HLA-DR抗原在慢性乙型肝炎和肝细胞癌中的表达及其意义

目的　探讨HLA DR抗原在慢性乙型肝炎和肝细胞癌 (HCC)中的表达及其意义。方法采用免疫组化技术对 2 0例正常肝组织、36例慢性乙型肝炎和 44例HCC中HLA DR抗原的表达进行检测。结果　正常肝组织中肝细胞未见HLA DR抗原表达。慢性乙型肝炎肝细胞HLA DR抗原表达阳性率为 2 7.8% ,其中 ,中度和重度肝炎HLA DR抗原阳性率明显高于轻度肝炎 (阳性率分别为 37.5 %和 2 0 % ,χ2 =13.6 ,P <0 .0 1)。HCC中肿瘤细胞HLA DR抗原表达阳性率为 43.2 %。HLA DR抗原表达与癌周淋巴细胞浸润 (χ2 =0 .5 1,P >0 .0 5 )和转移 (χ2 =2 .9,P >0 .0 5 )无关 ,但与癌组织分化程度有关 (χ2 =4.9,P <0 .0 5 )。结论　HLA DR抗原的异常表达在慢性乙型肝炎免疫损伤、免疫保护和HCC发生、发展中起重要作用     

T细胞可以作为抗原递呈细胞

人的Ｔ细胞是表达ＭＨＣⅡ类分子抗原和抗原和抗原递呈细胞特有的粘附分子。最近体内体外实验证明，Ｔ细胞具有抗原递呈功能。通过在已经被活化的Ｔ细胞中诱导免疫无能及在静止的Ｔ细胞中诱导细胞毒作用，Ｔ细胞对免疫应答提供了调的信号。ＷｅｒｎｅｒＪＰ和他的同事们指出：“这代表Ｔ细胞的主要阴性机制”。     

T—抗原递呈细胞研究进展

人类活化Ｔ细胞能表达ＨＬＡ－ＤＲ分子。这种ＤＲ＾＋Ｔ细胞具有抗原递呈作用，能递呈一些结合于Ｔ细胞上的抗原、自身抗原和游离抗原降解的肽段。Ｔ细胞递呈抗原通过递呈负性信号诱导Ｔ细胞克隆无反应性和／或细胞毒性Ｔ细胞活性而对机体免疫应答起负调作用。本文就这一方面的进展作一综述。     

T细胞识别的肿瘤抗原

在人类肿瘤中已鉴定出很多能为肿瘤特异性ＣＴＬ所能识别的抗原，在它们之中，有的由在肿瘤中表达但处于隐性状态下的基因所编码；有的则由肿瘤中的突变编码。多数人类肿瘤细胞上带有这种能为Ｔ细胞识别的抗原，应用这些抗原进行免疫接种将有一定的临床意义。     

稳定表达细胞毒性T淋巴细胞相关抗原CTLA-4的293T细胞株的建立

目的：构建稳定表达细胞毒性 T 淋巴细胞相关抗原-4（cytotoxic T lymphocyte antigen-4, CTLA-4）的293T 细胞株。方法首先从人外周血获取 PBMC 加以 T 细胞活化; PCR 扩增 CTLA-4转录本,连接pUCm-T 质粒引入 HindⅢ和 EcoRⅠ双酶切位点后转入真核细胞表达质粒 pcDNA3．1;重组质粒 pcDNA3．1-CTLA-4经脂质体转染293T 细胞,以抗生素 G418筛选表达 CTLA-4的293T 细胞;定量 PCR、免疫荧光分别检测293T 细胞 CTLA-4表达与细胞定位。结果血样来源 T 细胞经活化后表达 CTLA-4转录本。 HindⅢ和EcoRⅠ双酶切证实重组质粒内 CTLA-4插入序列正确; RT-PCR 及免疫荧光检测证实293T 细胞能够稳定表达目的蛋白 CTLA-4,并定位于细胞膜表面。结论成功构建的 pcDNA3．1-CTLA-4重组真核表达载体,在293T 细胞膜表面实现了稳定表达,为进行相关生物学理论与应用研究打下基础。     

急性心肌梗塞患者外周血活性T淋巴细胞亚群的研究

目的：研究１５例急性心肌梗塞患者外周血淋细胞亚群和活性标志的变化。方法：流式细胞仪技术,结果：急性心肌梗塞患者外周血淋巴细胞ＣＤ３＾＋ＤＲ＾＋和ＣＤ４＾＋和ＤＲ＾＋百分率明显高于对照组。结论：急性心肌梗塞患者存在免疫功能紊乱,辅助性Ｔ淋巴细胞处于高活性状态。     

SEB活化的人外周血T细胞CD25,CD69的表达

本文用超抗原葡萄球菌肠毒素B(SEB)诱导外周血淋巴细胞增殖。结果显示出微量超抗原能诱导外周血淋巴细胞的增殖,大量的增殖反应发生在SEB刺激后的第5天,增殖的细胞是CD4~+T细胞,它们由刺激前的27％增加到42％。外周血活化的T细胞不依赖外源性IL-2:大量内源性IL-2的存在抑制T细胞的增殖反应。伴随CD4~+T细胞的增殖,CD25和CD69分子表达明显增加。提示SEB能改变外周血T细胞表面的分子表达。     

亚硒酸钠对慢性乙型肝炎病毒感染者外周血树突状细胞功能的影响

目的 探讨体外培养诱导慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞(DCs)功能状态改善的方法.方法 用GM-CSF IL-4 INF-a诱生慢性乙型肝炎患者及健康人外周血来源的DCs,在乙肝患者DCs成熟前加入营养浓度的硒(0.3mmol/L)共培养.流式细胞仪(FCM)检测细胞表面CD80、CD86表达水平,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测DCs刺激同种异体淋巴细胞增殖能力及酶联免疫吸附测定法(ELISA法)检测DCs培养上清中白细胞介素12(IL-12)的分泌水平.结果 经营养浓度硒(0.3mmol/L)作用后的乙肝患者的DCs刺激淋巴细胞增殖能力明显高于未经硒作用的乙肝组(P<0.01),IL-12的分泌水平和表面刺激分子也明显高于乙肝组(P<0.01),加硒组和健康组之间则没有显著性差异.结论 体外经营养浓度的硒作用后的乙肝患者的DCs可有效刺激淋巴细胞增殖反应,提高IL-12分泌水平,在一定程度上能恢复DCs的免疫功能,这些为今后DCs的慢性乙型肝炎的免疫治疗提供新思路.     

香菇多糖注射液对慢性活动型肝炎外周血T淋巴细胞亚群和IL－2R表达作用的研究

研究香菇多糖注射液对３２例慢活肝患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群和ＩＬ－２Ｒ表达的影响，其治疗前和治疗后的ＣＤ４￣＋分别是４０．１０±６．２２％和４５．８９±６；８０％，ＩＬ－２Ｒ分别是３８．８２±７．５９％和４９．１６±５．６４％，与治疗前比较，Ｐ＜０．０１。对照组１０例慢活肝，治疗前和治疗后ＣＤ４￣＋分别４３．９０％±７．７１％和４３．５％±９．８７％；ＩＬ－２Ｒ分别是４０．３０±９．３７％和４２．９５±７．５９％，与治疗前相比，Ｐ＞０．０５。香菇多糖注射液使慢活肝患者的外周血ＣＤ４￣＋细胞和ＩＬ－２Ｒ表达的增加，可能是香菇多糖对慢活肝外周血ＣＤ４￣＋有活化作用。其作用机制将进一步探讨。     

INVESTIGATION OF T CELL RECEPTORS IN THE PERIPHERAL BLOOD OF PATIENTS WITH ACTIVE PULMONARY TUBERCULOSIS

T cells have the capability of recognizing target cells through their T cell receptors (TCRs). Thus, the percentages of CD3⁺/ gamma–delta (γδ) TCR⁺and CD3⁺/ alpha–beta (αβ) TCR⁺T lymphocytes were investigated in active and inactive pulmonary tuberculosis (PT) patients and in healthy individuals. CD3⁺and CD3⁺/αβTCR⁺cell percentages were significantly lower in all PT patients than in healthy subjects. Percentages of CD3⁺/γδand CD3⁺/αβTCR⁺were not statistically different between active and inactive PT patients. It was concluded that αβTCR⁺T cells might have a protective role in tuberculosis infection.     

WHEAT GERM AGGLUTININ DECREASES EXPRESSION OF THE T8 ANTIGEN ON HUMAN PERIPHERAL MONONUCLEAR CELLS

We examined dynamics of expression of the human T-suppressor specific antigen, T8, following interaction of peripheral lymphocytes with wheat germ agglutinin (WGA). Cells were incubated at 37°C with or without WGA (15ug/ml) for 18 hrs, washed sequentially with N-acetylglucosamine (to remove bound WGA) and plain medium, then analyzed by flow cytometry for binding of lectins and monoclonal antibodies 0KT8(T-suppressor specific) and 0KT3 (pan-T specific). WGA pretreatment induced an overall 65% reduction in WGA binding and concomitant 30% reduction in percentage of T8+ cells. Furthermore, residual T8+ cells showed 50% reduction in T8 expression. Taking into account reductions in both percentages of T8+ cells and also antigen densities, WGA reduced T8 expression by greater than 60% overall. By contrast, binding of 0KT3 and the lectins, concanavalin A (con A) and Ricinus communis agglutinin (RCA-I), was unaffected by WGA. The decreased T8 expression could not be explained by residual cell bound WGA and was fully reversible within 48 hours of removal of cells from WGA-containing medium. Therefore, WGA caused down-regulation of T8 antigen expression. The effect of WGA was time- and concentration-dependent. Downregulation did not occur at 4°C nor in the presence of azide, thereby demonstrating a requirement for cellular metabolism. The data suggest that WGA may bind to the T8 antigen, and they provide the possibility that similar downregulation of T8 by WGA may underlie certain of the in vitro immunoregulatory effects of this lectin.     

GM－CSF对人单核细胞HLA－DR抗原表达的影响

本文采用ＥＬＩＳＡ方法，研究了重组的人粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）对体外培养的正常人外周血单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达的影响。结果表明ＧＭ－ＣＳＦ能提高单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达，并且呈剂量依赖关系，最适剂量（５００ｕ／ｍｌ）时能使ＤＲ抗原表达量提高到对照组的２．５倍。ＧＭ－ＣＳＦ对ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达的诱导作用并不是通过诱生的ＩＦＮ－γ的作用而实现的，因为有中和活性的ＩＦＮ－γ单抗并不能阻断这种效应。ＧＭ－ＣＳＦ能够增强低剂量ＩＦＮ－γ（５ｕ／ｍｌ）对单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原的诱导作用，但未观察到对高剂量ＩＦＮ－γ（１００ｕ／ｍｌ）的ＨＬＡ－ＤＲ抗原的诱导增强作用。     

GM－CSF对人单核细胞HLA－DR抗原表达的影响

本文采用ＥＬＩＳＡ方法，研究了重组的人粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）对体外培养的正常人外周血单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达的影响。结果表明ＧＭ－ＣＳＦ能提高单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达，并且呈剂量依赖关系，最适剂量（５００ｕ／ｍｌ）时能使ＤＲ抗原表达量提高到对照组的２．５倍。ＧＭ－ＣＳＦ对ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达的诱导作用并不是通过诱生的ＩＦＮ－γ的作用而实现的，因为有中和活性的ＩＦＮ－γ单抗并不能阻断这种效应。ＧＭ－ＣＳＦ能够增强低剂量ＩＦＮ－γ（５ｕ／ｍｌ）对单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原的诱导作用，但未观察到对高剂量ＩＦＮ－γ（１００ｕ／ｍｌ）的ＨＬＡ－ＤＲ抗原的诱导增强作用。     

慢性活动性乙型肝炎患者细胞免疫功能检测及其临床意义

测定了例慢性活动乙型肝炎患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）产生的白细胞介素２（ＩＬ－２）活性，其中部分病人检测了血清可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）水平，膜白细胞介素２受体（ｍＩＬ－２Ｒ）表达，ＬＡＫ活性及外周血Ｔ淋巴细胞亚群，并分析了它们之间的相关性，结果表明：ＩＬ－２活性，ｍＩＬ－２Ｒ表达，ＬＡＫ活性，ＣＤ４／ＣＤ８比值显著低于正常对照组（Ｐ〈０．００１），而ｓＩＬ－２Ｒ水平，ＣＤ８细胞显     

慢性乙型肝炎患者外周血T细胞亚群及T_4/T_8双标志细胞的初步研究

本文应用抗人T细胞单克隆抗体借助葡萄球菌-羊红细胞直接双花环法研究了11例慢性乙型肝炎患者外周血T细胞亚群.结果发现.慢性乙型肝炎患者外周血T_4~+细胞(辅助/诱导T细胞)数在正常范围;T_8~+细胞抑制/细胞毒T细胞数与正常对照比较明显增加;T_4/T_8比值与正常对照比较明显降低.此外。在慢性乙型肝炎患者外周血中发现有较多的可同时表达T_4和T_8抗原的细胞。其功能和意义尚待进一步研究.     

类风湿性关节炎患者外周血淋巴细胞凝集素受体的表达及细胞免疫功能的测定

采用生物素标记的７种植物凝集素和Ｔ细胞花环法，检测了类风湿性关节炎（ＲＡ）患者外周血中淋巴细胞（ＰＢＬ）的凝集素受体的表达和细胞亚群的变化。结果显示这７种凝集素（ＣｏｎＡ，ＤＢＡ，ＢＰＡ，ＳＢＡ，ＰＮＡ，ＵＥＡ和ＷＧＡ）均与患者和正常对照组的ＰＢＬ相结合，但ＷＧＡ和ＣｏｎＡ的受体结合率在ＲＡ组明显高于正常组（Ｐ＜０．０５）。ＲＡ患者ＰＢＬ中Ｔ８细胞亚群减少和Ｔ４／Ｔ８比率增高十分明显，同时伴有淋巴细胞转化功能的降低及其他血清学方面的改变。     

肿瘤病人及正常人外周血大颗粒淋巴细胞的观察

本文报道了LGL细胞在肿瘤病人外周血中的数量;与治疗有关的动态变化及正常人LGL细胞与NK活性的关系。发现除了LGL细胞具有颗粒外,少数小淋巴细胞浆内也具有颗粒。19例癌症治疗好转病人LGL细胞百分数较正常人为高。18例癌症恢复健康病人LGL细胞百分数与正常人相比无明显差异。5例脑肿瘤手术后及9例肝癌住院治疗病人LGL细胞升高。20例正常人LGL数量与NK活性之间有平行关系。