人胃癌鸡胚移植模型的建立及其肿瘤生物学研究

目的 建立人胃癌鸡胚移植模型，为胃癌研究提供一种简便实用的手段。方法 将人胃癌细胞系SGC-7901细胞接种到鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)上，动态观察移植瘤的形态学及肿瘤生物学特性，分析影响移植瘤成活的因素，并对瘤组织行组织学检查。结果 成功建立了人胃癌鸡胚移植模型，移植瘤组织学结构与人胃癌相似；接种癌细胞数量影响接种成瘤率，癌细胞数量越大，成瘤率越高；移植瘤可诱发大量血管生成并向肿瘤呈放射状集中。结论 将SGC-7901细胞接种到鸡胚上建立鸡胚移植胃癌是可行的，本模型可动态观察胃癌生长，模拟其在体内生长情况，为胃癌研究提供一种简便实用的手段。     

骨肉瘤术后肺转移演进

伴发性肿瘤抵御是指原发瘤能够抑制转移瘤生长,在其他肿瘤动物实验中已显示切除原发瘤后可加速转移瘤的生长,但在骨肉瘤中是否有此现象还未得到试验证实。该文作者对此进行了以下实验:①对6～7周龄的雌性裸鼠皮下接种鼠骨肉瘤细胞(LM8,细胞浓度1×10~/0.1ml PBS)建立荷骨肉瘤裸鼠模型,2周后荷骨肉瘤裸鼠被分成2组,一组在麻醉下行骨肉瘤原发灶切     

人胃癌鸡胚移植模型的建立及其肿瘤生物学研究

目的　建立人胃癌鸡胚移植模型 ,为胃癌研究提供一种简便实用的手段。方法　将人胃癌细胞系SGC 790 1细胞接种到鸡胚绒毛尿囊膜 (CAM)上 ,动态观察移植瘤的形态学及肿瘤生物学特性 ,分析影响移植瘤成活的因素 ,并对瘤组织行组织学检查。结果　成功建立了人胃癌鸡胚移植模型 ,移植瘤组织学结构与人胃癌相似 ;接种癌细胞数量影响接种成瘤率 ,癌细胞数量越大 ,成瘤率越高 ;移植瘤可诱发大量血管生成并向肿瘤呈放射状集中。结论　将SGC 790 1细胞接种到鸡胚上建立鸡胚移植胃癌是可行的 ,本模型可动态观察胃癌生长 ,模拟其在体内生长情况 ,为胃癌研究提供一种简便实用的手段     

VEGF-C反义核酸对结直肠癌LoVo细胞体内生长的影响

目的：探讨VEGF-C反义核酸对结直肠癌LoVo细胞体内生长的影响。方法：20只裸鼠随机均分为实验组与对照组,实验组接种转染反义VEGF-C核酸的LoVo细胞,而对照组接种转染空白质粒的LoVo细胞。观察两组肿瘤的生长情况,21 d后处死动物取移植瘤标本,用免疫组化法检测移植瘤组织中的微淋巴管密度（MLD）和微血管密度（MVD）。结果： 两组的成瘤率均为100%;实验组与对照组接种14 d后的肿瘤体积分别为（382.0±152.8）mm3和（454.2±148.7）mm3,21 d后为（745.0±250.9）mm3和（1 574.4±506.2）mm3,差异均有统计学意义（均P<0.05）;实验组肿瘤组织中MLD与MVD计数均较对照组明显减少[（11.75±2.22）/0.72 mm2 vs. （28.50±2.65）/0.72mm2,（47.75±2.99）/0.72 mm2 vs. （53.73±3.50）/0.72 mm2]（均P<0.05）。结论：转染VEGF-C反义核酸可抑制结直肠癌LoVo细胞移植瘤在裸鼠的体内生长,并抑制移植瘤淋巴管与血管的生成。

     

Survivin反义核酸治疗人大肠癌裸鼠皮下种植瘤的实验研究

目的探讨Survivin反义寡核苷酸对裸鼠人大肠癌皮下种植瘤体生长的抑制作用及其机制。方法接种人大肠癌细胞制作裸鼠皮下大肠癌种植瘤模型,分别用Survivin反义寡核苷酸、正义核苷酸和生理盐水对皮下瘤体内直接进行注射治疗,检测肿瘤的生长状况、瘤体体积及瘤重变化,计算抑制率。病理切片免疫组化检测瘤体E-CD表达。结果经Survivin硫代反义寡核苷酸治疗组裸鼠皮下移植瘤生长受到抑制,肿瘤重量明显小于对照组,肿瘤体积明显小于对照组和正义组(P<0.05),裸鼠皮下移植瘤E-CD表达增强。结论Survivin反义核酸可以抑制大肠癌裸鼠移植瘤的生长,Survivin反义核酸抑制大肠癌裸鼠移植瘤生长的机理可能与E-CD基因表达变化有关。     

生长激素和生长抑素对人结肠癌裸鼠移植瘤模型的影响

目的观察外源性生长激素（GH）和生长抑素（SS）对人结肠癌细胞株HT-29裸鼠移植瘤模型肿瘤生长和裸鼠血清蛋白水平的影响。方法接种结肠癌细胞株HT-29建立裸鼠移植瘤模型。比较移植肿瘤体积、细胞周期分布、增殖指数（PI）、凋亡率、bcl-2和bax mRNA水平．以及裸鼠血清蛋白水平。结果生长抑素能够明显抑制移植瘤的生长（P〈0．05）、降低移植瘤PI（P〈0．05）、促进移植瘤细胞凋亡（P〈0．01）、降低移植瘤bcl-2mRNA表达（P〈0．05）、提高移植瘤baxmRNA表达（P〈0．05），生长激素则表现出相反的作用。生长激素能够改善移植瘤导致的低蛋白血症（P〈0．05）。结论外源性生长抑素能够显著抑制人结肠癌裸鼠移植瘤生长，外源性生长激素单独或联合生长抑素应用能够改善荷人结肠癌移植瘤裸鼠低蛋白血症，但具有潜在的促进肿瘤生长的作用。     

兔脊柱VX2移植瘤模型的建立及生物学特性观察

目的探讨兔脊柱VX2移植瘤模型的建立方法及其生物学特性。方法新西兰大白兔25只,分为两组。实验组（20只）采用VX2瘤细胞悬液经横突椎弓根注射法建立兔脊柱VX2移植瘤动物模型,对照组（5只）以生理盐水注射代替VX2瘤细胞悬液进行同样操作。接种后每天观察下肢神经功能变化,接种术后第2周起每周行X线、CT影像学检查肿瘤生长情况。动物出现下肢瘫痪、死亡或接种后6周为观察终点,取出接种椎作组织学检查。结果对照组5只兔观察期内均未出现神经功能障碍,检查未见异常。实验组中1只兔因钻孔破人椎管,退出实验。19只兔成功接种,1只于接种术后9天感染死亡,1只经病理检查证实观察截止时仍无肿瘤生长,其余17只成瘤（89．5％）。观察期内9只出现完全瘫痪,5只不全瘫,其余3只未出现神经功能障碍。结论经横突-椎弓根种植法建立兔脊柱VX2移植瘤模型具有成瘤率高、可重复性好的特点。该模型能较好地模拟脊柱转移癌发展、压迫脊髓导致瘫痪的病理过程,有助于脊拄转移癌各种治疗模式的研究和探索。     

肝门部胆管癌细胞系高转移亚系的建立

目的 利用肝门部胆管癌原发病灶建立的细胞系接种裸鼠脾脏，筛选出高转移亚系。方法 将FRH-0201制成细胞悬液，接种7只BALB／C裸鼠脾脏。将转移的肿瘤行组织块培养，筛选出细胞亚系。FRH-A再次接种裸鼠，将转移瘤再次培养，筛选出细胞亚系FRH-B。观察细胞形态学、核型变化、肿瘤标志物、角蛋白染色及细胞生长曲线。结果 FRH-A及FRH-B细胞系为梭形和圆形细胞，生长旺盛。电镜显示典型恶性细胞特征。细胞倍增时间为21．8h，染色体众数19条，主流范围18～44条。细胞上清液CA125显著增高。细胞角蛋白染色阳性。FRH-A细胞再次接种裸小鼠，转移发生率100％，肿瘤生长迅速，转移发生快。结论 FRH-A及FRH-B细胞系来源于FRH-0201的高转移的亚系。     

RhoC-siRNA 对裸鼠结肠癌移植瘤的生长抑制作用

目的 探讨小干扰RNA(siRNA)载体介导抑制RhoC表达对人结肠癌裸鼠移植瘤的抑制作用.方法 将人结肠癌细胞HT-29接种于裸鼠背部皮下,成功建立裸鼠移植瘤模型;成瘤后将RhoC-siRNA注射入裸鼠移植瘤瘤体,观察RhoC-siRNA对裸鼠移植瘤生长的影响,Western blot检测瘤体中RhoC、基质金属蛋白(MMP-2)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达.结果 RhoC-siRNA对结肠癌裸鼠移植瘤的生长有明显抑制作用,瘤体体积重量明显减轻; RhoC-siRNA治疗后瘤体内VEGF和MMP-2蛋白表达明显下降.结论 通过抑制裸鼠结肠癌移植瘤中RhoC的表达,可以抑制肿瘤的生长并下调VEGF和MMP-2的表达水平.     

bFGF及其抗体对移植前列腺癌生长影响的研究

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）及其抗体对裸鼠人前列腺癌移植瘤生长的影响和作用机制。方法建立人前列腺癌细胞系（DU-145）细胞裸鼠皮下移植瘤动物模型,观察移植肿瘤生长及荷瘤裸鼠状况,观察bFGF与bFGF抗体对裸鼠皮下瘤生长状况的影响;应用免疫组织化学方法检测肿瘤组织中增殖细胞核抗原（PCNA）和CD34的表达。结果 1bFGF治疗组移植瘤重量和体积分别比对照组显著增多,移植瘤组织中PCNA指数和微血管密度（MVD）也显著提高;2bFGF抗体治疗组移植瘤体积重量和体积比对照组均显著减少,移植瘤组织中PCNA指数和MVD也显著降低。结论 bFGF能促进前列腺癌细胞的增殖生长,bFGF抗体则能抑制肿瘤的细胞生长,其作用机制与调控肿瘤细胞的增殖和血管形成密切相关。     

ACHN人肾癌裸鼠移植瘤模型的生物学特性及放射治疗观察

目的观察ACHN人肾癌裸鼠皮下移植瘤模型的生物学特性及其对放射线的敏感性。方法分别利用瘤细胞悬液接种法、瘤块包埋法获得ACHN人肾癌裸鼠移植瘤模型，观察移植瘤的生长情况、成瘤率、肝肺转移率及病理形态。ACHN皮下荷瘤鼠14只，随机分为空白对照组和放疗组，6MV X直线加速器对放疗组移植瘤局部单次照射12Gy，观察裸鼠的耐受性及肿瘤生长抑制情况；透射电镜观察瘤细胞超微结构变化。结果瘤块包埋法成瘤稳定，成瘤率92．5%，肝转移率43％，未见肺转移。裸鼠对12Gy射线局部照射耐受良好，放疗组移植瘤与空白对照组比较生长明显受抑制（P〈0．01）；放疗组瘤细胞凋亡现象明显。结论ACHN人肾癌裸鼠移植瘤模型可作为肾癌放疗实验研究的有效工具。     

反义HIF-1α基因治疗人肝癌裸鼠移植瘤的实验研究

摘要：目的:探讨反义HIF-1α基因对人肝癌裸鼠皮下移植瘤的影响及其相关机制。方法:使用人原发性肝癌细胞株SMMC-7721建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤动物模型。待肿瘤生长至直径约0.4cm时，将荷瘤裸鼠随机分为3组，分别注射生理盐水、质粒PcDNA3和HIF-1α/PcDNA3B，质粒用脂质体DOTAP介导转染细胞。观察各组动物的肿瘤生长曲线；取肿瘤标本作免疫组织化学检查（SABC法）及蛋白质印迹检查，检测各组肿瘤的VEGF和HIF-1α表达及微血管密度（MVD）和细胞凋亡。结果:HIF-1α/PcDNA3B治疗组各时点的肿瘤体积，以及肿瘤组织中HIF-1α蛋白、MVD，VEGF表达均低于对照组，而细胞凋亡指数高于对照组，差异均有显著性（P＜0.05）。结论:通过阻断癌细胞的缺氧适应途径，反义HIF-1α基因治疗肝癌有抑制肿瘤生长、抑制肿瘤血管生成及诱导细胞凋亡的作用。     

胚胎牌细胞不同移植途径对小鼠接种性肉瘤生长和自然杀伤细胞活性的影响

分别于肌肉、腹腔、周围静脉、门静脉对荷瘤小鼠移植胚胎牌细胞，并于移植后30天、60天分别测定瘤体积抑制率和自然杀伤细胞（NK细胞）活性。结果显示：上述4种移植途径在移植后30天均能明显抑制移植性肿瘤生长，NK细胞活性显著升高（P＜0．01）。但移植后60天，仅门静脉组对肿瘤生长保持良好的抑制状态，NK细胞活性保持较高水平，证明经门静脉移植是牌细胞移植最好的途径。     

组织因子途径抑制物2基因对Panc-1细胞裸鼠成瘤及转移的影响

目的观察组织因子途径抑制物2（TFPI-2）对胰腺癌细胞系Pane-1细胞裸鼠成瘤及转移的影响。方法将Pane-1-TFPI-2细胞接种到裸鼠皮下作为实验组，观察肿瘤生长情况并测量其大小；取皮下新生肿瘤组织进行原位胰腺接种，观察其对周围组织浸润及远处转移能力的影响。同时以Pane-1-V和Pane-1-P细胞作为对照组。结果实验组和对照组裸鼠皮下均成瘤，但实验组肿瘤体积小于对照组，分别为（438．0±69．8）、（852．0±102．9）和（831．0±78．1）mm’，差异有统计学意义（P〈0．05）。原位胰腺接种，对照组移植瘤浸润胰腺组织，有肝、肺、淋巴结及腹膜转移灶形成，免疫染色显示转移灶CEA阳性，证实其为胰腺肿瘤转移而来。实验组移植瘤包膜完整，无明显浸润及转移现象。结论TFPI-2能抑制肿瘤细胞生长、周围组织浸润及远处转移，为胰腺癌的基因治疗奠定了实验基础。     

沉默RhoA基因对结肠癌LoVo细胞体内生长的抑制作用

目的：RNA干扰使RhoA基因沉默后对结肠癌LoVo细胞在裸鼠体内生长的影响。 方法：构建靶向RhoA基因的shRNA真核表达载体,转染LoVo细胞,筛选RhoA基因沉默的稳定克隆。采用Western blot法检测RhoA蛋白的表达水平。将稳定转染RhoA shRNA表达载体、转染空载体和未转染的LoVo细胞分别接种于裸鼠皮下,4周后测量瘤体的体积和重量;免疫组化检测肿瘤组织RhoA,VEGF和MMP-2蛋白的表达。 结果：RhoA shRNA转染组瘤体的体积与瘤重明显低于其他两对照组（P<0.01）。免疫组化结果显示,RhoA shRNA染组瘤体组织RhoA,VEGF和MMP-2蛋白表达均较两对照组显著降低（P<0.01）。 结论：沉默RhoA可以抑制结肠癌LoVo细胞移植瘤的生长。     

COX 2抑制剂对膀胱癌细胞株裸鼠成瘤的影响

目的探讨COX 2抑制剂对膀胱癌T24细胞株裸鼠成瘤性的影响。方法BALB/c裸鼠27只分为3组,每只皮下接种膀胱癌T24细胞5×106活细胞数建立移植瘤动物模型。COX 2抑制剂药物干预组（吲哚美辛、塞来昔布）采用喂饲途径,吲哚美辛3 mg/kg,塞来昔布10 mg/kg;对照组给予生理盐水溶液药物的投给。30 d 后处死裸鼠,取瘤块称重,测量肿瘤体积,行免疫组化、半定量RT PCR、Wester Blot检测移植瘤COX 2表达。结果对照组细胞接种裸鼠后第5天可见肿瘤长出,第7天各组均有肿瘤长出,第30天后用药组移植瘤生长较对照组明显减慢。免疫组化染色、RT PCR、Western blot 结果均显示对照组COX 2表达明显,而药物干预组均少量表达。结论选择性与非选择性COX 2抑制剂在实验中表现出良好的抗肿瘤特性。     

GA反义基因对裸鼠胃癌移植瘤细胞凋亡的影响

目的研究反义核酸技术封闭谷氨酰胺酶（GA）基因对裸鼠体内胃癌细胞凋亡作用的影响。方法将携带GA反义基因的质粒转染胃癌细胞SGC-7901，并将成功转染的胃癌细胞接种于裸鼠皮下，获得裸鼠胃癌移植瘤模型，通过TUNEL技术检测胃癌细胞凋亡的凋亡指数；RT-PCR技术检测移植瘤细胞内GAmRNA的含量。结果GA反义基因质粒载体成功转染胃癌细胞后，肿瘤生长速度减慢，癌细胞凋亡增加，肿瘤细胞内GAmRNA的含量减少。结论GA反义基因可抑制GA基因的表达，明显促进胃癌细胞凋亡。     

5-LOX抑制剂NDGA对人肝癌HepG-2细胞裸鼠移植瘤生长的影响及其机制的探讨

目的观察5-lox抑制剂去甲二氢愈创木酸(NDGA)对裸鼠人肝癌HepG-2细胞移植瘤的作用,并探讨其抗肿瘤的可能机制。方法以人肝癌细胞HepG-2制备裸鼠人肝癌移植瘤模型共18只,将18只荷瘤裸鼠随机分为三组:1、正常对照组(接种正常肝癌HepG2细胞)。2、药物组(接种正常肝癌HepG2细胞同时皮下注入5-lox抑制剂去甲二氢愈创木酸(NDGA),剂量:10μml/L NDGA 0.1ml/10g一天一次,连续5天)。3、溶媒组(接种正常HepG-2细胞后皮下注射溶质二甲亚酚)。密切观察移植瘤生长及裸鼠生存情况21天,记录各组移植瘤肿瘤体积V(V=长径×短径2×0.5),计算衰退率:肿瘤衰退率=1-干预组平均肿瘤体积比/空白对照组平均肿瘤体积比(V/Vo)。通过RT-PCR及Western-blot法检测裸鼠移植瘤组织中bcl-2、caspase3凋亡调节因子以及通路信号蛋白MEK1/2、ERK1/2等的表达。结果实验期间各组荷瘤鼠活动较好,成瘤率100%,且实验过程中无不良繁衍及裸鼠死亡;试验后分别测得各组荷瘤鼠皮下移植瘤体积及肿瘤衰退率,利用单因素方差分析及t检验可以发现:药物组荷瘤鼠较对照组及溶媒组移植瘤体积明显缩小,肿瘤衰退率明显较高,且存在统计学差异(P0.01);利用RT-PCR及Western-blot法检测发现药物组caspase3表达量较对照组及溶媒组明显增强,差异存在统计学意义(P0.01),bcl-2、ERK1/2、MEK1/2等表达量较对照组及溶媒组明显下降,差异具有统计学意义(P0.01)。结论 NDGA对于裸鼠人肝癌移植瘤具有明显的抑制效果。NDGA可能通过诱导肿瘤细胞凋亡而抑制肿瘤生长,其作用机制与抑制MEK/ERK信号通路有关。     

异种移植中预防传染性病原体传播的研究进展

异种移植中采用猪的细胞、组织和器官可能导致猪传染性病原体的转移,进而感染人受体,甚至引发人畜共患的疾病。为防止此情况发生,应对供体动物进行广泛的微生物筛选,包括细菌、病毒、真菌和其他微生物。在进行移植之前,供体猪可进行长时间的筛选,故异种移植将比同种异体移植变得更为安全。通过实施剖腹产、接种疫苗等策略可以筛选出不转移不传播微生物的供体动物。猪内源性逆转录病毒(PERV),整合于所有猪的基因组中,上述方法不能清除PERV,因此需选择病毒低表达的猪或构建PERV表达抑制的基因修饰猪。     

CDX2基因干扰对人结肠癌细胞在裸鼠体内生长的影响

目的:探讨CDX2基因表达对结肠癌细胞生长的影响。方法:将体外转染CDX2-shRNA慢病毒、空慢病毒载体及无转染的人结肠癌细胞系SW480和HT29接种到裸鼠皮下,制备皮下移植瘤模型,观察各组移植瘤的生长情况,28d后处死裸鼠,剥取移植瘤称重,并分别用免疫组化、Westernblot检测各组移植瘤组织Ki-67与CDX2的表达。结果:与各自空白对照组(无转染的SW480或HT29细胞移植)比较,两个干扰组(转染CDX2-shRNA慢病毒的SW480或HT29细胞移植)移植瘤生长速度均明显加快、移植瘤质量明显增加(SW480:679.11mgvs.379.36mg;HT29:715.78mgvs.427.07mg),瘤组织Ki-67蛋白表达水平明显升高、CDX2蛋白表达明显下调(均P0.05)。两个阴性对照组(转染空慢病毒载体的SW480或HT29细胞移植)的各指标与各自空白对照组间均无明显差异(均P0.05)。结论:抑制CDX2基因的表达能促进人结肠癌细胞的裸鼠体内的生长,故CDX2可能是一种重要的抑癌基因。