庆大霉素诱导大鼠肾性贫血模型的建立及其因重组人红细胞生…

用庆大霉素诱导建立大鼠肾性盆血模型并以此观察木所研制的基因重组人红细胞生成素对肾性贫血的治疗效应。连续１６ｄ给大鼠皮下注射庆大霉素，病理学研究证实大鼠肾脏组织学结构已发生破坏；实验室指标显示血清尿素氮、肌酐升高，红系各指标显著降低；ＥＬＩＳＡ法不能测出血清中的红细胞生成素，表明大鼠已发生肾功能衰竭和肾性贫血。     

国产重组人类红细胞生成素改善血液透析患者的肾性贫血

国产重组人类红细胞生成素改善血液透析患者的肾性贫血北京友谊医院姜群，王质刚，郝继英，马清选择５０例慢性肾功能不全维持血液透析患者应用国产重组人类红细胞生成素（ｒｈＥＰＯ）改善肾性贫血，并与同期应用进口ｒｈＥＰＯ的２５例患者疗效相比，结果总结如下：一、...     

利用聚合酶链反应扩增红细胞生成素基因片段

利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增红细胞生成素（ＥＰＯ）基因片段时，通过用３２Ｐ－ｄＣＴＰ取代反应体系中的ｄＣＴＰ，直接合成３２Ｐ标记的ＥＰＯ基因探针．以此为探针经斑点印迹杂交技术证实慢性肾功能衰竭贫血大鼠肾脏ＥＰＯ因表达活性增强。     

血透病人小剂量EPO治疗探讨

血透病人小剂量ＥＰＯ治疗探讨华东医院血透室孙建设，陆文俊肾性贫血主要是肾脏因疾病导致分泌促红细胞生成素减少所致。近年来临床应用人工合成促红细胞生成素（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｈｕｍａｎｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ，ｒＨｕＥＰＯ）治疗肾性贫血取得了很大的...     

应用国产人基因重组红细胞生成素治疗肾性贫血

目的：证实国产人基因重组红细胞生成素（ｒＨｕＥＰＯ）纠正终末期肾病（ＥＳＲＤ）患者肾性贫血的疗效。方法：５５例ＥＳＲＤ合并肾性贫血患者应用国产ｒＨｕＥＰＯ治疗１２周～２４周，给药方式随机分为皮下或静脉注射。结果：５４例中，４例中途退出。５１例用药前后自身对比显示：血红蛋白、红细胞压积、网织红细胞从给药第２周起显著升高（Ｐ＜００１）；白细胞、血小板、肝功能、肾功能、血清离子无明显改变（Ｐ＞００５）。应用药物剂量１２８２±２６１Ｕ／（ｋｇ·周）的疗效判定：显效率５２９％，有效率３３３％，无效率１３７％。副作用有头痛、低热、高血压等，发生率１２７％（７／５５）。结论：国产ｒＨｕＥＰＯ能安全有效纠正肾性贫血，副作用轻微。     

促红细胞生成素的脑保护作用

促红细胞生成素 (ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ ,ＥＰＯ)最初是从肾脏中分离出来能刺激前体红细胞增生、分化的一种细胞因子。血液中的ＥＰＯ主要来自肾脏 ,与其受体 (ＥＰＯ Ｒ)结合后共同介导缺氧的生理反应。 80年代后期 ,重组人促红细胞生成素 (ｒｈＥＰＯ)治疗肾性贫血取得成功 ,现已经成为治疗肾性贫血的常规药物。新近研究发现 ,ＥＰＯ和ＥＰＯ -Ｒ在正常脑组织中均有低水平表达 ,在脑缺氧后表达增加[1,2 ] ,并且给予外源性ＥＰＯ对多种脑损伤模型有脑保护作用[3 ] ,因此 ,ＥＰＯ对非造血系统的作用尤其是脑保护作用倍受关注。1　Ｅ…     

人促红细胞生成素基因表达的研究

为进一步探讨运用促红细胞生成素基因治疗肾性贫血的依据，本研究将人ＥＰＯｃＤＮＡ构建到逆转录病毒载体ＬＸＳＮ中，然后将重载体转染到２包装细胞系ＰＡ３１７中，经选择培养后，运用ＤＮＡ－ＰＣＲ，ＲＴ－ＰＣＲ，原位杂交ＥＰＯ生物活性检测，观察ＥＰＯｃＤＮＡ和ＬＸＳＮ－ＥＰＯ在ＰＡ３１７中的表达。     

电脉冲介导红细胞生成素基因肌肉转移治疗大鼠肾性贫血

研究电脉冲介导的质粒红细胞生成素基因肌肉转移效率以及对肾性贫血的治疗作用。方法用腺嘌呤诱导大鼠慢性肾性贫血模型,以电脉冲介导质粒ＥＰＯ基因肌肉转移对６０只大鼠实施基因治疗,治疗期间监测血红蛋白、红细胞压积血清肌酐、血清尿素氮,并用ＥＰＯ酶联免疫试剂盒测定血清ＥＰＯ水平,     

应用EPO治疗透析患者肾性贫血的效果

应用ＥＰＯ治疗透析患者肾性贫血的效果天津中建六局中心医院血透室安志风，周晓光，刘淑琳慢性肾衰竭及透析病人，由于内分泌功能障碍，致使体内促红细胞生成素缺乏，产生肾性贫血。我院首次应用美国产ＥＰＯ（促红细胞生成素）治疗２４例因慢性肾功能衰竭而贫血的长期透...     

人类重组红细胞生成素作用的研究进展

人类重组红细胞生成素（ｒＨｕＥＰＯ）是利用ＤＮＡ重组技术人工合成的激素，它的产生，标志着贫血治疗的一个新阶段，目前ｒＨｕＥＰＯ已成为治疗肾性贫血的首选药物。近年来随着对ｒＨｕＥＰＯ研究的不断深入，人们对ｒＨｕＥＰＯ在慢性肾功能衰竭（ＣＲＦ）患者中的临床作用又增添了许多新的知识。下面就这些研究进展作一简述。１ 对红细胞质量及免疫功能的影响 研究表明ＣＲＦ患者氧自由基脂质过氧化物（ＬＰＯ）水平、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性、红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋ＡＴＰａｓｅ活性　，经ｒＨｕＥＰＯ治疗后，不但ＬＰＯ、ＳＯ…     

Pharmacodynamic study of recombinant human erythropoietin on a renal anemia model induced by gentamycin in rats

ＰｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃｓｔｕｄｙｏｆｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｈｕｍａｎｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎｏｎａｒｅｎａｌａｎｅｍｉａｍｏｄｅｌｉｎｄｕｃｅｄｂｙｇｅｎｔａｍｙｃｉｎｉｎｒａｔｓＣａｏＺｈｉｆａｎｇ（曹之舫）；ＪｉａＬｉｎ（贾林）；Ｊｉ...     

风寒湿外邪作用于EPO影响痹证(类风湿关节炎)的发生

目的 明确风寒湿外邪作用于促红细胞生成素(EPO)影响痹证(类风湿关节炎)的发生机制.方法 (1)30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、单纯完全弗氏佐剂(CFA)组、风寒湿+CFA组,每组10只大鼠.单纯CFA组大鼠正常饲养14 d,风寒湿+CFA组大鼠风寒湿刺激14 d,再尾根部皮下注射0.1 mL含100滋g热灭活...     

重组人促红细胞生成素(rhEPO)在老年慢性病贫血（AcD）中治疗效果的评价及疗效的预测

 目的 在32例年龄在60岁以上的慢性病贫血(anemia of chronic disease,AcD)患者中,应用重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rhEPO)治疗8周后测观察贫血改善情况,并筛选出具有较高临床意义的预测参数。方法 32名AcD老年患者应用rhEPO治疗8周,8周内血红蛋白(hemoglobin,Hb)上升20 g/L设为治疗有效。选用血清EPO水平、Hb、网状红细胞计数(reticulocyte count,Ret)、总铁结合力(total iron binding capacity,TIBC)、血清铁(serum iron,SI)、血清铁蛋白(serum ferritin serum,SF)、可溶性转铁蛋白受体(serum transferrin receptor,sTfR)作为观测指标,观察患者8周时血红球蛋白的改变并进一步统计分析其与各观测指标变化之间的关系。结果 32例老年AcD患者应用rhEPO治疗8周后Hb升高,SI、LgSF下降,sTfR升高(P<0.05)。20例患者8周时获得预期疗效,多元回归分析提示rhEPO治疗8周后Hb改变与LgEPO及基线sTfR水平呈负相关(P<0.05)。根据设定的评价方法将32例患者分为rhEPO治疗有效组及治疗无效组,绘制sTfR及LgEPO的受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)并计算曲线下面积(area under the curve,AUC),后者具有统计学意义并且AUC更大(AUC为0.81,P<0.05,95%CI：0.627~0.993),并通过最大Youden指数寻找到最佳诊断点为EPO≤58 mIU/mL。如患者EPO≤58 mIU/mL,可预测其能获得较好的治疗效果。结论 rhEPO在老年慢性病贫血中可取得较好的治疗效果,患者的EPO水平是具有较高临床意义的预测参数。     

重组人促红细胞生成素对大鼠急性创伤性脑损伤脑组织中基质金属蛋白酶-9及水通道蛋白-4表达的影响

目的 探讨重组人促红细胞生成素（rhEPO）对大鼠急性创伤性脑损伤的神经保护作用及其机制。方法健康雄性SD大鼠55只随机分为假手术组（n=5）、对照组（n=25）和EPO治疗组（n=25）;对照组和治疗组采帽改进的Feeney等的方法制作脑创伤模型,EPO治疗组在模型建立后立即腹腔注射rhEPO5000U／kg,对照组和似手术组往等时间点给予等量生理盐水。根据伤后处死时间点不同每组再分为5个亚组,即6h、24h、48h、3d、7d组．每个亚组5只动物。断头、取脑,行HE染色和免疫组织化学方法检测大脑皮层组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及水通道蛋白-4（AQP-4）的表达。结果脑创伤大鼠6h创伤灶脑组织出现MMP-9和AQP-4的表达。与假手术组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。EPO治疗组和对照组槲比较MMP-9及AQP-4的表达明显降低（P〈0．05）。结论 rhEPO对大鼠急性创伤性脑损伤有一定的神经保护作用,其机制可能是通过降低MMP-9及AQP-4的表达来实现的。     

促红细胞生成素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的脑保护研究

目的:探讨促红细胞生成素(EPO)对新生缺氧缺血性脑损伤(HIBD)大鼠的神经保护作用。方法:40只7 d龄新生大鼠随机分为HIBD模型组、EPO干预组、生理盐水对照组、假手术组,每组各10例。在建立HIBD模型后,EPO干预组立即一次性腹腔注射5 000 U/kg剂量的人基因重组促红细胞生成素(rhEPO),生理盐水对照组注射等量生理盐水;于处置24 h后用原位缺口末端标记(TUNEL)法和流式细胞计(FCM)检测受损局部神经元细胞的凋亡情况,用RT-PCR检测神经元细胞凋亡相关信号分子的改变。结果:与假手术组比较,HIBD模型组在术后24 h神经元出现Bcl-2/Bax比值倒置,神经元凋亡增加;与HIBD模型组比较,EPO干预组神经元Bcl-2表达相对增加,而Bax表达相对受抑制,Bcl-2/Bax比值升高,神经元凋亡明显减少并且增殖增加,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:EPO可以通过提高Bcl-2/Bax比值,抑制细胞凋亡而起到神经保护作用。     

BNIP3在rhEPO促进大鼠部分肝切除后肝再生中的作用

目的 由BNIP3介导的线粒体动态平衡在肝脏的脂肪代谢及糖代谢中起重要作用,而肝再生与线粒体代谢密切相关.有研究表明EPO可促进肝脏再生,但具体机制不明.本文研究重组人促红细胞生成素（rhEPO）对大鼠部分肝切除后肝功能及肝再生的影响,以及BNIP3和TNF-αmRNA在再生肝组织中的表达.方法 36只Wistar大鼠随机分为rhEPO组和空白组,建立大鼠70％肝切除,肝切除后经门静脉注射3000IU/kg rhEPO,空白组注射等剂量生理盐水.术后1d、3d、5d各处死6只大鼠采集血清及肝脏标本,全自动生化分析仪测定血清谷丙转氨酶（ALT）,免疫组织化学染色法检测Ki-67表达,ELISA法检测血清TNF-α、IL-6,荧光定量PCR检测肝组织BNIP3和TNF-α mRNA.结果 肝切除术后1d rhEPO组的谷丙转氨酶（ALT）显著低于空白组（P＜0.05）.肝切除术后1、5d rhEPO组Ki-67标记率显著高于空白组（P＜0.05）.肝切除术后1d rhEPO组TNF-α显著高于空白组（P＜0.05）,肝切除术后1d 3d rhEPO组IL-6显著高于空白组.肝切除术后1d 3d rhEPO组BNIP3和TNF-αmRNA显著高于空白组（P＜0.05）.结论 门静脉注射rhEPO具有肝保护和明显的促肝再生作用,其机制可能与BNIP3和TNF-α有关.     

EPO的抗衰老作用及其作用机制的初步探讨

目的研究促红细胞生成素(EPO)是否具有抗衰老作用,并初步探讨其作用机制。方法采用皮下注射5%D-半乳糖2.5mL/(kg.d)共6周建立大鼠衰老模型。将大鼠随机分为正常对照组,衰老模型组及小〔1000U/(kg.d)〕、中〔3000U/(kg.d)〕、大剂量〔5000U/(kg.d)〕重组人促红细胞生成素(rhEPO)干预组,每组10只。Morris水迷宫实验分析比较各组间大鼠的学习记忆能力;处死小鼠后检测脑组织中丙二醛(MDA)、Na+-K+ATP酶、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD);每组随机抽取1只大鼠,观察海马组织超微结构的差异。结果①衰老模型组较正常对照组大鼠学习记忆能力下降,脑组织MDA水平升高,Na+-K+ATP酶、T-AOC及SOD活性降低(P<0.05),且海马组织超微结构呈现一系列衰老改变;②中剂量rhEPO干预组较衰老模型组大鼠学习记忆能力提高,脑组织MDA水平下降,Na+-K+ATP酶、T-AOC及SOD活性升高(P<0.05),且海马组织电镜下超微结构较之改善;③小剂量rhEPO干预可部分对抗衰老大鼠脑组织Na+-K+ATP酶及SOD活性的降低(P<0.05),对其余指标无显著影响,大剂量rhEPO干预对衰老大鼠的各项指标均无显著改善(P>0.05)。结论中剂量的EPO具有抗衰老作用,其作用机制可能与增强抗氧化酶活性、提高抗氧化能力有关。     

重组人促红细胞生成素对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用

 目的 探索不同剂量及给药时间的重组人促红细胞生成素（recombinant human erythropoietin,rhEPO）对大鼠肾脏缺血再灌注损伤（ischemia-reperfusion injury,IRI）的保护作用。方法 48只雄性SD大鼠随机分为假手术组（S组）、缺血对照组（IR组）、EPO-1组（再灌注时给药1 000、2 000和3 000 U/kg）和EPO-2组（再灌注前给药1 000、2 000和3 000 U/kg）。阻断左侧肾蒂45 min后切除右侧肾脏,建立IRI模型。检测血液中血肌酐（Scr）、血浆尿素氮（BUN）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、IL-6和Caspase-3水平,观察肾脏的病理学改变,采用TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡。结果 EPO组血清Scr、BUN和肾组织MDA、Caspase-3、IL-6水平明显低于IR组（P<0.05）;EPO组肾组织SOD水平明显高于IR组（P<0.05）,并在组织损伤上较IR组轻;TUNEL染色观察到EPO组阳性细胞数明显少于IR组（P<0.05）。再灌注前给药优于再灌注时给药（P<0.05）。结论 rhEPO对肾脏IRI有较好的保护作用,该作用可能通过抗氧自由基、减轻炎症反应、减少肾小管上皮细胞凋亡的协同机制来实现。保护作用与药物剂量呈正相关,再灌前给药优于再灌注时给药。     

围手术期应用重组人红细胞生成素的多中心随机对照研究

目的 观察围手术期贫血患者使用重组人红细胞生成素（rhEPO）对纠正贫血和减少异体输血的临床效果.方法 74例胃肠道肿瘤伴贫血患者,随机分成治疗组A、治疗组B和对照组C,A组患者术前每天皮下注射rhEPO 1万IU,连续4 d,术后第1、3 d分别皮下注射rhEPO 1万IU;B组患者术前7 d始隔天皮下注射rhEPO 1万IU,连续6次;C组患者不给予rhEPO.观察所有患者贫血纠正及异体输血情况.结果 治疗组患者用药后血红蛋白（Hb）、网织红细胞（Ret）及血细胞比容（Hct）水平高于对照组、用药前,术中及术后异体输血少于对照组.B组疗效优于A组.结论 围手术期使用rhEPO对于纠正贫血和减少异体输血是有效的.     

重组人促红细胞生成素对衰老大鼠脑组织不同部位BDNF表达的影响

目的 探讨重组人促红细胞生成素(rhEPO)对衰老大鼠脑组织内不同部位脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响.方法 40只2月龄雄性SD大鼠,随机分为4组:阴性对照组(N),D-半乳糖组(D),EPO干预组(E),阳性对照组(P),每组10只.应用免疫组化染色对比观察外源性rhEPO干预后D-半乳糖衰老大鼠脑组织不同部位BDNF表达的变化.结果 不同组大鼠比较发现相同部位BDNF表达存在显著差异:D组大鼠海马CA1、CA3、DG及额叶皮质区BDNF阳性细胞计数较N组相同部位明显减少(P<0.05),而应用rhEPO干预后的E组和P组大鼠海马CA1、CA3、DG及大脑皮质运动区BDNF阳性细胞计数较D组及N组相同部位显著增加(P<0.05);但E组和P组比较无差异.同组大鼠不同部位BDNF阳性细胞比较发现:同组大鼠不同部位BDNF阳性细胞个数存在显著不同(P<0.05),其中额叶皮质区阳性细胞数最多,其次是海马CA3区,海马DG区,海马CA1区.结论 rhEPO对增强大鼠神经细胞BDNF的表达具有普遍性,提示rhEPO可能能够通过增强内源性BDNF对神经系统衰老发挥保护作用.