端粒酶蛋白质亚单位的研究进展

端粒酶在肿瘤发生的过程中具有重要作用,端粒酶由蛋白质及RNA两种组分构成。四膜虫的端粒酶有p80和p95蛋白,哺乳动物中p80的同源物为TP1/TLP1,近来发现的hEST2/TP2/hTRT结构上具有逆转录酶的结构域单元,其在多种肿瘤组织及细胞系中的表达与端粒酶的活性一致。提示它是端粒酶的蛋白催化亚单位,针对该亚单位的治疗可能成为端粒酶治疗的新靶点。     

亚单位疫苗佐剂的研究进展

亚单位疫苗是通过物理化学方法或基因工程手段获取病原体主要免疫原蛋白而制成的一种疫苗,它可以有效避免利用全病原体生产疫苗所导致的生物安全风险,并有利于提高疫苗中有效成分的浓度、纯度,以及开发多价多联疫苗。目前,已研制成功的亚单位疫苗包括口蹄疫病毒VPI亚单位疫苗、乙肝病毒表面抗原亚单位疫苗、人乳头瘤亚单位疫苗等。     

免疫蛋白酶体亚单位LMP的研究进展

低分子量多肽(low molecular weight polypeptide,LMP),包括低分子量多肽2(LMP2)和低分子量多肽7(LMP7),为免疫蛋白酶体20S的β亚单位,普遍存在于真核细胞胞质中,胞核中也有少量分布.     

霍乱毒素及其亚单位的单克隆抗体研究

一、抗霍乱毒素(或其亚单位)单克隆抗体的杂交瘤细胞系的建立:本文报道以福尔马林脱毒的CT-B免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与骨髓瘤Sp 2/0细胞融合。筛选到一株能产抗CT-B单克隆抗体的杂交瘤细胞系,命名为AE 72-26。CT-B免疫组的试验中,获得4株能产抗体的杂交瘤细胞系,但效价很低,且兼有抗CT-A、抗CT-B抗体。     

β-肾上腺素受体亚单位的证实

多种激素和神经递质是与腺苷酸环化酶相结合的特异性受体起作用的。Sutherland等首先提出,此受体构成具有使腺苷酸环化酶变构效应点的调节亚单位。最近,有两方面的实验资料支持这种主张,即β-受体和膜上腺苷酸环化酶位于分离的大分子上。Lefkowitz等用分子筛色谱法从毛地黄甙溶解红细胞膜所得腺苷酸环化酶中分离出β-受体。Schramm等证明,火鸡红细胞的β-受体可被     

G蛋白βγ亚单位功能研究进展

G蛋白(guanine nucleotide-binding proteins)是由α、β、γ亚单位组成的杂三聚体,除了能够转导多种信息,如光子、激素、神经递质、气味分子、蛋白酶以及离子进入细胞内之外,还在细胞骨架形成与维持、信号转导反馈环的形成等方面发挥重要作用。但长久以来,人们一直认为在这些过程中发挥主导作用的是G_α亚单位;G_(βγ)亚单位的作用是将G_α锚固于细胞膜上并通过与之结合或脱离来调节其活性,而缺乏重要的直接功能。但是,近年来的研究发现G_(βγ)亚单位在多方面有着广泛的作用。本文仅就其中的几个重要方面作一综述。     

钙离子通道的分子结构及其亚单位的功能

钙离子通道是镶嵌于膜脂质中的糖蛋白或外侧糖基化的蛋白复合体，广泛存在于细胞膜表面，形成一个功能单位或小孔，对Ｃａ２＋具有高度的选择通透性，控制着离子的转运与细胞的功能。细胞内多种酶系统都对细胞内Ｃａ２＋非常敏感，Ｃａ２＋作为“第二信使”，进行着细胞调节的功能。此外，在心肌细胞的兴奋－收缩偶联中，Ｃａ２＋有着重要的作用     

基于gp41的HIV亚单位疫苗研究进展

艾滋病疫苗是当今时代最具挑战性的科学难题之一,现有的以诱导体液免疫为目的的HIV-1抗原均难以诱导产生有效的、持续的广谱中和抗体.近年来,一些具有广谱中和活性的HIV单克隆抗体(mAb)的发现及其相应抗原表位的阐明,给以诱导HIV体液免疫的疫苗研究带来了新的希望.相比于gp120,HⅣgp41的序列更为保守,糖基化位点更少,更适合作为疫苗的抗原.本文综述了靶向gp41的广谱中和抗体及其抗原表位,并阐述了对目前国际上基于gp41的HⅣ亚单位疫苗设计思路及进展.     

电压门控钠通道α亚单位的研究

电压门控钠通道是可兴奋细胞产生电兴奋的基础结构,其α亚单位为基本功能单位,可单独发挥作用。在人类已有9个α亚单位被成功克隆。对钠通道α亚单位的基本结构与分类、选择性剪切、基因克隆与突变、钠通道与肿瘤发生的关系以及神经母细胞瘤钠通道的研究进行阐述。     

亚单位流感疫苗对小鼠哮喘模型的影响

目的探索亚单位流感疫苗对哮喘模型小鼠的影响。方法将45只6周龄雌性BALB/c小鼠随机分为PBS对照组、哮喘对照组、亚单位流感疫苗组。哮喘对照组与亚单位流感疫苗组小鼠于第0、7、14天,腹腔注射50μg鸡卵清蛋白(OVA)与2 mg氢氧化铝混合乳液,PBS对照组给予相同体积的PBS。第21、28天,亚单位流感疫苗组小鼠分别被肌注0.1 m L及滴鼻40μL亚单位流感疫苗。此后,第42、43、44天,哮喘对照组、亚单位流感疫苗组小鼠被OVA雾化激发连续3 d。最后1次雾化48 h,眼球取血后处死小鼠并进行肺泡灌洗,收集的肺泡灌洗液(BALF)用于细胞计数及分类;取肺组织进行HE染色检测病理学变化,ELISA测定血清Ig E及BALF中白细胞介素4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)、IL-5、IL-13水平。结果与PBS对照组相比,哮喘对照组及亚单位流感疫苗组均出现明显的炎症反应、黏液分泌增多、血清及BALF中IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-13水平均显著增高。然而,哮喘对照组与亚单位流感疫苗组间无显著差异。结论亚单位流感疫苗接种于哮喘小鼠,不会加重哮喘症状,是相对安全的。     

幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位与大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位融合蛋白表达的研究

目的：获得大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位（LTB）与幽门螺杆菌保护性抗原热休克蛋白A亚单位（HspA）的融合蛋白。方法：PCR扩增ltB和hspA基因，依次构建至表达载体pIM-1，转化大肠杆菌，SDS-PAGE、免疫印迹分析目的蛋白表达情况。采用GM1ELISA和D( )-半乳糖亲和层析方法检测重组LTB-HspA融合蛋白LTB组分与GM1神经节苷脂结合活性。结果：重组LTB-HspA融合蛋白表达量最高可达细菌总蛋白的25％。免疫印迹检测结果证实为重组LTB-HspA融合蛋白。GM1ELISA和D( )-半乳糖亲和层析方法检测结果证实重组LTB-HspA融合蛋白具有与GM1神经节苷脂结合的活性。结论：LTB-HspA融合蛋白的表达研究，为研制幽门螺杆菌分子内佐剂疫苗打下了基础。     

大鼠神经系统内蛋白激酶Cγ亚单位的定位

目的　观察蛋白激酶Cγ亚单位 (PKCγ)在大鼠神经系统内的定位分布。　方法　PKCγ特异性抗体的免疫细胞化学染色技术。　结果　密集、浓染的PKCγ阳性神经元主要见于大脑皮质、海马、杏仁复合体、小脑皮质、耳蜗腹侧核和耳蜗背侧核、三叉神经脊束核尾侧亚核和脊髓背角浅层。　结论　PKCγ阳性神经元广泛分布于大鼠神经系统。本研究的结果为探讨PKCγ在神经系统信号转导过程中的作用提供了形态学证据     

登革病毒重组亚单位疫苗的构建及免疫原性分析

目的 构建登革病毒1～4型重组亚单位疫苗,分析重组疫苗的免疫原性.方法 利用连接肽将登革病毒1型与2型,3型与4型的外膜蛋白DⅢ基因片段连接在一起,克隆人原核表达载体pET-30a,在大肠埃希菌中表达DEN1/2型、DEN3/4型融合重组蛋白.重组蛋白经高效液相色谱柱分离纯化后,混和免疫小鼠,采用中和实验法测定血清中和抗体效价,同时进行乳鼠体内中和实验,观察中和抗体对乳鼠的免疫保护作用.结果 重组蛋白能诱导小鼠产生针对登革病毒1～4型的中和抗体,平均中和效价分别为1：34.9、1：45.3、1：24.7和1：38.4.中和抗体能保护新生乳鼠免受致死剂量DEN1～4的攻击,保护率分别为100%,100%,83%,83%.结论 构建的重组亚单位疫苗具有良好的免疫原性,能诱导小鼠产生中和抗体,为构建单一四价疫苗提供了实验室依据.     

重症肌无力患者肌肉AChR亚单位基因的表达

目的：探讨重症肌无力（MG）患者眼外肌易于受累的机制。方法：采用RT-PCR对正常人眼外肌、其他骨骼肌群（8例）以及MG患者肋间肌（10例）AChRα、β、γ、ε、δ亚单位mRNA的表达进行分析，同时采用ELISA方法检测83例MG患者血清AChR抗体对不同骨骼肌群AChR的反应。结果：①正常人眼外肌与其他骨骼肌一样均可见AChRα、β、γ、ε、δ亚单位mRNA的表达；②全身型MG患者肌肉AChRα P3A^＋／β—actin较正常对照组高（P=O．028）；③眼肌型、全身型MG抗成人腓肠肌AChR抗体显著高于抗胎儿肌肉AChR抗体（P=0．001，0．016）。结论：MG患者眼外肌易受累机制可能与眼外肌AChR亚单位mRNA表达水平及眼外肌的内在易感性有关。     

汉族青年鼻底亚单位的测量及其意义

目的研究汉族青年鼻底形态学特点,为鼻的美容整形提供形态学基础。方法观察165名19～30岁的汉族青年外鼻形态,采用人体测量学方法对鼻底及亚单位的鼻小叶宽、鼻宽、鼻深和尖下小叶高4项指标进行测量,并计算鼻底相关指数。结果鼻小叶宽:男(21.81±2.36)mm,女(20.49±2.00)mm;鼻宽:男(40.19±3.19)mm,女(36.03±2.77)mm;鼻深:男(19.58±2.32)mm,女(18.26±2.24)mm;尖下小叶高:男(7.86±2.13)mm,女(7.14±2.03)mm。结论通过对汉族青年鼻底及亚单位的测量及对鼻底相关指数计算,初步了解了其形态特点,为鼻美学评价和美容整形手术设计提供了形态学依据。     

GABAC受体/通道的ρ1亚单位的研究进展

关于GABAC受体/通道的ρl亚单位,许多都是研究其在视网膜中的功能。近年来发现它在哺乳动物的CNS中也广泛存在,如脊髓、垂体、海马等。在视网膜中,由ρl亚单位组成的GABAC受体调节双极杆状细胞的视觉信号传输;而在脊髓中,ρl亚单位参与痛觉传输的调节。预测GABA受体/通道ρl亚单位在CNS中有更多重要的生理功能,特别是它的抑制调节作用。本文主要叙述ρl亚单位的特征和它在CNS中的分布与功能。     

丙型肝炎病毒亚单位融合蛋白的表达及免疫原性测定

目的获得高纯度的丙型肝炎亚单位融合蛋白并评价其免疫原性。方法利用原核表达系统,以pET—11d作为载体,在大肠埃希菌BL21（DE3）中经IPTG诱导表达获得融合蛋白,之后采用DEAE阴离子交换和镍离子柱亲和层析进行纯化。通过Western Blot验证融合蛋白的抗原活性。同时以该蛋白免疫实验动物后测定血清中的抗体滴度。结果成功获得很高纯度的丙型肝炎亚单位融合蛋白,EIA显示融合蛋白能够诱生出高滴度的抗体。结论原核表达系统表达的丙型肝炎病毒亚单位融合蛋白具有较强的免疫原性,为丙型肝炎病毒治疗性和预防性疫苗的研制提供了一条新的途径。     

霍乱毒素B亚单位对树突状细胞成熟的影响

背景:已有实验证明,霍乱毒素可诱导树突状细胞成熟。霍乱毒素B为霍乱毒素的无毒亚单位,是一种良好的免疫佐剂和输送抗原载体,其是否能促进树突状细胞成熟至今尚未得到证实。目的:观察树突状细胞2.4的表型和功能变化,初步探讨霍乱毒素B对树突状细胞成熟的影响。方法:通过细胞培养增殖树突状细胞2.4。将树突状细胞分成5组:空白对照组:不进行任何处理;霍乱毒素B0.1,1.0,10mg/L组:分别在培养液中加入相应霍乱毒素B;阳性对照组:培养液中加入脂多糖,终浓度1mg/L。每组设6复孔。采用流式细胞术检测培养不同时间树突状细胞2.4细胞表面CD80,CD86,MHC-Ⅱ类分子的表达,并行体外混合淋巴细胞反应,MTT法观察树突状细胞对同种T细胞的刺激能力。结果与结论:10mg/L霍乱毒素B显著增强树突状细胞表面分子(CD80,CD86和MHC-Ⅱ)的表达(P0.01),并显著提高树突状细胞对T细胞的激活能力(P0.01)。阳性对照组与空白组之间差异有显著性意义(P0.01)。结果显示霍乱毒素B能增强树突状细胞的活化与成熟,对其免疫学功能起正性调节作用。     

TDM/TDB是结核亚单位疫苗的重要佐剂

结核病是严重危害人类健康的慢性传染病,每年造成全球二百万人死亡[1],我国结核病患者人数仅次印度,位于世界第二位。我国结核病的耐药状况不容乐观,耐多药结核分枝杆菌的出现给结核病的防治带来巨大的挑战[2]。在多数高负担的发展     

Stxl-A亚单位的原核表达、复性及抗原性鉴定

目的 构建志贺毒素1-A亚单位(Stxl-A)原核表达质粒,使其在大肠埃希菌中表达,对表达的重组蛋白进行纯化,并探讨其抗原性及应用价值.方法 以大肠埃希菌0157 DNA为模板扩增Stxl-A基因,重组克隆入原核表达载体pET32a( ),转化大肠埃希菌B121(DE3),异丙基硫代-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,包涵体经镍柱柱上复性和纯化,并对纯化产物进行Western印迹鉴定.结果 重组质粒经双酶协鉴定和测序分析后证实构建成功.重组蛋白经十二烷基磺酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示,其表达量占细菌总蛋白量的15%左右,主要以包涵体形式存在,通过镍柱柱上复性获得纯化的可溶性Stxl-A蛋白,纯度达95%以上,Western印迹检测显示特异性条带.结论 成功构建了pET32a( )/Stxl-A重组质粒,并获得了具有抗原特异性的可溶性Stxl-A蛋白,为进一步制备抗Stxl-A抗体和研究其生物学功能奠定了基础.