丙型肝炎的基因组结构与基因分型

丙型肝炎病毒（HCV）一词是1989年提出的。与传统模式的认识不同，HCV的认识是从先分离出病毒核酸、基因克隆，后破译其基因信息入手的，至今仍未分离到病毒颗粒，也未能在免疫电镜下观察到病毒颗粒。HCV的认识是从由核糖核酸（RNA）与结构蛋白组成。RNA外裹有蛋白质衣壳，衣壳外尚有囊膜包围着。它的直径50～60nm，是利用超滤技术间接推算的；有关HCV是有囊膜病毒的说法，则是根据它对有机溶剂敏感做出的判断。目前，根据它所编码的多肽序列，与已知的人类黄病毒属（乙型脑炎病毒、谷革热病毒和黄热病在）、动物瘟病毒日（牛病毒性…     

输血后丙型肝炎76例临床分析

随着对献血员进行HBsAg筛选以后，输血后乙型肝炎明显减少，而输血后丙型肝炎则相对增多。为了解输血后丙型肝炎的临床规律，我们对1991年以来所收治的76例输血后丙型肝炎进行了临床分析，结果报告如下。病例和方法病例来源：所有病例均选自本院1991年1月至1993年12月住院治疗患者，临床资料完整，总计76例，男54例，女22例，男女比例为2．45：1，年龄最小4．5岁，最大77岁，平均39．5岁。诊断标准：（1）既往无肝炎病史，输血前肝功能正常。（2）发病前有输血或输血制品史。（3）输血或输血制品后半年内，出现肝功能异常，具有肝炎临床症…     

在大肠杆菌中以非融合蛋白形式高效表达丙型肝炎核心蛋白

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，扩增出完整的丙型肝炎病毒核心蛋白基因，将其克隆于表达载体ｐＢＶ２２０ ＰＲＰＬ启动子的下游，构建了重组质粒ｐＢＶ－ＨＣＶ；转化大肠杆菌后，以非融合蛋白方式表达了丙型肝炎病毒核心蛋白。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳显示，此蛋白的分子量约为２０ｋＤａ，表达量约占菌体蛋白的１１％；Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹实验证明，此蛋白能与慢性丙型肝炎患者血清发生特异反应。序列分析结果表明，克隆于ｐＢＶ     

输血后丙型肝炎病毒感染情况随访调查

为进一步了解输血后丙型肝炎病毒(HCV)感染后的远期预后,我们对输血后感染HCV31例进行了1～4年的随访调查。1　对象和方法1.1　对象　31例中,男13例,女18例;年龄13～68岁。手术中均接受输血,输血量300～1800ml。1.2　诊断标准　输血前检测抗-HAV、抗-HCV、乙肝抗原、抗体及肝功能等均正常,其供血经HBsAg、抗-HCV及肝功能筛检,输血后1、3、6、9个月分别检测抗-HCV、肝功能及HCVRNA(PCR法),其结果有1次以上出现抗-HCV阳性或HCVRNA阳性和肝功异常者,诊断为输血后丙型肝炎(PTH-C);HCV标志阳性而无肝功能异常,则诊断为HCV隐…     

慢性丙型病毒性肝炎和疑似患者血清HCV标记检测分析

对122例慢性丙型肝炎和疑似患者,应用PCR法检测血清HCVRNA及用ELISA法进行抗-HCV检测,结果:单纯抗-HCV阳性61.5％、抗-HCV与HCVRNA同时阳性26.2％、HCVRVRNA阳性12.3％,前两种形式为慢性丙肝患者血清HCV标记的主要表现形式,结合检测有92.6％ALT水平异常升高,说明无论血清HCV标记为何种类型,肝组织都有炎症活动。PCR检测HCVRNA是目前确诊丙肝和疑似丙肝的理想方法。     

丙型肝炎非输血感染临床特征分析

流行病学调查结果表明，输血是丙型肝炎病毒（HCV）感染的最主要途径，但也可通过非输血途径感染[1，2]。我们以输血感染的丙型肝炎作为对照，对非输血感染的丙型肝炎临床特征，进行如下分析。1对象和方法1．l对象非输血组：非输血途径感染共22例，男19例，女3例；年龄24～62岁，平均47．4岁。输血组。输血途径感染共32例，男20例，女12例；年龄19～71岁，平均49．6岁，诊断标准符合1995年第五次全国传染病及寄生虫病会议修订的病毒性肝炎防治方案。1·2观察指标（l）临床表现；（2）肝功能：包括血清总胆红素（TSB）、丙氨酸转氨酶（AL…     

PCR检测丙型肝炎患者尿液中HCVRNA的意义

由于PCR法的建立,近几年对于丙型肝炎的研究取得了很大进展,目前国外用PCR的方法从丙型肝炎病人的唾液、精液、汗液和     

丙型肝炎患者血清和外周血单个核细胞中HCVRNA检测及其临床意义

应用套式ＰＣＲ检测了８８例丙型肝炎患者血清和外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中ＨＣＶＲＮＡ；结果发现：慢性丙肝患者ＰＢＭＣ中ＨＣＶＲＮＡ检出率显著高于急性丙肝患者（Ｐ＜０．００１）；急、慢性丙肝患者血清和慢性丙肝患者ＰＢＭＣ中ＨＣＶＲＮＡ检出率显著高于ＡＬＴ正常的抗－ＨＣＶ阳性者（Ｐ＜０．００１）；少数患者血清中ＨＣＶＲＮＡ阴性，ＰＢＭＣ中可测及，部分患者血清抗一ＨＣＶ阴性，而血清ＨＣＶＲＮＡ阳性．提示：血清ＨＣＶＲＮＡ检测有助于抗－ＨＣＶ阴性丙肝的诊断和早期诊断；丙肝的肝损害可能与ＨＣＶＲＮＡ血症有关；ＰＢＭＣ中ＨＣＶ感染在丙肝的慢性化和慢性肝损害中可能起一定作用；ＰＢＭＣ中可贮存ＨＣＶＲＮＡ。     

急性丙肝肝脏损害程度与基因分型的关系

丙型肝炎转变为肝硬化和肝癌的可能性是乙型肝炎的2～3倍〔1〕。丙型肝炎基因有、、、型。1994年4月～1995年11月,为探讨肝损害程度是否与丙型肝炎病毒基因分型有关,我们对急性丙型肝炎患者进行临床研究。1　对象和方法1.1　对象　急性丙型肝炎52例,男31例,女21例;年龄37.70±12.61岁。既往均无肝炎病史,病程在半年以内,经输血和(或)手术途径感染29例,无明确感染途径的散发型肝炎23列,HCV-RNA、抗-HCV均阳性。10d复查1次丙氨酸转氨酶(ALT),总胆红素(TBIL)。将其分为丙型肝炎基因型组28例,男17例,女11例;年龄40.56±17.79岁。型组11例…     

RT—nestedPCR和限制性酶切分析用于HV的检测和基因分型

为建立检测肾综合征出血热（HFRS）患者血清中汉坦病毒（HV）基因的RT－nestedPCR方法，并进行进一步进行限制性酶分型，设计并合成互补HV S基因片段的引物，对78例HFRS患者血清进行RT－nestedPCR检测，并对PCR产物进行酶切分析，结果显示，阳性率分别为76%（≤7天）、67％（8－14天）、43％（15－21天）和295（＞21天）。48例检测阳性患者PCR产物酶切物酶切分型，47例，Ⅰ型，1型Ⅱ型。提示RT－nestedPCR用于早期HFRS患者的HV基因，具有直接、敏感、特异等优点，其产物的限制性酶切分型能快速准确地区分国内当前流行的主要HV毒株型别。     

庚型肝炎病毒感染对慢性丙型肝炎的临床与病理学影响

目的　探讨庚型肝炎病毒 (HGV)感染对慢性丙型肝炎 (CH C)的临床与病理学影响。方法　应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)法对 5 3例经肝穿活检确诊的CH C患者血清标本进行了HGV RNA检测 ,并将合并与未合并HGV感染者进行了临床与病理学对比。结果　HGV RNA阳性 1 5例 (2 8 3 0 % )。合并与未合并HGV感染者在临床表现 ,肝功能等生化指标水平 ,HCV RNA阳性率及肝脏病理损害等方面差异均无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　HGV感染对CH C的肝脏损害及HCV复制无影响。     

PCR直接扩增与套式扩增用于HLA—DR基因分型的研究

人类ＨＬＡ抗原分型在人类学、法医学、疾病易感性及器官组织移植等研究中有重要的意义。在骨髓移植中，进行供者、受者ＨＬＡ配型，选择相合的供体，减少ＧＶＨＤ发生，是移植成功的关键。     

IgH基因重排和免疫分型检测在诊断B淋巴细胞增生性疾病中的初步应用

 目的 通过半巢式聚合酶链反应(PCR)技术对免疫球蛋白重链(IgH)基因重排的检测,建立对B淋巴细胞增生性疾病早期诊断的分子生物学方法,进而探讨在疑似B淋巴细胞增生性疾病诊断与鉴别诊断中的价值.方法 通过半巢式PCR技术检测8例已确诊的B淋巴细胞增生性疾病和24例临床疑似B淋巴细胞增生性疾病初诊患者的IgH基因重排;24例中流式细胞术检测了19例患者的免疫分型.结果 检测8例已确诊的B淋巴细胞增生性疾病,该方法敏感性为83.33%(5/6),特异性为100%(10/10);24例疑似B淋巴细胞增生性疾病初诊患者IgH基因重排检出的阳性率为83.33%(20/24),其中FR2A阳性率41.67%(10/24);FR3A阳性率50%(12/24);同时阳性2例.免疫分型结果14例可疑阳性,阳性率73.68%(14/19).结论 通过建立半巢式聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)技术检测IgH基因重排的分子生物学方法,对疑似B淋巴细胞增生性疾病患者的诊断起到了十分重要的作用,并且对反应性和肿瘤性淋巴细胞增生鉴别诊断具有重要的意义,为临床早期诊断、治疗干预提供了新的证据.     

ras基因的研究现状

目前认为，在肿瘤发生时，细胞中原癌基因被激活而成为癌基因，从而打断了细胞生长的调控和／或分化系统，继而发展成肿瘤细胞[1]。从分子水平探讨细胞生长分化调控机制对于肿瘤的鉴别诊断、治疗和估价预后有一定意义。ras基因是一个普遍存在的真核基因家族。自从1982年Weinberg和Barbacid首次从人膀脱癌细胞中克隆出活化的癌基因c－Ha－ras以来，有关ras基因及其与肿瘤发生关系的研究取得了很大的进展，本文对此作一综述。las基因的发现1982年Weinberg由人膀胱癌细胞系中分离出一种转化基因，可使NIH3T3细胞发生恶性转化，而从正常人组…     

用mRNA差异显示法筛选和鉴定反复高GZ暴露大鼠脑损伤相关基因

目的 筛选和鉴定反复高Ｇｚ暴露大鼠脑损伤相关基因。方法 １６只ＳＤ大鼠随机分为对照组、＋Ｇｚ重复暴露后３０ｍｉｎ、６ｈ和２４ｈ４组,每组４只。对照组大鼠Ｇ值为＋１Ｇｚ,实验组大鼠在动物离心机上经历了３次＋１４Ｇｚ／４５ｓ（两次间间隔３０ｍｉｎ）作用。分别于暴露后３０ｍｉｎ、６ｈ和２４ｈ处死大鼠取脑,提取总ＲＮＡ。取对照组和＋Ｇｚ暴露后６ｈ组大鼠脑总ＲＮＡ,用ｍＲＮＡ差异显示（ＤＤＰＣＲ）的方法,筛选＋Ｇｚ暴露大鼠脑差异表达基因。用３组锚定引物和６组随机引物作不同组合进行ＰＣＲ扩增。用Ｓｌｏｔ ｂｌｏｔ方法分析差异表达基因在对照组和＋Ｇｚ暴露后３０ｍｉｎ、６ｈ和２４ｈ组大鼠脑中表达情况。结果 获得的差异表达片段,经斑点杂交进一步筛选,克隆了３个强阳性片段,并进行序列分析,与Ｇｅｎｅｂａｎｋ等数据库进行同源比较,没     

直接抗人球蛋白试验阳性分型与输血疗效关系研究

目的 分析直接抗人球蛋白试验(DAT)阳性分型与输血疗效关系。方法 以2018年02月～2022年12月收治的80例DAT阳性输血患者为研究组,回顾性分析其病历资料,另以同期收治的80例与研究组病种构成相匹配的DAT阴性输血患者为对照组,比较两组组间和不同DAT阳性分型患者的血常规检查指标水平,对比两组组间和不同DAT阳性分型、不同凝集强度DAT阳性结果患者的输血疗效。结果 较之对照组,研究组输血前RBC、Hct水平和输血后Hb、RBC、Hct上升值/U均显著更低,输血前DAT阳性IgG+C3d型患者Hb水平和输血后DAT阳性IgG、C3d型患者Hb上升值/U显著更低,DAT阳性C3d型患者Hb水平显著更高,研究组输血有效率显著更高,P<0.05;较之DAT阳性C3d型患者,DAT阳性IgG+C3d、IgG型患者输血有效率均显著更高,P<0.05。结论 DAT阳性患者输血疗效可能与DAT阳性分型有关,DAT阳性患者在接受输血治疗前应了解自身抗体分型及抗体类别,以确保安全、有效输血。     

昆明地区HBV-DNA的基因分型研究

目的：研究昆明地区乙型肝炎病毒（HBV）的基因分型特征。方法：采用荧光定量PCR及基因型特异性引物PCR方法,对昆明地区360例HBV感染血清进行HBV．DNA定量及基因分型检测,以ELISA法检测血清乙肝标志物。结果：360例HBV感染血清中,有346例（96．11％）可以直接分型,其中196例（56．65％）为C型,91例（26．30％）为B型,37例（10．69％）为B／C混合型,21例（6．07％）为D型,A型仅1例（0．29％）;比较显示,C型基因分布显著高于B和其它基因型（P〈0．05,P〈0．01）;C型基因及B／C混合基因型的HBV。DNA定量显著高于其它基因型（P〈0．01）;另除B型基因在“大三阳”模式中比例显著较低（P〈0．05）,HBV基因型在其它各血清模式组间的分布没有显著差异（P〉0．05）;14例标本未能直接分型（3．89％）,其HBV．DNA定量平均水平均低于1．00&#215;10‘Iu／ml,显著低于其它检样（P〈0．01）。结论：昆明地区HBV基因型的分布较为丰富,存在C型、B型、B／C混合型及D型和A型,其中以C型和B型为本区域的主要HBV基因型;当B／C混合型和C型的HBV感染时,往往伴随HBV较高水平复制,且HBV感染B基因型与HBeAg的检出呈负相关;本区域内D基因型分布介于内地低海拔区域和拉萨高原地带之间。     

大肠癌组织大肠癌缺失基因杂合缺失的研究

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和限制性片段长度多态性分析（ＲＦＬＰ）技术，对４１例大肠癌组织大肠癌缺失基因杂合性缺失进行研究。结果表明，３８例大肠癌信息个体中有２１例（５５．３％）发现ＤＣＣ基因杂合缺失。ＤＣＣ基因杂合性缺失与肿瘤大小、组织学类型和浸润深度无关，但有淋巴结转移（８０．００％）和ＤｕｋｅｓＣ、Ｄａｄｗｅ（７１．４％）大肠癌ＤＣＣ基因杂合缺失率显著高于无淋巴结转移（３９．１％）和Ｄｕｋｅｓ