PM2.5对HTR8-SVneo细胞的毒性作用

目的：探讨大气中的PM2.5对HTR8-SVneo细胞的毒性作用。方法：采用0,30,60,120和200 μg/mL 5个浓度的PM2.5对HTR8-SVneo细胞染毒24 h,以0 μg/mL浓度为对照组,其余浓度为不同剂量PM2.5染毒组,通过CCK-8细胞增殖毒性检测试剂盒测定细胞存活率;激光全息细胞分析及成像系统观察细胞3D形态及动态监测24 h内各组细胞数量变化;流式细胞仪检测细胞生长周期;彗星试验检测细胞DNA损伤水平;活性氧簇（ROS）检测试剂盒测定细胞内ROS水平。结果：60,120和200 μg/mL浓度组细胞存活率及增殖能力低于对照组（P＜0.05或P＜0.01）;PM2.5可使HTR8-SVneo细胞的生长周期阻滞在G2/M期（P＜0.05或P＜0.01）;不同浓度PM2.5染毒组彗尾DNA百分比均高于对照组（P＜0.01）,且呈剂量依赖性。各浓度染毒组细胞中ROS的产生均高于对照组（P＜0.05或P＜0.01）。结论：PM2.5对 HTR8-SVneo细胞有一定毒性作用,造成DNA的损伤,阻碍细胞生长周期,这种毒性作用可能与氧自由基的产生增多有关。     

H19对滋养细胞中基质金属蛋白酶家族成员表达谱的影响

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)H19对滋养细胞中基质金属蛋白酶(MMPs)和金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)表达谱的影响。方法:在人早孕期绒毛外滋养细胞系HTR-8中过表达H19或干扰H19的表达,采用PCR及qPCR检测MMP和TIMP家族成员的mRNA表达水平。采用Western blot和明胶酶谱...     

人巨细胞病毒活动性感染对早孕绒毛细胞MMP9和TIMP1蛋白活性的影响

目的探究人巨细胞病毒活动性感染对早孕绒毛细胞基质金属蛋白酶9(MMP9)和组织型基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP1)活性的影响。方法收集2016年10月-2018年10月在湘潭市妇幼保健院和衡阳市第一人民医院自愿接受流产的健康孕妇的绒毛,人巨细胞病毒感染后,免疫组化检测细胞角蛋白7(CK7)、人波形蛋白(Vim)、HER-2基因(c-erbB-2)的表达以观察绒毛细胞纯度。免疫组化检测pp65抗原用于观察人巨细胞病毒(HCMV)的感染情况。Western Blot、荧光定量PCR(RT PCR)和酶联免疫吸附测定(ELISA)用于检测HCMV感染后早孕绒毛细胞中MMP9和TIMP1的表达水平。结果免疫组化染色显示,分离的原代细胞为高纯度绒毛细胞且HCMV可感染原代早孕绒毛细胞。PCR结果显示,HCMV组MMP9基因表达水平为0.23±0.08,低于对照组(P<0.05),TIMP1基因表达水平为5.49±1.76,高于对照组(P<0.05)。HCMV感染后第4天,HCMV组早孕绒毛细胞胞质中MMP9蛋白表达水平为0.18±0.08,低于对照组(P<0.05),TIMP1蛋白表达水平为0.97±0.16,高于对照组(P<0.05)。此外,与模拟感染细胞相比,感染HCMV的巨噬细胞中MMP-9活性持续降低。感染后第7天HCMV组上清液中MMP9蛋白水平低于对照组(P<0.05);感染后第4天和第7天HCMV组上清液中TIMP1蛋白水平高于对照组(P<0.05)。结论 HCMV感染可显著下调原代早孕绒毛细胞MMP9的基因和蛋白表达,上调TIMP1的基因和蛋白表达。     

煤工尘肺患者血清MMP9与TIMP1的表达

[目的]了解基质金属蛋白酶9（MMP9）及其组织抑制因子1（TIMP1）与煤工尘肺发生的关系。[方法]用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测对照组、接尘组及病例组血清中MMP9、TIMP1的含量，计算相应的MMP9/TIMP1值。采用多因素回归对年龄和接尘工龄校正后进行分析。[结果]与对照组比较，接尘组血清中MMP9、TIMP1均有增加，尤其是MMP9增加较为明显（P〈0．05），而TIMP1的差异没有统计学意义（P〉0．05），各期煤工尘肺患者的MMP9、TIMP1浓度呈增加趋势，而MMP9/TIMP1值呈下降趋势，且与对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．05）；经接尘工龄校正，与接尘组比较，Ⅰ期煤工尘肺的TIMP1升高（Х^2=8．80）以及Ⅲ期的MMP9、TIMP1升高（Х^2=12．18，8．20）。MMP9／TIMP1随煤工尘肺患者的晋期增加呈下降趋势（Х^2=13．42），差异均有统计学意义（P〈0．05）。[结论]MMP9和TIMP1的平衡可能与煤工尘肺的发生与发展有关。     

解脲支原体感染患者早孕绒毛MMP_9和TIMP_1蛋白的原位杂交检测

目的:探讨解脲支原体感染对早孕绒毛表达MMP9和TIMP1蛋白的影响。方法:收集生殖道解脲支原体感染女性患者的早孕绒毛组织采用原位杂交法从RNA水平检测其MMP9和TIMP1的表达。结果:正常妊娠时MMP9和TIMP1蛋白在早孕绒毛中呈强阳性表达,而胚胎绒毛组织解脲支原体感染者其早孕绒毛中MMP9和TIMP1蛋白表达减弱,差异有显著性(P<0.05),其MMP9/TIMP1比值显著小于正常妊娠时的比值,两者比较差异有显著性(P<0.05)。结论:解脲支原体感染状态下能对早孕绒毛中MMP9和TIMP1蛋白表达造成影响,使其MMP9/TIMP1比值显著降低,从而对早孕绒毛滋养细胞侵蚀力造成影响。     

基质金属蛋白酶及其抑制物与子宫内膜异位症

基质金属蛋白酶（MMP）家族是细胞外基质降解过程中的重要酶类，组织金属蛋白酶抑制物（TIMP）是MMP的天然抑制物。研究证实：细胞外基质中MMP和TMP的失衡与多种病理状态有关，尤其与肿瘤的侵袭和转移密切相关。近年来研究表明MMP、TIMP与子宫内膜异位症的发病也密切相关。故抑制MMP活性是子宫内膜异位症治疗的又一新靶点。     

MMP2、MMP9、TIMP1、TIMP2在非小细胞肺癌中的表达及临床病理学意义

目的探讨基质金属蛋白酶MMP2、MMP9及其抑制剂TIMP1、TIMP2在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及临床病理学意义。方法采用免疫组织化学S-P法,分别检测43例NSCLC组织、15例正常支气管粘膜上皮组织中MMP2、MMP9、TIMP1及TIMP2的蛋白表达。结果MMP2、MMP9、TIMP1及TIMP2在43例NSCLC中的阳性表达率(分别为79.1%、74.4%、55.8%及60.5%)明显高于正常支气管粘膜上皮组织(分别为26.7%、26.7%、20.0%及26.7%)(P<0.01或P<0.05);MMP2、MMP9的表达随着病理分级和临床分期增加而有增高趋势;而TIMP1、TIMP2的阳性表达则呈下降趋势。MMP2、MMP9、TIMP1及TIMP2的阳性表达率与患者淋巴结转移和3年生存期密切相关(P<0.05),但与患者的临床参数均无明显关系(P>0.05)。结论MMP2、MMP9、TIMP1及TIMP2的过度表达与NSCLC的发展、淋巴结转移及预后有密切关系,可作为临床评估NSCLC的进展及预测其转移潜能和预后的重要指标之一。     

基质金属蛋白酶-9与脑缺血研究进展

基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMPs）是一组Zn^2＋依赖性篮白酶，现已发现20多种，根据蛋白质结构可分为五大类，即基质溶解酶、胶原酶、明胶酶、膜型酶和其他不能分类的基质酶，其主要功能是降解和重塑细胞外基质（extracellular matrix，ECM），在正常的胚胎发育和组织重塑等生理过程以及一些疾病的病理生理中起重要作用。MMPs家族还参与神经系统疾病如多发性硬化、脑外伤、脊髓损伤、脑炎、脑膜炎、脑血管病变等的病理发生。组织型基质金属蛋白酶抑制剂（tissue inhibilor of metalloproteinases，TIMPs）为特异性的抑制因子，在一些生理和病理过程中，细胞分泌MMPs同时也分泌TIMPs，在体内与MMPs同步表达，二者以1：1的形式构成复合体。     

基质金属蛋白酶-9及其组织抑制物-1在胎儿生长受限患者胎盘绒毛的表达及其意义

目的:探讨胎儿生长受限患者胎盘绒毛基质金属蛋白酶-9(MMP9)及其组织抑制物-1(TIMP1) mRNA的表达和意义。方法:收集21例胎儿生长受限患者胎盘组织,采用原位杂交法从RNA水平检测其MMP9和TIMP1的表达,同时收集20例正常足月妊娠的胎盘组织进行对照。结果:正常妊娠时MMP9和TIMP1 mRNA在胎盘绒毛中呈强阳性表达,而胎儿生长受限的患者其胎盘绒毛中MMP9和TIMP1 mRNA表达减弱,差异有显著性(P<0.05),MMP9/TIMP1比值显著小于正常妊娠时的比值,两者比较差异有显著性(P<0.05)。结论:胎儿生长受限的患者,尤其是重度子痫前期所致胎儿生长受限的患者,胎盘绒毛中MMP9和TIMP1 mRNA表达均减少,提示与胎儿生长受限的发生关系密切。     

2型糖尿病大鼠心脏MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的变化与糖尿病心肌病变关系

目的 探讨2型糖尿病（T2DM）大鼠心脏基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制物1（TIMP-1）、基质金属蛋白酶组织抑制物2（TIMP-2）的变化及其在糖尿病心肌病变（Diabetic Cardiomyopathy,DC）发病中的意义.方法 高脂食物喂养、小剂量链脲菌素诱导2型糖尿病大鼠模型.正糖高胰岛素嵌铗技术（EICT）检测两组大鼠胰岛素抵抗情况,葡萄糖输注速率（GIR）表示胰岛素抵抗;测定大鼠体重（BW）、心脏重量（HW）和计算HW /BW;RT-PCR测定两组大鼠MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的mRNA水平,免疫组化法检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2和Ⅰ、Ⅲ胶原蛋白水平.结果 糖尿病大鼠GIR明显低于正常对照组（P〈0.01） .糖尿病大鼠心脏：HW和HW /BW明显高于正常对照组（P〈0.05）,Ⅰ、Ⅲ型胶原明显增多（P〈0.01）,MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的mRNA表达增加（P〈0.01）, MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的蛋白含量增加（MMP-2、TIMP-1：P 〈0.05;TIMP-2：P〈0.01）;MMP-2、MMP-9与TIMP-1蛋白水平比值及MMP-2与TIMP-2蛋白水平比值均显著降低.结论 T2DM大鼠心脏MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2增加,MMPs/TIMPs比值降低,心脏Ⅰ、Ⅲ型胶原明显增多;心脏MMPs/TIMPs表达改变与心脏间质纤维化有关.     

正常妊娠不同孕期胎盘组织中基质金属蛋白酶-9及其组织抑制物-1的表达

目的 :探讨基质金属蛋白酶 (MMP) - 9及其组织蛋白酶抑制物 (TL MP) - 1在正常妊娠不同孕期胎盘组织中的表达情况及其在滋养层细胞侵蚀及孕卵着床等正常妊娠过程中的作用。方法 :采用免疫组织化学 SP法检测 4 5例正常孕妇 (早孕 10例、中孕 15例、晚孕 2 0例 )胎盘组织中 MMP- 9/ TIMP- 1表达程度。结果 :MMP- 9在早、中孕组的滋养细胞、基质细胞、蜕膜组织中呈强阳性表达 ,晚孕组呈阳性表达 ,与早、中孕期组相比表达明显减弱 ,有极显著性差异 (P<0 .0 1) ;TIMP- 1在早、中孕组呈阳性表达 ,晚孕组呈强阳性表达 ,与早、中孕组相比表达明显增强 ,有极显著性差异 (P<0 .0 1)。结论 :MMP-9/ TIMP- 1可能在胎盘的形成、子宫 -胎儿血管系统的建立等过程中发挥重要作用。     

染料木黄酮对大鼠异位子宫内膜组织中MMP-9、TIMP-1表达的影响

目的:探讨染料木黄酮(GEN)对患子宫内膜异位症(EMs)大鼠的基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达水平的影响。方法:将68只Wistar大鼠分为正常组(A组,n=8)和EMs组(n=60),EMs组通过手术方法建立大鼠EMs模型,3周后测量移植物体积。EMs组大鼠随机分为4亚组:模型组(B组)和GEN低剂量组(C组,0.5mg/kg)、GEN中剂量组(D组,5mg/kg)、GEN高剂量组(E组,50mg/kg),连续皮下注射药物84d后处死大鼠,测量移植物体积、观察其组织学结构,并采用免疫组化法观察异位内膜组织中MMP-9、TIMP-1的表达。结果:与治疗前比较,E组移植物体积明显缩小(P<0.01),而C组和D组无差异;与A组比较,B组MMP-9表达率明显升高(P<0.05),TIMP-1表达率明显降低(P<0.01);与B组比较,E组MMP-9表达率明显降低,TIMP-1表达率明显升高(P<0.05),C组和D组无差异。结论:GEN可抑制大鼠EMs模型中异位内膜的生长,其抑制作用可能与MMP-9表达下降和TIMP-1表达升高,平衡MMP-9和TIMP-1的表达比例有关。     

基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶2组织抑制剂基因多态性与胃癌遗传易感相关性

目的 探讨中国福建地区汉族人群基质金属蛋白酶2(MMP2)-1306C/T、基质金属蛋白酶2组织抑制剂(TIMP2) 2379C/T、TIMP2 303G/A单核苷酸多态性(SNP)与胃癌遗传易感性的关系.方法 本研究为病例-对照研究.选取福建地区组织学确诊的胃癌患者479例及年龄和性别等频数匹配的对照健康体检人群469名,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法进行MMP2-1306C/T、TIMP2 2379C/T、TIMP2 303G/A多态性检测,应用非条件logistic回归进行分析以评估不同基因型与胃癌发病风险及病理特征的关系.采用似然比检验分析MMP2和TIMP2基因之间的交互作用.结果 TIMP2 303G/A在病例组中GG、AG、AA分布的频率分别为55.9%(267/478)、38.7%(185/478)、5.4%(26/478),对照组中分别为53.1%(243/458)、36.9%(169/458)、10.0%(46/458),两者差异有统计学意义(χ2=7.0,P=0.03).携带G等位基因(GG+GA)的患者发生胃癌的风险是携带AA基因型的1.94倍(OR=1.9,95%CI:1.2～3.2).TIMP2 303A/G在肌层组中GG+AG、AA基因型分布频率分别为87.5%(70/80)、12.5%(10/80),而其在浆膜及浆膜外层组中分别为96.0%(382/398)、4.0%(16/398),两者差异有统计学意义(χ2=9.31,P=0.002);携带G等位基因(GG+AG)的患者发生肿瘤浸润的风险是携带AA基因型者的3.4倍(OR=3.4,95%CI:1.5～7.8).TIMP2 2379C/T在淋巴结无转移组中CC+CT、TT基因型分布频率分别为93.4%(113/121)、6.6%(8/121),而其在淋巴结转移组中分别为98.6%(349/354)、1.4%(5/354),两者差异有统计学意义(χ2=9.16,P=0.002);携带C等位基因(CC+CT)的患者发生淋巴结转移的风险是携带TT基因型者的4.9倍(OR=4.9,95%CI:1.6～15.3).MMP2-1306C/T的基因型分布与肿物大小、组织分化、组织浸润及淋巴结转移均未见相关性(χ2肿物大小=0.05,P=0.98;χ2浸润深度=1.87,P=0.39;χ2组织分型=0.55,P=0.76;χ2淋巴结转移=0.44,P=0.80;χ2TNM=2.6,P=0.28).MMP2-1306C/T的SNP与TIMP2 303A/G、TIMP2 2379C/T间无明显的交互作用(χ2值分别为0.98、0.80,P值分别为0.81、0.85).结论 TIMP2基因多态性与胃癌的发生及侵袭转移密切相关,有可能成为胃癌预后的新分子指标.     

基质金属蛋白酶及其抑制剂与子宫内膜癌

基质金属蛋白酶是迄今发现最重要的一种降解细胞外基质的蛋白水解酶,其含量变化与肿瘤侵袭转移关系最为密切。基质金属蛋白酶及其组织抑制剂共同参与细胞外基质的合成与降解,两者之间比例失衡将导致肿瘤的侵袭和转移。子宫内膜癌是女性常见的恶性肿瘤之一,研究基质金属蛋白酶及其抑制剂与子宫内膜癌的关系,对于子宫内膜癌早期诊治、预后评估及其预防均具有重要意义。     

五味子乙素对苯并芘致HTR8-SVneo细胞氧化损伤的保护作用

目的：研究环境污染物苯并芘（BaP）致人绒毛膜滋养层细胞HTR8-SVneo氧化损伤的作用机制,探讨五味子乙素（Sch B）的可能保护作用。方法：本实验分为空白组、BaP组、Sch B不同浓度组（0.1,0.5,2.0 μmol/L）,以HTR8-SVneo 细胞为载体,构建BaP氧化应激损伤模型,测定氧化和抗氧化指标。结果：与空白组比较,BaP组超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的浓度显著降低,而乳酸脱氢酶（LDH）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的浓度明显增加（P＜0.05）。不同剂量Sch B组SOD、GSH-Px的浓度明显提高,LDH、MDA、NO、iNOS的浓度减少,与BaP组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：Sch B能调节BaP所致的HTR8-SVneo细胞氧化系统和抗氧化系统的失衡,从而预防BaP致HTR8-SV neo细胞的氧化损伤。     

基质金属蛋白酶-9及组织基质金属蛋白酶抑制剂-1在肝细胞癌中的表达及意义

目的：探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及组织基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）在肝细胞癌（HCC）中表达的意义。方法：收集HCC手术切除标本42例，采用免疫组化法检测MMP-9及TIMP-1的表达。结果：正常对照组中MMP-9、TIMP-1的表达均为阴性。MMP-9及TIMP-1在HCC中表达的阳性率分别为73．8％和69．0％，两者的阳性表达与患者年龄、性别、AFP是否阳性、HbsAg是否阳性、肿瘤大小、病理分级无关（P〉0．05）。有癌栓组MMP-9阳性率为100％，无癌栓组阳性率为63．3％，组间差异有统计学意义（P〈0．05）。包膜完整组MMP-9阳性率为33．3％，包膜不完整组阳性率为84．8％，组间差异有统计学意义（P〈0．01）。TIMP-1在以上2组间差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论：MMP-9和TIMP-1的表达与HCC关系密切，检测HCC中两者的表达，可作为判断HCC侵润转移的指标。     

子宫内膜癌组织中基质金属蛋白酶-2及其组织抑制因子-2的表达和意义

目的:探讨子宫内膜癌(EC)组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其组织抑制因子-2(TIMP-2)的表达,分析其与子宫内膜癌发生发展、侵袭、转移的关系。方法:选取EC患者癌组织标本64例为EC组,选取同期子宫内膜轻、中度不典型增生20例为增生症组及内膜正常组20例作为对照。用免疫组化法检测MMP-2、TIMP-2在3组中的表达。结果:MMP-2、TIMP-2在EC组阳性表达高于正常组(P<0.05)和增生症组(P<0.05),而增生症组与正常组比较阳性表达无统计学差异(P>0.05);MMP-2表达与手术-病理分期、肌层浸润深度、组织学分级及淋巴结的转移相关(P<0.05);TIMP-2表达仅与淋巴结有无转移有关(P<0.05);EC组MMP-2表达高于TIMP-2(P<0.05),且两者表达具有一致性(P<0.05)。结论:子宫内膜癌组织中MMP-2和TIMP-2均高表达;但TIMP-2的表达却不足以抑制MMP-2高表达的活性,可能与子宫内膜癌的发生发展、浸润和转移有关。