扶正抑瘤汤对肿瘤细胞周期及端粒酶影响的实验研究

目的探讨扶正抑瘤汤抗肿瘤的作用机理.方法用S180瘤株接种昆明种小鼠,造成S180实体瘤模型,扶正抑瘤汤等中药灌胃治疗,用流式细胞仪分析实体瘤的细胞周期;用端粒酶试剂盒检测端粒酶活性.结果各治疗组肿瘤细胞G0/1期比率升高,S期比率下降,端粒酶活性被抑制,与生理盐水(荷瘤)组相比,差异有显著性(P＜0.001).结论扶正抑瘤汤能阻滞肿瘤细胞增殖的进程,阻抑肿瘤细胞DNA的合成和复制,而端粒酶活性被抑制是影响肿瘤细胞增殖周期进程的机理之一.     

扶正抑瘤汤对肿瘤细胞周期及端粒酶影响的实验研究

目的：探讨扶正抑瘤汤抗肿瘤的作用机理。方法：用S180瘤株接种昆明种小鼠，造成S180实体瘤模型，扶正抑瘤汤等中药灌胃治疗，用流式细胞仪分析实体瘤的细胞周期；用端粒酶试剂盒检测端粒酶活性。结果：各治疗组肿瘤细胞G0／1期比率升高，S期比率下降，端粒酶活性被抑制，与生理盐水（荷瘤）组相比，差异有显著性（P＜0．001）。结论：扶正抑瘤汤能阻滞肿瘤细胞增殖的进程，阻抑肿瘤细胞DNA的合成和复制，而端粒酶活性被抑制是影响肿瘤细胞增殖周期进程的机理之一。     

小柴胡汤诱导荷瘤小鼠S_(180)细胞凋亡及对细胞周期的影响

目的探讨小柴胡汤SRBD对荷瘤小鼠S180的抑瘤作用及可能机制。方法通过体内实验,观察不同浓度SRBD对小鼠肉瘤S180的抑制作用,用流式细胞仪(FCM)检测法研究SRBD诱导肿瘤细胞凋亡以及对肿瘤细胞周期的影响。结果SRBD中、小剂量组中SRBD对荷瘤鼠S180细胞有明显抑制作用,各剂量组SRBD均可诱导荷瘤鼠S180细胞凋亡,与对照组比较有显著性差异(P<0.05);SRBD中、小剂量组S期细胞数明显减少(P<0.05),G0/G1期细胞数明显增加(P<0.05),S180细胞增殖指数明显下降(P<0.05)。结论SRBD对小鼠肉瘤S180的生长具有抑制作用,其机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡及抑制癌细胞增殖周期有关。     

四君子汤对荷瘤小鼠抑瘤和诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究

目的 :探讨四君子汤对荷瘤小鼠的抗肿瘤作用 ,阐明该方抑瘤作用的可能机制。方法 :建立荷瘤小鼠(SRS- 82瘤株 )动物模型 ,用四君子汤煎剂灌胃。连续处理 15 d后 ,剥离瘤块称重并计算抑瘤率 ,在电镜下观察肿瘤细胞形态 ,并提取肿瘤细胞 DNA做琼脂糖凝胶电泳。结果 :四君子汤组与空白对照组比较 ,瘤重显著减轻 (P<0 .0 1)。电镜观察 ,四君子汤组的肿瘤切片大部分呈现坏死细胞的改变 ,未见有大量细胞发生凋亡特征性改变。琼脂糖凝胶电泳 ,四君子汤组电泳带未见到细胞发生凋亡的特征性 DNA梯状条带。结论 :四君子汤可以显著抑制荷瘤小鼠肿瘤生长 ,证明有明显的抑瘤作用。该方在体内没有诱导肿瘤细胞凋亡的作用 ,可能通过间接作用而发挥治疗肿瘤的效果     

胃康复组方对小鼠S180实体瘤的抑制及其凋亡诱导作用

目的：研究胃康复组方对小鼠S180实体瘤的抑制，探讨其诱导细胞凋亡作用。方法：造模S180荷瘤小鼠，随机分为5组，胃康复组方按525，350，175 mg·kg^-1·d^-1剂量灌胃给药，造模对照组采用生理盐水灌胃给药，阳性药物组腹腔注射25 mg·kg^-1·d^-1环磷酰胺，连续处理10 d；考察胃康复组方的抑瘤作用，并采用流式细胞仪和DNA琼脂糖电泳检测细胞凋亡、细胞周期分布和凋亡相关基因蛋白表达。结果：胃康复组方显著抑制小鼠S180实体瘤的生长，可诱导肿瘤细胞凋亡，阻滞细胞周期在G₀-G₁期，其凋亡率呈现量效依赖关系；可使S180细胞中p53，bax基因表达上调，bcl-2基因表达下调。结论：胃康复组方具有明显的抗肿瘤作用，通过促进p53，bax基因表达和抑制bcl-2基因表达，诱导肿瘤细胞凋亡。     

糙叶败酱大孔吸附树脂提取物对小鼠Sarcoma 180移植瘤的作用

目的:观察糙叶败酱大孔吸附树脂提取物(PsBe)对Sarcoma 180(S180)荷瘤小鼠的抗肿瘤作用。方法:建立S180腹水瘤和实体瘤动物模型,分别给予PsBe 0.5g/kg、1.0g/kg、2.0g/kg治疗,观察荷瘤小鼠生命延长率和抑瘤率,HE染色观察肿瘤组织形态学变化,透射电镜观察肿瘤细胞结构变化,流式细胞仪检测Bcl-2、Bax、P53蛋白表达。结果:PsBe 0.5～2.0g/kg可提高S180腹水瘤荷瘤小鼠半数存活时间(P<0.01);PsBe 2.0g/kg显著抑制S180实体瘤生长,提高荷瘤小鼠生存质量(P<0.05);HE染色显示PsBe各组出现不同程度的肿瘤细胞减少;电镜下观察,PsBe各剂量组可引起肿瘤细胞凋亡;此外,PsBe1.0g/kg和2.0g/kg可增加P53蛋白表达,上调Bax/Bcl-2比例。结论:PsBe具有抑制肿瘤S180生长的作用,其作用与引起肿瘤细胞凋亡相关。     

龙蛇羊泉汤治疗小鼠膀胱癌作用机制的实验研究

目的：探讨龙蛇羊泉汤对BTT739荷瘤膀胱癌小鼠的抗肿瘤作用机制。方法：BTT739肿瘤细胞接种T739小鼠，随机分组，①对照组：每日灌胃生理盐水0.15m12次；②龙蛇羊泉汤组：每日2次龙蛇羊泉汤灌胃0．15ml；③MMC组每日1次腹腔给药lmg／kg；应用电镜，流式细胞分析枝术检测细胞凋亡；测定龙蛇羊泉汤对荷瘤小鼠的抑瘤率．荷瘤生存时间．腹腔巨噬细胞活性。结果：龙蛇羊泉汤组小鼠肿瘤组织电镜下可见特征性凋亡细胞的出现，流式细胞仪检测出在G1期前出现凋亡峰；龙蛇羊泉汤组小鼠的抑瘤率为30．5％，荷瘤生存时间为28.7天,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率为30％。结论：在本实验条件下，龙蛇羊泉汤可以直接抑制小鼠膀胱肿瘤生长,诱导肿瘤细胞凋亡可能是龙蛇羊泉汤抑制肿瘤细胞生长的重要信息传导途径。     

五行汤抗肿瘤及经钙离子介导的促肿瘤细胞凋亡作用

目的:明确五行汤的抗肿瘤作用并初步探讨其机制.方法:不同浓度五行汤处理培养肿瘤细胞, MTT检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;琼脂糖凝胶电泳检测细胞DNA变化;电镜观察细胞形态变化;特异性荧光探针检测胞浆钙离子浓度变化.结果:五行汤对多种肿瘤细胞生长有较特异的抑制作用;五行汤处理后的SGC-7901细胞经流式细胞仪检测出现亚二倍体峰,并呈时间-浓度依赖性;琼脂糖凝胶电泳呈现的DNA Ladder;电镜显示五行汤处理后的SGC-7901细胞呈现凋亡特征;Fluo-3 AM染色荧光显微镜观察到胞浆钙离子浓度升高;胞内钙离子拮抗剂Bapta AM可以明显降低五行汤处理后SGC-7901细胞的凋亡率,且对细胞的保护作用呈浓度依赖性.结论:五行汤有较明确的抑制肿瘤细胞生长作用,可能通过钙离子介导的肿瘤细胞凋亡发挥作用.     

扶正抑瘤颗粒对小鼠肝癌H22细胞凋亡及Fas和FasL表达的影响

目的：观察扶正抑瘤颗粒含药血清诱导小鼠肝癌H22细胞凋亡的作用和对细胞Fas、FasL表达的影响．方法：应用血清药理学方法，用不同剂量的含药血清与小氟肝癌细胞在体外共同孵育后，应用相差显微镜，流式细胞仪、电子显微镜对肿瘤细胞的生长和凋亡进行观察，用SABC法检测H22细胞Fas和FasL的表达结果：小鼠肝癌H22细胞经含药血清作用后，发生明显的形态学改变，相差显微镜下可见细胞体积缩小，折光性增强，染色质浓缩，核浆比例增大，密度增高，胞浆出现颗粒样物质。电镜下可见明显的凋亡形态变化，流式细胞仪可测到凋亡峰；SABC法显示，扶正抑瘤含药血清可上调小鼠H22细胞Fas的表达，而对FasL表达的影响不明显结论：扶正抑瘤颗粒能诱导H2：细胞发生凋亡，其机制可能与其上调H22细胞Fas的表达有关，     

扶正抑瘤汤对肿瘤细胞端粒酶活性影响的实验研究

目的 :探讨扶正抑瘤汤抗肿瘤作用的机理。方法 :用 S1 80 瘤株接种昆明种小鼠建成 S1 80 实体瘤模型 ,采用扶正抑瘤汤等中药灌胃治疗 ,用端粒酶试剂盒检测肿瘤细胞端粒酶活性。结果 :各中药治疗组肿瘤细胞端粒酶活性较 NS(荷瘤 )组明显降低 ( P<0 .0 0 1)。结论 :扶正抑瘤汤可以明显抑制肿瘤细胞端粒酶的活性 ,是其抗肿瘤作用的机理之一。     

刺五加多糖诱导S180肉瘤细胞凋亡和bax基因表达的影响

目的：探讨刺五加多糖诱导肿瘤细胞凋亡及其可能作用机制．方法：选用动物分五组为空白组、刺五加多糖高、中、低剂量组和贞芪颗粒对照组，评价刺五加多糖对S180肉瘤小鼠的抑瘤作用，采用流式细胞术对内瘤组织细胞悬液检测其诱导凋亡作用，计算凋亡率并检测凋亡相关基因bax的表达。结果：刺五加多糖对S180肉瘤小鼠抑瘤率达30．42-47．38％，其促进肿瘤细胞凋亡率和bax基因的表达。结论：刺五加多糖具有明确的抑瘤作用，影响肿瘤细胞凋亡和凋亡相关基因bax的表达是其作用可能机制之一。     

扶正抑瘤颗粒对小鼠移植性肿瘤细胞间通讯的影响

目的:观察扶正抑瘤颗粒(红芪、当归、墓头回、莪术)含药血清对荷瘤小鼠H22细胞的凋亡和肿瘤细胞间通讯的影响.方法:Annexin V/PI双染法检测FYK含药血清对H22细胞凋亡情况的影响;应用共聚焦激光显微镜检测H22细胞RNA、DNA、[Ca2 ]、细胞间通讯状况.结果:扶正抑瘤颗粒含药血清可引起H22细胞的凋亡,细胞RNA、DNA含量降低,[Ca2 ]升高,细胞间通讯状况得到改善.结论:扶正抑瘤颗粒含药血清抑制H22细胞的增殖,并提高肿瘤细胞[Ca2 ],阻止肿瘤细胞分裂.     

扶正抑瘤颗粒对H22荷瘤小鼠肿瘤细胞P53、 BCL-2蛋白表达的影响

目的:观察扶正抑瘤颗粒(FYK)对小鼠肿瘤细胞凋亡相关基因P53、BCL-2蛋白表达的影响。方法:将48只小鼠分成FYK大剂量组、FYK小剂量组、天仙胶囊阳性对照组和荷瘤模型组,造模形成实体瘤后分别灌胃FYK、天仙胶囊、生理盐水18天,取瘤组织用流式细胞仪检测P53、BCL-2蛋白表达。结果:FYK组肿瘤细胞P53蛋白表达升高、BCL-2蛋白表达下降,与模型组相比较有显著性差异(P<0.01)。结论:FYK具有促进肿瘤细胞P53表达和抑制BCL-2表达作用。     

三氧化二砷诱导小鼠膀胱癌细胞凋亡机制的研究

目的研究三氧化二砷对小鼠膀胱癌细胞生长抑制、诱导凋亡的生物学效应及作用机制.方法通过MTT法检测三氧化二砷对肿瘤细胞生长的影响,用光镜、电镜、流式细胞仪、DNA凝胶电泳检测三氧化二砷诱导细胞凋亡,用分光光度仪、流式细胞仪检测三氧化二砷对肿瘤细胞膜系统及死亡受体表达的影响.结果三氧化二砷可以明显抑制小鼠膀胱癌细胞的生长,三氧化二砷作用肿瘤细胞后,光镜、电镜下可见特征性凋亡细胞的出现,流式细胞仪检测出在G1期前出现凋亡峰,DNA凝胶电泳显示出凋亡特征性的梯带现象.三氧化二砷对肿瘤细胞膜系统有明显的影响,可以降低细胞膜脂的流动性,增加MDA的产生,增加膜死亡受体Fas、FasL的表达.结论三氧化二砷能显著抑制小鼠膀胱癌细胞的生长,并通过降低细胞膜脂的流动性,促进肿瘤细胞膜中脂质过氧化,增加死亡受体Fas及FasL的表达作为其信号传导途径,从而实现诱导肿瘤细胞凋亡.     

扶正抑瘤颗粒对食管癌、胃癌组织细胞周期及核转录因子的影响

目的：观察扶正抑瘤颗粒对食管癌、胃癌患者肿瘤组织细胞周期及核转录因子(NF-κB)的影响。方法：76例食管癌、胃癌患者随机分为2组,服药组服用扶正抑瘤颗粒15日后,与对照组分别采取手术切除肿瘤组织,用流式细胞仪检测肿瘤组织细胞周期、凋亡率和NF-κB水平。结果：服药组较对照组NF-κB水平明显升高(P<0．05);肿瘤细胞G0／G1期比率明显升高(P<0．05),S期比率明显降低(P<0．05)。同时,服药组癌细胞有明显的凋亡现象,其凋亡率与对照组比较差异有显著性(P<0．01)。结论：扶正抑瘤颗粒可提高肿瘤细胞NF-κB的表达,阻滞肿瘤细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡。     

消瘤饮的抑瘤作用及其诱导凋亡和bax基因表达的影响

目的：探讨消瘤饮的押瘤作用及其可能作用机制。方法：观察消瘿饮对S180肉瘤小鼠的抑瘤作用，采用流式细胞术对肉瘤组织细胞悬液检测其诱导凋亡作用；计算凋亡率：同时检测凋亡相关基因bax的表达。结果：消瘸对S180肉瘤小鼠抑瘤率达37．16—48．17％；其他促进凋亡率和bax基因的表达。结论：消瘤饮具有明确的抑瘤作用，影响肿瘤细胞凋亡和相二基因bax的表达是其作用可能机制。     

三叶青黄酮诱导SMMC-7721肝癌细胞凋亡的实验研究

目的 观察三叶青黄酮对SMMC-7721肝癌细胞诱导凋亡的作用.方法 通过四氮噻唑蓝(MTT)比色法检测三叶青黄酮对细胞的抑制增殖作用;光学显微镜、荧光显微镜下形态学观察;DNA琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪(FCM)研究分析三叶青黄酮对肝癌细胞的诱导凋亡作用.结果 三叶青黄酮能显著的抑制SMMC-7721肝癌细胞的生长,并具有浓度依赖性.光学显微镜、荧光显微镜下观察,发现细胞凋亡现象;DNA琼脂糖凝胶电泳可见DNA梯形条带;流式细胞仪(FCM)检测分析出现凋亡亚二倍体峰.结论 三叶青黄酮对肝癌细胞具有诱导凋亡作用,有抗肝癌的药用价值.     

荔枝核对小鼠S_(180),EAC细胞生长及凋亡作用的实验研究

目的利用血清药理学的方法,观察荔枝核含药血清体外的抑制肿瘤细胞生长;并研究荔枝核对小鼠S180,EAC体内、外细胞生长及凋亡作用。方法小鼠S180,EAC细胞混悬液用生理盐水按1:1进行稀释制成含瘤腹水混悬液,在给药前24 h,每只小鼠腋窝皮下接种0.2 ml。荔枝核水提液对小鼠S180,EAC抑瘤实验连续给药10 d。测定肿瘤作用与细胞凋亡表达。结果荔枝核提取物30%含药血清高中剂量和20%含药血清高剂量对HepG2肿瘤细胞具有明显的抑瘤作用,Hochest染色肿瘤细胞出现凋亡形态;而流式细胞仪检测可见30%含药血清高中低剂量的促肿瘤凋亡率分别是63.3%,45.5%和23.8%,明显高于正常血清组。荔枝核水提物能够明显抑制S180,EAC肿瘤的生长(P<0.05),荔枝核提取物对荷S180小鼠高剂量组的抑瘤率达到32.81%。对荷EAC实体瘤小鼠的肿瘤其抑瘤率达到30.62%;结论荔枝核具有抑制小鼠S180,EAC体内、外细胞生长的影响,促进肿瘤细胞的凋亡,从而表现抗肿瘤的作用。     

荔枝核对小鼠S180，EAC细胞生长及调亡作用的实验研究

目的利用血清药理学的方法，观察荔枝核含药血清体外的抑制肿瘤细胞生长；并研究荔枝核对小鼠S180，EAC体内、外细胞生长及调亡作用。方法小鼠S180，EAC细胞混悬液用生理盐水按1：1进行稀释制成含瘤腹水混悬液，在给药前24h，每只小鼠腋窝皮下接种0.2ml。荔枝核水提液对小鼠S180，EAC抑瘤实验连续给药10d。测定肿瘤作用与细胞凋亡表达。结果荔枝核提取物30％含药血清高中剂量和20％含药血清高剂量对HepG2肿瘤细胞具有明显的抑瘤作用，Hochest染色肿瘤细胞出现凋亡形态；而流式细胞仪检测可见30％含药血清高中低剂量的促肿瘤凋亡率分别是63．3％，45．5％和23．8％，明显高于正常血清组。荔枝核水提物能够明显抑制S180，EAC肿瘤的生长（P〈0．05），荔枝核提取物对荷S180小鼠高剂量组的抑瘤率达到32．81％。对荷EAC实体瘤小鼠的肿瘤其抑瘤率达到30．62％；结论荔枝核具有抑制小鼠S180，EAC体内、外细胞生长的影响，促进肿瘤细胞的凋亡，从而表现抗肿瘤的作用。     

附子多糖对H22和S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用研究

目的 :研究附子粗多糖和酸性多糖对S180、H2 2荷瘤小鼠的抑瘤作用并探讨其作用机制。方法 :采用水提醇沉法得到附子粗多糖和酸性多糖 ,通过腹腔注射和灌胃两种途径给药 ,以肿瘤生长抑制率和存活延长率为指标观察附子多糖对荷瘤小鼠 (S180和H2 2 )的抑瘤作用 ,并通过检测淋巴细胞转化能力、NK细胞活性、肿瘤细胞凋亡率、癌基因和细胞增殖指数 (PI)等指标探讨其抗肿瘤作用机制。结果 :附子粗多糖和酸性多糖对H2 2荷瘤小鼠肿瘤有显著的抑瘤作用 ,灌胃给药的抑瘤率分别为 4 5 30 %和 5 9 36 % (P <0 0 1) ,腹腔给药的抑瘤率分别为 4 9 6 5 %和 6 9 2 8% (P <0 0 1)。两种多糖对S180荷瘤小鼠肿瘤也有较显著的抑制作用。附子多糖对S180和H2 2荷瘤小鼠有延长存活时间的作用 (P <0 0 5或P <0 0 1)。两种多糖均明显增大了小鼠脾脏的重量 (P <0 0 1) ,提高了荷瘤小鼠的淋巴细胞转化能力 (P <0 0 5 )和NK细胞活性 (P <0 0 1) ,提高了抑癌基因p5 3和Fas的表达 (P <0 0 1) ,并且提高了肿瘤细胞凋亡率 (P <0 0 1)。结论 :附子粗多糖和酸性多糖有显著的抑瘤作用 ,其作用机制主要是增强机体的细胞免疫功能 ,诱导肿瘤细胞凋亡和调节癌基因的表达。