北京地区2008年儿童感染性腹泻病原学分析

目的 研究儿童腹泻的病原学变化.方法 检测9843例腹泻病粪便的轮状病毒(RV)抗原,对其中疑诊细菌腹泻的301份标本做培养.结果 RV检出 2249例,全年发病,有两个高峰.便培养出沙门菌32株,志贺菌13株(B群占9株),致泻大肠杆菌6株,金黄色葡萄球菌19株.便培养证实RV并细菌感染10例.结论 2008年RV腹泻居多;细菌腹泻以沙门菌为主,志贺菌以B群为主,两者易感染2岁以下者,1岁以下易感金葡菌;RV合并细菌性腹泻增多.     

婴幼儿轮状病毒性肠炎与血清心肌酶谱关系的研究

目的分析婴幼儿轮状病毒性腹泻与心肌损伤的关系,探讨血清心肌酶谱检测在婴幼儿轮状病毒性肠炎诊治中的意义。方法收集本院2010年161例腹泻住院患儿的粪便标本,采用免疫层析金标记法检测轮状病毒抗原,并采集血液标本进行血清心肌酶谱检测。结果161例拟诊肠炎患儿的粪便标本,轮状病毒（RV）阳性标本88例,阳性率54．6％,观察组（RV阳性）患儿心肌酶谱检测心肌损害56例,阳性率63．6％,对照组（RV阴性）患儿心肌酶谱检测心肌损害11例,阳性率15．1％,观察组心肌损害阳性率高于对照组,差异有统计学意义。结论粪便中轮状病毒是导致婴幼儿腹泻的主要致病原,心肌酶谱与轮状病毒肠炎具有相关性,对腹泻患儿粪便做轮状病毒抗原及血清心肌酶谱检测,有助于早期及时发现婴幼儿心肌损害,为临床诊断和治疗该病提供有价值的依据。     

绵阳地区轮状病毒感染性腹泻的血清学分型研究

目的：了解绵阳地区轮状病毒感染的流行情况、血清型情况。方法：采用双抗夹心ELISA技术检测RV抗原，采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）对RV病毒株进行血清学鉴定。结果：对222例标本进行ELISA法检测．RV阳性121例，阳性率54．5％；血清型检测共测得G1 36例（29．75％），G2 15例（12．37％），G3 45例（37．19％），G4 19例（15．70％），G9 3例（2．47％）。另有3例未能用现有引物分型。结论：轮状病毒是引起绵阳地区婴幼儿病毒性腹泻的主要原因，绵阳地区流行的RV以G1型为主，其次为G3型。     

腹泻患儿诺如病毒和轮状病毒感染96例临床特点分析

目的分析2007年和2008年9～12月昆明地区部分婴幼儿秋冬季腹泻散发病例中诺如病毒（norovirus,NoV）感染,诺如病毒和轮状病毒（rotavirus,RV）混合感染情况及其临床特点.方法收集2007年9～12月及2008年9～12月在昆明医学院第一附属医院儿科住院的腹泻患儿的粪便标本96份,其中2007年有46份,2008年有50份.用＂胶体金法＂检测A群轮状病毒（RV）抗原.应用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）扩增标本中诺如病毒核酸.结果 96份标本共有60份检出RV阳性,阳性检出率为62.5%;12份检出NoV阳性,阳性检出率为12.5%,其中5例同时两种病毒阳性,混合感染的阳性检出率为5.2%.结论昆明地区秋冬季腹泻病原以轮状病毒多见,诺如病毒次之,也出现两种病毒的混合感染.混合感染时临床症状加重,病程延长,并发症增加.     

婴幼儿轮状病毒两种检测方法的比较

目的：比较轮状病毒（RV）金标免疫层析法（GICA）和电镜法（EM）,为实验室合理选择检测方法提供依据。方法：采用GICA和EM法对120例婴幼儿腹泻标本和100例正常婴幼儿粪便标本进行检测,计算阳性率,并对其检测结果进行统计学分析与比较。结果：EM法的阳性率37.5%（45/120）高于（GICA）法的阳性率33.3%（40/120）,差异有统计学意义（Kappa=0.392,χ2=19.64,P〈0.01）。两种方法对正常对照组进行检测,结果均为阴性。结论：GICA法和EM法检测婴幼儿粪便中轮状病毒,结果有明显差异。EM法阳性率高,而GICA法低,并且两种方法的假阳性率几乎不存在。     

抚州市儿童腹泻病轮状病毒流行病学研究

目的探讨儿童腹泻病轮状病毒（PV）的流行病学及其影响因素。方法收集抚州市妇幼保健院2011年6月-2013年5月收治的腹泻病患儿粪便1168例,采用胶体金免疫层析法检测RV抗原。结果1168例中RV阳性445例,阳性率5809％,9416％的腹泻发生在2岁以下患儿,阳性率最高的月份是10月,其中母乳喂养RV阳性检出19I例（16.35％）,人工喂养781例（66.87％）,混合喂养RV阳性检出196例（16.78％）,母乳喂养低于人工喂养,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论抚州市妇幼保健院住院腹泻病患儿轮状病毒感染率高峰在10月份,0～〈24月龄的患儿RV腹泻比例最大,与卫生及喂养方式有关,RV腹泻易引起脱水。     

两次婴幼儿急性胃肠炎流行的病原学研究

本文报道1979年冬和1980年秋江苏省两次婴幼儿急性胃肠炎流行的病原学研究。从37例患儿粪便中,电子显微镜检查见典型轮状病毒(Rota virus)颗粒者24例(65%)。部分电镜阳性标本和患儿恢复期血清的免疫电镜检查,可见凝聚成堆的病毒颗粒,有的颗粒之间隐约可见抗体桥。对31例标本在人胚肾细胞上作常规病毒分离,有4例表现为肠道病毒的细胞病变,其中2例为电镜检查轮状病毒阳性者。     

轮状病毒细胞培养的若干研究

轮状病毒(RV)细胞培养问题迄今尚未完全解决。为此,我们从筛选RV 敏感细胞和改变 RV 培养条件入手研究,发现恒河猴胚肾传代细胞 Frhk-4对不同血清型的人和动物 RV 标准株敏感,感染后有明显 CPE。将刀豆素 A(Con A)加入营养液中,在细胞生长过程中预处理细胞时,能显著增加 Wa 株的空斑数目和增殖滴度,加速 CPE 的发展,而用 Con A 预处理病毒、加入病毒接种液或加入凝胶覆盖物时,则明显抑制 Wa 株的空斑形成。此外,我们发现,Wa 株经细胞培养多次传代后,有变异株产生,所分离到的3个克隆株的基因图谱与原始 Wa 株有明显差异。对此,国内外均未见报道。     

人轮状病毒感染的几种实验室诊断方法比较研究

本实验采用醋酸纤维膜对流免疫电泳(CIEP)、聚丙稀酰胺凝胶电泳(PAGE)酶联免疫吸附试验(ELISA),对经直接电镜(DEM)证实轮状病毒阳性或阴性的腹泻患儿的粪便标本进行检测,以比较它们检出轮状病毒的敏感性。结果表明:40例轮状病毒阳性粪便标本,CIEP有38例呈现明显沉淀线(38/40),ELISA有37例呈现阳性(37/40);19例轮状病毒阳性粪液,PAGE检测有12例轮状病毒dsRNA阳性。它们的敏感性为CIEP与DEM和ELISA相似,PAGE比DEM低。我们认为CIEP和PAGE的设备简单、操作方便、诊断快速,适用于一般医院常规病毒实验诊断。     

6个月以内婴儿急性腹泻病原学及有关发病因素分析

目的研究6个月以内婴儿腹泻病的病因及病原流行病学特点。方法选择2002年1月至2003年12月在我院感染消化科就诊的6个月以下婴儿腹泻患儿192例,对其粪便标本采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测诺如病毒抗原,用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）检测轮状病毒并对粪便标本进行细菌培养。抽取58例患儿血清用荧光分光光度计检测维生素A含量,通过问卷调查获得喂养方式。结果192份标本中检测出诺如病毒17例,占8．8％：轮状病毒48例,占25％;病原菌42株,占21．9％。纯母乳喂养32例,占16．7％;人工与混合喂养160例．占83.3％。58例腹泻患儿中43例（74．1％）维生素A缺乏[维生素A≤（0．70±0．40）μmol／L]。结论6个月以下婴儿腹泻的主要病原为病毒及条件致病菌。母乳喂养可减少腹泻的发病率。维生素A缺乏亦可为感染性腹泻病的发病因素之一．     

STRAIN OF HEPATITIS A VIRUS CAUSING CYTOPATHIC EFFECTS ISOLATED IN A549 CELL LINE

A strain (named BJ-1) of hepatitis A virus (HAV) causing cytopathic effects (CPE) has been isolated in A549 cell cultures from a fecal specimen of an infant with hepatitis A. Hepatitis A antigen (HAAg) w3s detectable in about 50To of the cells by immunofluo- rescence (IF) assay. The viral antigenicity was spe- cifically identified by monoclonal anti-HAV and chim- panzee reference antiserum to HAV (NIH). HAV particles in crystal arraDgement were observed in cell cytoplasm by electron microscopy in ultrathin sec tions. The particles appeared both "empty" and "full". It was observed that many 27-30 nm virtts particles were aggregated by convalescent human he- patitis A sera and chimpanzee HAV antisera observ- ed by immune electron microscopic (IEM) ex- amination. BJ-1 HAAg could be detected on day 34 after inoculation at the initial passage. The virus titers increased and the virus replication cycle short- ened with serial passages. The highest TCID 50 was 10-5/0.1 ml and the shortest replication cycle 2-3 days. IF kit consisting of BJ-1 HAV infected A549 coverslip culture and sheep fluorescence antibody to human IgM were made to detect anti-HAV IgM. Comparing the BJ-t IF with the Abbott EIA HAVAB- M kit. the coincidence rate was 98.4% (246/250).     

C6/36细胞系分离登革1型病毒的方法学探讨

目的应用C6/36细胞系3种细胞分离方法分离血清中登革1型病毒并探讨其分离效率。方法采用血清预稀释法,将已鉴定为登革I型病毒的阳性血清作10^-1-10^-10等10个10倍梯度稀释并接种于长满单层C6/36细胞的培养管;采用共培养法,将血清作50至6400等8个梯度倍比稀释,再加等体积C6/36细胞悬液作共培养;采用直接接种法,将25μl、50μl、100μl、150μl、200μl血清接种于长满单层C6/36细胞的培养管。连续7d,每天观察细胞生长情况,收获细胞分离液并提取核酸,然后采用Real-time PCR检测其CT值。结果血清标本呈登革I型病毒阳性,CT值为26.3;血清预稀释法与共培养法均未发现由血清毒性引发的非特异性细胞病变,除了10^-10稀释度呈弱阳性外,其余稀释度的CT值均在11-15之间。直接接种法中25μl、50μl接种量培养管未发现由血清毒性引起明显的非特异性细胞病变,检测其CT值约为19,100μl、150μl、200μl接种量的细胞第2d就因血清毒性完全被破坏。结论3种方法都能成功分离登革1型病毒,降低血清对细胞的干扰作用能提高分离效率。     

出血性大肠杆菌O157：H7 vero细胞毒素抗体的保护性研究

目的:在体外研究vero细胞毒素抗体的保护作用。方法:用从出血性大肠杆菌O157:H7中纯化的一种新的vero细胞毒素来免疫家兔,获得多克隆抗体。用不同剂量抗体,在不同时间段与此vero细胞毒素进行vero细胞毒性试验。结果:高剂量的抗体预先处理过的vero细胞,可以受到抗体保护,毒素的细胞毒作用被抑制。预先用毒素作用vero细胞后,一小时内给予大剂量抗体可以部分抑制毒素的细胞毒作用。结论:本试验提示用抗毒素紧急预防和治疗Vero细胞毒素引起的疾病是可行的。     

Reference ranges for lymphocyte subsets in healthy adult male Omanis

OBJECTIVE: To determine the reference ranges of lymphocyte subsets in serologically HIV-seronegative healthy male adults in Oman. METHODS: A cohort, of 118 healthy male blood donors ranging in age from 18-51 years, was included in the study. The average age was 25 years. Blood samples collected into tubes containing ethylene-diamine-tetra acetic acid were investigated for lymphocyte subsets using flow cytometer. This study was conducted in the Immunology Laboratory of the Sultan Qaboos University, College of Medicine and Health Sciences, Muscat, Oman during the year 2006. RESULTS: For the 118 males investigated, the mean percentage and absolute values of the lymphocyte subsets were as follows: CD3: 68.53 +/- 7.5%, 1701 +/- 489 cells/microliter; CD4: 40.4 +/- 6.5%, 1006 +/- 319 cells/microliter; CD8: 25.8 +/- 5.9%, 638 +/- 225 cells/microliter; CD19: 13.7 +/- 4.7%, 349 +/- 158 cells/microliter, and CD56: 12.2 +/- 6.7%, 308 +/- 204 cells/microliter. The ratio of CD4/CD8 was 1.6. CONCLUSION: Immunophenotyping has been used to establish reference values of lymphocyte subsets in normal healthy adult males in Oman. The Omani male reference values obtained in this study show wide variations compared with kits values previously used as a reference.     

肿瘤坏死因子α在抗鼠衣原体生殖道感染过程中的作用

目的 探讨肿瘤坏死因子α（TNF-α）在抗衣原体感染免疫以及介导衣原体生殖道病理损伤过程中的作用。方法 以5~6周龄雌性C57BL/6J野生型小鼠及TNF-αR基因敲除小鼠为研究对象,野生型和TNF-αR基因敲除两组各15只小鼠,经生殖道感染1×104包涵体形成单位的鼠衣原体,初次感染后第56天,每组8只小鼠再次感染同等剂量的鼠衣原体。每隔3~4 d 取小鼠生殖道分泌物用于衣原体包涵体数目的检测。于初次感染后第80天处死小鼠,收集小鼠腹腔巨噬细胞,并分离生殖道和脾脏。观察输卵管和子宫角病理损伤程度,并采用盲法对管腔扩张以及炎性细胞浸润程度进行半定量分析;测定小鼠巨噬细胞培养上清中的IL-6、IL-8、IL-1α、IL-1β和TNF-α等前炎症因子水平;制备脾细胞悬液,体外经衣原体EB刺激后检测其产生的IL-4、IL-5、IL-17和 IFN-γ 等细胞因子水平。结果 TNF-αR 基因敲除组生殖道衣原体清除速度与野生型组基本一致,与初次感染或再次感染无 关;两组小鼠子宫角和输卵管的炎症程度差异没有统计学意义（P>0.05）,但TNF-αR基因敲除组输卵管水肿程度明显低于野生型组（P<0.05）。腹腔巨噬细胞细胞因子检测结果显示,TNF-αR基因敲除小鼠的TNF-α水平高于野生型小鼠（P<0.05）;脾细胞细胞因子水平显示,两组小鼠脾细胞均产生较高水平的IFN-γ,TNF-αR基因敲除小鼠产生的IL-17细胞因子水平低于野生型小鼠（P<0.05）。结论 TNF-α对小鼠生殖道清除鼠衣原体感染无影响,但可促进鼠衣原体引起的生殖道炎症病理损伤。     

双J管在肾输尿管手术中的应用及护理

目的探讨双J管在肾输尿管手术中的应用价值及护理。方法对62例在肾输尿管手术中应用双J管患者的临床资料进行回顾性分析。结果62例中,58例通过膀胱镜顺利将双J管取出;2例女性患者在排尿时尿出丝线而直接牵出;2例因双J管向上移位,经输尿管镜取出。置管期间,出现膀胱刺激征及肾区不适21例,泌尿系感染3例。无尿漏及输尿管梗阻及吻合口狭窄发生。结论在肾输尿管手术中应用双J管方便、安全、可靠,加强术后护理可减少并发症。     

复制缺陷型重组腺病毒rvAdG1VP7免疫学效果的研究

目的对1株可表达A组轮状病毒主要结构抗原VP7的重组腺病毒rvAdG1VP7的体内免疫学效果进行研究.方法通过灌胃和滴鼻2种途径对BALB/c小鼠进行免疫,并对免疫后小鼠体液和黏膜免疫进行分析.结果初次免疫后,2组小鼠均有应答,但血清IgG抗体滴度及阳转率不同.再次免疫后,显示出明显的加强效果.除了血清IgG外,小鼠还产生了较强的针对轮状病毒的血清IgA.滴鼻组在肺灌洗液和肠匀浆液中均可检测到SIgA,灌胃组仅在肠道检测到SIgA.滴鼻组的免疫学效果明显优于灌胃组.对滴鼻组小鼠肺灌洗液IgG/SIgA的阳转率进行了比较,发现IgG的应答水平明显高于SIgA.免疫后小鼠血清中IgG的动态观察表明,抗体可长期持续至少半年以上.结论重组腺病毒载体rvAdG1VP7所取得的良好免疫学效果,为我国具有自主知识产权的新型轮状病毒基因工程疫苗的进一步研制奠定了基础.     

Powassan Virus: Morphology and Cytopathology

Powassan virus, a North American tickborne group B arbovirus, multiplied after simultaneous inoculation into bottles or tubes of virus and trypsinized suspension of continuous-line cultures of rhesus monkey kidney cells, strain LLC-MK2. Cytopathic effects comprising cell rounding and cytoplasmic vacuolation were first observed five days after inoculation. Mixture of Powassan antiserum with virus before inoculation into tissue cultures inhibited the appearance of cytopathic effects. Hemagglutinins for rooster erythrocytes, optimally at pH 6.4 and 22° C., first appeared in tissue culture supernatant fluids four days after inoculation.

Electron microscopic observation of thin sections of infected tissue culture cells showed virus particles 360-380 A.U. along outer cell membranes and edges of cytoplasmic vacuoles. In phosphotungstic acid negatively stained preparations, intact virus particles, 400-450 A.U. total diameter, were observed inside infected cells. In particles in which the peripheral layer became discontinuous, geometrically arranged subunits compatible with cubic symmetry were observed.

     

Humoral antibody responses of swine infected experimentally with group E streptococcus. I. Whole cell agglutinin response

Reference streptococcal antisera and sera collected from swine infected experimentally (by intranasal inoculation or contact exposure) with group E Streptococcus (GES) were studied in a tube agglutination system using whole GES cells.Specificity studies revealed common group specific antigen among GES serotypes I and III, GES strains devoid of type specific antigen (untypable by ring precipitin testing) and group P and group U Streptococcus. The group specific antigens were not agglutinated by GES type specific antisera or by group specific antisera against Streptococcus groups A, B, C, D, F, G, H, K, L, M, N, or O. Results of the study suggested that GES serotypes I and III are invalid; i.e., they are devoid of type specific antigen.Groug E Streptococcus type specific antigens II, IV, and V were agglutinated significantly only by their homologous antisera.Experimentally infected swine developed significant titers against both the group and type specific antigen of GES. Antibodies appeared from three to eight weeks postexposure and persisted for the duration of the experiment (six months). The potential utilization of the whole cell agglutination (WCA) test for detection of GES carrier swine is discussed.     

硅酸二钙离子溶出液体外促进成骨细胞早期增殖及对细胞周期的影响

目的探讨硅酸二钙涂层离子溶出液对成骨细胞早期增殖和细胞周期的影响及其机制。方法含有硅酸二钙离子溶出液的DMEM培养基作为实验组,正常DMEM培养基作为对照组,分别接种人成骨细胞株MG63细胞培养。MTT法测定细胞增殖情况;流式细胞仪测定成骨细胞G0/G1、S、G2/M期变化,并进行比较。结果与对照组比较,实验组MG63细胞增殖在各时间点增强,其中24、72h的差异有统计学意义（P〈0.05）;在48、72h,处在S期和G2/M期的细胞增多;而G0/G1期细胞降低,差异均有统计学意义（均P〈0.05）;结论硅酸二钙涂层离子溶出液能加速成骨细胞周期,进而促进细胞增殖,促进新骨的形成。因此,该材料是一种较理想的生物活性涂层材料。