HPLC测定菝葜芪类提取物在大鼠体内的分布

目的:研究菝葜芪类提取物在大鼠体内的组织分布规律.方法:菝葜芪类提取物大鼠灌胃给药1g·kg~(-1)后,应用HPLC测定氧化白藜芦醇和白藜芦醇在大鼠心、肝、脾、肺、肾中的含量.Zorbax SB-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈(A)-水(B)进行梯度洗脱;流速1.0 mL·min~(-1);检测波长320 nm;进样量10μL;柱温40℃.结果:建立了氧化白藜芦醇和白藜芦醇在大鼠心、肝、脾、肺、肾中的含量测定方法.结论:本方法简便、准确、专属性强,可以成功应用于大鼠灌胃给药菝葜芪类提取物后,氧化白藜芦醇和白藜芦醇在大鼠体内组织分布的研究.     

HPLC测定鼠尾草酸在大鼠胃肠组织中的分布

目的:建立鼠尾草酸灌胃给药后大鼠胃肠组织中鼠尾草酸含量的高效液相色谱测定方法,考察鼠尾草酸灌胃给药后在大鼠胃肠组织中的分布情况.方法:大鼠灌胃给予鼠尾草酸混悬液(90 mg·kg~(-1))后,于不同时间点将大鼠断头处死,采集胃肠组织,经过生物样品预处理后,采用HPLC-UV测定不同时间点大鼠胃肠组织中的药物浓度.结果:鼠尾草酸的质量浓度在标准曲线范围内呈现良好的线性(r＞0.999),线性范围为0.321 2～160.6 mg·L~(-1).组织样品的回收率,日内和日间精密度及准确度,稳定性均符合生物样品分析的相关要求.鼠尾草酸组织分布的研究结果表明,胃壁上的分布较多,随着时间的延长浓度逐步降低,最高为(307.1±119.2)μg·g~(-1);而在肠壁上的分布较低,随着时间的延长,经历了先升高后降低的过程,在给药后1 h浓度达到最高(33.32±17.70)μg·g~(-1).结论:首次建立了胃肠组织中鼠尾草酸浓度的高效液相色谱测定方法,该方法简便、快速,结果准确、可靠,并且首次阐明了灌胃给药后鼠尾草酸在胃肠组织中的分布情况.     

卵泡方在大鼠体内组织分布研究

目的:研究卵泡方在大鼠体内的组织分布规律.方法:卵泡方大鼠灌胃给药6g·kg-1后,应用HPLC测定大黄酸、汉黄芩素及千层纸素A在大鼠肝、心、脾、肺、肾中的含量,色谱柱:Zorbax SB-C18(250mm×4.6mm.5μm),流动相:(A)乙腈-(B)0.5%冰醋酸水溶液(v/v)梯度洗脱;流速为1.0mL·min-1;检测波长为254,276nm:进样量为10μL;柱温30℃.结果:建立了大黄酸、汉黄芩素及千层纸素A在大鼠肝、心、脾、肺、肾中的HPLC含量测定方法.结论:该法成功应用于卵泡方单剂量大鼠灌胃给药后,大黄酸、汉黄芩素及千层纸素A在大鼠体内组织分布的研究.     

不同产地菝葜中白藜芦醇的含量比较

目的：比较不同产地菝葜中有效成分白藜芦醇的含量。方法：对采自我国不同产地的菝葜样品进行成分分析比较,以菝葜活性成分白藜芦醇为指标,采用高效液相色谱法测定其含量。结果：不同产地菝葜中白藜芦醇的含量有显著差异。结论：产自安徽潜山菝葜中白藜芦醇的含量显著高于其他产地。     

葡萄属低聚茋含量的HPLC测定

采用HPLC法测定11种葡萄属植物低聚茋的含量，方法简便，快速准确，为合理利用和评价本届药用植物提供依据。     

HPLC法同时测定菝葜和金刚藤糖浆中4种成分

目的建立HPLC法同时测定菝葜Smilax china L.和金刚藤糖浆(菝葜)中4种成分的含有量。方法该药材和药物甲醇提取液的分析采用Diamonil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;柱温30℃;进样量10μL;检测波长290 nm(落新妇苷)、306 nm(白藜芦醇)、360 nm(芦丁和山柰酚)。结果落新妇苷、白藜芦醇、芦丁、山柰酚分别在0.006 64~0.664μg(r=0.999 7)、0.006 58~0.658μg(r=0.999 9)、0.001 01~1.01μg(r=0.999 6)、0.0078~0.78μg(r=0.9999)范围内呈良好的线性关系,金刚藤中其平均加样回收率分别为98.40%、100.89%、99.11%、100.17%,RSD分别为2.1%、3.2%、2.1%、2.8%;金刚藤糖浆中其平均加样回收率分别为101.70%、97.50%、101.55%、101.23%,RSD分别为2.2%、1.3%、1.4%、1.4%。4种成分含有量在各批药材和制剂中均有明显差异,仅白藜芦醇能在所有样品中被检出。结论白藜芦醇可作为菝葜和金刚藤糖浆质量评价的指标成分。     

菝葜药材HPLC指纹图谱的鉴别

目的:建立菝葜药材高效液相色谱(HPLC)指纹图谱鉴别方。方法:采用RP-HPLC,以Diamonsil-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱为分析柱,流动相乙腈-0.1%磷酸水,梯度洗脱,流速0.6 mL·min-1,330 nm波长下测定菝葜、光叶菝葜的指纹图谱,并作相似度比较分析。结果:建立了菝葜药材HPLC指纹图谱共有模式,18个共有指纹峰被标定,并对菝葜与光叶菝葜药材的HPLC指纹图谱进行相似度比较,结果具有明显差异。结论:HPLC指纹图谱具有方法简便,重复性好,特征性强的特点,可用于菝葜药材的鉴别。     

17种国产菝葜属植物中白藜芦醇含量比较

目的测定17种国产菝葜属植物样品中白藜芦醇的含量。方法以活性成分白藜芦醇为指标,采用HPLC法对采自我国17种菝葜属植物样品进行含量测定。结果不同品种菝葜中白藜芦醇的含量有显著差异。小果菝葜、长托菝葜、黑果菝葜等含量较高,而短梗菝葜、尖叶菝葜、土茯苓等不能检测出。结论该研究为菝葜属植物资源的深入开发利用提供了一定的科学依据。     

紫杉醇脂质体在大鼠体内的组织分布

 目的考察紫杉醇制备成脂质体后对其组织分布的影响。方法建立了大鼠组织中紫杉醇HPLC检测法。色谱条件为:流动相为甲醇-乙腈-水(4:3:3);色谱柱为Turner kromasil C₁₈(4.6 mm×250 mm,5μn);检测波长为227 nm;炔诺酮为内标。结果此色谱条件下各组织的标准曲线、回收率等试验结果表明该方法符合生物样品的分析要求。大鼠静脉注射紫杉醇脂质体及紫杉醇注射液(10 mg·kg^-1)后,紫杉醇脂质体在肝脏、脾脏和肺脏等脏器分布相对较多。结论大鼠给予紫杉醇脂质体及紫杉醇注射液后在各个脏器的分布量几乎均有极显著性差异。     

马鞭草提取物在大鼠体内的组织分布及排泄研究

目的:建立马鞭草提取物中马鞭草苷、戟叶马鞭草苷在大鼠11种主要组织器官及尿液中的反相高效液相色谱(RPHPLC)分析方法,研究其在体内组织分布的规律特点及原形药物体内排泄情况。方法:50只SD大鼠随机分为5组,尾静脉注射给予8g生药/kg马鞭草提取物后,分别于5,15,30,60,120 min腹主动脉放血处死,时间点的选择包括药物的吸收相、分布相和消除相,迅速取出脑、心、肝、脾、肺、肾、胃、骨骼肌、小肠、生殖器(卵巢、子宫)、脂肪组织;另12只SD大鼠随机分为两组,尾静脉注射给予4g生药/kg马鞭草提取物后,收集给药前及给药后0~2 h、2~6 h、6~12 h、12~24h各尿液,RP-HPLC法测定各组织及尿液中马鞭草苷、戟叶马鞭草苷的浓度。结果:马鞭草苷和戟叶马鞭草苷在各组织的5个时间点上均有不同程度的药物浓度被检出,其中肾脏分布最高,其次为肺、生殖腺和肝脏。马鞭草苷和戟叶马鞭草苷以原形药物的形式经肾排泄,12 h马鞭草苷与戟叶马鞭草苷尿中原形药物累积排泄量分别占给药量的22.7%、32.6%。结论:马鞭草苷和戟叶马鞭草苷在大鼠体内分布快速而广泛,部分以原形药物的形式经尿排泄。     

菝葜全长转录组测序及分析

目的:获得菝葜Smilax china L.全长转录组数据,深入挖掘其功能基因。方法:采用PacBio Sequel测序平台,分别提取菝葜根、茎、叶3个部位的RNA,将样品等量混合后进行全长转录组测序及分析。结果:共获得转录本122324个,N50长度为1400 nt,鸟嘌呤和胞嘧啶(GC)占比为45.32%,其中92878个(75.93%)转录本在七大数据库中注释。非冗余蛋白(NR)注释中,与菝葜最相近的物种是海枣Phoenix dactylifera L.,匹配程度达17.39%;真核生物相邻类的聚簇(KOG)数据库注释中,比对到一般功能预测的转录本最多,有17875个;基因本体(GO)数据库注释中,66001个转录本分布于生物学过程、细胞组成和分子功能三大类的45个功能组;京都基因与基因组百科全书(KEGG)注释中,参与菝葜生物合成和其他次生代谢转录本4286个,其中参与黄酮类化合物生物合成的转录本1478个、参与皂苷生物合成的转录本162个、参与芪类化合物生物合成的转录本4个、参与其他有机化合物合成的转录本2642个。在基因结构分析中,共得到64612个编码序列、2003个转录因子。此外,简单序列重复(SSR)分析表明,33118个SSR中最多的优势重复单元为腺嘌呤(A)G/C胸腺嘧啶(T),同时还预测到44580个长链非编码RNA和28229个mRNA。结论:获得了菝葜全长转录组数据,可为深入研究菝葜生长发育、相关代谢途径、胁迫响应及生物遗传多样性提供数据支持。     

大通筋化学成分研究

目的:对中药大通筋的化学成分进行研究。方法:利用硅胶柱色谱、薄层色谱等多种色谱分离技术进行分离纯化,根据理化常数和波谱数据鉴定化合物结构。结果:从大通筋根茎中共分离得到9个单体化合物,分别鉴定为β-谷甾醇(1),表木栓醇(2),木栓酮(3),5,3',5'-三甲氧基-7-甲基黄酮(4),大黄素甲醚(5),大黄素(6),5,6,4'-三羟基-7,8-二甲氧基黄酮(7),β-胡萝卜苷(8),蒙花苷(9)。结论:所有化合物均为首次从该植物中分离得到。     

三脉菝葜的化学成分研究

采用硅胶,Sephadex LH-20,MCI及半制备高效液相等多种色谱技术,对三脉菝葜70%乙醇提取物进行化学成分研究,运用现代波谱学方法并结合文献对分离得到的化合物进行结构鉴定。从该植物分离得到12个化合物,包括7个酚苷,4个木脂素及二苯乙烯类等。化合物1~11为首次从菝葜属中分离得到,化合物12为从该种植物中首次分离得到。该研究为促进江西野生中草药资源的开发利用提供了科学资料。     

不同提取方法对菝葜中总皂苷提取效果的影响

目的 考察不同提取方法对菝葜中总皂苷提取效果的影响.方法 分别采用加热回流(水和乙醇溶液)、酶解、渗漉和超临界CO2流体萃取法对菝葜药材进行提取,通过紫外-可见分光光度(UV-Vis)法检测菝葜总皂苷的量,计算不同提取方法的转移率.结果 5种提取方法菝葜总皂苷转移率分别为34.22％、86.48％、85.51％、78.68％、38.66％.结论 不同提取方法对菝葜中总皂苷的转移率影响较大,采用乙醇加热回流提取法所得转移率较高,且简单易行,可作为菝葜总皂苷工艺提取方法应用.     

菝葜叶绿体基因组的组装分析与分子标记研究＊

目的 采用高通量测序数据和新组装手段对药用植物菝葜的叶绿体基因组进行精细组装，并以此为基础厘清其分类地位，开发分子鉴定标记。方法 利用两种测序手段重新测定并精细组装菝葜叶绿体基因组；重建菝葜近缘物种在时间尺度下的系统发育关系；分析菝葜叶绿体基因组一级结构并检测编码区选择压力；筛选并验证具备种群特异性的SSR引物。结果 混合组装结果显示菝葜叶绿体基因组全长157959 bp，内含编码基因86个。菝葜族与油点草族和百合族互为姐妹群；其内部约26.5Mya开始出现分化。在accD、rbcL及rpl20基因中存正选择信号。247个SSR位点中的3个具备作为菝葜分子鉴定标记的潜力。结论 利用短读长和长读长共同组装菝葜叶绿体基因组的结果更佳。已探明的3个SSR位点能为筛选分子标记提供数据支撑。     

菝葜乙酸乙酯提取物对THP-1源性荷脂细胞胆固醇蓄积及SREBP-1表达的影响

目的： 观察菝葜乙酸乙酯提取物对人单核/巨噬细胞系（THP-1）源性荷脂细胞胆固醇蓄积的影响,并初步探讨类固醇调节因子结合蛋白-1（SREBP-1）蛋白表达在其中的作用。 方法： 以THP-1源性荷脂细胞为模型,洛伐他汀（80 mg·L^-1）做阳性对照,菝葜乙酸乙酯提取物不同浓度（0,40,80,160 mg·L^-1）作用于细胞24 h以及80 mg·L^-1作用于细胞不同时间（0,12,24,48 h）,高效液相色谱法测定细胞内总胆固醇（TC）,游离胆固醇（FC）,胆固醇酯（CE）的含量,油红O染色观察菝葜乙酸乙酯提取物对THP-1源性荷脂细胞中脂滴形成的影响,Western blot印迹法检测细胞内SREBP-1蛋白表达变化。 结果： 菝葜乙酸乙酯提取物明显降低THP-1源性荷脂细胞中脂滴含量,细胞内TC,FC,CE水平呈现一定的剂量和时间依赖性下降趋势,同时 SREBP-1蛋白表达上调。 结论： 菝葜乙酸乙酯提取物能引起THP-1源性荷脂细胞TC,FC,CE含量下降,且这种作用与SREBP-1蛋白表达上调有一定关系。     

土茯苓对急性汞中毒大鼠的保护作用研究

目的：探讨土茯苓对急性汞中毒大鼠的保护作用。方法：将大鼠随机分为正常对照组、模型组、土茯苓高、中、低剂量组（5,10,20 g·kg^-1）,模型组及土茯苓高、中、低剂量组sc 2.5 mg·kg^-1 HgCl₂溶液,连续2 d,造成汞中毒,正常对照组sc生理盐水;土茯苓水煎液低、中、高剂量组末次染毒后开始ig给药,ig体积10 mL·kg^-1,2次/d,早晚各1次,持续3 d,观察土茯苓对染汞大鼠血清尿素氮（BUN）、汞、尿蛋白、尿乳酸脱氢酶（LDH）、尿碱性磷酸酶（ALP）活力、尿汞、肾汞、肝汞含量及肾脏病理组织学变化的影响。结果：与正常对照组比较,模型组尿汞、血汞和肝汞、肾皮质汞含量,尿LDH及ALP活力,尿蛋白和血清BUN含量均显著提高（P<0.01）,肾脏损伤明显;与模型组对比,土茯苓水煎液高、中剂量组血清BUN、尿蛋白,尿LDH及ALP活力,肾、肝及血汞含量显著降低,尿汞含量显著增加（P<0.01或P<0.05）;肾脏病理组织学观察结果显示,高剂量组土茯苓对汞中毒大鼠肾损伤有较好的修复作用。结论：土茯苓具有能够改善汞中毒大鼠肝肾功能、去除体内汞蓄积的作用,对汞中毒大鼠具有一定的防治作用。