氧化应激性损伤对不育男性精子功能的影响

目的 探讨活性氧(ROS)生成剂及清除剂对不育男性精子氧化应激性损伤的作用.方法 取30例不育男性精液,每例精液平均分成3份,分别加入ROS生成剂FeSO4/H2O2体系、ROS清除剂过氧化氢酶(CAT)和不处理的对照组,观察精子存活率、a+b级精子、低渗膨胀率、丙二醛(MDA)水平.结果 加入ROS生成剂后,精子存活率、a+b级精子、低渗膨胀率均明显下降(P<0.01),MDA水平明显上升(P<0.01).加入ROS清除剂后,得出与ROS生成剂相反的结果.结论 ROS生成剂能明显加重精子的氧化应激损伤,ROS清除剂能减轻这一损伤,有效改善精子质量,为治疗男性不育提供了新思路.     

西维因致男性工人精子DNA损伤的机制初探

目的:探讨西维因农药暴露与男性工人精子DNA损伤的关系,并探讨其可能的机制?方法:选择某农药厂西维因生产男工31名为暴露组;该厂行政区男性员工36名为内对照组;同地区男性行政人员22名为外对照组?检测3组人群精子DNA损伤?精浆超氧化物歧化酶(SOD)活性及精子活性氧(ROS)含量?选用培养的小鼠精母细胞(GC2-spd细胞)进行体外功能学验证,在不同浓度西维因染毒条件下,分析细胞存活率?凋亡及SOD活性,ROS含量的变化?结果:与内?外对照组相比,暴露组男性精子DNA断裂损伤显著增加(P < 0.05)?精浆SOD活性降低及精子ROS增加(P < 0.05)?相关性分析的结果显示,精子DNA损伤与精浆SOD的活性负相关(r=-0.53,P < 0.001),与精子ROS水平呈正相关(r=0.32,P=0.002)?小鼠精母细胞随西维因染毒剂量增加细胞存活率显著下降,凋亡增多并且细胞SOD减少及ROS增加(P < 0.05)?结论:西维因可影响男性精液质量,其可能的机制是通过氧化应激导致精子DNA的损伤?     

乙酰左旋肉碱对人精子冷冻过程中氧化损伤的作用

目的:比较添加乙酰左旋肉碱的冷冻保护剂对人精子的冻存效果。方法:将30例患者的精液标本(15例正常精子与15例弱精子)液化,并PureSperm梯度离心处理后分为8组,分别为对照组(A1/A2组,仅冷冻保护剂),B1/B2组(2.5mmol/L乙酰左旋肉碱),C1/C2组(7.5mmol/L乙酰左旋肉碱),D1/D2组(15mmol/L乙酰左旋肉碱),液氮中冷冻2周,比较冻融前后各组精子存活率、活力、DNA完整性和活性氧(ROS)水平。结果:无论是正常精子组或弱精子组,精子解冻后的活力、存活率、DNA完整性较冷冻前下降,ROS水平升高。A1/A2组与B1/B2组精子解冻后的活力、存活率、DNA完整性和ROS水平比较无差异。C1/C2组和D1/D2组精子解冻后的活力、存活率、DNA完整性和ROS水平较A组明显升高,但C1/C2组和D1/D2组各项指标相比无差异。结论:玻璃化冻存对精子存在损伤,含7.5mmol/L乙酰左旋肉碱的冷冻保护剂可以提高人类精液的冻存效果。     

玻璃化冷冻与慢速冷冻对微量精子活动力和DNA完整性的影响

目的比较玻璃化冷冻与慢速冷冻微量精子对精子活力和DNA完整性的影响。方法取70份正常精液标本上游处理后,每份标本分别进行慢速冷冻和玻璃化冷冻。观察冷冻前及2组冷冻组复苏后精子活动率和DNA碎片指数（DFI）,比较两种方法的冷冻效果。结果冷冻前精子活动率和DNA碎片指数分别为（93.24±2.26）%和（6.70±5.78）%;玻璃化冷冻复苏后精子活动率及DFI分别为（63.07±6.69）%和（9.26±7.00）%;慢速冷冻复苏后精子活动率及DFI分别为（63.99±5.88）%和（9.58±6.89）%。两种方法复苏后精子活动率均较冷冻前显著性降低（P〈0.05）,两种方法复苏后精子DFI均较冷冻前显著性升高（P〈0.05）,两种冷冻方法复苏后精子活动率和精子DFI差异无统计学意义（P〉0.05）。结论玻璃化冷冻和慢速冷冻均导致精子活动率下降及DNA损伤,但两种冷冻方法之间无显著差异。     

活性氧类物质对精子DNA的损伤及其检测

活性氧类物质（ROS）产生过多会破坏精子核内DNA的完整性，促进了一系列男性生殖功能的病理学改变。DNA损伤发生DNA断裂（DSBs）均可诱导H2AX的磷酸化（γH2AX）和簇集。近年来γH2AX识别抗体免疫荧光法是检测DNA双链断裂的热点之一。     

氟对人胚肝细胞氧化应激、DNA损伤及凋亡的影响

目的 研究氟对人胚肝细胞(L—02细胞)氧化应激、DNA损伤及诱导凋亡的作用。方法 体外培养的L-02细胞接触40、80、160μg／ml氟化钠24h，检测L—02细胞脂质过氧化物(LPO)水平，还原型谷胱甘肽(GSH)含量，DNA损伤率，细胞凋亡率和周期构成比的情况。结果 氟可使L—02细胞LPO水平升高，GSH含量下降，并且二者均与氟浓度呈明显的剂量-效应关系；氟可使L—02细胞DNA损伤率、凋亡率和S期细胞数明显升高，高剂量氟组DNA损伤率和凋亡率与低剂量氟组之间存在显著性差异。结论 氟可致L—02细胞出现氧化应激，引起DNA损伤，诱导细胞凋亡，并且三者之间存在明显的相关关系。     

冷冻方法对人精子功能的影响

低渗膨胀试验(HOST)是利用正常精子尾部细胞膜在低渗溶液中的膨胀形态,作为判断精子授精能力的一种间接实验手段。1966年以来,该手段在欧美已广泛用于哺乳动物,特别是牛精子的功能研究。由于它具有操作简     

男性不育症精子DNA损伤研究进展

男性因素不育目前的评价手段主要是精液常规分析，而大约15％的男性因素不育患者有一个正常的精液分析，故不能对男性生育能力和辅助生殖的预后进行准确评价。精子DNA的完整性对于精确传递遗传物质至关重要，精子DNA损伤作为一种新的精子功能评价指标受到越来越多的关注，本文对其近年来研究进展进行综述如下。     

抗氧化剂改善冻融人精子氧化应激性DNA损伤的研究

目的 探讨抗坏血酸盐、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)对冻融人精子氧化应激性DNA损伤的可能保护作用.方法 30份健康可生育男性精液分别添加改良人精子冷冻保护液,依所添加的抗氧化剂及终浓度分6组;检测各组冻融前后常规精子参数,精子核DNA完整性以及冻融后活性氧(ROS)水平.结果 (1)冻融后抗坏血酸盐300 μmol/L组与CAT 200 U、400 U组a+b级精子下降少于对照组(均P＜0.05),精子活率复苏率、ROS水平则分别高于和低于对照组(67%±14%、68%±14%、69%±15%vs 59%±10%,均P＜0.05;30±13、30±11、30±11 vs 37±17,均P＜0.05).(2)添加抗坏血酸盐300 μmol/L组,CAT 200 U、400 U组的彗星细胞尾部DNA百分比及Olive尾矩与冷冻前相比,差异无统计学意义(P＞0.05);但分别低于对照组(41%±4%、40%±7%、40%±6%vs 46%±6%,均P＜0.01;7.7±1.2、7.5±1.6、7.8±1.9 vs 10.1±3.1,均P＜0.01).其余试验组上述指标则明显高于冷冻前(均P＜0.01),而与对照组差异无统计学意义(P＞0.05).(3)冻融后各实验组a+b级精子与ROS水平有负相关性(P＜0.05或P＜0.01).除抗坏血酸盐600 μmol/L组外,其余试验组尾部DNA%、Olive尾矩则分别与其对应组ROS有显著正相关性(P＜0.05、P＜0.01).结论 在精液冷冻保护剂中添加一定浓度的抗坏血酸盐、CAT可减少冷冻产生的过量ROS,进而减轻后者对精子核DNA的氧化应激性损伤,从而提高冻融人精子质量.     

精子DNA完整性对复发性流产的影响

目的 探讨精子DNA完整性与复发性流产的相关性.方法 病例来自于2015年1月至2016年6月在我院流产门诊就诊的夫妇,选取复发性流产患者丈夫作为研究组(n=37)和正常生育男性作为对照组(n=30).取两组精液进行常规分析,同时采用精子染色质结构分析法(SCSA)对研究对象精子DNA完整性进行检测.结果 复发性流产患者丈夫组与正常生育男性组精液的量[(3.61±0.8)mL vs(3.74±0.7)mL]、精子浓度[(130.86±69.47)×106/mL vs(141.97±80.44)×106/mL]、精子活力[(54.18±11.75)%vs(56.33±11.78)%]以及正常形态精子百分率[(13.19±8.93)%vs(14.27±8.78)%]比较差异均无统计学意义(P>0.05);复发性流产患者丈夫组精子DNA碎片指数为(28.33±7.97)%,低于正常生育男性组的(12.73±5.07)%,差异有显著统计学意义(P<0.01).结论 精子DNA完整性损伤可能是复发性流产的相关因素,SCSA对评估生育力具有临床意义.     

氧化应激及其介导的细胞凋亡在糖尿病肾病中的作用

氧化应激产生的活性氧簇(ROS)在糖尿病肾病(DN)的发病机制中起重要作用.ROS通过激活线粒体、DNA氧化损伤、NF-κB及影响基因表达等途径诱导细胞凋亡,促进DN病的发生发展.减少ROS的生成及阻断ROS产生后所激活的细胞凋亡途径可成为治疗DN的新靶点.     

氧化应激对铁过载造血干祖细胞造血功能的影响

目的 体外诱导脐血来源的造血干祖细胞铁过载,检测参与氧化应激的活性氧物质(ROS)的水平以及对造血干祖细胞造血功能的影响.方法 通过体外培养脐血单个核细胞(MNC)的过程中添加枸橼酸铁铵(FAC),建立铁过载造血干祖细胞模型.实验分组:对照组、FAC组、FAC+N-乙酰半胱氨酸(NAC)组、FAC+谷胱甘肽(GSH)组.检测各组细胞内ROS水平,并用抗氧化剂处理,检验这一过程中ROS、细胞内可变铁池(LIP)、凋亡水平、造血集落形成和脐血各系造血细胞数目的变化.结果(1)在培养液中加入不同浓度FAC(50、100、200、400μmol/L)培养不同时间(6、12、24 h),发现ROS水平随着FAC的浓度和培养时间变化,且在200μmol/L FAC的培养液中培养24h时ROS水平达到最高.(2)用抗氧化剂(NAC、GSH)联合FAC处理细胞发现,抗氧化剂处理组细胞内总的ROS以及髓系细胞和红系细胞内的ROS明显低于FAC组(均P＜0.05).(3)在200 μmol/LFAC的浓度下,培养脐血MNC 24 h后细胞内总的LIP、髓系细胞和红系细胞内LIP水平均显著高于对照组(均P＜0.05),但抗氧化剂NAC和GSH对铁过载细胞内LIP没有明显影响.(4)对脐血造血干祖细胞造血功能的检测发现:FAC组细胞凋亡比例[(20.90±3.45)％]明显高于对照组[(9.20±1.29)％](P＜0.05);造血集落形成单位(CFU-E、BFU-E、CFU-GM、CFU-mix)计数明显低于对照组(前3项两组间差异具有统计学意义,P ＜0.05);CD34+、CD33+、GlyA+细胞比例及细胞计数均显著低于对照组(均P＜0.05);这些损伤都可以通过NAC或GSH处理部分恢复.结论 氧化应激在铁过载造血干祖细胞的损伤中扮演着重要角色,可以通过升高细胞内ROS水平抑制其造血功能,清除细胞内多余的ROS能减轻这些损伤.研究结果可为治疗铁过载患者因氧化应激诱导的造血功能低下提供新的靶点和研究思路.     

肥胖对男性不育症患者精液质量与精子DNA完整性的影响

目的探讨肥胖对男性不育症患者精液质量与精子DNA完整性的影响。方法选择2018年2月～2019年6月就诊于本院男科门诊的男性不育症患者93例;根据患者BMI值分组,18.5 kg/m~2≤BMI24 kg/m~2为正常体质组(n=50),年龄(32.60±3.95)岁,BMI(21.18±1.44)kg/m~2;BMI≥28 kg/m~2为肥胖体质组(n=43),年龄(32.23±5.03)岁,BMI(29.60±1.27)kg/m~2。比较两组患者精子浓度、精液量、精液pH值、PR值、NP值、正常精子百分率及DFI值。结果肥胖体质组与正常体质组精液量比较,采用独立样本t检验,差异无统计学意义(P=0.065,P0.05);精子浓度降低[(40.50±23.80)×10~6/mL,(53.27±35.47)×10~6/mL],差异有统计学意义(P=0.048,P 0.05);PR降低[(20.62±7.86)%,(24.76±9.04)%],差异有统计学意义(P=0.021,0.05);正常精子百分率比较差异无统计学意义(P=0.080,P0.05);DFI值升高[(19.21±6.68)%,(16.20±5.73)%],差异有统计学意义(P=0.022,P0.05)。经Mann-Whitney U检验,精液pH值降低[7.3(7.3,7.5),7.3(7.2,7.4)],差异有统计学意义(P=0.006,P0.01);NP值比较,差异无统计学意义(P=0.416,P0.05)。经Pearson相关性分析,患者的BMI值与精液量、精子浓度呈负相关(P0.05),与DFI值呈正相关(P0.05);精液量与PR呈正相关(P0.05);精子浓度值与PR呈显著负相关(P0.01);PR与正常精子百分率呈正相关(P0.05)。结论肥胖可降低男性精液质量,加重精子DNA损伤,是男性生育能力受损的危险因素。     

黄连素诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及其相关的氧化应激机制

目的已有较多研究表明黄连素对许多肿瘤有治疗作用。文中探讨黄连素诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及其相关的氧化应激机制。方法 MTT法检测不同浓度黄连素(10、25、50、75、100μmol/L)对细胞活力的影响,Hochest33342检测不同浓度黄连素(10、25、50、75、100μmol/L)对细胞凋亡的影响;2,7-二氯荧光黄双乙酸盐(2’,7’-dichlorofluorescein diace-tate,DCFH-DA)荧光探针检测黄连素(50μmol/L)处理后MCF-7细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)的变化;5,5’,6,6’-四氯-1,1’,3,3’-四乙基苯丙咪唑羰花青碘化物(JC-1)荧光探针检测黄连素处理后MCF-7细胞线粒体膜电位(mitochon-drial membrane potential,△Ψm)的变化。结果黄连素作用MCF-7细胞48 h,呈浓度依赖性致MCF-7细胞活力降低,诱导其凋亡。黄连素作用诱导MCF-7细胞内ROS大量生成并伴随△Ψm降低。结论黄连素具有抑制乳腺癌细胞活力,诱导其凋亡的作用,黄连素可能通过对乳腺癌细胞内氧化还原状态的调节,诱导ROS大量生成,从而损伤线粒体功能,诱导△Ψm降低,参与抗肿瘤作用。     

褪黑素对过氧化氢诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞氧化应激的改善作用及其机制

目的:研究褪黑素对过氧化氢(H2O2)诱导的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞)氧化应激损伤的保护作用,并探讨其作用机制.方法:体外培养SH-SY5Y细胞,将SH-SY5Y细胞分为对照组、H2O2组、不同浓度褪黑素组和2-苯基-N-乙酰色胺(Luzindole)组.对照组为正常培养SH-SY5Y细胞,H2O2组加入...     

氧化应激在子宫内膜异位症发病机制中的研究进展

近年来大量研究表明,子宫内膜异位症患者体内普遍存在氧化应激现象。线粒体呼吸链异常、雌激素代谢失衡、内环境铁过载和子宫内膜异位病灶可导致活性氧增多,抗氧化酶和非酶类物质减少导致患者体内抗氧化水平减弱,而环境因素则会加剧子宫内膜异位症患者的氧化抗氧化失衡。本文从氧化物过度产生和抗氧化能力下降两方面分析氧化应激及其在子宫内膜异位症发病中的作用,旨在为发现子宫内膜异位症新的治疗方案提供思路。     

活性氧与男性不育相关研究进展

在生殖系统内,活性氧主要由精子自身和精液中的白细胞产生,活性氧在低浓度时可以调节正常精子功能,而过量活性氧会引起氧化应激反应,影响精子膜功能、精子运动能力和DNA完整性,是男性不育的重要原因。因此,如何清除过量活性氧、进行抗氧化治疗是男性不育研究的重要课题。     

精子DNA完整性对体外受精-胚胎移植结局的影响

目的探讨精子DNA损伤对体外受精-胚胎移植（IVF-ET）结局的影响。方法：142对夫妇接受142周期IVF-ET治疗,采用染色质扩散实验对男方精液进行精子DNA完整性检测。分析精子DNA碎片指数（DFI）与受精率、2PN受精率、卵裂率及优胚率的相关性;根据DFI值分为DFI〈30%组与DFI≥30%组,比较两组间的种植率、妊娠率和流产率。结果：精子DFI与受精率、2PN受精率及卵裂率均无显著相关性（P〉0.05）,与优胚率具有显著负相关（P〈0.05）。两组间对比,DFI〈30%组的种植率及妊娠率均高于DFI≥30%组,差异有统计学意义（P〈0.05）。DFI≥30%组的流产率高于DFI〈30%组,但差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：IVF-ET治疗中,精子DNA损伤对受精率、2PN受精率及卵裂率无影响,但对优胚率、种植率及妊娠率有负面影响,与流产率的关系需更大样本研究。建议将精子DNA完整性分析作为精子功能分析的一个常用项目。