bcl—2基因与头颈部肿瘤

抗凋零基因ｂｃ12(ＢＣｅｌｌＬｅｕｋａｅｍｉａ/Ｌｙｍｐｈｏｍａ2)是一种原癌基因,最早是从Ｂ细胞淋巴瘤染色体14和18位断裂点ｔ(14∶18)(ｑ31∶ｑ21)中得到,免疫电镜检测ｂｃ12基因表达蛋白定位于细胞内氧自由基产生的位置。如线粒体、核周膜和内质网〔1〕。ｂｃ12是已明确的抗凋亡基因。研究表明ｂｃ12基因与许多肿瘤发生、发展密切相关,可作为评估肿瘤预后的一个参数,是细胞凋亡的调控因子。高等动物中第一个被确认的存活基因就是ｂｃ12基因,它能阻遏程序性细胞凋亡(Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)和延长细胞生命,但不促进细胞增殖〔2〕。关于ｂ…     

APC抑癌基因在人类急性白血病中的杂合性缺失

ＡＰＣ基因是近年来发现的定位于人染色体 5ｑ2 1的抑癌基因 ,目前已被发现涉及多种肿瘤的形成。我们采用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (ＰＣＲ ＲＦＬＰ)方法检测了急性白血病患者 48例的ＡＰＣ基因杂合性缺失 (ｌｏｓｓｏｆｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｓｉ ｔｙ ,ＬＯＨ) ,具体报道如下。对象和方法1　标本　病例组标本取自 1995年 1月～ 9月在福建省血液病研究所就诊患者的骨髓 ,其中未经治疗的初诊或复发的急性非淋巴细胞白血病 (ＡＮＬＬ) 36例 ,急性淋巴细胞白血病(ＡＬＬ) 12例。经Ｆｉｃｏｌｌ Ｕｒｏｇｒａｆｉｎ(华美公司 )密度…     

化疗药物诱导白血病细胞凋亡对Fas/FasL途径依赖性的研究

化疗药物除通过同各自的靶点直接作用外 ,也可以通过诱导细胞凋亡而杀伤肿瘤细胞。文献报道化疗药物诱导白血病细胞凋亡与Ｆａｓ/ＦａｓＬ途径有关[1 3 ] ,我们对此进行了研究 ,并探讨化疗药物与ＦａｓＬ联用的疗效及其机制 ,期望为白血病的治疗提供新的线索。材料和方法1　主要试剂　柔红霉素 (ＤＮＲ)、阿糖胞苷 (Ａｒａ Ｃ)、碘化丙锭(ＰＩ)购自Ｓｉｇｍａ公司 ;原位末端标记 (ＴＵＮＥＬ)试剂盒购自博士德公司 ;可溶性Ｆａｓ配体 (ｓＦａｓＬ) ,小鼠抗人Ｆａｓ单抗 (ＩｇＧ1) ,白血病细胞系ＨＬ 6 0、Ｋ5 6 2、Ｕ937由华中科技大学同济…     

三例变异型Ph染色体的bcr/abl融合基因荧光原位杂交

大约 8 %的慢性粒细胞白血病 (ＣＭＬ)患者有变异型Ｐｈ染色体 (变异Ｐｈ易位 ) ,形态上可将其分为简单型和复杂型。国外有作者用Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和染色体原位杂交技术研究发现 ,变异Ｐｈ易位的ＣＭＬ患者具有ｂｃｒ/ａｂｌ融合基因[1,2 ] 。我们应用双色荧光原位杂交技术 (ｄｕａｌ ｃｏｌｏｒｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ ,Ｄ ＦＩＳＨ) ,检测 3例变异Ｐｈ易位ＣＭＬ患者的ｂｃｒ/ａｂｌ融合基因。对象和方法1　病例　变异型Ｐｈ染色体的ＣＭＬ患者 3例 ,男 1例 ,女 2例 ,发病年龄为 2 5～ 3…     

Fas系统与疾病

Ｆａｓ和ＦａｓＬ分别属于ＴＮＦＲ／ＮＧＦＲ和ＴＮＦ超家族。Ｆａｓ表达于多种细胞表面，其中以活化淋巴细胞、淋巴系恶性肿瘤细胞表达最为丰富。ＦａｓＬ主要表达于活化Ｔ细胞。ＦａｓＬ与Ｆａｓ结合可介导Ｆａｓ细胞凋亡，也可协同刺激Ｔ细胞增殖，Ｆａｓ系统在机体维持自身稳定中起重要作用。该系统的缺损或功能紊乱将导致疾病。     

云南省三民族人FⅧ基因XbaⅠ限制性片段长度多态性研究

血友病甲是由于凝血因子Ⅷ（ＦⅧ）基因缺陷所致的Ｘ染色体连锁隐性遗传性疾病［１］，ＦⅧ基因定位于Ｘ染色体长臂末端２区８带（Ｘｑ２８）全长约１８６ｋｂ，包括２６个外显子和２５个内含子。目前多利用ＤＮＡ限制性内切酶片段长度多态性（ＲＦＬＰｓ）［２］和可变数...     

早幼粒细胞白血病锌指基因与白血病的关系

近年来 ,随着对白血病细胞遗传学及分子生物学研究的深入 ,逐渐揭示了不少白血病的发病机制 ,并发现了一些与白血病发病密切相关的基因 ,早幼粒细胞白血病锌指基因(ｐｒｏｍｙｅｌｏｃｙｔｉｃｌｅｕｋｅｍｉａｚｉｎｃｆｉｎｇｅｒ,ＰＬＺＦ)即为其中之一。现就ＰＬＺＦ基因的分子结构、与白血病发病机制的关系等方面的研究进展综述如下。1　ＰＬＺＦ的分子结构　ＰＬＺＦ基因定位于 11号染色体(11ｑ2 3) ,ＰＬＺＦ基因编码一个含 6 73个氨基酸的蛋白质 ,其相对分子质量约为 90× 10 3,属于一类被称为ＺＩＤ (ｚｉｎｃｆｉｎｇｅｒｐｒｏｔ…     

bcl-2基因转染阻断Fas介导的Jurkat细胞凋亡

目的：通过ｂｃｌ２阻断Ｆａｓ介导的细胞凋亡了解ｂｃｌ２基因在淋巴瘤癌变过程中逃避机体免疫监控的作用机制。方法：应用基因重组技术重组ｐＬＸＳＮｂｃｌ２，采用电穿孔法将其与空载体分别转染包装细胞系ＰＡ３１７，将阳性克隆病毒上清感染人Ｔ淋巴瘤细胞株Ｊｕｒｋａｔ，用Ｇ４１８筛选，其阳性克隆进行免疫组化检测，应用抗Ｆａｓ抗体诱导细胞凋亡来模拟细胞毒Ｔ细胞的杀伤机制，观察ｂｃｌ２在淋巴瘤逃避免疫机制中的作用。结果：转染人ｂｃｌ２基因的Ｊｕｒｋａｔ（Ｊｕｒｋａｔｂｃｌ２）细胞较对照Ｊｕｒｋａｔ及转染空载体Ｊｕｒｋａｔ（Ｊｕｒｋａｔｎｅｏ）细胞，ｂｃｌ２表达量明显增加，而Ｆａｓ基因表达量无明显变化。其Ｊｕｒｋａｔｂｃｌ２能明显耐受抗Ｆａｓ抗体诱导的细胞凋亡。结论：人ｂｃｌ２基因在淋巴瘤中过量表达，能部分阻断抗Ｆａｓ抗体诱导的细胞凋亡，ｂｃｌ２基因过量表达可能是淋巴瘤癌变过程中逃脱机体免疫监控的机制之一。     

BCR基因重排的儿童急性淋巴细胞白血病

ＢＣＲ基因重排的儿童急性淋巴细胞白血病金晓明，林坤治，李奇志，吕联煌，郭瑞官，邓国仁ｂｃｒ（ｂｒｅａｋｐｏｉｎｔｃｌｕｓｔｅｒｒｅｇｉｏｎ，断裂点密集区）基因长５．８ｋｂ，位于ＢＣＲ基因的中部，定位于人染色体的２２ｑ１１．２１。已知该区域断裂与慢性粒...     

竞争性逆转录-聚合酶链反应和毛细管电泳定量检测慢性髓系白血病患者bcr/abl mRNA

ｂｃｒ ａｂｌ融合基因绝大部分融合方式为ｂ3ａ2或ｂ2ａ2型。我们根据竞争性逆转录 酶合酶链反应 (ＲＴ ＰＣＲ)的原理 ,设计和构建了该基因的竞争性参照物 ,并利用毛细管电泳技术对竞争性ＲＴ ＰＣＲ的产物进行分离分析 ,建立了对该基因精确的定量分析方法。材料和方法1　细胞标本　Ｋ5 6 2细胞系 (含ｂ3ａ2型融合基因 )和ＨＬ 6 0细胞系为本室冻存。含ｂ2ａ2型融合基因的白血病细胞采自1例住院慢性髓系白血病 (ＣＭＬ)患者。ＲｉｂｏＭＡＸＴＭ 体外转录试剂盒购自Ｐｒｏｍｅｇａ公司。毛细管电泳无胶筛分ＤＮＡ专用试剂盒购自中国科学…     

肝癌相关基因及其表达产物的研究

自 198 4年顾建人等对原发性肝癌及肝癌 740 2细胞株ＤＮＡ转染ＮＩＨ/ 3Ｔ3所得转化细胞的研究证明存在人Ｎ ｒａｓ基因顺序以来 ,肝癌基因研究十分迅速。已证明与肝癌有关的癌基因有Ｎ ｒａｓ,Ｃ ｆｍｓ,Ｐ53 ,Ｃ ｍｙｃ ,ＩＧＦ -Ⅱ ,Ｐ16、Ｐ15等。1　Ｎ ｒａｓ基因　Ｎ ｒａｓ基因家族 ,位于人类染色体 1Ｐ1～ 3位置上 ,其表达产物为分子量 2 1ＫＤ的内膜蛋白 ,具有ＧＴＰ结合的活性 ,通过Ｃ -端的 4个氨基酸与脂类结合定位于细胞膜内表面 ,其作用是在细胞生长和代谢过程中将表皮样生长因子 (ＥＧＦ)和胰岛素的刺激信号传入相应的靶细…     

抗人重组可溶性组织因子单克隆抗体的制备及鉴定

组织因子 (ＴＦ)作为血液凝血因子Ⅶ (ＦⅦ )和活化的血液凝血因子Ⅶ (ＦⅦａ)的受体和辅助因子 ,是生理性和病理性凝血过程的始动因子。可溶性组织因子 (ｓＴＦ)为ＴＦ的胞外区(1～ 2 19氨基酸 ) ,具备ＴＦ连接ＦⅦａ及催化ＦⅦａ所必需的全部结构。ｓＴＦ作为抗原较全长ＴＦ具有相对分子质量小、针对性强的特点。我们以重组人可溶性组织因子 (ｒｈｓＴＦ)为抗原 ,制备了抗ｒｈｓＴＦ单克隆抗体 (ＭｃＡｂ) ,并对抗体进行了鉴定。材料和方法1　材料　细胞和实验动物 :ＳＰ2 / 0细胞由中南大学湘雅医学院肿瘤免疫室提供。ＢＡＬＢ/ｃ小鼠购…     

外源性野生型p53基因对HL-60细胞的作用

野生型ｐ5 3基因是一种肿瘤抑制基因 ,急性髓系白血病(ＡＭＬ)患者伴有 17号染色体异常 [ｉ(17ｑ) ]者ｐ5 3基因点突变的发生率可高达 40 %。大多数ＡＭＬ细胞系 ,如ＨＬ 6 0、ＣＭＫ、ＭＬ 1、Ｕ937均可检出ｐ5 3基因严重缺失或者突变[1,2 ] 。我们利用脂质体介导法将两种ｐ5 3基因ｐＣ5 3 ＳＮ3(含人野生型ｐ5 3ｃＤＮＡ)、ｐＮ5 3ｃＧ(Ｖａｌ135 ) (32 .5℃表现野生型ｐ5 3基因功能 )分别导入Ｐ5 3蛋白缺失的ＨＬ 6 0细胞中 ,观察它的表达及其对ＨＬ 6 0细胞的影响。材料和方法1　细胞系及培养体系　ＨＬ 6 0细胞由福建省医学科学研究…     

结缔组织生长因子与消化系疾病的研究进展

结缔组织生长因子 (ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｅｔｉｓｓｕｅ ｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＣＴＧＦ)是一种富含半胱氨酸的内分泌多肽 ,相对分子质量为36 0 0 0～ 380 0 0。人结缔组织生长因子 (ｈＣＴＧＦ)是 1991年由Ｂｒａｄｈａｍ等首次在人的脐静脉内皮细胞 (ＨＵＶＥＣ)的条件培养基中发现的[1] 。它是一个包含 349个氨基酸的多肽。其基因定位于染色体 6 ｑ2 3.1,包含 5个外显子和 4个内含子 ,其中外显子与蛋白质的解码、表达有关。它的起始位点为ＡＴＧ ,其 3’端包含 3个ＡＴＴＴＡ位点。ＣＴＧＦ基因属即刻早期生长反应性基因 ,参与调节细…     

应用荧光原位杂交技术筛选bcr基因探针及分析微小残留病

目的　定量检测慢性髓细胞白血病（ Ｃ Ｍ Ｌ） 造血干细胞移植（ Ｈ Ｓ Ｃ Ｔ） 后ｂｃｒ 基因重排。方法　应用荧光原位杂交（ Ｆ Ｉ Ｓ Ｈ） 技术,从 Ｃ Ｅ Ｐ Ｈ 酵母人工染色体（ Ｙ Ａ Ｃ） 文库的３ 个ｂｃｒ 相关候选克隆中筛选探针,并对７ 例造血干细胞移植后病人进行检测,同时进行细胞遗传学和逆转录聚合酶链反应（ Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ） 分析。结果　确定了定位于２２ｑ１１ ｂｃｒ 基因区域且可在 Ｐｈ 染色体阳性细胞中易位至９ｑ３４的 Ｙ Ａ Ｃ 克隆７６５ Ｅ３ ,应用该 Ｙ Ａ Ｃ Ｄ Ｎ Ａ 探针进行荧光原位杂交,发现７ 例病人中５ 例存在ｂｃｒ 易位阳性细胞（６ ％ ～９８ ％ ） ,常规 Ｇ 显带检出３ 例, Ｐ Ｃ Ｒ 检出６ 例。结论　 Ｆ Ｉ Ｓ Ｈ 可能成为白血病造血干细胞移植后疗效观察和微小残留病定量监测的重要手段。     

神经纤维瘤病2型的基因与治疗

神经纤维瘤病 (ｎｅｕｒｏｆｉｂｒｏｍａｔｏｓｉｓ,ＮＦ) ,又称之为ＶｏｎＲｅｃｋｌｉｎｇｈａｕｓｅｎ病。是由于基因缺陷导致神经嵴细胞发育异常而引起多系统损害的常染色体显性遗传病。根据临床表现和基因定位 ,ＮＦ分为 1型和 2型。本文主要介绍ＮＦ2的基因和治疗。1　分子遗传学基础神经纤维瘤病 2型遗传性最早由Ｆｅｉｌｉｎｇ和Ｗａｒｄ于 1 92 0年报道了 3个听神经瘤家族后提出。由于嵌合作用遗传率少于 50 %。 1 987年 ,提出其致病基因位于人类的第 2 2对染色体。研究发现它是一个抑癌基因。 1 993年人们确认了ＮＦ2基因的蛋白…     

Fas-Fas配体在血液病中的研究进展

Ｆａｓ(Ｆａｃｔｏｒａｓｓｏｃｉａｔｅｄｓｕｉｃｉｄｅ) Ｆａｓ配体 (ＦａｓＬｉｇａｎｄＦａｓＬ)是一对细胞程序性死亡介导分子 ,在诱导细胞凋亡、维持机体自身稳定和保护内环境平衡方面起着重要作用。现就Ｆａｓ/ＦａｓＬ性质、生理作用和在血液病的治疗和预后中的意义作一简要综述。1　Ｆａｓ/ＦａｓＬ的生物学性质及分布Ｆａｓ(Ａｐｏ 1/ＣＤ95 )是一种由 319个氨基酸组成的细胞表面蛋白 ,Ｆａｓ蛋白属Ⅰ型跨膜蛋白 ,是神经生长因子受体 /肿瘤坏死因子超家庭 (ＮＧＦ/ＴＮＦ)成员。Ｆａｓ的可溶性形式(ｓＦａｓ)由蛋白水解酶水解膜…     

bcr／abl基因抑制髓系细胞凋亡与慢性髓细胞白血病反义基因治疗

ｂｃｒ／ａｂｌ基因抑制髓系细胞凋亡与慢性髓细胞白血病反义基因治疗戴木水综述洪文德审校慢性髓细胞白血病（ＣＭＬ）细胞遗传学特征是具有Ｐｈ染色体，即ｔ（９；２２）（ｑ２３；ｑ１１），结果形成ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因，编码２１万的ｂｃｒ／ａｂｌ融合蛋白（Ｐ２...     

Fas抗原—配体系统与肝脏疾病研究进展

Ｆａｓ抗原和Ｆａｓ配本是细胞表面的两种跨膜蛋白。当一个细胞的Ｆａｓ与另一细胞的ＦａｓＬ相结合时,可以导致表达Ｆａｓ的细胞凋亡;Ｔ淋巴细胞表达ＦａｓＬ可以使表达Ｆａｓ的肝细胞凋亡,Ｆａｓ诱导的肝细胞凋亡在某些肝脏疾病的发生发展中起重要作用。     

急性呼吸窘迫综合征患者肺组织Fas/FasL系统表达的变化及其意义

目的：探讨细胞凋亡在急性呼吸窘迫综合征（ＡＲＤＳ）发病中的作用及基因调控机制,为进一步阐明ＡＲＤＳ的发病机制和在细胞凋亡水平防治本病提供理论依据。方法：ＡＲＤＳ组９例,对照组５例,采用ＴＵＮＥＬ法以及免疫组化技术观察ＡＲＤＳ患者肺组织Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统表达及细胞凋亡的变化。结果：ＡＲＤＳ早期患者肺组织细胞凋亡率较对照组明显增加,且主要表现为肺泡上皮和肺血管内皮细胞凋亡增加;Ｆａｓ抗原、ＦａｓＬ在ＡＲＤＳ早期患者肺组织表达明显上调,并且Ｆａｓ、ＦａｓＬ表达的增加与肺组织细胞凋亡增加呈平行关系。结论：肺泡上皮和肺血管内皮细胞凋亡增加和Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统活化可能参与临床ＡＲＤＳ早期的发病。