P53、VEGF在SKOV3荷瘤裸鼠不良心理应激模型血清及移植瘤中的表达及意义

目的:探讨不良心理应激对SKOV3荷瘤裸鼠血清及移植瘤中P53、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白水平的影响。方法:建立荷卵巢癌裸鼠不良心理应激模型,采用ELISA检测正常对照组(A)、单纯应激组(B)、单纯荷瘤组(C)和荷瘤应激组(D)各10只小鼠的血清P53和VEGF浓度,用Western blot方法分析C组和D组移植瘤中P53、VEGF蛋白表达情况;另取32例荷瘤应激和24例单纯荷瘤的裸鼠移植瘤标本,免疫组化检测P53和VEGF的蛋白表达水平。结果:A组与B组血清P53和VEGF含量比较差异无统计学意义(P>0.05),C组的P53、VEGF含量均明显高于A组(P<0.01),D组的血清P53、VEGF与B、C组相比差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);D组P53、VEGF的蛋白灰度值明显高于C组(P<0.05);免疫组化结果示P53蛋白在荷瘤应激组和单纯荷瘤组的阳性表达率分别为87.5%和62.5%,VEGF蛋白在2组的阳性表达率分别为93.8%和70.8%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:不良心理应激明显促进荷瘤鼠SKOV3移植瘤生长,可能与P53和VEGF有关;P53及VEGF有望成为心理肿瘤学的分子靶标。     

EMMPRIN和Ki-67在panc-1荷瘤裸鼠束缚应激模型移植瘤中的表达及意义

目的探讨慢性心理应激对panc-1荷瘤裸鼠移植瘤中细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（EMMPRIN）和Ki-67蛋白水平的影响。方法将20只裸鼠随机分成单纯荷瘤组和荷瘤＋应激组,每组10只,建立裸鼠胰腺癌移植瘤束缚应激模型,采用免疫组化检测移植瘤组织中EMMPRIN和Ki-67蛋白的表达。结果荷瘤＋应激组移植瘤组织中EMMPRIN和Ki-67的阳性表达均明显高于单纯荷瘤组,差异有统计学意义（Z=-2.636,P〈0.05）;移植瘤组织中EMMPRIN与Ki-67的表达呈正相关（r=0.534,P〈0.05）。结论应激可能通过上调EMMPRIN的表达,诱导肿瘤细胞增殖,促进裸鼠胰腺癌的生长。     

雷公藤红素抑制可移植性人脑胶质瘤生长相关分子

目的 研究雷公藤红素在裸鼠胶质瘤动物模型治疗人脑胶质瘤的可行性.探讨雷公藤红素抑制SHG-44胶质瘤裸鼠移植瘤生长的作用机制.方法 建立BALB/c裸小鼠SHG-44胶质瘤移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为5组,采用腹腔内注射给药方法.雷公藤红素按4mg/kg、2mg/kg、1mg/kg三种浓度分组给药;阳性对照顺铂组按2mg/kg给药.定期观察肿瘤生长情况测量肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线并计算抑瘤率.全部SHG-44裸鼠移植瘤石蜡标本用SP法免疫组化染色,检测移植瘤组织中的微血管计数(MVD)、以及bFGF、周期蛋白D1和PCNA的蛋白表达.结果 与溶媒对照组相比,雷公藤红素4mg/kg组、2mg/kg组均能抑制肿瘤生长(P＜0.05),其体积抑瘤率分别为35%和26.9%.雷公藤红素高剂量组能下调移植瘤组织中bFGF的蛋白表达(P＜0.05);MVD也随之降低(P＜0.05),呈剂量依赖关系.PCNA、周期蛋白D1在雷公藤红素高、中剂量组及阳性对照组移植瘤中的蛋白表达明显低于溶媒对照组(P＜0.05),呈剂量依赖关系.结论 雷公藤红素能明显抑制SHG-44裸鼠移植瘤生长,并存在剂量依赖性.其机制可能是下调bFGF的蛋白表达,抑制肿瘤血管生成,下调周期蛋白D1、PCNA的蛋白表达,对肿瘤细胞周期进行调控.     

奥曲肽抑制人卵巢癌细胞增殖

目的 探讨生长抑素类似物奥曲肽在体内外对人卵巢癌细胞株SKOV3生长的影响.方法 Mtt比色法观察体外奥曲肽对人卵巢癌细胞株SKOV3的生长抑制作用.建立人卵巢癌细胞株SKOV3裸鼠移植瘤模型,随机分成四组,分别给予生理盐水(A组)、奥曲肽(B组)、顺铂(C组)及两药联用(D组)处理,处死裸鼠后采用免疫组织化学法检测肿瘤标本血管内皮生长因子(VEGF)的表达.结果 奥曲肽可抑制体外SKOV3细胞生长,且其作用呈时间、浓度依赖性.各用药组瘤重、瘤体积、VEGF的表达均低于A组(P<0.05).结论 奥曲肽能抑制体内外人卵巢癌细胞株SKOV3生长,对肿瘤VEGF表达的抑制可能为其抑瘤机制之一.     

恩度联合放疗对鼻咽癌裸鼠成瘤的抑制作用及机制

目的:观察恩度联合放疗对鼻咽癌裸鼠成瘤的抑制作用及对血管内皮生长因子(VEGF)和生存素SurvivinmRNA表达的影响.方法:建立鼻咽癌裸鼠成瘤模型,成瘤后随机分为对照组、恩度组、放疗组和恩度+放疗联合组(联合组),观察各组移植瘤的生长速度和瘤体大小的变化.4周后处死裸鼠摘取瘤体,电镜观察各组肿瘤凋亡情况,应用实时荧光定量PCR检测各组瘤体组织中的VEGF和Survivin mRNA的表达水平.结果:联合组肿瘤体积增长受到明显抑制,对照组生长迅速,恩度组与放疗组居中.恩度组、放疗组和联合组的VEGF表达水平均低于对照组,联合组低于放疗组,差异均有统计学意义(P＜ 0.05或P＜0.01),放疗组和联合组的Survivin表达水平均低于对照组,联合组低于放疗组,差异均有统计学意义(P＜ 0.05或P＜0.01).成瘤组织中VECF与Survivin的表达呈正相关(r=0.679,P＜0.01).结论:恩度联合放疗能明显抑制鼻咽癌裸鼠移植瘤的生长,这种作用可能与VEGF和Survivin表达下调有关.     

PI3K/Akt抑制剂对肺癌裸鼠移植瘤MMP9、VEGF表达的影响

目的探讨PI3K抑制剂LY294002对肺癌裸鼠移植瘤的基质金属蛋白酶9(MMP9)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响及意义。方法人肺癌A549细胞接种于裸鼠皮下,建立肺癌裸鼠移植瘤模型并予LY294002治疗,计算LY294002的抑瘤率,western b lot法测定裸鼠移植瘤组织MMP9、VEGF蛋白的表达。结果 LY294002可有效抑制裸鼠移植瘤的生长,其抑瘤率为40.30%。LY294002治疗组裸鼠移植瘤组织MMP9及VEGF蛋白水平均显著低于对照组(P均<0.01)。结论 PI3K抑制剂LY294002通过下调MMP9及VEGF蛋白的表达,从而抑制肿瘤的侵润转移。     

奥曲肽对人卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV3/DDP移植瘤增殖的影响

目的探讨奥曲肽对人卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV3/DDP裸鼠移植瘤生长的影响。方法将SKOV3/DDP细胞接种雌性BALB/c-nu/nu裸鼠右腋前皮下构建移植瘤动物模型,成瘤后随机分成4组。奥曲肽组(A):奥曲肽100μg.kg-1.d-1,用药28 d;顺铂组(B):顺铂4 mg.kg-1.d-1,成瘤后第1、8、15、22天用药;联合组(C):奥曲肽和顺铂联用;对照组(D):生理盐水对照。用药4周后处死裸鼠,取肿瘤标本计算瘤重和瘤体积,并采用免疫组织化学法检测瘤块中生长抑素受体2(SSTR2)和表皮生长因子受体(EGFR)的表达。结果各用药组肿瘤标本的瘤重、瘤体积均低于D组,C组的瘤重、瘤体积低于A、B组(P<0.01)。各组移植瘤细胞均有SSTR2表达;EGFR表达量D组显著高于其他各组(P<0.01),C组及A组EGFR表达量低于其他两组(P<0.01)。结论奥曲肽能抑制人卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV3/DDP的裸鼠移植瘤的生长,并与顺铂有协同作用。     

顺铂不同疗程化疗对裸鼠人卵巢癌移植瘤的影响

目的观察顺铂(DDP)不同疗程化疗对裸鼠人卵巢癌移植瘤的影响,并探讨其对乳腺癌耐药蛋白(BCRP)、P-糖蛋白(P-gp)和肿瘤干细胞标记物CD133表达水平的影响。方法用人卵巢癌细胞株SKOV3建立荷人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,24只裸鼠随机分为对照组、短疗程化疗组和足疗程化疗组,每组8只。化疗期间观察裸鼠体重和肿瘤生长状况;Western Blot方法检测3组移植瘤组织中BCRP、P-gp、CD133的蛋白表达水平。结果对照组移植瘤体积最大,短疗程化疗组次之,足疗程化疗组最小(P<0.05);足疗程化疗组裸鼠体重低于对照组及短疗程化疗组(P<0.01,P<0.05);足疗程化疗组CD133、BCRP、P-gp蛋白表达水平高于对照组及短疗程化疗组(P<0.01,P<0.05)。结论 DDP足疗程化疗可以更好地抑制荷人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的生长,但残余瘤对化疗抵抗性更强,更难治疗。     

靶向HIF—1α小干扰RNA对裸鼠MiaPaCa2细胞移植瘤生长的影响

目的:初步探讨重组腺相关病毒(rAAV)介导的靶向缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)小干扰RNA对裸鼠Mia-PaCa2人胰腺癌细胞移植瘤生长的影响.方法:首先构建rAAV介导的以HIF-1α为靶基因的RNA干扰表达载体,即rAAV-siHIF.将rAAV-hrGFP、rAAV-siHIF分别转染对数生长的MiaPaCa2细胞,在乏氧条件下进行培养,应用Real-Time PCR、Western Blot和ELISA法观察其对MiaPaCa2细胞HIF-1α mRNA、蛋白和VEGF表达的影响.将MiaPaCa2细胞接种于裸鼠皮下,形成荷瘤小鼠后随机分别肌注ddH2O(空白对照组)、rAAV-hrGFP(空载病毒组)和rAAV-siHIF(干扰病毒组),30 d后处死荷瘤裸鼠,取出移植瘤并测量肿瘤的大小及肿瘤的质量,应用免疫组化染色观察各组肿瘤标本HIF-1α、VEGF、CD34的表达并计数微血管密度(MVD).结果:体外实验发现,干扰病毒组MiaPaCa2细胞HIF-1α mRNA和蛋白的表达以及VEGF的分泌低于空白对照组(均P<0.01).体内实验发现,干扰病毒组裸鼠移植瘤的生长和HIF-1α、VEGF及CD34的表达也低于空白对照组(P<0.01或P<0.05).而空载病毒组与空白对照组相比,体内外实验结果差别均无统计学意义(均P>0.05).结论:rAAV介导的靶向HIF-1α小干扰RNA有抑制裸鼠MiaPaCa2细胞移植瘤生长的作用,其机制可能是通过抑制移植瘤的血管生成而实现的.     

PI-88 对 TE-13 细胞及裸鼠移植瘤中乙酰肝素酶表达的影响

目的 探讨硫酸化寡聚多糖 （PI-88） 对食管鳞癌细胞株 TE-13 乙酰肝素酶 （Hpa） 表达的影响, 以及对裸鼠人食管癌移植瘤生长、 血管生成及 Hpa 蛋白表达的影响。方法 体外培养 TE-13 细胞, 实验分为 A 组（对照组）、 B组 （15 mg/L PI-88 干预组） 和 C 组 （30 mg/L PI-88 干预组）。培养 36 h 后 Western blot 检测各组细胞 Hpa 蛋白表达。选取 10 只 BALB/c/nu 裸鼠, 皮下接种 TE-13 细胞建立食管癌裸鼠移植瘤模型, 建模成功后随机均分为观察组及对照组。观察组腹腔注射 PI-88 40 mg/ （kg·d）, 对照组给予等剂量生理盐水, 连续注射 14 d。每 2 d 测量移植瘤体积,注射第 14 天处死动物, 剥除移植瘤行 CD34 染色, 检测微血管密度（MVD）。Western blot 及免疫组化染色检测 Hpa蛋白表达。结果 与 A 组相比, B、 C 组细胞 Hpa 蛋白表达量明显降低 （P < 0.001）, 且存在药物浓度依赖性。观察组裸鼠移植瘤体积、 MVD 值、 Hpa 蛋白表达水平及阳性细胞数均低于对照组（均 P < 0.05）。结论 PI-88 可抑制 TE-13 细胞及食管癌裸鼠皮下移植瘤中 Hpa 表达, 并抑制肿瘤生长和血管生成。     

成骨细胞的功能与损伤和骨质疏松的防治

骨质疏松是一种全身性骨骼疾病,导致骨折风险增加。成人的骨量通过破骨细胞的骨吸收和成骨细胞的骨形成作用来维持动态平衡,治疗骨质疏松症的理想策略是抑制破骨细胞的骨吸收和/或增强成骨细胞的骨形成功能。目前针对保护成骨细胞及增强其功能的骨质疏松疗法相对较少。因此,本文针对成骨细胞相关功能蛋白、各种细胞损伤机制（内质网应激、氧化应激、机械过载、微小RNA和长链非编码RNA的影响等）及骨质疏松的治疗与预防作一综述,以期为针对增强成骨细胞功能的骨质疏松治疗策略提供新思路。     

PTEN和DNA含量与非小细胞肺癌侵袭转移的关系探讨

目的 研究非小细胞肺癌(NSCLC)组织中抑癌基因PTEN的表达和DNA含量与NSCLC侵袭、转移的关系.方法 采用免疫组织化学SP方法检测PTEN在78例肺癌标本中的表达,并用流式细胞术检测30例肺癌标本中DNA含量.结果:肺癌标本中PTEN蛋白总缺失率为42.3%,有淋巴结转移组和无淋巴结转移组肺癌表达缺失率分别为52.1%和26.7%(P＜0.05),其表达缺失率随TNM分期增加而上升,分期越晚表达缺失率越高.PTEN缺失率高者生存时间短.DNA指数(DI)的分布范围在1.04～1.93.异倍体肿瘤24例,DI值随TNM分期增加而增加(P＜0.05),与淋巴结转移呈正相关.结论 肺癌组织中PTEN的表达与肺癌淋巴结转移有显著相关性,肺癌细胞DNA含量与肺癌TNM分期及淋巴结转移密切相关.检测PTEN蛋白表达和DNA含量将有助于判断肺癌的转移及预后.     

CD44与肿瘤侵袭、转移及预后的关系

CD44是一种跨膜受体蛋白 ,属于黏附分子家族 ,可与透明质酸等配体结合 ,介导细胞与细胞、细胞与基质之间的黏附。近年来发现CD44及其变异体在许多肿瘤细胞中异常表达 ,且与肿瘤的发生发展及患者的预后存在着一定的关系 ,因此 ,可作为一个辅助性指标预测肿瘤的发展情况     

Seasonal variation of alkaloids of Adhatoda vasica and detection of glycosides and N-Oxides of vasicine and vasicinone

The distribution pattern of the alkaloids of A. Vasica has been studied with change of season. The study also resulted in the detection of glycosides and N-oxides of vasicine and vasicinone.