脐带间质干细胞移植治疗对MRL/lpr狼疮鼠单核细胞趋化蛋白-1的影响

目的:探讨脐带间质干细胞(UC-MSCs)治疗MRL/lpr狼疮鼠的作用机制。方法:24只MRL/lpr鼠随机分为UC-MSCs1次移植治疗组(G1)、UC-MSCs3次移植治疗组(G2)、对照组(G3)。酶联免疫吸附法检测血清和尿液单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平,蛋白印迹法检测肾脏MCP-1蛋白水平的表达,实时定量PCR检测肾脏MCP-1基因mRNA表达,免疫组化检测MCP-1蛋白在肾脏表达。结果:(1)29周时G2组血液MCP-1水平为827.70±259.36pg/mL,显著低于G3组1 325.45±352.28pg/mL(P<0.05);28周时G2组尿液MCP-1为239.93±31.47pg/mL,显著低于对照483.52±184.37 pg/mL(P<0.01)。(2)G2组(0.30±0.02)和G1组(0.40±0.02)MCP-1蛋白表达与G3(0.67±0.05)组比较差异有统计学意义(P<0.01);G2组也显著低于G1组(P<0.05)。(3)G2组(0.30±0.01)和G1组(0.39±0.02)MCP-1基因mRNA表达显著低于对照组(0.79±0.15)(P<0.05),G2组显著低于G1组(P<0.05)。(4)MRL/lpr鼠MCP-1主要定位于肾小球系膜区和肾间质炎性细胞浸润处及肾小管。G3组肾小球系膜区强表达MCP-1,治疗G1、G2组表达明显减弱。结论:UC-MSCs可能通过抑制MCP-1表达而发挥治疗作用。     

单核细胞趋化蛋白-1表达与狼疮肾炎

目的探讨单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在狼疮肾损伤中的作用.方法应用ELISA方法测定112例系统性红斑狼疮(SLE)患者、30例类风湿性关节炎患者、11例非SLE肾损伤患者及40例正常健康者血清MCP-1水平;应用RT-PCR方法,测定以上各组外周血单个核细胞(PBMCs)MCP-1 mRNA表达.结果狼疮处于疾病活动时PBMCs MCP-1 mRNA表达上调,尤其是狼疮肾炎活动组患者PBMCs MCP-1 mRNA表达增加最为显著(P＜0.001),PBMCs MCP-1 mRNA表达不仅与总狼疮疾病活动指数评分呈正相关(r=0.6245,P＜0.001),而且与狼疮疾病活动指数肾评分呈正相关(r=0.6808,P＜0.001),而在类风湿性关节炎组和非狼疮肾脏疾病组仅低水平表达,与正常对照组水平相近似(P＞0.05).狼疮活动组血清MCP-1水平较非活动组及正常对照组均明显升高(P＜0.001),但活动性狼疮肾炎组与无肾损伤组之间血清MCP-1水平的差异无显著性(P＞0.05).结论狼疮处于疾病活动时PBMCs MCP-1 mRNA表达上调,并与狼疮肾炎的疾病活动情况密切相关.     

来氟米特治疗狼疮性肾炎疗效评价

目的探讨来氟米特（LF）治疗狼疮性肾炎的疗效和不良反应.方法选择11例系统性红斑狼疮并发狼疮性肾炎患者,用LF20mg/d口服,疗程为3个月,同时设对照组12例继续用环磷酰胺（CTX）治疗,比较1个月和3个月的疗效.结果治疗1个月时LF组所有临床观察指标即有明显改善（P＜0.05）,而CTX组改善不明显.3个月时LF组在提高血红蛋白、降低尿蛋白及尿红细胞数方面与CTK组比较有显著差异（P＜0.01）.治疗前后免疫指标的变化：LF组治疗后ANA、抗dsDNA抗体转阴及补体升高明显（P＜0.01）,与CTX组差异有显著性（P＜0.01～0.05）.毒副作用：LF组表现为-过性皮疹、轻度白细胞下降、脱发、瘙痒;无严重不良反应.结论LF治疗狼疮性肾炎安全有效且物美价廉.     

来氟米特对2型糖尿病大鼠肾脏单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的研究来氟米特(LEF)对2型糖尿病肾病大鼠的肾脏单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响及肾脏保护作用。方法将30只建立链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠动物模型的8周龄的雄性Wistar大鼠分为正常对照组、LEF给药组(4 mg.kg-1.d-1)和0.9%氯化钠注射液给药组,各10只。每天给药1次,共7周。比较实验室指标、病理组织学和MCP-1、单核/巨噬细胞表面特异性标志抗原(ED-1)的表达。结果 LEF给药组大鼠尿蛋白排泄率较0.9%氯化钠注射液给药组明显减少,肾小球硬化、肾间质纤维化也明显减轻,MCP-1、ED-1的表达也显著减少。结论 LEF抑制了糖尿病大鼠MCP-1的表达,延缓了肾小球硬化、肾间质纤维化的进展。     

来氟米特治疗轻中型狼疮性肾炎疗效分析

目的分析来氟米特对轻中型狼疮性肾炎的治疗效果。方法 33例5≤狼疮基本活动指数(SLEDAI)≤14、0.5 g≤24 h尿蛋白定量<2.0 g的狼疮性肾炎患者,随机分为对照组16例和观察组17例,分别单用糖皮质激素及联合应用来氟米特治疗6个月,观察其疗效及治疗前后SLEDAI、24 h尿蛋白定量、抗ds-DNA抗体滴度及补体C3变化。结果观察组总有效率为88.24%,对照组总有效率为68.75%,但组间疗效比较差别无统计学意义(P>0.05)。治疗6个月后,对照组和观察组的SLEDAI评分均较治疗前明显降低,差别有统计学意义(P<0.05),而24 h尿蛋白定量、抗ds-DNA滴度、补体C3虽较治疗前有一定改善,但差别无统计学意义(P>0.05)。观察组与对照组的各项指标治疗后差别无统计学意义(P>0.05)。结论来氟米特联合糖皮质激素用于轻中型狼疮性肾炎的缓解治疗有一定的疗效。     

突变型单核细胞趋化蛋白-1构建及其对单核细胞趋化蛋白-1的干预作用

目的:构建表达N端2-8位氨基酸缺失的突变型单核细胞趋化蛋白-1(mMCP-1),并观察其对单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的干预作用.方法:Megaprimer-PCR构建mMCP-1-pVAX1(pVMm).以脂质体将pVMm转染真核细胞系C2C12,ELISA分析mMCP-1的表达情况.采用趋化实验分析mMCP-1对病毒性心肌炎小鼠外周血单个核细胞(PMNCs)的趋化活性及其对MCP-1的干预作用.结果:①酶切和测序显示野生型MCP-1真核表达载体(pVM)和pVMm构建成功.pVMm在真核细胞C2C12中有效表达.②mMCP-1不具有趋化病毒性心肌炎小鼠PMNCs的活性.与单纯使用MCP-1相比,以不同浓度的mMCP-1和MCP-1同时行趋化实验,被趋化的细胞明显减少(P＜0.01),25 μg/L mMCP-1可阻断10 μg/L MCP-1对病毒性心肌炎小鼠PMNC的趋化活性.结论:小鼠MCP-1 N端2-8位氨基酸决定其趋化活性.mMCP-1可用于干预MCP-1的作用.     

来氟米特治疗环磷酰胺无效的狼疮性肾炎的临床疗效及安全性分析

[目的]探讨来氟米特(LEF)对环磷酰胺(CTX)治疗无效的狼疮肾炎(LN)的临床疗效及安全性.[方法]观察43例经CTX治疗无效、复发或因不良反应停用的狼疮肾炎患者经LEF治疗12个月前后临床和免疫指标的变化,并记录不良反应发生率.[结果]LEF治疗1个月后,尿蛋白明显减少,白蛋白增加,血肌酐降低,有19例肾功能不全病人治疗半年后肾功能恢复,治疗3~6个月时抗dsDNA抗体显著降低,SLEDAI明显降低,较治疗前相比差异均有显著性意义.治疗过程中共发生不良反应12例,不良反应发生率28%,而治疗前CTX治疗时不良反应发生率74.4%(32/43),两者比较差异有非常显著性意义(P<0.01).[结论]LEF对CTX治疗无效的LN有显著疗效,其不良反应较小,患者耐受性较好.     

来氟米特治疗对环磷酰胺无效或无法耐受的狼疮性肾炎的临床观察

目的：观察来氟米特治疗对环磷酰胺治疗无效或无法耐受的狼疮性肾炎（LN）的疗效和安全性。方法：23例经环磷酰胺治疗无效或无法耐受且均经肾穿刺活检证实的LN患者,停用环磷酰胺4周后,应用来氟米特及强的松治疗,疗程6个月;治疗期间监测有关指标并记录所有不良反应;治疗前后行疗效、狼疮活动指数（SLEDAI）及安全性评价。结果：共有22例完成治疗、1例因费用问题退出治疗。治疗2个月后开始起效、3～4个月后明显有效、6个月时各项指标仍较稳定。治疗前后SLEDAI评分明显改善,总有效率为77%。来氟米特不良反应轻,以胃肠道症状、带状疱疹、脱发多见。结论：来氟米特联合强的松用于环磷酰胺治疗无效或无法耐受的LN有较好的效果,耐受性尚好。     

单核细胞趋化蛋白-1与心室重塑

单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1)是一种C-C型(具有相邻的半胱氨酸)化学趋化因子.MCP-1被认为可能是导致动脉粥样硬化重要的细胞因子.MCP-1在动脉粥样硬化的多个阶段均有重要作用,包括诱导脂条纹开始形成,引起斑块不稳定和促进心肌梗死后心室重塑.本文现将MCP-1对心室重塑的作用综述如下.……     

来氟米特联合厄贝沙坦治疗狼疮性肾炎疗效观察

目的探讨来氟米特联合厄贝沙坦治疗狼疮性肾炎的临床效果。方法选取新乡医学院第一附属医院2013年3月至2016年3月收治的狼疮性肾炎患者88例,按照入院顺序分为对照组和观察组,每组44例。2组患者均采用标准激素治疗联合厄贝沙坦治疗,在此基础上,对照组患者口服环磷酰胺片3 mg·kg~(-1)·d~(-1),观察组患者口服来氟米特片,前3 d剂量为50 mg·d~(-1),3 d后减少为20 mg·d~(-1),2组患者均治疗6个月。比较2组患者治疗3、6个月后肾功能和血液学指标的变化及其疗效。结果治疗前2组患者24 h蛋白尿、尿β_2-微球蛋白(β_2-MG)、尿红细胞计数比较差异均无统计学意义(P>0.05)。2组患者治疗3、6个月时的24 h蛋白尿、尿β_2-MG、尿红细胞计数均低于治疗前(P<0.05);治疗6个月时2组患者的24 h蛋白尿、尿β_2-MG、尿红细胞计数均低于治疗3个月(P<0.05)。观察组患者治疗3、6个月时的24 h蛋白尿、尿β_2-MG、尿红细胞计数均低于对照组(P<0.05)。2组患者治疗前血白蛋白、红细胞沉降率(ESR)、血β_2-MG、血肌酐(Cr)、C反应蛋白(CRP)及补体C3水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。2组患者治疗3、6个月时的血白蛋白水平高于治疗前,ESR、血β_2-MG、血Cr、CRP及补体C3水平低于治疗前(P<0.05);观察组患者治疗6个月时的血白蛋白水平高于治疗3个月,ESR、血β_2-MG、血Cr、CRP及补体C3水平低于治疗3个月(P<0.05);对照组患者治疗6个月时血白蛋白、ESR及β_2-MG水平与治疗3个月时比较差异无统计学意义(P>0.05),血Cr、CRP及补体C3水平低于治疗3个月时(P<0.05)。观察组患者治疗3、6个月时血白蛋白的水平高于对照组,ESR、血β_2-MG、血Cr、CRP、补体C3水平低于对照组(P<0.05)。观察组患者治疗3、6个月时的缓解有效率分别为84.09%(37/44)、90.91%(40/44),对照组患者治疗3、6个月的缓解有效率分别为72.73%(32/44)、81.82%(36/44),观察组患者治疗3、6个月的缓解有效率均高于对照组(χ~2=10.218,P<0.05)。观察组和对照组患者不良反应发生率分别为6.82%(3/44)、15.91%(7/44),观察组患者不良反应发生率显著低于对照组(χ~2=11.210,P<0.05)。结论来氟米特联合厄贝沙坦治疗狼疮性肾炎的疗效优于环磷酰胺联合厄贝沙坦,且血液指标恢复明显,不良反应发生率低。     

BXSB小鼠肾组织中MCP-1的异常表达及甲泼尼龙的干预作用

目的:探讨BXSB狼疮鼠肾组织单核细胞趋化因子1(MCP1)的表达情况及甲泼尼龙(MPS)是否可通过抑制MCP1的表达而缓解狼疮肾炎(LN)。方法:将18周龄雄性BXSB自发性狼疮小鼠随机分成BXSB治疗组(n=6)和对照组(n=6);另随机抽取同龄雄性BALBc小鼠6只为正常对照组。MPS组小鼠每日腹腔注射MPS25mg·kg-1;BXSB小鼠对照组及BALBc小鼠按体质量每日同一时间腹腔注射等体积生理盐水,连续3周。用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)研究BXSB小鼠肾脏MCP1mRNA的表达,并观察小鼠24h尿蛋白排泄量。结果:BXSB治疗组与对照组小鼠肾组织均检测到MCP1mRNA的表达,而BALBc正常对照组小鼠未见表达;BXSB治疗组小鼠肾组织MCP1mRNA表达量显著低于对照组(P<0.01);BXSB治疗组24h尿蛋白排泄量显著低于对照组(P<0.01)。结论:MCP1可能参与介导LN的发生、发展;MPS可能通过抑制肾组织MCP1的表达而减轻蛋白尿,从而缓解LN。     

MRL/lpr小鼠肾组织MCP-l表达及MMF对其表达的影响和相关机制研究

目的:检测MRL/lpr狼疮小鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达及探讨霉酚酸酯(MMF)对其影响和相关机制,研究MMF对MRL/lpr狼疮小鼠的治疗作用.方法:MRL/lpr狼疮小鼠分为对照组和治疗组两组.观察肾组织病理学改变及其MCP-1、CD14和蛋白激酶C(PKC)等的表达以及尿蛋白、抗ds-DNA抗体水平的变化.结果:对照组小鼠肾小球基底膜增厚,系膜基质增多,肾组织MCP-1表达上调,CD14+细胞数明显增多,伴尿蛋白及抗ds-DNA抗体水平增加.治疗组小鼠肾组织MCP-1表达减少,CD14+细胞数减少,尿蛋白和抗ds-DNA抗体水平减少,且肾小球MCP-1与其PKC表达水平及肾小球CD14+细胞数、尿蛋白水平呈直线相关关系.结论:MMF对MRL/lpr小鼠自发狼疮肾炎具有治疗作用,其机制可能通过抑制PKC通道激活减少小鼠肾组织MCP-1的表达,从而减少肾组织单核细胞的浸润,减轻肾脏损害.     

MRL/lpr 鼠部分病理指标动态变化及SIGIRR表达与狼疮肾炎相关性研究

目的观察MRL／lpr鼠病理指标动态变化,研究MRL／lpr小鼠肾组织单个免疫球蛋白区白介1相关受体（single IgIL-1-related receptor,SIGIRR）的表达是否随病理分级加剧而变化,以提示TLR4／NF-κB通路是否参与了狼疮肾炎（iupus nephritis,LN）的发生发展。方法对照组C57BL／6小鼠和模型组MRL／lpr小鼠各12只,分别检测12、15、18、21周龄时小鼠胸腺指数、脾指数、尿蛋白,血清尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）、抗核抗体（antinuclear antibodies,ANA）;对肾组织切片进行苏木素依红（hematoxylin and eosin,HE）和马松（Masson）染色,观察模型鼠狼疮肾炎发病情况,采用免疫印迹（westernblot）和免疫组化（immunohistochemistry,IHC）方法观察不同周龄小鼠肾脏SIGIRR的表达情况。结果MRL／lpr小鼠12、15、18、21周龄时与同龄C57BL／6鼠相比其尿蛋白水平随周龄增加而升高,血清尿素氮以及抗核抗体和对照组相比无明显差异,HE、Masson染色显示模型鼠从12周开始即表现出肾小球肾炎,血管周围炎细胞浸润,之后逐渐间质纤维化,肾小球系膜和基底膜增厚,甚至出现肾小球纤维化和硬化。Westernblot和IHC结果显示,21周龄时MRL／lpr小鼠肾组织SIGIRR蛋白表达增加,与同龄C57BL／6相比有显著性差异。结论SIGIRR蛋白表达随MRL／lpr小鼠狼疮肾炎加重而增加,其可能与TLR4／NF-κB（Toll-like receptor 4／nuclear factor-kappa B,Toll样受体4／核因子κB）通路相关。     

解毒祛瘀滋肾方干预TLR9信号通路对MRL/lpr狼疮小鼠肾脏的保护作用

目的 基于对TLR9-MyD88-NF-κB通路的干预作用,阐明解毒祛瘀滋肾方对狼疮鼠肾脏的保护作用。方法 将30只MRL/lpr狼疮鼠随机分为模型对照组、泼尼松治疗组、中药组共3组,对各治疗组进行相应的药物治疗,疗程8周。采用HE染色法、PAS染色法、Masson染色法分别对MRL/lpr小鼠肾脏切片进行病理染色,观察比较3组小鼠病理变化及治疗效果;采用real-time PCR法观察比较各组小鼠TLR-9、MyD88、NF-κB mRNA表达量的差异。结果 与模型组比较,中药组能明显改善MRL/lpr小鼠的肾组织病理损伤。Real-time PCR法结果显示:中药组MRL/lpr小鼠的肾组织TLR-9、MyD88、NF-κB mRNA表达均低于模型组(均为P<0.05)。结论 解毒祛瘀滋肾方对MRL/lpr小鼠肾脏具有保护作用,可对其病理变化产生影响,减轻其肾脏损害,延缓病程,并与解毒祛瘀滋肾方对MRL/lpr小鼠TLR-9-MyD88-NF-κB信号通路的抑制作用相关。     

白芍总苷对MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎的影响

目的观察白芍总苷(TGP)对MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎的影响。方法将MRL/lpr狼疮肾炎小鼠随机分为模型组和TGP组。考马斯亮蓝法检测尿蛋白含量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清IgG型抗dsDNA抗体、ANA水平,HE染色光镜下观察肾组织病理改变,称脾脏和胸腺湿重,并计算脾脏和胸腺指数。结果①与模型组相比,TGP组用药后15、30 d尿蛋白含量显著下降(P<0.05),用药后30 d抗dsDNA抗体、ANA水平和脾脏质量及其指数均显著下降(P<0.05),肾脏组织病理损害明显减轻。②TGP组用药后15、30 d与用药前相比,尿蛋白含量、抗dsDNA抗体水平、ANA水平显著下降(P<0.05),而模型组抗dsDNA抗体水平显著上升(P<0.05),尿蛋白含量、ANA水平无显著差异;TGP组用药后30d与用药后15d相比尿蛋白含量显著下降(P<0.05),抗体水平无显著差异。结论白芍总苷可以降低尿蛋白含量和血清抗dsDNA抗体、ANA水平,明显改善肾组织病理损害,对MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎具有一定疗效。     

狼疮肾炎患者血、尿MCP-1测定的意义

目的 :探讨狼疮肾炎患者血、尿单核 巨噬细胞趋化蛋白 1(MCP 1)的变化及其意义。方法 :应用酶联免疫法 (ELISA)分别检测 3 6例狼疮肾炎和 2 0例健康对照者血、尿MCP 1的水平。结果 :狼疮肾炎患者血、尿MCP 1水平较正常对照者明显升高(均为P <0 .0 1) ;狼疮肾炎患者活动期尿MCP 1水平较静止期明显增高 (P <0 .0 1) ,而血MCP 1水平差异不大 (P >0 .0 5 ) ;活动期患者经激素或细胞毒药物治疗后尿MCP 1明显下降 (P <0 .0 1) ,血MCP 1下降不明显 (P >0 .0 5 )。结论 :尿MCP 1的测定可作为反映狼疮肾炎活动的一个有用指标。     

尿MCP-1、血浆IL-8在紫癜性肾炎诊断中的价值

目的:探讨尿单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)与血浆白细胞介素-8(IL-8)在紫癜性肾炎中的诊断价值?方法:将57例过敏性紫癜患儿纳入实验组,其中合并紫癜性肾炎的45例细胞,按照尿微量白蛋白(UMALB)测定分为正常尿白蛋白组(第1组)?微量尿白蛋白组(第2组)及大量尿白蛋白组(第3组);12例无尿常规异常者为单纯性紫癜组(第4组);同期选取19例健康儿童作为对照组?酶联免疫吸附双抗体夹心法测定尿MCP-1及血浆IL-8水平,并比较各组间尿MCP-1及血浆IL-8水平的差异;计算紫癜性肾炎病例尿MCP-1?血浆IL-8在ROC曲线下面积,分析其在紫癜性肾炎中的诊断价值?结果:尿MCP-1水平在1~4组间比较差异有统计学意义(F = 88.52,P < 0.01),且随着尿白蛋白的增加,尿MCP-1水平随之上升,组间两两比较,差异均有统计学意义(P < 0.01)?血浆IL-8水平在1~4组及对照组组间比较差异有统计学意义(F = 289.55,P < 0.01),两两比较显示:血浆IL-8水平在不同水平尿白蛋白组(1~3组)间比较差异有统计学意义(P < 0.01);而正常尿白蛋白组(第1组)与单纯性紫癜组(第4组)比较差异无统计学意义(P > 0.05);1~4组血浆IL-8水平均显著高于对照组(P < 0.01)?尿MCP-1?血浆IL-8在ROC曲线下面积分别为0.90?0.83,其诊断界值分别为111.50?349.54 ng/L,灵敏度分别达到82.22%?68.89%?结论:尿MCP-1对紫癜性肾炎早期诊断的灵敏度优于血浆IL-8,且两者都有助于判断紫癜性肾炎肾脏损害的轻重程度?     

Monocyte chemoattractant protein-1 expression in renal tissue is associated with monocyte recruitment and tubulo-interstitial lesions in patients with lupus nephritis

目的　观察狼疮性肾炎 (LN)患者肾组织中单核细胞趋化因子 (MCP 1)的分布及其与肾间质单核细胞浸润和间质病变的关系 ,探讨其在LN患者肾小管间质病变中的作用。方法　采用PAP四层法对 18例LN患者肾组织MCP 1,CD68 ,CD4 ,及CD8 进行免疫组化染色。同时取 8例微小病变型肾病患者作为对照。结果　 18例患者肾组织中均有不同程度的MCP 1染色阳性。其主要位于肾小管基侧膜 (16/ 18例 )及间质小血管壁 (9/ 18例 )上。对照组MCP 1阳性的小管明显低于狼疮性肾炎患者 (7 4± 6 2 %vs 2 6 7± 2 2 8% ,P <0 0 1)。LN患者肾间质中CD4 ,CD8 及CD68 细胞数明显高于对照。其MCP 1阳性小管数与间质CD68 细胞浸润及间质病变的程度明显相关。而与CD4 ,CD8 细胞浸润程度及患者尿蛋白的多少无相关性。结论　LN患者肾小管MCP 1表达增加可能是导致间质单核细胞浸润及肾小管间质损伤的一个重要原因