氨基酸神经递质受体／氯离子通道与精子顶体反应

哺乳动物精子存在着两类不同的氨基酸神经递质受体／通道，即ＧＡＢＡＡ样受体／氯离子（Ｃｌ＾－）通道和甘氨酸受体／Ｃｌ＾－通道。它们参与精子顶体反应（ＡＲ），前者参与孕酮（Ｐ４）激发的ＡＲ，后者则参与卵透明带（ＺＰ）激发的精子ＡＲ。     

氨基酸神经递质受体/氯离子通道与精子顶体反应

哺乳动物精子存在着两类不同的氨基酸神经递质受体/通道,即GABA_A样受体/氯离子(Cl~-)通道和甘氨酸受体/Cl~-通道。它们参与精子顶体反应(AR)。前者参与孕酮(P_4)激发的AR,后者则参与卵透明带(ZP)激发的精子AR。在精卵相互作用过程中,上述两类受体的激活导致钙离子(Ca~(2+))内流,从而触发精子AR。阐明神经递质受体/Cl~-通道在AR中所起的关键作用,可能提供了一条新的男性抗生育途径。     

复发性流产相关精子因素的研究进展

复发性流产（recurrent spontaneous abortion，RSA）的病因主要包括遗传、解剖、内分泌因素、感染、免疫功能异常、血栓前状态、孕妇的全身性疾病以及环境因素等。临床研究显示，精子质量与胚胎发育潜能相关。从传统精液参数、精子功能参数、精子DNA/染色质完整性三个方面综述男性精子因素与RSA之间的关系，希望为RSA的临床诊治提供一定的借鉴意义。     

精子代谢与男性不育的相关性研究进展

精子发生和成熟中涉及到多种与代谢相关的过程,任何一种代谢异常都可引起精子活动力、受精能力等受损,最终导致男性不育的发生,如精子中活性氧簇过度产生引起的氧化应激反应,损害了精子的运动和获能;在临床上,男性不育症患者的精浆与正常男性相比,其代谢物成分表现出明显的变化,也可反映精子发育和成熟过程的异常,并间接表明这可能与男性不育相关。本文从精子代谢的相关途径、精子代谢组学检测与精子活动力及临床男性不育症的相关性等方面进行综述。     

镉对人胚肾细胞中经典瞬时受体电位通道mRNA表达影响

目的观察不同质量浓度的氯化镉(CdCl2)染毒后人胚肾细胞(HEK 293T细胞)经典瞬时受体电位通道(TRPC)6个亚型mRNA表达水平的改变,在mRNA水平上探讨镉对肾细胞钙通道的影响。方法 HEK 293T细胞分别暴露于7.5、15.0、30.0、45.0和60.0μmol/L的CdCl28 h后,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖活力;实时荧光定量聚合酶链反应法检测0、15.0和30.0μmol/L CdCl2作用8 h和30.0μmol/L CdCl2染毒4 h后TRPC 6个亚型mRNA表达水平。结果以对照组(CdCl20μmol/L)HEK 293T细胞存活率为100%,各不同质量浓度的染毒组细胞存活率分别为79.40%、77.29%、72.26%、70.25%、60.80%,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。经CdCl2染毒后,各染毒组HEK 293T细胞的TRPC 6个亚型mRNA相对表达量均低于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论 CdCl2可能引起HEK 293T细胞的TRPC基因mRNA的表达水平发生改变。     

精子尾部离子通道KSper和CatSper的结构与功能

钾离子通道KSper和钙离子通道CatSper是精子尾部的两种离子通道,对精子运动、精子超激活和受精功能起着重要作用,受到pH值、膜电位、环腺苷酸类似物等生理刺激物的调控。KSper由主亚基Slo3和辅助亚基LRRC52、KCNMB组成,介导成熟精子所产生的p H值依赖性钾电流(IKSper),调控与细胞膜电位有关的信号通路,从而影响雄性生育功能。CatSper蛋白只表达于精子尾部主段,由4个α亚基(CatSper1~4)和5个辅助亚基β、γ、δ、ε和ζ构成。CatSper蛋白通过调控精子尾部蛋白酪氨酸磷酸化,维持精子的超激活运动。本文综述精子尾部KSper和CatSper这两种离子通道的分子结构、特异性的表达模式和生理功能。     

水通道蛋白调节的研究进展

水通道蛋白是特异性跨膜转运水的蛋白家族 ,能显著增加细胞膜水通透性 ,参与水的分泌、吸收及细胞内外水的平衡。迄今为止 ,在哺乳动物细胞膜上已发现 11种水通道蛋白 ,这些水通道蛋白分别介导不同类型细胞膜的跨膜水转运 ,使水代谢的研究进入了一个新的领域。     

附睾特异蛋白与精子功能的研究进展

鉴定精子特异蛋白的目的是阐明其在生殖过程中的作用,将其作为有效调控的靶点.哺乳动物的精子在睾丸的曲细精管内生成后,虽然形态上已成为蝌蚪状,但并不具备运动和识别卵子并使其受精的能力.精子必须经过附睾内的加工才能成熟,即精子的附睾成熟.该过程主要是修饰精子膜表面的蛋白,随着精子在附睾管腔中的运行,某些蛋白被移除或结合其上,...     

精子活动力与线粒体代谢的研究进展

弱精子症或精子无力症是一种由于精子活动力缺陷所引起的男性不育,约占男性不育症的19％,已成为男性不育的主要诱因之一.精子运动所需能量基本来自其线粒体呼吸链的氧化磷酸化,而任何与线粒体代谢相关的因素,如氧化应激、细胞凋亡及Ca2+循环等均可对精子活动力产生影响.综述近年来对精子活动力与其线粒体代谢的相关性及机制研究的进展.     

附睾特异蛋白与精子功能的研究进展

鉴定精子特异蛋白的目的是阐明其在生殖过程中的作用,将其作为有效调控的靶点。哺乳动物的精子在睾丸的曲细精管内生成后,虽然形态上已成为蝌蚪状,但并不具备运动和识别卵子并使其受精的能力。精子必须经过附睾内的加工才能成熟,即精子的附睾成熟。该过程主要是修饰精子膜表面的蛋白,随着精子在附睾管腔中的运行,某些蛋白被移除或结合其上,还有经历糖基化或磷酸化等修饰。因此,对附睾中蛋白的鉴定研究,特别是附睾特异合成的蛋白,始终是揭示精子功能的重要切入点之一。综述近年对附睾特异蛋白参与精子成熟以及保护精子的较系统的研究。     

受精调控机制的研究进展

人类和哺乳动物的受精机制是近年来的研究热点.通过生物化学、转基因和基因敲除等研究得出的受精机制主要分为4个部分：①精子获能;②精子结合至卵子透明带;③精子与透明带结合诱发顶体反应（AR）;④精子与卵子的结合和膜融合.笔者拟就近期研究阐明的精子获能、AR及精、卵融合的新信息、新观点,进行综述如下.     

Quantitative Evaluation of the Human Spermatozoal Motility and Acrosome Reaction in Infertile Ollgozoospermic and Fertile Euspermic Men

Idiopathic oligozoospermia is one of the most important problems in Andrology, but up to now it is poorly understood because the often routine conventional semen parameters, unquestionably are not directly related to the evaluation of the morphological and functional integrity that determines the spermatozoan fertilizing capacity. A non complex strategy was designed to determine the presence of alterations in the functional integrity of the spermatozoa from infertile men with idiopathic oligozoospermia and from euspermic fertile men, by the quantitative analysis of the spermatozoan motility and the acrosome reaction. There was a lower percentage of acrosome reacted spermatozoa within the semen of the infertile men, accompanied with a significant decrease in the motility percentage, sperm velocity and motility index in comparison with semen from fertile men. These data strongly support a possible detrimental structural and functional integrity of the spermatozoa from the oligozoospermic men.     

丙烯酰胺对小鼠精子的毒性作用

目的研究丙烯酰胺(AA)对小鼠精子的毒性作用,为AA生殖毒性研究提供科学依据。方法将25只7～8周龄体重为25～30g的清洁级雄性昆明小鼠随机分为阴性对照组(双蒸水),AA染毒组(染毒剂量分别为20、40、60mg/kg)和阳性对照组(环磷酰胺),每组5只。除阳性对照组采用腹腔注射染毒外,其余各组均采用经口灌胃染毒,1次/d,连续5d,于首次染毒后14d处死小鼠,观察精子数、活动度与精子形态的变化。结果各剂量AA染毒组精子数均显著低于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05);中、高剂量AA染毒组精子活动率显著低于阴性对照组,精子畸形率显著高于阴性对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。AA染毒后精子畸形类型主要表现在头部,且以无钩和无定形为主。结论AA对小鼠精子有毒性作用,且存在明显的剂量-效应关系。     

少弱精症患者精子顶体酶活性分析

目的:研究少弱精症不育男性精子顶体酶活性变化与其生育力的关系。方法:以159例少弱精症和25例正常生育男性为研究对象,应用改良Kennedy法检测精子顶体酶活性,分析不同精子密度、活力、形态与顶体酶活性的关系。结果:正常组的顶体酶活性高于不同精子密度不育各组(>50×106ml、20～50×106ml、<20×106ml)(F=7.504,P<0.001);不同精子密度不育各组之间顶体酶活性比较,>50×106ml组顶体酶活性高于<20×106ml组(P<0.05),其它各亚组两两比较顶体酶活性无统计学差异;少弱精症不育者的精子畸形率与顶体酶活性呈负相关(r=-0.171),a+b级精子活力(r=+0.142)和顶体完整率(r=+0.154)与顶体酶活性呈正相关。结论:顶体酶活性对少弱精症男性生育力评价有重要价值,顶体酶活性可以作为精子形态分析之外重要的预测精子受精能力的指标。     

Effect of Ace-Inhibitors,Calmodulin Antagonists,Acetylcholine Receptor Blocking,and Alpha Receptor Blocking Agents on Motility of Human Sperm

The purpose of this study was to investigate the influence of several pharmacological compounds on the motility and velocity of washed human spermatozoa. Results were evaluated by multiple exposure photography and computer-aided picture analysis. The motility-inhibiting effect of the antifertility drug gossypol was confirmed. Gossypol proved to be a potent inhibitor of the angiotensin converting enzyme (ACE) detectable in high concentrations in seminal plasma. However, human sperm motility was not inhibited during incubation with two other specific ACE-inhibitors (captopril, enalapril). On the contrary, high concentrations of captopril even showed a slight motility-stimulating effect. These results indicate no direct involvement of ACE in the regulation of sperm motility but suggest a direct interaction of gossypol with the plasma membrane of spermatozoa. To clarify whether or not gossypol blocks membranous ion transport, the effect of well-defined ion transport blocking agents on sperm motility was investigated. It was determined that the acetylcholine receptor blocker alpha-bungarotoxin and trifluoperazin, a specific calmodulin antagonist, inhibit sperm motility completely. Since stimulation of sperm motility by captopril may be due to an alpha-mimetic action of this compound, the influence of two alpha receptor blockers (bromocriptine, lisuride) on sperm motility was studied. Although lisuride inhibited sperm motility completely, bromocriptine revealed no influence. A temporary and reversible intervention with membrane transport processes could be a suitable way to regulate human sperm motility and male fertility.     

镉对大鼠精子运动能力影响的体外实验研究

赖皮地精子运动能力的直接作用。方法应用计算机辅助精子分析（ＣＡＳＡ）系统了氯化镉对离体大鼠精子运动能力的影响。利用扩散法收集健康成年雄性ＳＤ大鼠附睾尾精子,用氯化镉进行体外染毒,染毒浓度分别为０．５、２．０、８．０ｍｇ／Ｌ（以镉计）。分别在染毒１ｈ和２ｈ后应用ＣＡＤＡ系统对精子运动速度（运动速度、直线运动速度、平均路径速度、鞭打频率）和运动方式（前向性,直线性等）进行检测。「结果」在染毒１ｈ后染毒     

优选和冻融对精子顶体反应及顶体反应释放的顶体酶活性影响

目的:研究优选和冻融对人精子顶体反应(acrosome reaction,AR)和AR释放的顶体酶活性影响。方法:10例健康生育男子精液,用Percoll密度梯度分离法和上游法优选精子;用3种冷冻保护剂进行冷冻;用孕酮诱导AR;采用FITC-PSA荧光染色法分析AR;采用分光光度比色法测定顶体酶活性。结果:Percoll法和上游法优选后,顶体反应率和AR释放的顶体酶活性均较优选前显著升高(P<0·05),但Percoll法和上游法优选组间比较差异不显著(P>0·05)。精子冻融后甘油组和GYC组顶体反应率和AR释放的顶体酶活性均下降,与冷冻前比较差异均有显著性(P<0·01),GYCG组与冻融前组比较,差异不显著(P>0·05)。结论:优选后顶体反应率及AR释放的顶体酶活性增加,GYCG对精子顶体反应和AR释放的顶体酶活性有保护作用。     

糖原合成酶激酶3在精子成熟、获能和顶体反应中的作用

糖原合成酶激酶3(glycogen synthase kinase-3,GSK-3)是一种广泛表达于各组织细胞的激酶,参与调节多种生物活动。在精子细胞中,其两种亚型(GSK-3α和GSK-3β)均有表达,参与调控精子在附睾中的成熟、女性生殖道中的获能和顶体反应等过程。GSK-3通过磷酸化隔膜蛋白、蛋白磷酸酶1γ2(PP1γ2)等靶蛋白影响精子获能与顶体反应。同时,作为参与了精子细胞中的Wnt信号通路、Toll样受体信号通路以及环磷酸腺苷/蛋白激酶A(c AMP/PKA)介导的蛋白质磷酸化通路等多条通路的激酶,GSK-3的活性也受到严格的控制。因此,研究GSK-3在精子成熟、获能和顶体反应中的作用对进一步阐明精子在附睾和女性生殖道中发生的各种生理过程和男性不育的发生机制具有重要的意义。