云南地区丙型肝炎病毒基因亚型及RNA载量在丙型肝炎进展中的变化

目的 检测云南地区慢性丙型肝炎、丙肝相关性肝硬化、丙肝相关性肝癌患者中丙肝病毒 (HCV) 的基因亚型及RNA载量在疾病进展过程中的变化.方法 通过收集2016年1月至2017年4月昆明医科大学第一附属医院及云南省传染病医院收治的患者241例, 其中丙型肝炎组患者169例, 丙肝相关性肝硬化组56例, 丙肝相关的肝癌组16例作为研究对象.采用PCR荧光探针法检测血清中丙肝病毒基因亚型以及HCV RNA载量.结果 在丙型肝炎患者中3b型最多 (27.81%) ;在丙肝相关性肝硬化患者中1b型最多 (30.36%) ;在丙肝相关性肝癌中3 b型最多 (31.25%) .3组患者基因亚型比例无显著差别 (P>0.05) .慢性丙型肝炎、丙肝相关性肝硬化、丙肝相关性肝癌组患者的HCV RNA载量分别为 (332±114) Copies/m L、 (189±73) Copies/m L、 (152±56) Copies/m L.3组患者HCV RNA载量的差异显著 (P<0.01) , 慢性丙型肝炎组高于其他2组 (P<0.01) , 但丙肝相关性肝硬化组与丙肝相关性肝癌组患者HCV RNA载量没有明显差别 (P>0.05) .结论 云南地区丙型肝炎中以3b型为主, 丙肝相关性肝硬化中以1b型为主, 丙肝相关性肝癌中3b型为主.在慢性丙型肝炎进展过程中HCV RNA载量减低.     

丙型肝炎病毒感染的不同人群HCV RNA定量研究

目的　了解丙型肝炎病毒感染的不同人群血清 HCV RNA水平 ,比较定性和定量 PCR结果 ,探讨 HCV含量与血清 AL T的相关性 .方法　采用荧光定量 PCR和逆转录巢式定性 PCR同时检测 136例丙型肝炎病毒感染者血清 HCV RNA,并测定定量 PCR (+ )者血清 AL T.用相关系数分析 HCV RNA含量与血清 AL T的关系 .结果　定性 PCR阳性率为 80 .88% ,定量 PCR阳性率为 77.94% .两者相对符合率为 94.12 % .定量 PCR(+ )血清 (10 6例 ) HCV RNA含量在 10 7.0 4～ 10 1 0 .96拷贝· L- 1 .无症状献血员 HCV RNA含量显著低于慢性丙型肝…     

丙型肝炎患者血清和外周血单个核细胞HCV-RNA检测

目的 :了解丙型肝炎患者血清和外周血单个核细胞 (PBMC)中HCV RNA存在情况及其意义。方法 :采用套式PCR检测 38例急性丙型肝炎和 36例慢性丙型肝炎患者血清和外周血PBMC中HCV RNA。结果 :74例丙型肝炎患者血清HCV RNA阳性 6 8例 ,PBMC阳性 44例 ;急性丙型肝炎患者PBMC中HCV RNA阳性 15例 (39.5 % ) ,慢性丙型肝炎患者PBMC中阳性 2 9例 (80 .6 % )。慢性丙型肝炎患者PBMC中HCV RNA检出率显著高于急性丙型肝炎患者 (P <0 .0 1)。 3例血清HCV RNA阴性 ,而PBMC中HCV RNA均阳性 ;8例患者血清抗 HCV阴性 ,而血清HCV RNA均阳性。结论 :PBMC可能为HCV肝外贮存和复制场所 ,PBMC中的HCV感染在丙型肝炎慢性化和慢性肝损害中可能起一定作用 ;血清HCV RNA检测有助于抗 HCV阴性丙型肝炎的诊断。     

丙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒核酸含量与丙型肝炎病毒抗体和丙氨酸氨基转移酶的相关性

[目的]探讨丙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒核酸(HCV RNA)含量与丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)间的相关性.[方法]采用实时荧光定量PCR检测302例丙型肝炎患者血清中HCV RNA含量,同时采用ELISA法检测抗-HCV水平,利用全自动生物化学检测仪测定ALT水平.[结果]302例丙型肝炎患者血清标本中,抗-HCV均呈阳性,其中199份标本HCV RNA含量高于检测上限(103 U/mL),2种检测方法的符合率为65.9%.ALT异常率随HCV RNA含量的增高而升高,两者呈显著正相关(r=0.155,P<0.05);而ALT水平变化与HCV RNA含量无相关性(r=0.001,P>0.05).[结论]HCV RNA含量与抗-HCV水平是诊断HCV感染的重要指标,HCV RNA含量结合ALT水平测定可帮助临床了解HCV在体内复制的状况及肝脏损伤情况.     

RT／PCR法检测慢性丙型肝炎HCV—RNA

应用逆转录一多聚酶键反应（RT／PCR）方法，对8例慢性丙型肝炎血清进行了HCV－RNA检测，结果显示7例（87．5％）阳性。认为丙肝病毒（HCV）感染后，病毒血症的长期存在和肝内HCV的活跃复制，是导致任性丙型肝炎持续肝功能异常的主要原因。利用RT／PCR技术检测HCV-KNA，对慢性丙型肝炎患者病情及传染性的估计，指导临床治疗、预后判断等方面比抗一HCV检测更具意义。丙型肝炎病毒（HCV）在我国感染率较高，引起丙型肝炎（HC）后易慢性化．近年来随着HCV克隆成功，相继建立了一些HCV＄染标志的检测方法。资料表明［'J，目前…     

荧光定量聚合酶链反应检测HCV-RNA

丙型肝炎病毒 (HCV)是引起输血后肝炎的主要致病因子 ,在血中含量极微 ,免疫学标志仅有抗 HCV一项 ,而且抗 HCV出现较晚或不出现 ,所以单凭血清学诊断是不够的。为此 ,采用荧光定量聚合酶链反应 (FQ PCR)检测血清中HCV RNA ,是确诊HCV感染的有效方法之一 ,可为制订治疗方案及疗效观察提供确切依据。1　材料与方法1 1　材料1.1.1　标本 :88份血清标本来源于哈尔滨医科大学第一临床医学院临床确诊的丙型肝炎患者。1.1.2　试剂 :①丙型肝炎 (HCV)核酸扩增 (PCR)荧光检测试剂盒 ,包括 :引物序列、荧光探针序列、RNA提取液、逆转录…     

慢性丙型肝炎患者采用α2b干素治疗前后PBMC内HCV—RNA的变化

目的：探讨α2b干素对慢性丙型肝炎（丙肝）患者的治疗效果。方法：采用国产α2b干素（300MU／d）治疗，3个月为一疗程，共2个疗程，并设常规治疗组（VitC、门冬氨酸）为对照。于疗程结束后分别检测患者PBMC内HCV－RNA和血清内CV-RNA、抗－HCV。结果：α2b干素治疗组2个疗程后慢性丙肝患者PBMC、血清内HCV－RNA和抗－HCV转阴率分别为42．31％、57．69％、65．38％，常规治疗组慢性丙肝患者PBMC、血清内HCV－RNA和抗－HCV转阴率分别为13．64％、22．73％、27．27％，两组差异均有显著性（P＜0．05－P＜0．01）。结论：α2b干素对血清及PBMC内HCV－RNA具有肯定的治疗作用，其疗效优于常规治疗组，但对PBMC内HCV－RNA的疗效似有比抗血清内HCV－RNA和抗－HCV疗效弱的趋势。     

武威地区慢性丙型肝炎患者基因型分型与抗病毒治疗疗效分析

目的:了解武威地区丙型肝炎基因型与干扰素抗病毒治疗关系。方法:63例慢性丙型肝炎(CHC)患者,HCV-RNA采用荧光定量RT-PCR试剂盒,并对血清标本PCR扩增基因片段,测定核苷酸序列进行基因分型。采用IFN-α2b联合利巴韦林抗病毒治疗,疗程48周。全自动生化分析仪检测血清ALT。结果:63例患者基因型分型如下:HCV1b型36例,占57%;HCV2a型18例,占28%;HCV1b/2a混合型6例,占10%;HCV2b型3例,占5%。干扰素治疗中HCV1b型的SVR、RVR、EVR、ETVR的应答率分别是44.4%、55.6%、66.7%、61.1%,非HCV1b型的SVR、RVR、EVR、ETVR的应答率分别是74.1%、81.5%、92.6%、88.9%,两者分别进行χ2检验,有显著性差异(P<0.05)。结论:武威地区HCV基因型主要为1b型,其次为2a型,同时存在1b/2a混合型和2b型,干扰素对非1b型感染的疗效优于1b型,HCV基因分型有预测干扰素疗效的意义。     

丙型肝炎干扰素治疗前后外周血单个核细胞中HCV RNA检测研究

丙肝病毒(HCV)是引起非甲非乙型肝炎常见的病原体,HCV感染的病原学诊断,检测血清中特异性抗体采用ELISA或RIB-A和用PCR法检测血清中HCV RNA已有大量报道,但是应用非同位素原位杂交技术检测患者外周血单个核细胞中HCV RNA报告甚少.本文采用地高辛标记的HCV531bp正链和负链(中间复制体),RNA探针,应用原位杂交的方法检测20例慢性丙肝患者用干扰素治疗前和治疗以后的外周血单个核细胞中HCV RNA.旨在探讨干扰素对丙型肝炎的疗效以及丙肝病毒复制情况,现报告如下.     

聚合酶链反应检测血清及肝脏中丙型肝炎病毒核糖核酸的研究

本文报道了简便快速检测血清及肝脏中丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA)的聚合酶链反应(PCR)方法。检测单浆献血员61例,其中抗-HCV阳性30例,检出血清HCV RNA阳性者17例;抗-HCV阴性31例,检出血清HCV RNA阳性者9例。检测6例血清HCV RNA阴性、抗-HCV阳性丙型肝炎患者的肝穿标本,发现4例HCV RNA阳性。说明本文所建立的PCR方法是诊断HCV感染的特异性强、敏感度高的一种新方法。检测肝组织内的HCV RNA可提高HCV RNA的检出率。本文还对标本的处理及如何避免假阳性等问题进行了讨论。     

丙型肝炎病毒RNA与血清标志物的关系

目的 :探讨血清HCVRNA含量与丙氨酸氨基转氨酶 (ALT)、HCV抗体的关系。方法 :采用荧光定量 聚合酶链反应 (FQ PCR)检测 75例HCV抗体复检阳性无偿献血者、9例丙型肝炎患者的HCVRNA含量 ,并与HCV抗体、ALT的检测结果比较。结果 :75例献血者中 ,HCV抗体 (+ )、ALT(-)组HCVRNA阳性率高于HCV抗体 (+ )、ALT(-)组。在 9例丙型肝炎患者中 ,ALT与HCVRNA含量呈正相关 ,且相关性显著 (r =0 72 ,P <0 0 5 )。结论 :在HCV感染的人群中 ,ALT的高低可间接反应HCV在体内的状态 ,这对安全输血和诊断有重要意义     

国产荧光定量PCR与COBAS Amplicor检测HBV DNA的结果比较

目的比较国产实时荧光定量PCR（FQ PCR）试剂与罗氏COBAS Amplicor方法检测乙型肝炎病毒（HBV）DNA的结果。方法据COBAS Amplicor 的FQ PCR试剂（A）的检测结果,抽取151份慢性乙型肝炎（慢乙肝）血清标本,采用两种国产实时FQ PCR试剂B、C对血清标本进行HBV DNA平行检测,以分析国产试剂的敏感度、特异度及与试剂A的相关性。结果试剂A、B、C测得的HBV DNA结果分别为（5.87±1.64）、（5.11±1.34）、（4.93±1.35）log10?copies/mL,试剂B、C与试剂A的相关系数分别为0.947、0.937。3种试剂检测结果总体差异有统计学意义（P＜0.05）,试剂B、C与试剂A检测结果相比差异有统计学意义（P＜0.05）。低HBV载量标本,试剂B、C与试剂A相关性较低。以试剂A为准,总体灵敏度、特异度分别为试剂B 90.4％、56.3%,试剂C 77.0%、100%。结论试剂B、C与试剂A在检测HBV DNA方面有较好一致性,但在低HBV载量时可靠性较低。试剂B灵敏度高,试剂C特异度高。     

献血者血清抗-HCV阳性与ALT活性的关系

目的 分析献血者血清抗-HCV抗体及丙型肝炎病毒核酸（HCVRNA）含量与ALT的关系。方法 采用ELISA法检测抗-HCV抗体。阳性标本用荧光PCR试剂盒测定HCVRNA，分析ALT活性与HCVRNA水平的关系。结果 83份抗-HCV抗体阳性标本经PCR检测后有37份标本含HCVRNA，HCVRNA拷贝量与ALT活性呈正相关，且标本的HCVRNA含量越多，ALT活性也越高（P〈0．01）。结论 献血者中筛查ALT并结合PCR技术，能减少HCV经血传播的危险。     

丙型肝炎患者血清IL-6和IL-12水平变化及临床意义

目的 探讨丙型肝炎患者血清白细胞介素-6（IL-6）和白细胞介素-12（IL-12）水平分别与丙型肝炎病毒核糖核酸（HCVRNA）含量和谷丙转氨酶（ALT）水平的相关性及其临床意义。方法应用荧光定量逆转录聚合酶链反应（FQ-RT-PCR）测定100例丙型肝炎患者血清中HCV RNA含量，再采用酶联免疫吸附法（ELISA）和酶法分别检测患者血清IL-6、IL-12和ALT水平，并与100例健康者比较。结果丙型肝炎患者血清IL-6、IL-12水平显著高于健康对照组（P〈0．01），且与血清ALT水平呈明显正相关。免疫治疗完全应答组血清IL-6、IL-12水平与其HCVRNA含量呈正相关，而与免疫治疗无应答组IL-6和IL-12水平差异有极显著性（P〈0．01）。结论检测丙型肝炎患者血清IL-6和IL-12水平可反应机体的免疫功能状态及肝功能的损害程度，对预测患者的预后有一定的作用。     

TT病毒对干扰素的敏感性及其临床意义分析

目的 :探讨各种肝病 TTV- DNA阳性的临床意义 ,并对丙型慢性肝炎的干扰素疗效及 TT病毒对干扰素敏感性进行研究。方法 :利用半套式 PCR方法检测 TTV- DNA。结果 :TTV- DNA阳性者非甲～丙型急性肝病 4 0 .9%、乙型急性肝病 30 %、非甲～丙型慢性肝病 2 5 %、乙型慢性肝病 37.5 %、丙型慢性肝病 39.6 %。对丙型慢性肝炎进行干扰素治疗的 TTV- DNA阳性 10 1例病例和阴性 15 4例间的年龄、性别、AL T、肝组织学及 HCV- RNA量差异无显著性 ,干扰素治疗后的 AL T变化和 HCV- RNA的消长是一致的 ,和 TT病毒无关。结论 :TT病毒和丙型肝炎病毒重复感染的慢性肝炎患者 ,肝损伤的主要原因是丙型肝炎病毒 ,与 TT病毒关系不大     

趋化因子CXC家族基因多态性与丙型肝炎抗病毒治疗效果的相关性分析

目的: 探索趋化因子CXC家族基因多态性与慢性丙型肝炎治疗效果的关系,以便在治疗过程及时干预和提高疗效。方法: 对确诊的282例慢性丙型肝炎患者采用聚乙二醇干扰素α联合利巴韦林抗病毒治疗48周并随访24周,观察持续病毒学应答（sustained virological response,SVR）结果,运用TaqMan MGB荧光探针PCR法对所有患者进行基因分型,采用Logistic回归分析SVR的影响因素。结果： 治疗48周后,180例 (63.83%)患者达到SVR。多因素Logistic回归分析结果表明,促甲状腺激素水平高（OR=1.22,95% CI=1.04～1.42）和空腹血糖浓度低（OR=0.85,95% CI=0.72～0.99）有利于提高SVR率;而基线HCV RNA高（OR=0.72, 95%,CI=0.56～0.99）不利于提高SVR率。但并未发现趋化因子CXCL9 rs10336（相加模型: OR=0.97,95% CI=0.40～2.33）、rs3733236（相加模型: OR=0.89, 95% CI = 0.43～1.87）和CXCL12 rs1801157（相加模型: OR=1.31, 95% CI=0.80～1.86）与SVR存在显著关联。 结论： 未发现丙肝患者抗病毒治疗效果与趋化因子CXC家族基因多态性存在显著相关,但基线HCV RNA、血清促甲状腺激素和空腹血糖是影响慢性丙肝患者SVR的独立影响因素。     

武汉地区不同人群血清HCV感染状况研究

采用Ortho抗HCV ELISA C100-3试剂对武汉地区不同人群进行了抗HCV筛选。部分阳性标本作了RIBA证实实验及HCV RNA分析。并分析了5例HCV或HBV/HCV感染者的HCV基因型。结果表明:①在献血人群中,经RIBA证实抗HCV检出率为1.20％,HCV病毒血症者为0.80％;②多次受血治疗组抗HCV检出率为13.64％;③肝病组,重症肝炎为32.00％,HCC为22.86％,CPH和轻型CAH为4.05％,婴儿肝炎综合征中为5.00％;④亚基因探针杂交结果显示:武汉地区肝病患者感染的HCV主要为HCV-K2型(60.00％)。表明:经HBsAg和ALT筛选的合格献血员血清中HCV感染率仍较高,除接受血治疗外,重症肝炎和HCC患者对HCV易感性也较高,在婴儿肝炎综合征中约5％为HCV感染引起;初步结果提示武汉地区HCV的基因型主要为HCV-K2型。     

丙型肝炎病毒核心抗原检测在临床诊断HCV感染的价值

目的:评估丙型肝炎病毒核心抗原(HCVcAg)诊断试剂在临床运用对HCV感染的诊断价值?方法:对临床214例确认HCV感染者?60例健康体检者?40例非HCV感染的其他肝炎患者同时检测HCVcAg?抗HCV和HCV RNA,并对78例HIV感染者进行HCV感染筛查,分析 HCVcAg试剂的敏感性?特异性?结果:214 例确认丙肝患者HCVcAg检测162例(75.7%)阳性,且HCV RNA水平越高,HCVcAg检出率也越高?当HCV RNA载量>106/ml时,HCVcAg与HCV RNA检测的符合率达98.7%;60例健康对照和40例非HCV感染的各种肝炎HCVcAg检测均为阴性,显示了HCVcAg对诊断HCV感染得高度特异性?对78份HIV感染者样本进行HCV RNA测定,有16例阳性,以HCVcAg法测定有15例阳性,以抗HCV法测定仅有9例阳性?结论:HCVcAg可作为HCV感染诊断的血清病毒标志物,也可用于使用免疫抑制剂,抗HCV产生受到抑制的患者,以及在一些不具备开展PCR的医院实验室作为HCV RNA检测的替代试验?