微小RNA与卵巢癌铂类耐药的研究进展

微小RNA(micmRNA,miBNA)是广泛存在于生物体内的一类非编码的小RNA,miRNA是细胞增殖、死亡、应激抗性和脂肪代谢的关键调节因素,体外实验已经证实miRNA在卵巢癌耐药中起重要作用.卵巢癌铂类耐药的产生与发展是十分复杂的过程,研究结果显示,miRNA的表达对卵巢癌细胞株的铂类药物敏感性有着重要作用,能够...     

卵巢癌细胞中hCTR1的表达与细胞对顺铂耐药的相关研究

目的:探讨人铜离子转运蛋白1(human copper transporter 1,hCTR1)与卵巢癌细胞对铂类药物耐药的关系.方法:构建重组反转录病毒载体pBABEpuro-hCTR1,转染包装细胞后感染人卵巢癌细胞株SKOV-3,用嘌呤霉素筛选得到稳定表达hCTR1的pBABEpuro-hCTR1/ SKOV-3细胞.应用实时荧光定量.PCR(real time fluorogentic quantitative PCR,RFQ-PCR)和Western 印迹法检测pBABEpuro-hCTR1/ SKOV-3细胞中hCTR1 mRNA和蛋白的表达,MTT法检测顺铂(cisplatin, DDP)对pBABEpuro/SKOV-3和pBABEpuro-hCTR1/SKOV-3细胞的增殖抑制率,FCM检测DDP对上述细胞周期的影响,电感耦合等离子质谱法(ion-coupled plasma-mass spectroscopy,ICP-MS)测定细胞内的铂含量.结果:成功构建了hCTR1高表达的SKOV-3稳定细胞株.DDP对pBABEpuro-hCTR1/SKOV-3细胞的IC50值为(18.97±1.24)μmol/L,对pBABEpuro /SKOV-3细胞的IC50值为(29.35±2.12)μmol/L(P<0.01).DDP对pBABEpuro-hCTR1/SKOV-3细胞的S期阻滞作用大于pBABEpuro/SKOV-3细胞.pBABEpuro-hCTR1/SKOV-3细胞对DDP的摄入能力大于pBABEpuro/SKOV-3细胞.结论: hCTR1参与卵巢癌细胞对DDP的转运,其高表达可增强SKOV-3细胞对DDP的摄入能力和敏感性.     

靶向EGFR的干扰RNA对卵巢癌耐药细胞凋亡的影响

目的：探讨RNA干扰表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）的表达对多药耐药卵巢癌细胞株SKOV3/DDP凋亡的影响。方法：构建携带EGFR小发夹干扰RNA(small hairpin RNA, shRNA)的重组表达载体（pEGFRshRNA）,脂质体法转染入SKOV3/DDP细胞,同时设未转染对照组和非特异性干扰质粒CtrlshRNA对照组。RTPCR和免疫细胞化学法检测转染后SKOV3/DDP细胞内EGFR mRNA和蛋白的表达;流式细胞仪分析EGFR沉默后SKOV3/DDP细胞周期和凋亡率的变化。结果：与转染对照质粒组相比,转染pEGFRshRNA组细胞EGFR mRNA和蛋白的表达明显受抑制(P<001)。流式细胞仪检测结果显示：顺铂作用24 h后,pEGFRshRNA转染组细胞周期分布发生明显改变,与对照组和CtrlsiRNA组相比,G0/G1期细胞比例和凋亡率明显增加（P<0.01）,而S期细胞比例显著降低（P<0.01);凋亡率显著升高。结论：靶向EGFR的干扰RNA可抑制SKOV3/DDP细胞中EGFR的表达,调节耐药细胞周期,促进耐药细胞凋亡。     

卵巢癌的化疗现状

卵巢癌的化疗现状梁月琴综述张秀国审校化疗特别是联合化疗是治疗卵巢癌的主要手段之一，其治疗作用已经趋于明显。过去，卵巢癌化疗的主要方案是顺铂＋环磷酰胺或碳铂＋环磷酰胺。但是，自从紫杉醇应用于卵巢癌化疗之后，卵巢癌的化疗方案发生了较大变化。目前，卵巢癌最...     

人卵巢癌顺铂耐药细胞株的建立,耐药机制的研究

目的通过建立人卵巢癌体外耐药模型，研究卵巢癌对顺铂的耐药特征和机制。方法应用浓度递增和短时间作用法。从人卵巢癌细胞A2780中培养对顺铂耐药细胞亚株（A2780／DDP）。采用MTT法检测耐药细胞的耐药指数及对抗癌药物的敏感性。而高效液相色谱仪检测耐药细胞内顺铂含量。以及应用RT－PCR法和免疫组化法检测MDRI和GST－π的表达情况。结果（1）A2780／DDP对DDP的耐药倍数为10．59．并且其倍增时间较A2780细胞延长，对VCR、MTX呈高度耐药状态，对Carp、Pym、CTX、VP16有不同程度的耐药，而对ADM、5－FU、KSM无交叉耐药现象。（2）耐药细胞内顺铂含量明显低于A2780细胞。（3）耐药细胞内GST－π的表达呈强阳性，而MDRI只有在高度耐药细胞呈弱阳性。结论A2780细胞对顺铂的耐药是获得性的，并呈多药耐药特征，其耐药的主要原因是与谷胱甘肽解毒途径有关的酶表达增多有关。GST一π表达过度导致细胞内药物浓度降低有关。     

卵巢癌多药耐药逆转治疗研究进展

由多约耐药基因(mdrl)编码、P-糖蛋白(P-gp)介导的多药耐药性的产生是肿瘤化疗失败的重要原因。下凋mdrl基因的表达，可逆转肿瘤细胞对化疗药物的敏感性，提高化疗疗效。现综述近年来以P-gP为靶点克服卵巢癌细胞多药耐药的研究进展。     

不同方式诱导人卵巢癌顺铂耐药细胞株的比较

目的 研究不同诱导方式建立的卵巢癌顺铂耐药细胞株的耐药机理。方法 采用大剂量冲击法和浓度梯度递增法建立卵巢癌顺铂耐药细胞株Skov3/CDDP-P和Skov3/CDDP-50。结果 Skov3/CDDP-P和Skov3/CDDP-50的耐药指数分别为3．7和48．6,伴有形态改变、生长减慢、细胞周期改变等。耐药细胞株的细胞内药物浓度降低,与多药耐药相关基因（MDR1）、多药耐药相关蛋白（MRP）和肺耐药蛋白（LRP）的表达增强有关。谷胱甘肽S转移酶（GST－π）的表达无明显变化,拓朴异构酶Ⅱ（TOPOⅡ）活性轻度下降。不同诱导方式存在差异。结论 顺铂耐药涉及多个相关基因的表达,持续诱导方式容易产生耐药。     

RNA干扰靶向沉默EGFR基因对卵巢癌耐药细胞凋亡影响的实验观察

目的:探讨RNA干扰表皮生长因子受体(EGFR)基因对卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP凋亡的影响。方法:利用基因重组技术构建携带EGFR小发夹干扰RNA(pEGFR-shRNA)的重组质粒表达载体,脂质体法转染SKOV3/DDP细胞。实验分组:对照组(不进行干扰)、S1组(转染非特异性质粒)、S2组(转染特异性质粒)。用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫细胞化学法(ICC)检测转染后细胞内EGFRmRNA和蛋白的表达,流式细胞仪(FCM)分析细胞周期和凋亡率。结果:与对照组相比,S2组细胞EGFRmRNA的表达明显受抑制,抑制率达57%(P<0.01)。蛋白质的表达水平显著降低(P<0.01)。流式细胞仪检测结果显示,顺铂作用24h后,特异性转染组细胞周期分布发生明显改变,G0/G1期细胞比例增多,而S期细胞比例减少,凋亡率显著升高(P<0.01)。结论:RNA干扰EGFR基因通过抑制SKOV3/DDP细胞中EGFR基因的表达,恢复细胞对顺铂的敏感性。     

卵巢癌对顺铂耐药机制的研究进展

卵巢癌的发病率在女性生殖器恶性肿瘤中占第三位，但其患者死亡率却居首位。在细胞减灭术的基础上施以以顺铂为主的联合化疗方案已成为卵巢癌的常规治疗方案。据报道：Ⅲ和Ⅳ期的卵巢癌患者采用联合化疗．其完全缓解率可达60％-80％。但在实际临床应用中却并非如此。近30年来卵巢癌患者的5年生存率一直徘徊于30％-50％之间。其主要原因就是卵巢癌对化疗药物产生了耐爱性。约75％-80％的卵巢上皮癌开始对化疗有反应．其余则表现为原发耐药．最终所有化疗患者至少80％出现耐药。因此，耐药的产生直接影响化疗效果及生存率。如何尽早发现耐药度克服耐药是急需解决的问题。     

卵巢癌化疗耐药及逆转耐药基因水平研究进展

卵巢癌细胞对化疗产生耐药的机制主要有肿瘤细胞内有效药物浓度降低、DNA损伤修复功能异常和细胞凋亡调控异常3个方面.逆转卵巢癌细胞耐药主要包括反义基因治疗、RNA干预、化疗药物的联合应用等.     

microRNA 在浆液性卵巢癌中的研究进展

卵巢癌是女性生殖系统最致命的恶性肿瘤,尽管在临床和基础研究中做了很多的努力,但是卵巢癌的整体存活率并无明显的改善。近年来,越来越多的研究表明,microRNA 的异常表达与上皮性卵巢癌的发生发展有着密切联系,很多的 microRNA 被证实可预测卵巢癌的预后和转移,因此 microRNA 可能成为诊断卵巢癌的新的肿瘤标记物,这将会给卵巢癌的诊治开辟新的途径,为卵巢癌患者带来一片曙光。     

MicroRNA调控胃癌多药耐药的研究进展

晚期胃癌最常用的治疗方法是化疗,但患者存在对化疗药物原发或继发的多药耐药(multidrug resistance,MDR)现象,使患者很难获得长期生存.大量研究证实,microRNA是转录后基因表达调节的关键分子,在肿瘤的多种生物学行为中起着关键性作用,本文就microRNA调控胃癌多药耐药的相关研究进展做一综述.     

microRNA在乳腺癌耐药中的作用

乳腺癌是危害全球女性健康的主要疾病,而乳腺癌患者对现有治疗方法产生获得性耐药成为目前乳腺癌临床治疗所面临的难题.微小RNA (miRNA)是一种内源性的非编码RNA,它参与调控多种生物学过程,包括细胞增殖、侵袭、转移、上皮间质转化和耐药等.获得性耐药包含多种复杂机制,可通过特定miRNA的异常表达影响细胞相关蛋白的表达、抗肿瘤药物与相应靶点的结合以及凋亡相关途径引起乳腺癌耐药.本文将重点关注在乳腺癌内分泌治疗、化疗、分子靶向治疗发生获得性耐药中表达异常的miRNA.相信miRNA能够成为乳腺癌临床诊断与治疗以及对抗获得性耐药的生物标志物和新的治疗靶点.     

胃癌相关microRNA的研究

microRNA通过对基因表达的调控参与生命过程中一系列重要进程。它对肿瘤的标记高效、敏感而特异,提示其可能成为众多疾病有价值的诊断标志物和治疗靶点。目前,microRNA作为生物学治疗靶标已经取得实验性进展。本文就胃癌相关microRNA的研究进展做一综述。     

乳腺癌相关microRNA的研究进展

乳腺癌作为一种复杂的、表型多样性的遗传性疾病，涉及基因表达和各种结构的变化。如何早期诊断乳腺癌，降低乳腺癌发病率、死亡率一直是大众关注的焦点。微小RNA（microRNA）是一类内源性非编码单链RNA，广泛参与乳腺癌细胞的增殖、分化、凋亡等生理过程，并与乳腺癌患者的临床分期、淋巴结转移、远处转移等相关。现就microRNA在乳腺癌发生、发展过程中的作用，及其在该病诊疗过程中的应用作一综述，以期为乳腺癌的进一步研究提供新的思路。     

lncRNA、microRNA在卵巢癌中的研究进展及相互作用关系

人类基因组中大部分为非编码区,转录产生非编码 RNA(ncRNA) 。这些ncRNA可以在表观遗传水平、转录水平及转录后水平调控基因的表达,进而影响肿瘤的发生和发展,是肿瘤诊断、治疗及预后判断的潜在靶标。微小RNA(microRNA ,miRNA) 和长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA) 是 ncRNA 的两个重要分类。越来越多的研究表明lncRNA、microRNA 参与生物体的各种生理及病理过程,其中恶性肿瘤的相关研究最多。卵巢癌是妇科常见的恶性肿瘤疾病,早期诊断困难、预后差。MicroRNA和 lncRNA 在卵巢癌的发生发展中的研究进展及相互作用关系近年来引起了人们的关注。本文就这两者在卵巢癌的发生发展过程中的相互作用机制及研究进展作一综述。     

miR-429 在卵巢癌多药耐药中作用的研究进展

[摘要] 目前miRNA 在癌症发生、发展中的作用得到了广泛的研究,并且在诊断、预后中已经被证明是有效生物标志物。miR-429 在肿瘤中差异表达,并通过与多个靶基因相互介导,与卵巢癌细胞的多药耐药密切相关。miR-429 通过抑制卵巢癌细胞发生上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）抑制肿瘤细胞的耐药。自噬有助于提升肿瘤细胞的抗压、修复能力,并可促进肿瘤细胞的迁移、生长,miR-429 可能抑制耐药细胞的自噬从而减少卵巢癌细胞耐药的发生。本文主要对近年来关于miR-429 参与卵巢癌多药耐药机制的研究做一综述,希望能对卵巢癌多药耐药的诊断、治疗和预后判断有所帮助,为其进一步在临床应用提供指导。     

Changes in circulating microRNA levels associated with prostate cancer

Background:

The aim of this study was to investigate the hypothesis that changes in circulating microRNAs (miRs) represent potentially useful biomarkers for the diagnosis, staging and prediction of outcome in prostate cancer.

Methods:

Real-time polymerase chain reaction analysis of 742 miRs was performed using plasma-derived circulating microvesicles of 78 prostate cancer patients and 28 normal control individuals to identify differentially quantified miRs.

Results:

A total of 12 miRs were differentially quantified in prostate cancer patients compared with controls, including 9 in patients without metastases. In all, 11 miRs were present in significantly greater amounts in prostate cancer patients with metastases compared with those without metastases. The association of miR-141 and miR-375 with metastatic prostate cancer was confirmed using serum-derived exosomes and microvesicles in a separate cohort of patients with recurrent or non-recurrent disease following radical prostatectomy. An analysis of five selected miRs in urine samples found that miR-107 and miR-574-3p were quantified at significantly higher concentrations in the urine of men with prostate cancer compared with controls.

Conclusion:

These observations suggest that changes in miR concentration in prostate cancer patients may be identified by analysing various body fluids. Moreover, circulating miRs may be used to diagnose and stage prostate cancer.     

MicroRNA let - 7f 对胃癌细胞株 SGC7901 / ADR 耐药性的影响

目的：通过检测胃癌细胞株SGC7901及其阿霉素耐药细胞株SGC7901/ADR中microRNA let-7f的表达差异,探讨let-7f表达与胃癌细胞对ADR耐药的关系.方法：通过实时荧光定量PCR比较SGC7901/ADR与SGC7901两种细胞中 let-7f表达水平的差异;MTT法检测SGC7901,SGC7901/ADR及转染let-7f mimic后SGC7901/ADR的药物敏感性;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western Blot检测凋亡相关分子Bcl-2和Caspase-3蛋白表达情况.结果：qRT-PCR结果显示,let-7f在SGC7901/ADR细胞中的表达较在SGC7901中的表达显著降低（ P＜0.05）.MTT法结果显示SGC7901与SGC7901/ADR两种细胞阿霉素的半数抑制浓度（IC50）分别为（0.95 ±0.08）g/L和（5.40 ±0.28）g/L.SGC7901/ADR细胞转染let-7f mimic后,let-7f表达显著上调,并且对阿霉素的IC50明显降低（ P＜0.05）.凋亡检测结果显示,转染let-7f mimic后,SGC7901/ADR细胞凋亡率明显增加（ P＜0.05）.Western Blot结果表明相较于转染let-7f negative control（NC）组,转染let-7f mimic组cleaved-Caspase-3表达显著降低（P＜0.05）,而两组中的Bcl-2表达水平无差异.结论：let-7f在胃癌阿霉素耐药细胞株SGC7901/ADR中的表达显著降低,逆转let-7f表达可增加其对阿霉素敏感性,并诱导其凋亡.