3蛋白和mRNA的表达;流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡的改变。 结果与对照组相比,siB7-H3转染组的B7-H3蛋白水平明显降低,mRNA表达量也明显低于对照组且差异有统计学意义（t=-4.222,P=0.013）。siB7-H3转染组细胞的G0/G1期细胞阻滞,S和G2/M期细胞数量减少;与对照组相比,照射组出现轻微的G0/G1期阻滞和明显的G2/M期细胞阻滞,照射+siB7-H3转染组的G0/G1、G2/M期均有明显的阻滞。照射后48 h,与对照组相比,照射组细胞的坏死率和凋亡率明显升高,siB7-H3转染组和照射+siB7-H3转染组的坏死率和凋亡率均无明显改变。 结论降低肺癌A549细胞中B7-H3蛋白表达水平可明显增加辐射诱导的G0/G1期阻滞,从而提示B7-H3表达水平的改变可能通过调节G0/G1细胞周期检查点而对肺癌细胞放射敏感性产生重要的调节功能。     

非小细胞肺癌中survivin的表达及定位研究

目的 探讨survivin在非小细胞肺癌细胞中的表达和定位及其与p53、CD44表达和淋巴结转移的关系.方法 以免疫组化方法测定2002年1月～2004年5月手术获得的28例非小细胞肺癌标本的survivin、p53、CD44的表达情况,用SPSS软件分析survivin在细胞中的表达和定位情况及其与p53、CD44表达和淋巴结转移的关系.结果 28例非小细胞肺癌中survivin总阳性率为60.7%(17/28),其中单纯胞质阳性占25.0%(7/28),单纯胞核阳性占10.7%(3/28),胞质和胞核共同阳性者占25.0%(7/28),总的胞核表达阳性率为35.7%(10/28).survivin的积分值为2.00±2.92,与正常肺组织(积分值为0.10±0.32)差异显著(P＜0.005).survivin表达阳性组与阴性组中p53、CD44的表达以及淋巴结转移情况均无显著性差异(P＞0.05);但在survivin阳性组中,胞核survivin表达阳性者p53的阳性率明显高于胞核survivin表达阴性者(P＜0.005).结论 survivin在非小细胞肺癌中表达上调,且在非小细胞肺癌的发生发展过程中其胞核表达可能与p53具有一定的协同作用.     

姜黄素对人肺腺癌细胞促凋亡及抗侵袭作用的研究

目的 探讨姜黄素对人肺腺癌细胞(A549)的促凋亡及抗侵袭作用。方法 采用荧光显微镜、MTT、比色法、流式细胞仪(FCM)技术结合PI及Annexin V-FITC双标记染色观察姜黄素作用后,人肺腺癌细胞的生长及凋亡状况;用Western blot法进一步验证上述结果及抗侵袭作用。结果 姜黄素作用于癌细胞后,荧光镜下可见细胞核破碎;ATT法测得不同浓度姜黄素作用后,可产生显著的细胞增殖抑制作用,IG50-18umol／L;姜黄素药物浓度从5umol／L增至40umol／L,Annexix-FITC单阳性细胞(早期凋亡细胞)由3．4％增加到65．9％,同时发现出现了G2期的阻滞;Western blot法观察到10umol／L及20umol／L姜黄素作用30min后,出现了聚(二磷酸腺苷-核糖)多聚酶(PARP)的裂解;姜黄素可下调MMP-2和上调TIMP-2的表达。结论 姜黄素能干扰细胞周期进程,对A549细胞有生长抑制作用,且呈剂量依赖性;姜黄素可能通过下调MMP-2和上调TIMP-2的蛋白表达发挥抗侵袭作用。     

野生型INK4a/ARF基因共转染对A549细胞药物敏感性的影响

目的　研究野生型INK4a/ARF基因共转染对人肺腺癌A5 4 9细胞药物敏感性的影响。方法　利用阳离子脂质体介导的基因转染技术 ,将含有人全长野生型INK4a/ARF基因的真核表达重组质粒pcDNA3 p16 INK4a和pcDNA3 p14 ARF同时导入该基因位点缺失的人肺腺癌A5 4 9细胞系中 ,确定其编码的蛋白p16 INK4a和p14 ARF稳定表达 ;在设立空白组和空质粒转染组的情况下 ,用 5种不同作用机制的常用肺癌化疗药物 (阿霉素、顺铂、拓朴替康、诺维本和紫杉醇 )作用于转染前后的细胞 ,利用MTT法测定各种不同药物的 5 0 %抑制浓度(IC50 ) ,并测定在该浓度作用下转染细胞的凋亡指数。结果　转染INK4a/ARF基因后 ,A5 4 9细胞对阿霉素和顺铂的IC50 值显著降低 (P <0 0 5 ) ,而拓朴替康、诺维本和紫杉醇的IC50 值无明显变化 (P >0 0 5 ) ;阿霉素和顺铂诱导的凋亡指数也明显高于其他 3种药物。结论　恢复p16 INK4a和p14 ARF蛋白的表达可改变A5 4 9细胞对部分化疗药物的敏感性。     

LPS对A549和Hela细胞SPLUNC1蛋白表达的影响

 目的 探讨脂多糖(LPS)对人肺腺癌上皮A549细胞和人子宫颈癌上皮Hela细胞短的上腭、肺及鼻咽上皮克隆1(short palate, lung and nasal epithelium clone 1, SPLUNC1)蛋白表达的影响。方法 将两类细胞各随机分为对照组、实验组,CCK-8法观察LPS与细胞增殖活性的时间-反应和剂量-反应关系,筛选各自的最佳效应浓度和作用时间,以LPS最佳效应浓度和作用时间处理后,免疫组化和免疫荧光定量法检测两类细胞SPLUNC1蛋白相对表达量的变化。结果 LPS对A549细胞的最佳效应浓度为20 mg/L,最佳效应时间为12 h,对Hela细胞的最佳效应浓度为40 mg/L,12~24 h为其最佳效应时间窗。SPLUNC1在两类细胞中均呈阳性表达,LPS处理后表达均显著上调(P＜0.05),两类细胞间比较,LPS处理后Hela细胞SPLUNC1相对表达量高于A549细胞(P＜0.05),较对照的增量值(Δ)也明显大于A549细胞(P＜0.05)。结论 SPLUNC1在宫颈癌细胞中存在表达,可能是肺腺癌和宫颈癌病变中的保护性因子,具有潜在的临床应用价值。     

榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞放射敏感性影响及其机制的研究

目的 探讨榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞放射敏感性的影响及其分子机制。方法 克隆形成实验检测10、20 μg/ml榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞的放射敏感性影响。细胞分为空白对照组、单纯照射组(4 Gy X射线照射)、单纯药物组(给予10、20 μg/ml榄香烯乳);联合照射组(给予10、20 μg/ml 榄香烯乳24 h后4 Gy X射线照射)。Western blot检测DNA-PKcs、Bcl-2及P53蛋白的表达变化,并分析DNA-PKcs与Bcl-2、P53表达之间的相关性。结果 10 μg/ml榄香烯乳的放射增敏比SER_D0、SER_Dq 为1.54±0.20和1.43±0.15;20 μg/ml榄香烯乳SER_D0、SER_Dq 为1.63±0.32及1.75±0.19。与单纯照射组相比,10、20 μg/ml榄香烯乳联合照射组细胞的DNA-PKcs蛋白表达明显减少(t=7.52、8.33, P<0.05),Bcl-2蛋白表达明显减少(t=10.74、11.33, P<0.05),P53蛋白表达明显增加(t=-9.25、-7.66P<0.05)。DNA-PKcs与P53蛋白表达显著负相关(r=-0.569,P<0.05),与 Bcl-2蛋白表达显著正相关(r=0.755, P<0.05)。结论 榄香烯乳可增加人肺腺癌A549细胞的放射敏感性,其机制与下调DNA-PKcs表达抑制DNA双链损伤修复和上调p53,下调Bcl-2表达促进细胞凋亡有关。     

应用RNAi技术沉默survivin基因对肺腺癌A549细胞的影响

目的 探讨RNA干扰(RNAi)沉默survivin基因对肺腺癌A549细胞的影响.方法 应用RNAi技术,以化学合成的survivin小干扰RNA(siRNA)体外转染A549细胞,采用MTT法及流式细胞仪检测转染前后A549细胞增殖、凋亡和细胞周期的变化,通过RT-PCR及Western blot分析survivin mRNA和蛋白的表达情况.结果 survivin siRNA对A549的生长抑制作用呈浓度依赖性(P＜0.05),并能引起G1期细胞比率的增加和S期细胞相应的减少,诱导一定数量的细胞凋亡,转染后36、60、84、108、132h的IC50值分别为152.4、151.2、136.0、144.0、150.4nmol/L.100～200nmol/L siRNA转染组细胞的survivin表达在蛋白及RNA水平都显著低于对照组(P＜0.01),但空白对照组与空质粒组间无明显差异(P＞0.05).结论 应用siRNA沉默survivin基因可以下调肺腺癌A549细胞survivin的表达,进而抑制细胞生长、增殖并诱导细胞凋亡.RNAi的抑制效果具有特异、高效和持久的特点.     

circRNA_0128846靶向miR-1183介导人非小细胞肺癌细胞放射抵抗的研究

目的 探讨环状RNA（circRNA）_0128846对人非小细胞肺癌（NSCLC）细胞放射抵抗的影响及机制。 方法 应用GEO数据库筛选、采用荧光实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测在人NSCLC细胞A549及其放射抵抗细胞（A549R）中差异表达最显著的circRNA作为目标circRNA,qRT-PCR检测其在人支气管上皮细胞Beas-2B及人NSCLC细胞A549、H460、H1299、H1975中的表达水平。在A549细胞中转染目标circRNA过表达载体,在A549R细胞中转染目标circRNA沉默载体,并检测以上细胞经8 Gy X射线照射后的克隆形成能力。应用人类环状RNA数据库和circinteractome数据库预测目标circRNA下游的miRNA,qRT-PCR检测A549R细胞中目标circRNA沉默后表达水平上升最显著的miRNA作为目标miRNA。qRT-PCR检测A549细胞中过表达目标circRNA后目标miRNA的表达情况;通过双荧光素酶报告基因分析人胚肾细胞293T中过表达目标miRNA后目标circRNA的表达情况;qRT-PCR检测目标miRNA在A549、A549R细胞中的表达水平。在A549细胞中转染目标miRNA抑制剂以沉默目标miRNA,在A549R细胞中转染目标miRNA模拟物以过表达目标miRNA,并检测以上细胞经8 Gy X射线照射后的克隆形成能力;将过表达目标circRNA的A549细胞进行8 Gy X射线照射并在该细胞中过表达目标miRNA,检测细胞的克隆形成能力。组间数据的比较采用独立样本t检验。 结果 qRT-PCR检测结果显示,circRNA_0128846为目标circRNA,且其在人NSCLC细胞A549、H460、H1299、H1975中的相对表达水平均高于人支气管上皮细胞Beas-2B（t=6.200、7.903、6.010、6.132,均P<0.01）。过表达circRNA_0128846的A549细胞经照射后的克隆形成能力增强（0.22%对0.45%,t=4.427,P<0.05）;沉默circRNA_0128846后A549R细胞经照射后的克隆形成能力降低（0.23%对0.10%,t=3.780,P<0.05）。qRT-PCR检测结果显示,miR-1183为目标miRNA,在A549细胞中过表达circRNA_0128846显著下调miR-1183的表达（t=6.002,P<0.01）;双荧光素酶报告基因分析证实过表达miR-1183可显著下调circRNA_0128846的表达（t=4.562,P<0.05）;miR-1183在A549R细胞中的相对表达水平显著低于亲本A549细胞（t=6.025,P<0.01）。过表达miR-1183显著降低A549R细胞经照射后的克隆形成能力,沉默miR-1183显著增强A549细胞经照射后的克隆形成能力（0.26%对0.15%、0.21%对0.31%,t=3.671、3.293,均P<0.05）,且过表达miR-1183显著降低了过表达circRNA_0128846对A549细胞克隆形成能力的促进作用（1.90%对1.20%,t=6.325,P<0.01）。 结论 circRNA_0128846作为miR-1183的吸附海绵,可抑制miR-1183的表达进而抑制其放疗增敏作用,从而促进人NSCLC细胞的放射抵抗。