核糖体蛋白及其在疾病中的作用

核糖体蛋白（RP）是核糖体的重要组成部分,在核糖体生物合成和蛋白质翻译中起关键作用。除此之外,核糖体蛋白还具有许多核糖体外功能,如调控基因表达、细胞增殖、分化、凋亡、DNA修复和其他多种细胞过程。RP的功能紊乱与包括血液、代谢、心血管疾病以及肿瘤在内的多种疾病的发生、发展密切相关,是多种疾病潜在的治疗靶点。本文将对RP的研究进展,包括RP的基本功能、核糖体外特性以及与人类疾病的联系进行综述,并探讨其作为生物标记物及在疾病治疗中的潜力。     

右美托咪定调控miR-526b-3p/S100A4表达影响胰腺癌细胞增殖及凋亡的机制研究

摘要：目的:探讨右美托咪定（Dex）对胰腺癌细胞增殖、凋亡的影响及其可能作用机制。方法:应用MTT法检测Dex对人胰腺癌Capan-1细胞增殖的抑制作用;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）与蛋白免疫印迹法检测Dex对微小RNA-526b-3p（miR-526b-3p）和钙结合蛋白A4（S100A4）表达的影响;检测miR-526b-3p过表达与干扰S100A4表达对Capan-1细胞增殖及凋亡的影响;双荧光素酶报告实验验证miR-526b-3p与S100A4的靶向作用关系;抑制miR-526b-3p表达验证Dex对Capan-1细胞增殖和凋亡的作用机制; Western blot法检测细胞周期蛋白1（CyclinD1）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、p21、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白（Bax）蛋白表达。结果:用不同浓度的Dex处理后,细胞抑制率、细胞凋亡率与miR-526b-3p、p21、Bax的表达水平显著高于对照组（P<0.05）,S100A4、CyclinD1、Bcl-2的表达水平显著降低（P<0.05）,且呈明显的浓度依赖性（P<0.05）;双荧光素酶报告实验与Western blot实验证实miR-526b-3p与S100A4存在靶向结合关系,且miR-526b-3p可负性调控S100A4的表达; miR-526b-3p过表达或干扰S100A4表达后细胞抑制率、细胞凋亡率与p21、Bax的表达水平显著升高（P<0.05）,CyclinD1、Bcl-2的表达水平显著降低（P<0.05）;抑制miR-526b-3p表达可逆转Dex对Capan-1细胞增殖与凋亡的作用。结论:Dex可通过调控miR-526b-3p/S100A4表达抑制胰腺癌细胞增殖并诱导细胞凋亡。     

沙枣提取物对某些肿瘤细胞株及小鼠实体瘤和腹水瘤的抑制作用

目的探讨沙枣提取物对4种肿瘤细胞株及小鼠实体瘤和腹水瘤的抑制作用及机制。方法应用MTT法检测了提取物对4个肿瘤细胞株生长的抑制作用,检测提取物对实体瘤肿瘤生长的抑制率和腹水瘤小鼠的生命延长率,探讨提取物对肿瘤细胞凋亡的影响及机制。结果体外实验中观察到高中低剂量组具有明显抑制4种肿瘤细胞生长作用(P<0.01)。体内实验观察到沙枣提取物高中低剂量均有抑制S180实体瘤小鼠肿瘤生长、延长S180腹水瘤小鼠的生存时间作用。形态学观察发现提取物诱导了4种肿瘤细胞的凋亡,提取物诱导4种肿瘤细胞早期凋亡率在14.1%～24.5%之间,明显高于未处理肿瘤细胞(P<0.05)。提取物处理T24细胞后,bax、caspase-3蛋白表达明显增强,bcl-2表达降低。结论在本试验条件下,沙枣提取物有抑制肿瘤生长作用,其机制可能与下调bcl-2表达和上调bax的表达,高表达caspase-3诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

基于半胱天冬酶-3调节的抗肿瘤药物研究进展

肿瘤细胞的一个重要特征是由于细胞凋亡通路受阻而导致无限增殖[1].细胞凋亡中关键分子的异常表达和功能改变与肿瘤的发生发展密切相关.目前,通过控制凋亡通路中关键蛋白或酶类的表达及功能,诱导肿瘤细胞凋亡,已成为肿瘤治疗中颇具吸引力的靶点[2].在众多凋亡相关蛋白中,半胱氨酸蛋白酶(Caspase)家族成员在启动和执行细胞凋亡中起重要作用[3],半胱天冬酶-3 (Caspase-3)处于Caspase 蛋白酶系核心地位是抗肿瘤药物作用的极好靶点[4].本文重点论述Caspase-3的生物特性与细胞凋亡的关系,肿瘤细胞中的表达及以其为靶点的抗肿瘤药物研究进展.     

DLC2在肿瘤中作用及机制的研究进展

DLC2是新近发现的抑癌基因,在肝癌、乳腺癌、胶质瘤等多种肿瘤中不表达或低表达。DLC2可增强Rho A、Cdc42的GTP酶活性,负性调控Rho蛋白活性及其下游效应分子,并可靶向定位于黏着斑; DLC2还可通过其SAM结构域与蛋白相互作用,促进蛋白泛素化降解;近年来研究发现,DLC2可通过竞争性内源RNA机制与其他转录体相互调控。通过以上3种主要机制,DLC2抑制肿瘤细胞增殖,并促进肿瘤细胞凋亡,阻碍肿瘤细胞转移、侵袭及黏附,削弱肿瘤细胞的干性,增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。因此,上调DLC2的表达可作为潜在的抗肿瘤策略,用于协同化疗治疗肿瘤。     

2,3-吲哚醌抗肿瘤作用研究

目的研究2,3-吲哚醌的抗肿瘤作用及机制。方法观察2,3-吲哚醌对小鼠肉瘤(S180)、小鼠肝癌(H22)、小鼠艾氏腹水瘤实体型(EC)和腹水型(EAC)的抗肿瘤作用;免疫组化法测定药物对S180肿瘤组织中PCNA、Bcl-2蛋白表达的影响;核染色法(Hoechst33258染色)和MTT法观察2,3-吲哚醌对人神经母瘤(SH-SY5Y)细胞体外促凋亡和抗增殖作用。结果2,3-吲哚醌对3种小鼠移植性肿瘤有抑制作用,对荷瘤鼠血液白细胞水平无影响;2,3-吲哚醌可抑制S180肿瘤组织中PCNA,Bcl-2蛋白表达;2,3-吲哚醌可促进人神经母瘤细胞凋亡并抑制其增殖。结论2,3-吲哚醌有抗肿瘤作用,其机制与抑制肿瘤细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

BMI1在肿瘤中的研究进展★

B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1（BMI1）作为多梳基因（PcG）家族的重要成员，参与调控细胞增殖与分化，与肿瘤的发生发展密切相关。作为原癌基因，BMI1在人类多种肿瘤中过表达，通过多种途径如促进肿瘤细胞增殖、维持肿瘤细胞干性、促进DNA损伤修复等来参与肿瘤的发生发展。本文总结了BMI1的分子结构与功能、上游调控机制及其与肿瘤细胞增殖、肿瘤免疫微环境、肿瘤细胞干性和DNA损伤修复的关系和引起的信号通路变化，并对BMI1在化疗耐药中的作用和BMI1小分子抑制剂的开发现状进行综述。     

新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂致U251细胞周期阻滞、凋亡及其机制的研究

目的探讨新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi)2,2,3,3-四甲基环丙酰硫脲(TCCT)诱导人脑胶质瘤U251细胞周期阻滞、凋亡及其作用机制。方法以不同药物浓度与U251细胞共同培养48 h后,采用MTT法检测药物作用48 h后肿瘤细胞的增殖。药物作用24 h后,采用RT-PCR检测肿瘤细胞的p21WAF1/CIP1与Cyclin D1 mRNA的表达,Western blot检测HDAC3、HDAC4、Cyclin D1与p21WAF1/CIP1蛋白的表达,PI单染法分析细胞周期,Annexin V-PI双染法检测肿瘤细胞凋亡。结果 TCCT对U251细胞增殖具有明显抑制作用,药物干预48 h时的IC50为(0.461±0.108)mmol·L-1,并呈现剂量依赖性。TCCT药物干预24 h后U251细胞p21WAF1/CIP1mRNA表达上调,Cyclin D1 mRNA下调;组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)和组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)表达下调,Cyc-lin D1蛋白表达弱下调,p21WAF1/CIP1蛋白表达上调;S期细胞比例明显提高(P<0.05);细胞凋亡率明显增高(P<0.01)。结论 TCCT对U251细胞增殖有明显的抑制作用,引起肿瘤细胞S期阻滞和凋亡。其作用机制可能与其下调HDAC3、HDAC4表达,促进组蛋白乙酰化,而影响p21WAF1/CIP1和Cyclin D1的基因、蛋白的表达有关。     

凋亡抑制因子Survivin在肿瘤治疗中的研究进展

Survivin是凋亡抑制蛋白家族中的成员,参与细胞分裂和增殖过程调节,在细胞凋亡抑制中起重要作用。Survivin在大多数已分化组织中低表达甚至不表达,而在多数肿瘤细胞高表达,这一特异性分布与表达使靶向survivin抗肿瘤疗法成为药学领域的研究热点。本文综述了survivin的结构和基因特性,主要介绍survivin的功能及其在肿瘤中的靶向作用等方面的近年来研究进展。     

长链非编码 RNA组蛋白去乙酰化酶 3通过哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路调控肝癌细胞增殖、迁移侵袭和凋亡

目的 研究长链非编码RNA组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的调控机制.方法 运用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测正常肝细胞MIHA、肝细胞癌细胞SK-Hep1中HDAC3的表达;将si-NC组(转染si-NC)、si-HDAC3组(转染si-HDAC3)、si-HDAC3+DMSO组[转染si-HDAC3并用二甲基亚砜(DMSO)处理]、si-HDAC3+MHY1485组[转染si-HDAC3并用哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路抑制剂MHY1485处理]用脂质体法转染至SK-Hep1细胞;CCK-8法检测细胞增殖;Transwell小室检测细胞迁移侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹法(Western blot?ting)检测细胞中Akt激酶、翻译起始因子4E结合蛋白1(4E-BP1)、核糖体p70S6激酶蛋白(S6K1)、磷酸化核糖体p70S6激酶蛋白(p-S6K1)的蛋白表达.结果 与正常肝细胞MIHA(1.00±0.06)相比,肝细胞癌细胞SK-Hep1中HDAC3表达(4.38±0.34)显著上调(P<0.05).敲减HDAC3后,SK-Hep1细胞的增殖、迁移、侵袭能力均得到明显下调,凋亡能力得到明显上调.有趣的是,敲减HDAC3后,SK-Hep1细胞中mTOR信号通路关键基因Akt、4E-BP1、p-S6K1的表达均明显下调,并且激活mTOR信号通路可部分逆转敲减HDAC3对肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡调控作用.结论 长链非编码RNA HDAC3可调控肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡,其机制可能与mTOR信号通路相关,可为肝癌的治疗提供新的作用靶点.     

糖皮质激素对人卵巢癌细胞系3AO增殖分化及对糖皮质激素受体表达的影响

目的：观察不同浓度地塞米松（Dex)对人卵巢癌细胞系（3AO）增殖及分化的影响及其对糖皮质激素受体（GR）的调节作用。方法：以不同浓度Dex处理3AO细胞,采用活细胞计数法观察细胞增殖,用氨基安替比林法测定碱性磷酸酶（AKP）活性;用酶联免疫法测定细胞标志抗原CA125水平的变化;用放射配体结合法测定GR的表达。结果：Dex对3AO细胞的增殖有抑制作用,同时伴有细胞形态的变化及AKP活性增高和CA125的表达下降。Dex对3AO细胞AKP活性的诱导作用可被RU486所阻断。在3AO细胞中存在糖皮质激素受体（GR）,Dex对GR结合活性有下调作用。结论：Dex对3AO细胞有增殖抑制和诱导分化作用,这种作用是通过GR来介导的。     

糖皮质激素对人卵巢癌细胞系3A0增殖分化及对糖皮质激素受体表达的影响(英文)

目的:观察不同浓度地塞米松(Dex)对人卵巢癌细胞系(3AO)增殖及分化的影响及其对糖皮质激素受体(GR)的调节作用.方法:以不同浓度Dex处理3AO细胞,采用活细胞计数法观察细胞增殖,用氨基安替比林法测定碱性磷酸酶(AKP)活性;用酶联免疫法测定细胞标志抗原CA125水平的变化;用放射配体结合法测定GR的表达.结果:Dex对3AO细胞的增殖有抑制作用,同时伴有细胞形态的变化及AKP活性增高和CA125的表达下降.Dex对3AO细胞AKP活性的诱导作用可被RU486所阻断.在3AO细胞中存在糖皮质激素受体(GR),Dex对GR结合活性有下调作用.结论:Dex对3AO细胞有增殖抑制和诱导分化作用,这种作用是通过GR来介导的.     

Involvement of protein phosphatase 2A in arsenic trioxide-induced differentiation and apoptosis of NB4 cells

Arsenic trioxide (ATO) is known to have concentration-dependent dual effects on acute promyelocytic leukemia (APL) cells, preferentially inducing apoptosis at relatively high concentrations and promoting partial differentiation at low concentrations. Protein phosphatase 2A (PP2A) has been demonstrated to take part in the differentiation and apoptosis of malignant hematological cells induced by commonly used medicines, such as all-transretinoic acid (ATRA), interferon, arsenic sulfide, etc. However, there are almost no data on the role PP2A plays in ATO-induced APL cell differentiation/apoptosis. In this report, our goal was to show that ATO inhibited the proliferation and induced the apoptosis and differentiation of neuroblastoma NB4 cells. Okadaic acid (OKA), a specific inhibitor of protein phosphatase activity, markedly increased these effects of ATO on cells. To further elucidate the regulation of PP2A during ATO-induced differentiation/apoptosis of NB4 cells, we measured the phosphatase activity and protein expression of PP2A. The activity of PP2A in NB4 cells decreased with increasing concentration of ATO. This decrease of PP2A activity appeared to parallel phenotypic and functional changes of NB4 cells. Western blot analysis showed that the levels of the PP2A structural subunit PP2A-A decreased during the course of ATO-induced differentiation/apoptosis, whereas the expression of the B and C subunits of PP2A was relatively unaltered. In conclusion, the decrease of PP2A activity may be involved in ATO-induced apoptosis and differentiation of APL cells, and this decrease is predicted to be related to the repression of PP2A-A subunit expression.     

p-JNK在结肠癌组织中的表达及抑制JNK通路后HT-29细胞增殖和凋亡变化

目的研究p-JNK在结肠癌组织中的表达以及抑制JNK信号通路后人结肠癌HT-29细胞增殖和凋亡的变化。方法使用免疫组织化学方法检测50例结肠癌组织标本和50例正常结肠组织标本中p-JNK的表达情况并和临床资料进行比较分析;在人结肠癌细胞株HT-29中使用SP600125抑制JNK信号通路后,MTT法检测细胞增殖,TUNEL法检测凋亡。结果 p-JNK在结肠癌组织中的表达水平明显高于正常对照组织(P<0.05);并和淋巴结转移、肿瘤分化程度、肿瘤的侵犯深度相关(P<0.05);而与肿瘤部位无关。抑制JNK信号通路后,HT-29细胞中的p-JNK表达降低(P<0.05);增殖减少,凋亡增加(P<0.05)。结论在结肠癌组织中存在p-JNK的高表达,抑制JNK信号通路能降低人结肠癌细胞株HT-29细胞的增殖,并促进凋亡;JNK信号通路和结肠癌的发生发展有关。     

Rac1的生物学作用及其调控机制研究进展

Rac1（即Rac相关的C3肉毒素底物1）是Rho家族成员之一.Rho家族在细胞的一些基本功能中起着＆quot;分子开关＆quot;的作用,参与了细胞的运动、1肌动蛋白重组、肿瘤的恶性转型、侵袭转移、转录因子的调节、细胞的凋亡以及肿瘤的血管生成等过程.Rac1在细胞运动与黏附、细胞的增殖分化与凋亡、肿瘤的侵袭与转移以及免疫调节等方面都发挥了重要的作用.本文就Rac1的结构特点、主要生物学作用及其调控机构等方面的最新研究进展进行介绍.     

The role of c-Myc on granulocyte colony-stimulating factor-dependent neutrophilic proliferation and differentiation of HL-60 cells

We have previously suggested that phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)/p70 S6 kinase (p70 S6K) plays an important role in the regulation of neutrophilic differentiation of HL-60 cells on the basis of analysis of transferrin receptor (Trf-R)-positive (Trf-R(+)) and -negative (Trf-R(-)) cells that appear after treatment with dimethyl sulfoxide (DMSO). In the present study, we analyzed the downstream events of p70 S6K in differentiation and proliferation of both cell types, with a particular focus on c-Myc. Similar to p70 S6K, we found that the expression of c-Myc in Trf-R(+) cells is also higher than that in Trf-R(-) cells. Wortmannin, a specific inhibitor of PI3K, partially inhibited G-CSF-induced p70 S6K activity, c-Myc expression, and G-CSF-dependent proliferation, whereas rapamycin, an inhibitor of p70 S6K, completely inhibited p70 S6K activity, c-Myc expression, and G-CSF-dependent proliferation, indicating that the extent of c-Myc inhibition by these inhibitors correlates with a reduction in proliferation, and that c-Myc is downstream from PI3K/p70 S6K. We also determined phosphorylation of the 4E-binding protein 1 (4E-BP1), which is regulated downstream of the mammalian target of rapamycin. The addition of G-CSF failed to enhance the phosphorylation state of 4E-BP1 of HL-60 cells 2 days after DMSO differentiation. An antisense oligonucleotide for c-myc inhibited both G-CSF-dependent enhancement of c-Myc expression and proliferation in Trf-R(+) cells, but did not enhance the differentiation in terms of O(2)(-)-generating ability or fMLP-R expression. In contrast, antisense oligonucleotide for c-myc promoted fMLP-R on non-treated HL-60 cells. We therefore conclude that the PI3K/p70 S6K/c-Myc cascade plays an important role in neutrophilic proliferation in HL-60 cells. Unlike that of rapamycin, however, the antisense oligonucleotide for c-myc could not promote differentiation of Trf-R(+) cells cultured with G-CSF, indicating that another target downstream of p70 S6K may control the differentiation of HL-60 cells in terms of the signal transduction of G-CSF.     

双氢青蒿素对人骨肉瘤细胞株143B增殖和凋亡的作用

目的观察双氢青蒿素(dihydroarteminin,DHA)对人骨肉瘤细胞143B的增殖和凋亡的影响以及可能的机制。方法体外培养人骨肉瘤细胞株143B;MTT比色法和克隆形成实验检测不同浓度DHA对骨肉瘤细胞存活与克隆形成能力的影响。Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡的形态变化。构建β-Catenin荧光素酶报告基因(β-Catenin-Luc,p-Top)检测DHA作用143B后细胞内β-Catenin活性变化。不同浓度的DHA作用后,Western blot检测与细胞增殖(如PC-NA、Cyclin D1、c-Myc)、凋亡(如Bad、Bcl-2、Caspase-3)密切相关的标志物蛋白质表达变化。结果 DHA作用于143B细胞24 h后,MTT结果显示143B细胞的增殖活性受到明显抑制,且其克隆形成能力减弱(P<0.05),在DHA浓度达35μmol.L-1时,抑制效率最明显。Western blot结果显示PC-NA表达下调;而促凋亡蛋白Bad和Caspase-3表达上调,Bcl-2蛋白表达明显减弱。结论双氢青蒿素具有较明显的抑制人骨肉瘤细胞的增殖且促进其凋亡的作用,可能通过下调细胞增殖相关蛋白PCNA、Bcl-2和上调促凋亡蛋白Bad和Caspase-3,启动凋亡程序,致143B细胞发生凋亡。     

罗格列酮对体外培养小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1生长与分化的影响研究

目的:研究罗格列酮对体外培养小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1生长与分化的影响。方法:以小鼠MC3T3-E1作为药物筛选的细胞模型,分别加入1、2、5、10μmo·lL-1罗格列酮干预,MTT法测定细胞活性并计算生长抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡率;免疫组化法分析细胞中促凋亡因子Bax和抗凋亡因子Bcl-2蛋白的表达;测定细胞中分化指标碱性磷酸酶(ALP)的活性。设立只加入培养基处理的空白对照组。结果:与空白对照组比较,罗格列酮各浓度组生长抑制率、细胞凋亡率升高(P均<0.05),Bax表达增强、Bcl-2表达减弱、ALP活性下降(P均<0.05),且呈浓度依赖性。结论:罗格列酮可抑制MC3T3-E1细胞生长及分化,并诱导其凋亡;而Bax/Bcl-2可能参与凋亡的发生,并可能起关键调控作用。