吉西他滨纳米磁靶向药囊对肺癌相关蛋白P53表达的影响

目的观察吉西他滨纳米磁靶向药囊对肺鳞癌细胞株A2裸鼠移植瘤模型的抑瘤率、血常规、肝肾功能和P53的表达变化探讨其疗效、安全性和抑制肺癌的机制。方法将植入肺鳞癌细胞株A2的肺癌裸鼠模型分为5组NiTi合金支气管支架+纳米磁靶向药囊组、NiTi合金支气管支架+化疗药物组、纳米磁靶向药囊组、化疗药物组和未干预组。观察各组肿瘤抑制率、血常规和肝肾功能,采用RT-PCR和western blot方法检测各组在药物干预后P53的表达情况。结果 NiTi合金支气管支架+纳米磁靶向药囊组肿瘤抑制最明显,骨髓抑制和肝功能损伤最轻;NiTi合金支气管支架+纳米磁靶向药囊组P53水平与未干预组相比显著降低(P0.01);NiTi合金支气管支架+化疗药物组、纳米磁靶向药囊组、化疗药物组的P53与未干预组相比有差异性(P0.05);三者之间没有统计学差异。结论吉西他滨纳米磁靶向药囊抑瘤作用明显,毒副作用轻,可能通过下调P53表达而发挥抑制肺癌的作用。     

选择性COX-2抑制剂联合顺铂对肺癌新生血管的影响及机制研究

目的研究选择性环氧化酶2(COX-2)抑制剂尼美舒利(NIM)单独应用以及联合顺铂(DDP)对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤血管生成的影响及其机制,为肺癌的治疗提供新思路。方法培养肺癌A549细胞,构建肺癌A549裸鼠移植瘤模型。依据随机数字表法将研究对象分为4组进行药物干预:对照组、NIM组、DDP组、NIM+DDP组,每组8只,观察一般状态。给药后第22天处死裸鼠,获取肿瘤组织,测量称取瘤重、瘤径,计算并比较各组体积抑瘤率。用CD31标记微血管,采用微血管计数法检测各组微血管密度。采用免疫组织化学检测肺癌A549裸鼠移植瘤内血管内皮生长因子的表达。结果本研究成功构建肺癌A549裸鼠移植瘤模型。NIM+DDP组第9、13、17、21天的移植瘤体积增长较其他3组慢(P值均<0.001)。NIM+DDP组体积抑瘤率最大。NIM+DDP组较其他3组移植瘤微血管密度低(F=27.861,P<0.001)。结论选择性COX-2抑制剂单独使用有抑制新生血管生成的作用,推测选择性COX-2抑制剂具有抗肿瘤能力,可能成为肺癌靶向治疗因子。选择性COX-2抑制剂联合DDP对新生血管因子表达的抑制效果更显著,对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的生长的抑制更显著。     

下调S100A6基因对裸鼠肺腺癌移植瘤生长和凋亡的影响

目的探讨下调靶向基因S100A6对在体肺腺癌移植瘤生长和凋亡的影响。方法 18只健康Balb/c雄性裸鼠随机分为空载体对照组、阴性对照组及S100A6基因RNA干扰组三组,每组6只动物;分别应用不携带目的基因的空载质粒、未转染任何质粒以及含有S100A6基因RNA干扰慢病毒质粒的A549肺腺癌细胞接种于裸鼠皮下,构建移植瘤动物模型;观察不同组移植瘤组织生长情况;采用Real-Time PCR、免疫组织化学及Western-blot等技术检测S100A6 mRNA和蛋白的表达,TUNEL法检测细胞凋亡。结果成功构建了裸鼠肺腺癌皮下移植瘤模型;病理学特征显示,阴性对照组和空载体对照组可见到成巢的肿瘤细胞,癌细胞核大,而干扰组肿瘤细胞较稀疏,间质组织明显;接种细胞2周时,阴性对照组、空载体对照组和RNA干扰组肿瘤组织体积和质量差异具有统计学意义(P0.05);S100A6基因和蛋白表达在三组之间差异具有统计学意义(P0.05);各组裸鼠移植瘤凋亡细胞呈现不同程度的棕褐色肿瘤细胞核,三组肿瘤细胞凋亡率的差异具有统计学意义(P0.05)。结论下调肿瘤瘤组织S100A6蛋白表达,可抑制肿瘤生长,诱导细胞凋亡,为进一步开发肺腺癌分子靶点提供了新途径。     

藤梨根提取物抗肺癌作用的体内实验研究

目的研究藤梨根乙酸乙酯提取物对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的生长抑制及凋亡诱导作用,探讨其可能机制。方法用肺癌A549细胞建立肺癌裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组、治疗组（高剂量组、低剂量组）。根据瘤体积变化绘制移植瘤生长曲线,根据终末瘤质量比较计算抑制率,移植瘤细胞凋亡指数检测采用TUNEL法,移植瘤细胞Bcl-2、Bax蛋白、Ki-67抗原表达检测采用免疫组化SP法,RT-PCR检测移植瘤Bcl-2、Bax mRNA表达。结果各治疗组经藤梨根乙酸乙酯提取物治疗后移植瘤生长缓慢,治疗结束时治疗组移植瘤质量及瘤体积明显低于对照组（P均〈0.01）,高、低剂量组的瘤质量抑制率分别为69.00%和45.09%。治疗组移植瘤细胞透射电镜下均可见不同阶段典型的凋亡细胞形态学变化。各治疗组移植瘤组织凋亡指数明显高于对照组,而增殖指数明显减低,Bcl-2 mR-NA及蛋白表达较对照组亦明显减少,Bax蛋白及mRNA表达较对照组明显增加,高剂量组尤其明显（P均〈0.01）。结论藤梨根乙酸乙酯提取物对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长有抑制作用,其机制与抑制移植瘤细胞的增殖活性和诱导癌细胞凋亡有关,而降低Bcl-2基因表达、上调Bax基因表达可能是其诱导细胞凋亡机制之一。     

Survivin反义寡核苷酸抑制宣威肺腺癌裸鼠皮下移植瘤生长的研究

目的研究靶向survivin mRNA的反义寡核苷酸对裸鼠宣威肺腺癌细胞XWLC-05移植瘤的抑制作用。方法建立宣威肺腺癌细胞XWLC-05裸鼠移植瘤模型,随机分为：空白对照组、单纯脂质体转染组、正义链转染组、反义链转染组,观察裸鼠一般活动情况、移植瘤体积、计算抑瘤率。病理学检测各组对肿瘤的影响以及对心脏、肝脏、肾脏的影响情况。结果空白对照组、单纯脂质体转染组、正义链转染组移植瘤随时间增长而增大,但3组间无显著差异（P〉0．05）。反义链转染组注射反义寡核苷酸后,裸小鼠肿瘤生长速度较为缓慢;肿瘤重量低于其他3组;其肿瘤生长抑制率高于其他3组（P〈0．05）;病理检查见瘤组织中有大量的细胞坏死灶。各组裸鼠均未出现死亡,病理检查重要脏器未见明显损害。结论survivin反义寡核苷酸能够抑制裸鼠皮下移植瘤的生长,未对其他脏器产生明显损害。     

斑蝥素抑制裸鼠胰腺癌移植瘤生长研究

目的 探讨斑蝥素对荷瘤裸鼠胰腺癌移植瘤生长的影响.方法 在培养人胰腺癌SW1990细胞的基础上建立荷瘤裸鼠胰腺癌模型,瘤内注射斑蝥素1 mg/kg体重作为斑蝥素组,瘤内注射等量生理盐水作为对照组,观测移植瘤大小改变及p53、Bcl-2和Bax蛋白表达的变化.结果 两组裸鼠移植瘤的体积随着时间的延长而明显增加,但斑蝥素组的增长幅度明显小于对照组(P＜0.05),移植后27 d瘤体缩小40%;斑蝥素组移植瘤Bcl-2无强阳性(+ +～+ + +)表达,p53强阳性表达6只(85.7%),Bax强阳性表达3只(42.9%),对照组强阳性表达分别为2只(33.3%)、3只(50%)和2只(33.3%).Bcl-2、p53表达两组差异显著(P＜0.05),而Bax表达无显著差异.结论 斑蝥素可明显抑制裸鼠胰腺癌移植瘤的生长,其机制可能与斑蝥素下调Bcl-2蛋白表达,上调p53蛋白表达有关.     

Bcl-2在RNAi-hTERT诱导HeLa细胞凋亡过程中的作用

目的探讨B细胞淋巴瘤／白血病-2（Bcl-2）在靶向端粒酶逆转录酶（hTERT）的RNA干扰诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡过程中的作用。方法将常规培养的HeLa细胞分为6个组,A组不处理,B组转染试剂,c组转染空载体,D组转染阴性siRNA,E组转染siRNA．hTERT,F组同时转染pcDNA3．1-Bd-2和siRNA—hTERT。转染后48h,流式细胞术分析各组细胞凋亡率,Westernblot法检测各组hTERT、Bcl-2表达水平。结果与E组相比较,F组的Bcl-2的蛋白水平显著增高,细胞凋亡率显著降低（P〈0．01）。结论靶向hTERT的RNA干扰诱导HeLa细胞凋亡依赖于Bcl-2蛋白水平的下调。     

肺癌肿瘤抑制因子1对膀胱癌裸鼠移植瘤的抑制作用及机制

目的 观察肺癌肿瘤抑制因子1(TSLC1)对膀胱癌裸鼠移植瘤的抑制作用,并探讨其作用机制。方法将TSLC1过表达人膀胱癌T24细胞株(Ad-TSLC1-T24组)、空载体对照T24细胞株(Ad-T24组)及空白对照T24细胞株(T24组)种植于裸鼠皮下,绘制肿瘤生长曲线,种植细胞5周处死全部裸鼠留取肿瘤组织标本,测量肿瘤体积,称量瘤重,计算抑瘤率,光镜观察移植瘤组织病理变化,RT-PCR法检测移植瘤组织中TSLC1、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)mRNA表达,Western blotting法检测移植瘤组织中TSLC1、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达。结果 肿瘤生长曲线显示Ad-TSLC1-T24组移植瘤生长明显慢于Ad-T24组及T24组,种植细胞5周Ad-TSLC1-T24组肿瘤体积及质量低于Ad-T24组及T24组(P均<0.05),抑瘤率高于Ad-T24组(P<0.05)。HE染色结果显示,Ad-TSLC1-T24组移植瘤细胞出现明显的核固缩、核碎裂等凋亡现象。与Ad-T24组、T24组比较,Ad-TSLC1-T24组移植瘤中TSLC1、Caspase-3 mRNA及蛋白相对表达量增加,Bcl-2 mRNA及蛋白相对表达量降低(P均<0.05)。结论 TSLC1过表达可抑制膀胱癌裸鼠移植瘤生长,其机制可能与上调Caspase-3表达和下调Bcl-2表达促进了肿瘤细胞凋亡有关。     

静默人类真核延伸因子1A2对胰腺癌裸鼠移植瘤生长的影响

目的 探讨静默人类真核延伸因子1A2(EEF1A2)对胰腺癌细胞体内生长的影响及其可能的机制.方法 建立胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,均分为空白组、阴性对照组、EEF1A2组,移植瘤内分别注射PBS、阴性对照siRNA和特异性EEF1A2 siRNA.测定各组移植瘤的体积和质量;应用免疫组织化学的方法检测各组移植瘤组织中EEF1A2和抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)的表达;应用TUNEL法检测各组移植瘤组织中细胞凋亡率.结果 在裸鼠移植瘤模型中,从给药后第17天开始,EEF1A2组移植瘤体积增长明显滞后于阴性对照组和空白组(P值均＜0.05).治疗结束后切取肿瘤称重,EEF1A2组肿瘤质量为(0.27±0.06)g,显著低于阴性对照组和空白组[(0.39±0.08)g和(0.43±0.07)g,P＜0.05].EEF1A2主要表达于胰腺癌细胞胞质,其中在阴性对照组和空白组中,阳性细胞分布比较密集,阳性率分别为(72.58±25.47)％和(76.75±23.19)％,而EEF1A2组阳性细胞分布较稀疏,阳性率为(34.78±21.36)％,差异有统计学意义(P＜0.01).EEF1A2组的PCNA蛋白表达也显著低于空白组和阴性对照组(P＜0.01),而原位末端转移酶标记技术(TUNEL)的结果显示EEF1A2组中细胞凋亡率高于空白组和阴性对照组(P＜0.01).结论 EEF1A2在体内能被有效静默,EEF1A2静默后能明显抑制胰腺癌细胞的生长,可能与其抑制细胞增殖和促进细胞凋亡有关.     

选择性环氧合酶-2抑制剂罗非昔布对胆囊癌生长的影响

目的研究选择性环氧合酶-2（COX-2）抑制剂罗非昔布对人胆囊癌细胞生长及凋亡的影响,观察罗非昔布对人裸鼠胆囊癌移植瘤生长的抑制作用。方法用免疫组化检测细胞COX-2的表达,用TUNEL染色法检测细胞凋亡。建立裸鼠胆囊癌移植瘤模型,给予罗非昔布8周,观察肿瘤大小、肿瘤组织的COX-2的表达情况。结果罗非昔布能诱导胆囊癌细胞的凋亡、降低胆囊癌细胞的COX-2的表达。罗非昔布对裸鼠胆囊癌移植瘤的抑瘤率为89．4％;肿瘤组织的COX-2的表达较对照组明显下降。结论选择性环氧合酶-2抑制剂罗非昔布能抑制人胆囊癌细胞的生长,并诱导其凋亡。罗非昔布能显著抑制裸鼠胆囊癌移植瘤的生长。     

Bcl-2/Bax基因在非小细胞肺癌中的异常表达及其与吸烟的关系

目的探讨凋亡相关基因Bcl-2／Bax在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其与吸烟的关系。方法应用免疫组化S—P法对33例NSCLC及正常对照肺组织中的Bcl-2和Bax表达水平进行检测,并比较其与吸烟及临床病理特征的关系。结果Bcl-2和Pax蛋白在NSCLC中均有异常表达,Bcl-2为高表达,Bax为低表达;二者的表达均与吸烟有关,Bcl-2表达吸烟组高于非吸烟组,Bax表达吸烟组低于非吸烟组。Bcl-2和Bax在非小细胞肺癌中的表达与肺癌的组织学类型及淋巴结转移情况有关,Bcl-2表达鳞癌高于腺癌,淋巴结转移组高于无淋巴结转移组;Bax表达则鳞癌低于腺癌,淋巴结转移组低于无淋巴结转移组,二者呈负相关。结论凋亡相关基因Bcl-2／Bax在NSCLC中均有异常表达,且与肺癌的组织学类型及淋巴结转移有关,说明凋亡作用失衡在NSCLC发生发展中起重要作用。Bcl-2／Bax表达与吸烟有关,提示吸烟可影响机体的细胞凋亡,参与肺癌的发生。     

吉西他滨对Lewis肺癌放射增敏的实验研究

目的　吉西他滨是一种核苷类似物,能够掺入到肿瘤细胞的DNA分子中,有效抑制DNA合 成。本实验观察联合应用吉西他滨和放疗治疗荷Lewis肺癌实体瘤C57BL小鼠的疗效,以明确吉西他滨 对Lewis瘤的放射增敏作用。方法　建立小鼠Lewis肺癌实体瘤模型后,分对照组、单纯放疗组、吉西他滨 组及吉西他滨联合放疗组。对照组给予腹腔注射生理盐水0.1ml,单纯放疗组荷瘤鼠右下肢肿瘤局部以 34Gy射线照射,吉西他滨组分两个亚组,分别以25mg/kg、50mg/kg吉西他滨腹腔注射,联合放疗组则以 25mg/kg吉西他滨腹腔注射加荷瘤鼠右下肢肿瘤局部34Gy射线照射。然后每两天测量肿瘤的长、短径, 比较各组瘤体积、肿瘤生长延缓天数、荷瘤鼠存活数和肺转移率等。结果　与对照组比较,25mg/kg和 50mg/kg的单剂量吉西他滨都对Lewis实体瘤生长有抑制作用(P<0.05);联合放疗组局部肿瘤生长受 到明显抑制,抑瘤率为86.6%,明显高于单纯放疗组(64.7%,P<0.05)和吉西他滨组(47.3%,P< 0.05);联合放疗组肿瘤生长延缓天数(瘤体积0.3～1.0cm3)超过9天,高于单纯放疗组(5天,P<0.05) 和吉西他滨组(3天,P<0.05);联合放疗组60天内存活的鼠最多(4个),单纯放疗组为2个,其他两组鼠 全部死亡。联合放疗组平均肺转移为0.5个/叶肺,单纯放疗组为1.5个/叶肺,吉西他滨组     

藤梨根提取物对HT-29荷瘤裸鼠的抑制及诱导凋亡作用的影响

目的:研究藤梨根提取物(ethanol extract from radix of Actinidia chinensis,EERAC)对人大肠癌HT-29荷瘤裸鼠移植瘤的抑制和诱导凋亡作用.方法:提取EERAC,以大肠癌HT-29细胞对40只Balb/c-nu/nu裸鼠进行荷瘤造模,并随机将分为3个EERAC处理组(低剂量组5mg/kg、中剂量组10mg/kg、高剂量组20mg/kg),空白对照组(生理盐水)和阳性对照组(5-Fu,25mg/kg),每组8只,连续用药8d后,测定各实验组的肿瘤抑制率、脾脏指数.通过脾脏效应细胞培养,测定NK细胞的活性度.免疫组织化学法测定各组荷瘤裸鼠体内凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Caspase-3的蛋白表达水平.结果:与空白对照组相比,EERAC对HT-29移植瘤均有明显的抑制作用,各剂量组的抑瘤率为9.12%、20.13%、37.81%,与药物剂量呈正比;EERAC各剂量组对荷瘤裸鼠脾脏指数较生理盐水组和5-Fu组有显著增加(P<0.05);不同剂量的EERAC均可使NK细胞活性度增加(P<0.05);EERAC作用后,HT-29荷瘤裸鼠体内的Bcl-2表达减弱,Bax、Caspase-3表达水平增高,Bcl-2/Bax比值下降,其作用也呈剂量相关性.结论:EERAC对大肠癌细胞HT-29荷瘤裸鼠具有抑制瘤体生长和诱导癌细胞凋亡的作用,其作用机制可能为抑制荷瘤裸鼠体内Bcl-2的表达,提高Bax、Caspase-3表达水平,下调Bcl-2/Bax.EERAC对荷瘤裸鼠免疫系统无不良影响,且能一定程度上提高机体的免疫功能.     

腺病毒介导的肿瘤生长抑制因子4和白细胞介素-24双基因共表达对肺腺癌放疗增敏的体内外实验研究

目的 研究肿瘤生长抑制因子4 (ING4)和白细胞介素-24 (IL-24) 双基因共表达腺病毒载体对肺腺癌细胞SPC-A-1的体内外放疗增敏作用及其潜在的作用机制.方法 用Western blot法检测ING4和IL-24在SPC-A-1细胞中的表达;四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法和流式细胞仪分别检测Ad-ING4-IL-24联合放疗对SPC-A-1肺腺癌细胞的生长抑制作用和促凋亡作用.应用抽签法将25只裸鼠随机均分为5组:PBS组、腺病毒(Ad)组、双基因组、放疗组及联合组,除放疗组外其余各组均采用瘤体内注射干预用药,隔日1次,共注射6次.第1次治疗前及开始治疗后隔日测量各组瘤体的长径(L)和短径(W),计算瘤体体积(V=L×W2/2),绘制瘤体体积-时间变化曲线.采用 SPC-A-1细胞株建立肺腺癌裸鼠模型,观察Ad-ING4-IL-24联合放疗对移植瘤的抑制作用.免疫组织化学法检测天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2 (Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因的表达.采用金正均法计算q值并判断其放疗增敏作用.结果 Western blot法检测结果显示,目的 基因在SPC-A-1细胞中成功表达;MTT和流式细胞仪检测结果显示,Ad-ING4-IL-24联合放疗组对SPC-A-1细胞的生长抑制和促细胞凋亡作用[(86.2±0.8)%、(60.9±1.0)%]明显高于Ad-ING4-IL-24双基因组[(49.8±0.3)%、(26.3±1.3)%]和放疗组[(44.4±2.2)%、(33.3±0.8)%](生长抑制率比较,F=550.88,P＜0.01;凋亡率比较,F=614.08,P＜0.01),Ad-ING4-IL-24联合放疗具有放疗增敏协同作用(q=1.20);裸鼠体内瘤重抑瘤率Ad-ING4-IL-24组、放疗组及Ad-ING4-IL-24联合放疗组分别为49.5%(样本5只)、35.4%(样本5只)和79.8%(样本5只),Ad-ING4-IL-24联合放疗能明显抑制移植瘤生长,具有放疗增敏协同作用(q=1.18);免疫组织化学法检测结果显示,Ad-ING4-IL-24联合放疗可明显上调Bax和Caspase-3基因表达,下调Bcl-2及VEGF基因表达.结论 Ad-ING4-IL-24具有放疗增敏作用,是理想的放疗增敏剂,其作用机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡和抑制血管形成有关.

Abstract：

Objective To study the radiosensitivity of the recombinant adenoviral vector (called Ad-ING4-IL-24) carrying and co-expressing inhibitor of growth 4 (ING4) and interleukin-24 (IL-24) to human lung adenocarcinoma and the underlying mechanisms. Methods The expression levels of ING4 and IL-24 were detected by Western blot. The growth-suppressing and apoptosis-inducing effect of Ad-ING4-IL-24 combined with radiotherapy on SPC-A-1 lung carcinoma cells were assessed by MTT assay and FCM respectively. The 25 nude mice were randomly divided into 5 groups of 5 mice ecah: PBS group,Ad group,Ad-ING4-IL-24 group,radiotherapy group and joint group (Ad-ING4-IL-24 combined radiotherapy). Mice in all groups except radiotherapy group were intratumorally injected every other day for 6 cycles. The short and long axes of the tumor were measured dynamically, tumor volume was calculated as: V=L×W2/2, changes in tumor volume were graphed. The human lung carcinoma model was established with SPC-A-1 cells in nude mice. The ratios of tumor-suppression and q were calculated. The expression of Caspase-3, Bcl-2, Bax, VEGF in tumor samples were detected by immunohistochemistry. Results The expressions of ING4 and IL-24 were successfully expressed in SPC-A-1 cells. MTT assay and FCM showed that the levels of cell-growth inhibition and apoptosis induction in Ad-ING4-IL-24 combined with radiotherapy group [(86.2±0.8)%,(60.9±1.0)%] were higher than in Ad-ING4-IL-24 group [(49.8±0.3)%,(26.3±1.3)%] and in radiotherapy group [(44.4±2.2)%,(33.3±0.8)%] (ratio of cell-growth inhibition, F=550.88,P＜0.01; ratio of induced apoptosis F=614.08,P＜0.01). Ad-ING4-IL-24 combined with radiotherapy showed an enhanced radiosensitivity effect on human lung adenocarcinoma(q=1.20). In Ad-ING4-IL-24 group, radiotherapy group and Ad-ING4-IL-24 combined with radiotherapy group, the weight inhibition ratio was 49.5% (5 nude mice), 35.4%(5 nude mice), 79.8%(5 nude mice) respectively. Ad-ING4-IL-24 combined with radiotherapy had a synergetic and enhanced radiosensitivity effect on inhibiting the growth of transplanted tumor(q=1.18). According to immunohistochemistry, Ad-ING4-IL-24 was shown to up-regulate the expression of Bax and Caspase-3 but down-regulate the expression of Bcl-2 and VEGF. Conclusion Ad-ING4-IL-24 had an enhanced radiosensitivity effect on human lung adenocarcinoma, and therefore acted as a radiotherapy sensitizer, which may be related to its effect on apoptosis-induction and antiangiogenesis.     

选择性COX-2抑制剂尼美舒利对肺癌放射治疗增敏作用及其机制研究

目的 观察选择性环氧化酶抑制剂与放射治疗联合应用对人肺腺癌A549裸鼠移植瘤生长的影响并进一步探讨其放疗增敏机制.方法 首先构建人肺腺癌A549裸鼠移植瘤模型,待裸鼠移植瘤长至最长径6.0 mm时随机分为4组:对照组、尼美舒利组、放疗组、尼美舒利联合放疗组.尼美舒利溶于0.5％羟甲基纤维素钠中,采用灌胃方式给药,剂量为60 mg·kg1·d-1,共28 d.移植瘤最大径长至6.0 mm时予以局部单次大剂量放疗10 Gy.观察各组移植瘤最长径由6 mm长至12 mm所需时间,以移植瘤体积绘制生长曲线,计算抑瘤率,用免疫组化方法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、前凋亡蛋白Bax、凋亡抑制蛋白Bcl-2在组织中表达情况,应用流式细胞技术测定细胞周期分布及凋亡率.结果 尼美舒利联合放疗对肺腺癌裸鼠移植瘤生长有明显抑制作用.对照组移植瘤最长径由6 mm增长至12 mm所需时间为(7.12±0.72)d,放疗组为(8.34±0.71)d,尼美舒利组为(11.29±0.78)d,尼美舒利联合放疗组为(14.62±0.19)d.放疗组抑瘤率为21.2％,尼美舒利组为18.3％,尼美舒利联合放疗组为41.7％.应用免疫组化方法检测移植瘤中PCNA和Bcl-2表达的阳性面积百分比及灰度值:尼美舒利联合放疗组、放疗组、尼美舒利组均低于对照组(P值均＜0.05),且尼美舒利联合放疗组低于放疗组及尼美舒利组(P值均＜0.05);Bax表达阳性面积百分比及灰度值:尼美舒利联合放疗组、放疗组、尼美舒利组均高于对照组(P值均＜0.05),且尼美舒利联合放疗组高于放疗组及尼美舒利组(P值均＜0.05).流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期分布:尼美舒利联合放疗组、放疗组、尼美舒利组凋亡率均高于对照组(P值均＜0.05),且尼美舒利联合放疗组高于放疗组及尼美舒利组(P值均＜0.05);G0/G1期各组差异无统计学意义(F＝2.731,P＞0.05);S期尼美舒利联合放疗组、放疗组、尼美舒利组均低于对照组(P值均＜0.05),且尼美舒利联合放疗组低于放疗组及尼美舒利组(P值均＜0.05);G2/M期尼美舒利联合放疗组同其他各组相比增多(P值均＜0.05),对照组、放疗组、尼美舒利组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 尼美舒利可抑制人肺腺癌A549裸鼠移植瘤的生长,尼美舒利增强人肺腺癌A549裸鼠移植瘤对放射治疗的敏感性.其机制可能同抑制PCNA表达,从而抑制肿瘤细胞的生长,并通过抑制Bcl-2表达、增强Bax表达,而诱导A549细胞凋亡有关;还可能与细胞周期分布中对放疗不敏感的S期细胞数减少而对放疗敏感的G2/M期细胞数增加有关.     

E2F-1蛋白在肺鳞状细胞癌及腺癌中的表达及临床病理学意义

目的:研究E2F-1蛋白在肺鳞状细胞癌及腺癌中的表达情况,探讨其在肺癌发生发展中的作用机制及其与临床病理学特征间的关系。方法:应用免疫组化ElivisionTMsuper二步法检测71例肺鳞状细胞癌、腺癌及相应癌旁组织中E2F-1蛋白的表达情况。结果:肺鳞状细胞癌及腺癌组织中E2F-1蛋白的阳性表达率为83.1%(59/71),显著高于癌旁组织中的8.5%(6/71)(P0.05);E2F-1蛋白表达随癌组织分化程度的减低有升高的趋势,在肺腺癌组织中(91.4%)的表达虽高于鳞状细胞癌中的表达(75.0%),但与组织分化、组织类型差异均无统计学意义,且与患者年龄、性别、肿瘤大小、有无淋巴结转移及TNM分期等差异无统计学意义(P0.05)。结论:E2F-1的过表达与肺鳞状细胞癌及腺癌的发生发展密切相关。     

Effects of recombinant human growth hormone on growth of human gastric carcinoma xenograft model in nude mice

AIM: To study effects of recombinant human growth hormone (rhGH) on growth of a human gastric carcinoma cell in vivo. METHODS: Experimental mice were divided into control group, rhGH group, oxaliplatin (L-OHP) group and rhGH L-OHP group. Cultured human gastric carcinoma cells BGC823 were inoculated into right axilla of nude mice and carcinoma xenograft model was established successfully. Inhibitory rate of xenograft tumor growth was estimated by measuring tumor volume; expression of proliferating cell nuclear antigen (PCNA), Bax and Bcl-2 proteins of xenograft tumor was detected using immunohistochemical S-P method. RESULTS: Tumor growth inhibitory rate, the positive expression rate of PCNA, Bax and Bcl-2 were 49.3%, 58.2%, 65.2% and 59.2% in rhGH L-OHP group respectively; 46.6%, 62.5%, 59.7% and 64.7% in L-OHP group; 5.0%, 82.7%, 23.2% and 82.2% in rhGH group and 0, 77.8%, 23.5% and 80.3% in control group. There was significant difference between rhGH L-OHP group (or L-OHP group ) and control group or rhGH group (P < 0.05), whereas there were no significant differences (P > 0.05) between L-OHP group and rhGH L-OHP group and between rhGH group and control group. CONCLUSION: rhGH does not accelerate the proliferation of human gastric cancer cell in vivo.     

A case of primary squamous cell carcinoma of the lung with a metastatic thyroid tumor improved following chemotherapy]

Metastatic thyroid tumor is rarely diagnosed clinically. We report here a case of a 59-year-old male of a primary squamous cell carcinoma of the lung with metastatic thyroid tumor diagnosed by an ultrasonography-guided aspiration cytology. A squamous cell carcinoma of the lung (c-T4N3M1 stage IV) was diagnosed in March 2001, and so chemotherapy using carboplatin and paclitaxel was tried initially. A partial response was obtained. Then, he was re-admitted to our hospital because his thyroid gland was swollen. Ultrasonography-guided aspiration cytology of the thyroid tumor was performed and revealed a metastatic squamous cell carcinoma from the lung cancer. The patient was given chemotherapy using gemcitabine and docetaxel as second line chemotherapy. This reduced the thyroid tumor size and improved the symptoms.