产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测及其基因分析

目的了解临术分离菌中产超广谱β内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌发生率，分析其耐药表型，探讨其ESBLs基因类别。方法采用美国国家临床实验室标准化委员会（NCCLS）推荐的纸片扩散法，对364株大肠埃希菌和71株肺炎克雷伯菌进行产ESBLs菌株初筛试验，并用双纸片确证试验和双纸片协同试验进行产ESBLs菌株确证。按照NCCLS文件标准，用Kirby-Bauer纸片扩散法进行产ESBLs株21种抗生素药敏试验。用PCR方法扩增168株ESBLs表型阳性菌中blaTEM-1、blaSHV-1、CTX-M-1组、TOHO-1组等4种基因。结果（1）大肠埃希菌和克雷伯菌中产ESBLs的检出率分别为46．7％和32．4％。（2）产ESBLs菌对青霉素类100％耐药；对第1、2代头孢菌素耐药率达85％～100％；对除头孢他定以外的第3代头孢菌素，产ESBLs大肠埃希菌耐药率为80％以上，产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药率为65％～75％以上；产ESBLs菌对复方新诺明的耐药率为75％～85％；产ESBLs大肠埃希菌对环丙沙星耐药率为80％～90％、庆大霉素耐药率为50％～75％；产ESBLs菌对阿米卡星、头孢替坦、亚胺培南有较好的敏感性（80％～90％以上）。（3）产ES-BLs大肠埃希菌中，blaTEM-1、blasSHV-1、CTX-M-1组等3种基因扩增阳性率分别为93．9％、7．4％和53．4％。51．4％的菌株同时携带2种耐药基因，2．7％的菌株同时携带3种耐药基因。产ESBLs肺炎克雷伯菌中blatTEM-1、blaSHV-1、CTX-M-1组等3种基因扩增阳性率分别为50．0％、95．0％和20．0％。同时携带2种耐药基因的菌株占35．0%，同时携带3种耐药基因的菌株占15．0％。两种细菌中均未检出TOHO-1组基因。结论大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产ESBLs的检出率较高，大肠埃希菌中产ESBLs菌比例有逐年上升趋势。产ESBLs菌对头孢噻肟的耐药率远高于头孢他定，且多数菌株对青霉素类，第1、2、3代头孢菌素、喹诺酮类、磺胺类、氨基糖甙类等抗生素呈多重耐药。大肠埃希菌中以TEM型和CTX-M型基因为主。肺炎克雷伯菌以SHV型基因为主，同时存在TEM型和CTX-M型基因。     

产ESBLs的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的检测及耐药性分析

目的对本院1999-2003年产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）细菌进行检测，并对其耐药性进行分析。方法采用纸片扩散法（K—B法）进行药敏试验，标准纸片扩散表型确证试验检测ESBLs。结果1999年阳性率为46．9％，2000年为51．9％，2001年为56．3％，2002年为58．7％，2003年为63．9％。ICU病房、介入病房和神经外科病房检出率分别为79．8％、73．8％和34．8％，明显高于其他科室。结论产超广谱β-内酰胺酶细菌阳性率呈逐年上升趋势，阳性菌对第三代头孢菌素和氨曲南耐药，部分菌株对氨基糖甙类和喹诺酮类耐药。临床对产超广谱β-内酰胺酶细菌治疗以碳青霉烯类最有效，头霉烯类和酶抑制剂复合药部分有效。     

产ESBLs大肠埃希菌与非产ESBLs大肠埃希菌耐消毒剂基因检测

目的了解大肠埃希菌（E．coli）耐消毒剂基因（qacE△1-sull）在产ESBLs组及非产ESBLs E.coli组该基因携带情况。方法PCR法对54株E．coli进行qacE△1-sull基因的检测。结果54株E．coli qacE△1-sull基因扩增结果，38株阳性，其中产ESBLs组携带qacE△1-sull基因有20株，不产ESBLs组携带qacE△1—sull基因有18株。结论qacE△1-sull基因在E．coli携带率较高，且产ESBLs组与非产ESBLs组E．coli qacE△1-sull基因携带情况差异无统计学意义。     

产ESBLs的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的检测及耐药性分析

目的对本院1999~2003年产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌进行检测,并对其耐药性进行分析。方法采用纸片扩散法(K-B法)进行药敏试验,标准纸片扩散表型确证试验检测ES-BLs。结果1999年阳性率为46.9%,2000年为51.9%,2001年为56.3%,2002年为58.7%,2003年为63.9%。ICU病房、介入病房和神经外科病房检出率分别为79.8%、73.8%和34.8%,明显高于其他科室。结论产超广谱β-内酰胺酶细菌阳性率呈逐年上升趋势,阳性菌对第三代头孢菌素和氨曲南耐药,部分菌株对氨基糖甙类和喹诺酮类耐药。临床对产超广谱β-内酰胺酶细菌治疗以碳青霉烯类最有效,头霉烯类和酶抑制剂复合药部分有效。     

大肠埃希菌和克雷伯菌ESBLs及AmpC酶的检测

近年来，由于β-内酰胺类抗生素，特别是第3代头孢菌素的广泛应用，细菌对这类抗生素产生的耐药问题十分突出，给临床抗感染治疗带来极大困难。革兰阴性杆菌是临床感染的主要病原菌，其中AmpC酶在革兰阴性杆菌耐药机制中的地位日渐突出，特别是质粒型AmpC酶的出现，使AmpC酶获得了与ESBLs相同的进化背景，     

大肠埃希菌与克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶的临床耐药分析

目的对大肠埃希菌及克雷伯菌产超广谱p内酰胺酶（ESBLs）与抗菌药物使用间的关系进行分析研究。方法前瞻性监测产ESBLs菌的情况，并对感染者进行临床调查。结果产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对头孢噻肟钠耐药率为95．3％，对阿莫西林＋棒酸为72．2％，产ESBLS菌感染者头孢第3代的使用率（72％）显著高于非产ESBLs菌感染者（35％）（P〈0．05）；第3代头孢菌素的大量使用诱导ESBLs的产生。结论严重的基础病、高龄、机体免疫力低下、长期住院者是ESBLs菌感染的易感宿主，皮质激素、化疗及介入性疗法是ESBLs感染的高危因素。滥用抗感染药是产生ESBLs的重要因素，合理使用抗感染药是防止ESBLs产生的主要措施。     

大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶的检测和耐药性监测分析

目的了解医院1998年1月至2006年12月期间临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的情况,监测并分析大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药特性,为临床合理使用抗生素提供指导。方法对分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌采用纸片扩散法进行药物敏感试验,用筛选试验和确证试验确认产ESBLs菌株,用WHONET5．4软件进行数据分析。结果947株大肠埃希菌中,产ESBLs的有311株,占32．8％;293株肺炎克雷伯菌中,产ESBLs的有69株,占23．5％。产ESBLs菌株的耐药性显著高于非产ESBLs菌株（P〈0．05）,产ESBLS菌株呈现多重耐药。结论医院产ESBLs菌的阳性率较高,应加强对产ESBLs菌株的耐药性监测,合理使用抗菌药物,防止ESBLs菌株的增长、扩散与流行。     

产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性分析

目的 了解本院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药情况,为临床合理使用抗生素提供指导.方法 采用美国BD公司生产的Phonenix 100全自动微生物鉴定药敏仪进行细菌鉴定及药敏检测.结果 分离培养得到103株大肠埃希菌和84株肺炎克雷伯菌,其中ESBLs产酶率分别为52.4%、45.2%,产ESBLs菌株对亚胺培南、美洛培南、哌拉西林/他唑巴坦敏感性较高,对其他β-内酰胺类抗菌药几乎全部耐药.结论 医院及时监测产ESBLs菌的发生率及其耐药趋势以指导临床用药至关重要.     

产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性分析

超广谱β-内酰胺酶（extended—spectrum—β—lactamases,ESBLs）由质粒基因编码,通过转导和转化在细菌间扩散,水解含甲氧亚氨基的β-内酰胺类抗生素,是细菌对青霉素、头孢菌素及单环类抗生素产生耐药性的主要原因。ESBLs多由肠杆菌科细菌产生,其中以大肠埃希菌（Escherichia coli）和肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）最为常见。为了解嘉兴地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的感染率和耐药率,本次研究对临床分离的121株大肠埃希菌和101株肺炎克雷伯菌菌株标本中进行了ESBLs检测,现报道如下。     

产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性变化

目的分析产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性变化。方法收集我院2004年1月—2005年12月期间临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,对其产ESBLs及耐药情况与2000年1月—2002年10月进行比较研究。结果以头孢噻肟为底物检测ESBLs,2004—2005年产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别为35.4%和21.1%,与2000—2002年度比较显著增加(P<0.01)。2004—2005年产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌占尿标本41.4%(133/321),呼吸道分泌物占29.0%(93/321),血液占5.9%(19/321),伤口分泌物占12.8%(41/321),体液或引流液占8.1%(26/321)。产ESBLs大肠埃希菌对氨曲南敏感性2004—2005年较前有显著下降(P<0.05),对其他抗生素的敏感性差异无统计学意义。产ESBLs肺炎克雷伯菌对抗菌药物的敏感性2004—2005年较2000—2002年除左氧氟沙星外均有下降趋势,并且头孢他啶、头孢哌酮-舒巴坦敏感性显著下降(P<0.05)。结论产ESBLs细菌近2年有增加趋势,并对多种抗生素的敏感性下降。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测

目的 选择和适用于检测产超广谱β－内酰安酶（ＥＳＢＬｓ）临床大肠埃希菌、肺炎克雷伯耐药菌株的最佳方案。方法 临床分离的１１０株大肠埃希菌和８４株肺炎克雷伯菌经初筛试验,用浓度梯度法（Ｅｔｅｓｔ）、单纸片加抑制剂舒巴坦扩散法、阿莫西林及氨苄西林双纸片协同试验,比较５种方法的检出率极度其差异。结果 Ｅｔｅｓｔ法对产ＥＳＢＬｓ大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出存在明显的差异（Ｐ〈０．０１）,肺炎克雷伯菌的检出率（４／２０）有显低于大肠埃希菌（１６／２６）;单纸片扩散法加克拉维酸对两种菌的检出均较高（１６／２６、１２／２０）。检测产ＥＳＢＬｓ大肠埃希菌时,除氨 苄西林双纸片协同法（８／２６）检出率低以外,其他４种方法的检出率无明显差异（Ｐ〉０．０５）,５种方法有较好的一致性。检测产ＥＳＢＬｓ肺炎克雷伯菌时,单纤片扩散法加克     

急诊感染产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌危险因素分析

目的 探讨本院急诊科2008年1月至2010年12月感染产广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的危险因素,为其防治提供依据.方法 采用病例对照研究,收集本院急诊科2008年1月至2010年12月检出产ESBLs大肠埃希茵和肺炎克雷伯菌84例,与同期未产ESBLs菌136例为对照组,采用单因素分析和多因素Logistic回归分析其危险因素.结果 单因素分析发现,住院天数≥15天、疾患肿瘤、侵入性置管、使用糖皮质激素、长期使用三代头孢菌素和氟喹诺酮类与医院感染产ESBLs菌有关;多因素Logistic回归分析发现,住院天数、侵入性置管、长期使用三代头孢菌素和氟喹诺酮类是独立危险因素.结论 医院急诊科产ESBLs菌耐药率高,应根据危险因素采取有效措施控制医院产ESBLs菌的感染和流行.     

铜陵地区大肠埃希菌和克雷伯菌属ESBLs检测及耐药性分析

目的了解安徽省铜陵地区大肠埃希菌和克雷伯菌属产ESBLs的检出率及其耐药状况。方法铜陵地区2003年1月-2004年12月临床分离大肠埃希菌270株和克雷伯菌属127株用NCCLS表型确证试验（纸片增强法）检测其ESBLs产生率；并用Kirby-Bauer法进行药敏试验。结果大肠埃希菌和克雷伯菌属ESBLs产生率分别为37．8％和30．7％；产ESBLs株对亚胺培南均呈敏感，对头孢西丁、头孢哌酮-舒巴坦及哌拉西林-三唑巴坦耐药率较低，对其他抗菌药物的耐药率均较不产ESBLs株高。结论临床上应加强细菌耐药性监测及ESBLs检测，指导临床合理使用抗菌药物，防止产ESBLs菌株的产生和流行。     

肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶检测

目的　了解耐氨苄西林肺炎克雷伯菌超广谱β 内酰胺酶 (ESBL)产生情况。 方法　用双纸片扩散法和Etest筛选肺炎克雷伯菌ESBLs ;用SHV PCR检测SHVβ 内酰胺酶基因 ,进一步用PCR NheⅠ酶切检测SHV ESBL。 结果　 36株肺炎克雷伯菌中有 30株产 β 内酰胺酶 ,31株含SHVβ 内酰胺酶基因 ,8株ESBL菌表型阳性 ,其中 3株为SHV ESBL。 结论　肺炎克雷伯菌是产ESBL的常见菌 ,实验室对其检测和监控非常重要     

产超广谱β-内酰胺酶菌株检出方法的探讨

目的 提高产超广谱β－内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）细菌的检出率。方法 采用标准纸片扩散法、筛选法、确认法和双纸片协同法进行试验。结果 头孢他啶（ＣＡＺ）、头孢噻肟（ＣＴＸ）、氨曲南（ＡＺＴ）对产ＥＳＢＬｓ大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌筛选率分别为１１．２％、１８．５％、１８．５％。ＣＡＺ／克拉维酸（ｃｌａｖ）对产ＥＳＢＬｓ大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌确认率分别为７２．３％（３４／４７）、７５．０％（１２／１６）;     

Nationwide study of Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae producing extended-spectrum beta-lactamases in Spain

Clonal dissemination of extended-spectrum beta-lactamases (ESBL) in 170 Escherichia coli isolates and 70 Klebsiella pneumoniae isolates from a nationwide study of 40 Spanish centers in 2000 was not observed in most centers. The most prevalent ESBL were CTX-M-9 (27.3%), SHV-12 (23.9%), and CTX-M-14 (20.5%) for E. coli and TEM-3 (16.7%) and TEM-4 (25%) for K. pneumoniae. A new ESBL, TEM-133, with mutations L21F, E104K, and R164S, was identified.     

超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的耐药性

目的 了解超广谱β－内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）肺炎克雷伯菌、大肠埃杀菌的耐药性、药特点,指导用药。方法 对应用双纸片 试验法检测６２株产ＥＳＢＬＳ的肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌的体外抗生素耐药性作了初步研究。结果 ＥＳＢＬＳ总阳性率为４０．３５,以重症监护病房为最高（７５．０％）。产ＦＳＢＬＳ菌对头孢他啶、头孢噻肟、头孢曲松的耐药性高达８２．９￣１００．０％,较不产ＥＳＢＬＳ菌高７７．０％￣９４．０％。对     

中国部分地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β内酰胺酶基因型研究

目的了解中国产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型分布。方法收集北京、浙江、新疆及郑州等共400株临床分离的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，采用接合试验，聚合酶链反应，克隆测序等方法明确ESBLs基因型。结果400株细菌中356株细菌ESBLs的基因型明确。其中328株细菌产1种ESBLs，主要为CTX-M型，包括CTX-M-14型ESBLs占52．25％，CTX-M-3型占14、25％，CTX-M-24型占7．25％，CTX-M-22型占2％，CTX-M-28和CTX-M-9型分别占0．75％，CTX-M-13、CTX-M-27和CTX-M-29型各占0．25％；其次为SHV型，其中SHV-12占2．5％(10／400)，SHV-5占1．00％，SHV-2占0．5％。28株细菌同时携带2种或3种ESBLs，占7．00％(28／400)，其中以同时产CTX-M-14和CTX-M-3最常见。结论中国产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型以CTX-M-14型为主；其次为CTX-M-3型，部分菌株同时产两种及两种以上ESBLs。     

肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌AmpC β内酰胺酶的表型检测

目的 比较研究临床实验室对AmpCβ内酰胺酶（AmpC酶）的表型检测方法,了解对头孢西丁不敏感的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中产生hmpC酶和超广谱β内酰胺酶（ESBLs）的分布情况。方法 利用加与不加3-氨基苯酚硼酸（APB）的头孢他啶、头孢噻肟和头孢西丁纸片进行APB纸片增强试验检测肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的AmpC酶,并与Tris-EDTA纸片试验检测AmpC酶的结果进行比较。用CLSI纸片确认实验检测肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产生的ESBLs。结果 APB纸片增强试验与Tris-EDTA纸片法检测结果完全一致。对头孢西丁不敏感的62株肺炎克雷伯菌和74株大肠埃希菌中,分别检测到产AmpC酶41株（66．1％）和33株（45．0％）。AmpC酶和ESBLs同时存在的肺炎克雷伯菌占51．6％,单产AmpC酶和单产ESBLs的肺炎克雷伯菌分别为14．5％和21．0％;而大肠埃希菌则以单产ESBLs为主,占40．5％,单产AmpC酶及同时产生AmpC酶与ESBLs的分别占20．3％和24．3％。结论 APB纸片增强试验和Tris-EDTA纸片试验操作简单,应用方便,成本低廉,均可用于临床实验室检测产AmpC酶的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌。