人牙齿切片器官培养模型的建立

目的建立人牙齿切片体外器官培养模型。方法收集年轻人健康前磨牙或第三磨牙,用慢速切锯制备2mm厚的牙齿横切片,将切片用含1%琼脂糖的半固体培养基包被后采用Trowel器官培养方法在体外培养2～14天,对培养切片的细胞及组织形态进行组织学观察。结果实验成功的将牙齿切片在体外培养了两周,成牙本质细胞在培养一周之内能够很好的维持原来的形态。一周之后成牙本质细胞逐渐萎缩,细胞密度减小。结论实验成功的建立了人牙齿切片体外器官培养的模型,为后期进行组织损伤和修复、第三期牙本质的形成等方面的研究奠定了基础。     

大鼠全牙器官体外培养模型的建立

目的 观察体外培养的大鼠全牙牙髓组织的生物学特征,为评估牙科生物材料的生物相容性提供实验模型。方法 新鲜拔除4周龄W istar大鼠上、下中切牙,采用Trowell支架培养法在体外培养,分别培养1周和2周进行组织学切片,HE染色后对牙髓组织进行组织形态学观察。结果 大鼠全牙器官在体外培养1周后,牙髓组织特别是成牙本质细胞能够很好的维持原来的生活状态。结论 大鼠中切牙全牙在体外培养可以成功培养1周,可为评价材料的生物相容性提供更加接近临床的实验模型。     

应用牙器官培养模型评价粘结剂的生物相容性

目的:应用大鼠全牙器官培养模型对两种牙科粘结剂进行生物相容性评价。方法:在新鲜拔除的4周龄SD大鼠切牙唇面制洞,随机分成3组:对照组(不涂粘结剂);AP组(涂Adper Prompt粘结剂)和PB组(涂Prime&Bond NT粘结剂),3组洞壁做相应处理后光照10 s后填入树脂,分别于术后即刻和体外全牙培养1周两个时间点,40 g/L多聚甲醛(PBS)固定,100 g/L甲酸脱矿,常规切片,HE染色进行组织学观察,并采集图像进行细胞计数及统计学分析。结果:术后即刻与对照组相比,PB组制洞部位下方的牙髓细胞发生聚集,AP组则表现为成牙本质细胞的细胞数减少,两种细胞均发生形态改变。术后培养1周时与对照组相比,AP组制洞部位下方的牙髓内牙髓细胞坏死,而PB组则表现为成牙本质细胞的细胞数目减少,两种细胞均发生形态改变。结论:两种牙科粘结剂均对牙髓组织有毒性作用,早期AP的毒性大于PB。     

金属栅栏式腭器官培养模型的建立

目的建立金属栅栏式小鼠腭器官培养模型。方法选取妊娠14 d的孕鼠20只,采用金属栅栏静式培养法,将腭器官分别培养24和48 h,肉眼以及苏木精-伊红染色观察腭器官在体外的发育过程。结果腭器官发育良好,细胞形态正常。腭器官培养24 h后可见到中脊上皮;培养48 h后可见中脊上皮消失,腭突融合。结论本方法为研究腭裂发病机制提供了一个良好的体外模型。     

金属栅栏式腭器官培养模型的建立

选取妊娠14d的孕鼠20只,采用金属栅栏静式培养法,将腭器官分别培养24和48h,肉眼以及苏木精-伊红染色观察腭器官在体外的发育过程。结果:腭器官发育良好,细胞形态正常。腭器官培养24h后可见到中脊上皮;培养48h后可见中脊上皮消失,腭突融合。结论:本方法为研究腭裂发病机制提供了一个良好的体外模型。     

人牙及实验动物牙颌软硬组织石蜡切片技术要点介绍

人牙及不同实验动物制作牙颌软、硬组织联合切片时需注意几个技术要点（１）取材和固定：大动物的颌骨尽量去除骨皮质,使固定液尽快渗入到的深部。人牙应去除牙冠部多余的硬组织不同暴露牙髓,以透出粉红色为准。     

人牙及实验动物牙颌软硬组织联合石蜡切片技术要点介绍

人牙及不同实验动物制作牙颌软、硬组织联合切片时需注意几个技术要点：①取材和固定：大动物的颌骨尽量去除骨皮质,使固定液尽快渗入到组织的深部。人牙应去除牙冠部多余的硬组织不要暴露牙历,以透出粉红色为准。②脱钙应选用弱酸,可加入少量强酸,用增大液体流动性或增加液体温度的方法来缩短时间。③脱水和浸蜡应注意牙髓的脱水情况,脱水不彻底影响浸蜡,使片中牙髓破碎或与髓腔壁分离。④切片：用浸透冷水的纸在蜡块表面浸10分钟再切,可切出很好的条状腊带。⑤展片：可先用低度乙醇行第一道展片后,再放入温水内行第二次展片,选择展平而完整的切片抹在载玻片上入烤箱继续展平与烤干。     

提高牙及牙周组织联合石蜡切片质量的探讨

在口腔组织病理学、牙体牙髓病学、牙周病学、修复学、口腔材料学、药物学等很多科研领域，都需要制作牙及牙周组织联合切片进行观察和研究。由于牙体组织中的牙釉质、牙本质、牙骨质和牙槽骨中含钙较多，坚硬且致密。为难切、硬脆、易碎组织；而牙髓、牙龈、牙周膜为软组织，制作过程中易受挤压、牵拉变形分离，甚至脱落。故用常规石蜡切片方法很难制出优良的牙及牙周组织联合切片。     

牙及牙周组织联合切片的脱钙方法探讨

目的研究牙和牙周组织联合切片脱钙方法。方法成年犬磨牙及牙周组织标本21块，分成7组，分别用6种甲酸及EDTA脱钙，测定脱钙液的pH值、脱钙时间、标本重量、体积和脱出的钙量及各种染色效果等指标判定。结果脱钙液pH值低脱钙快，脱钙后标本重量减轻37．54％、体积缩小25．97％，每克湿重标本脱出的钙量为174．49mg。EDTA脱钙染色效果最佳，脱钙慢。Plank—Rycho脱钙液较迅速，切片质量和染色效果不佳。以氯化铝为保护剂的甲酸脱钙液，切片质量和染色效果优良，比EDTA脱钙迅速。结论以氯化铝为保护剂的50％甲酸是较理想的脱钙液。     

改良小鼠胚胎下颌下腺的获取及其体外器官培养模型的建立

分支形态的形成对于保证器官可以在有限的体积内获得最有效的功能形态具有重要意义。下颌下腺是研究器官分支形态发生过程的重要模型,在小鼠胚胎中获取下颌下腺组织进行体外器官培养是一种重要的研究方法。本文介绍了一种改良的小鼠胚胎下颌下腺获取方法,并将整个获取及建立体外器官培养流程作以简介,以对其在体内发育过程中的分支形态发生过程进行更好体外的模拟,从而能够更好地开展相关研究。     

牙胚细胞的分离培养

目的：分离培养牙胚细胞。方法：选择出生后（PN）8天的SD大鼠,从第一磨牙牙胚上撕脱牙囊和成釉器组织,切取牙胚颈部组织,剁离牙乳头组织,分别进行细胞培养,通过差速消化法分离符种牙胚细胞。结果：牙囊、牙乳头、成釉器和上皮根鞘细胞被分离纯化出来。结论：利用差速消化法可同时分离培养4种主要的牙胍细胞。     

Differentiation of odontogenic tissues in organ culture

abstract – Molar tooth germs from 17-d-old mouse embryos were cultivated in a Trowelltype culture, and different culture media were tested for their ability to support enamel formation. The medium which allowed secretion of considerable amounts of enamel matrix by ameloblasts consisted of BGJb medium supplemented with 20 % horse serum, 10 % chick embryo extract and 0.9 mM ascorbic acid. At the onset of culture the teeth were in the early bell stage. After 2 weeks of cultivation both odontoblasts and ameloblasts had differentiated, and considerable amounts of predentin and enamel matrix had been secreted. Similar development was also seen in teeth which had been enzymatically separated into the mesenchymal dental papilla and epithelial enamel organ and subsequently recombined in vitro . This method allows good differentiation of odontogenic tissues, and is considered suitable for further studies of tissue interactions in the tooth rudiment.     

Uptake of cadmiuin in developing rat teeth in organ culture

Abstract – Molar teeth from 9-day-old rats were cultured for 7 days in medium supplemented with 1 or 10 ppm Cd for 1 or 3 h or 7 days. After culture the Cd concentrations were measured separately from the mineralizing parts and the cell-containing tissues. The accumulation of Cd increased with the duration of treatment and the concentration used, being more intensive in the hard parts than the soft tissues of the teeth.     

大鼠牙乳头与成釉器重组肾被膜下种植的研究

目的：观察大鼠牙乳头对成釉器上皮的诱导作用。方法：出生后7dSD大鼠下颌第一磨牙根部的牙乳头与出生后2d的第二磨牙成釉器分别重组，出生后2d冠部牙乳头与成釉器重组为对照组。体外培养2d后种植于成年大鼠肾被膜下，1周，4周后取材，组织学观察上皮分化情况和硬组织形成情况。结果：1周后实验组重组体生成薄层的牙本质结构，内侧成牙本质细胞排列整齐，牙源性上皮未分化成成釉细胞，而有大量的骨样物质生成，对照组形成较为完整的牙冠结构。4周后，实验组重组体形成类牙根形态但仍无釉质形成。结论：根部牙乳头不具有促进成釉上皮分化的能力。     

cbfa1反义核酸对体外培养小鼠牙胚发育的影响

目的：采用反义核酸技术，用特异的、与cbfa1 mRNA互补的AS—ODN，抑制cbfa1在体外培养牙胚的翻译，观察它对牙齿发育及矿化的影响，探讨其在牙齿发育中的作用。方法：设计合成cbfa1反义核酸，应用所建立的牙胚体外培养体系，用光镜和电镜观察小鼠牙胚被cbfa1反义核酸阻断表达后发育的情况。结果：在缺乏cbfa1情况下，与对照组相比，实验组牙胚在体外虽然可以继续生长发育至钟状晚期，但形成的基质较薄，且基质中胶原纤维排列稀疏，粗细不等，方向杂乱。此外，成釉细胞与成牙本质细胞的发育均显幼稚。结论：cbfa1可能不仅仅参与了牙齿的矿化，还在成牙本质细胞和成釉细胞的分化中起重要的作用。