PDGF-B在闭合性脑损伤组织中的表达

目的了解闭合性脑损伤后PDGF—B的表达变化。方法制备液压冲击脑损伤大鼠模型,应用免疫组化技术观察大鼠脑损伤后不同时间PDGF—B的表达情况,并应用图象分析仪进行分析。结果脑损伤后1h PDGF—B表达上调,4～7d达高峰,14d时仍高于对照组。结论液压冲击脑损伤后PDGF—B表达上调,且呈一定的时序性变化规律,可望成为脑损伤时间推断的新的指标。     

大鼠弥漫性脑损伤后BDNF表达的法医学研究

目的:观察大鼠弥漫性脑损伤后BDNF的表达变化。方法:采用Marmarou的弥漫性脑损伤模型,分别于伤后15min、30min、lh、3h、6h、12h、24h、48h、72h取脑组织,运用免疫组化SABC法观察BDNF的表达,以正常大鼠和假手术大鼠作为对照。结果:正常大鼠即有少量BDNF的表达。打击后15min,BDNF表达增强,1h达高峰,48h降至正常水平。结论:机体对脑损伤存在自我保护机制;BDNF的时序性变化可望为法医学脑损伤时间的推断提供参考。     

大鼠脊髓损伤后神经生长因子BDNF\轴突导向因子slit-2的表达变化

目的:研究脊髓损伤后神经生长因子BDNF和轴突导向因子slit-2的表达变化,同时观察大鼠行为学、脊髓形态学及体感诱发电位(SEP)的变化特点.方法:雄性SD大鼠45只,随机分成正常组,假手术组和手术后1、3、5、7、14、21、28天组,每组各5只.免疫组化法观察神经生长因子BDNF\slit-2的表达变化,计算阳性细胞灰度值,并进行统计学分析.BBB法进行功能评分.HE染色观察脊髓损伤后不同时期的形态学变化.结果:大鼠脊髓损伤后,肢体瘫痪从第7天开始明显恢复直至28天.免疫组化结果正常组和假手术组脊髓前角BDNF\slit-2的表达较低.脊髓损伤24 h后,损伤位点前角神经元中,BDNF\slit-2表达活跃,3天表达达高峰.形态学显示了损伤后脊髓出血吸收、变性的过程.结论:成年大鼠脊髓损伤后,神经生长因子BDNF和轴突导向因子slit-2随之上调,呈一定规律性,提示两者与脊髓损伤后神经再生相关.且BDNF、slit-2主要表达于脊髓前角,提示与脊髓损伤后肢体运动功能恢复密切相关.     

大鼠闭合性脑损伤后5-LOX、c-fos蛋白、NSE的表达及表达时相的研究

目的探讨5-脂氧合酶(5-LOX)、c-fos蛋白及神经元特异性烯醇化酶(NSE)在闭合性脑损伤后不同时间点的表达情况及其意义。方法 Wistar大鼠55只随机分成正常对照组、假损伤组及损伤后0.5h组、1h组、2h组、4h组、8h组、12h组、24h组、48h组、72h组。用免疫组化(SP)法检测5-LOX、c-fos蛋白和ELISA检测NSE在闭合性脑损伤后不同时间点的表达情况。结果 5-LOX免疫阳性细胞在损伤后8h明显增高,24h达到高峰,然后逐渐降低,损伤72h后仍高于正常值;c-fos蛋白于损伤0.5h后表达明显增高,8h达到高峰,24h降至正常值;血清中的NSE于损伤2h候表达增高,24小时达到高峰,损伤72h后仍高于正常值。结论大鼠闭合性脑损伤后5-LOX、c-fos蛋白及血清中的NSE表达均上调,且各自具有时间规律,有希望为法医学中的颅脑损伤时间的推断提供参考。     

大鼠液压脑损伤后bcl-2和bax基因的表达分布

目的;观察SD大鼠单侧液压脑损伤后凋亡相关基因（bcl-2,bax）在脑组织中的表达特点。方法：采用侧方液压打击颅脑损伤模型,应用免疫组化和原位杂交方法,以及计算机显微图像分析技术,观察SD大鼠脑损伤后12 b脑内bcl-2、bax蛋白和mRNA的阳性细胞分布。结果：液压打击伤后bcl-2、bax基因在损伤侧大脑皮质、海马表达明显增强,挫裂伤组织内的血肿周边bcl-2、bax基因表达亦明显增强,阳性细胞受打击能量传递的影响呈梯度分布。结论：大鼠液压脑损伤后bcl-2和bax基因的表达分布受打击能量和脑内血肿的影响,并与脑损伤后迟发性神经元死亡（delayed neuron death,DND）密切相关。     

VEGF、COX-2在甲状腺癌中的表达及临床意义

目的探讨VEGF、COX-2在甲状腺癌肿的表达及其临床意义。方法采用免疫组化的方法,对71例甲状腺癌、53例甲状腺良性肿瘤、10例正常甲状腺组织VEGF、COX-2的表达进行检测,并将甲状腺癌的组织学分型、淋巴转移、病人年龄、性别进行对比分析。结果甲状腺癌、甲状腺良性肿瘤、正常甲状腺组织中VEGF的表达阳性率分别为77.5%,15.1%,11.1%,差异具有统计学意义(P<0.05),COX-2的表达阳性率分别为64.8%、13.2%、11.1%,差异具有统计学意义(P<0.05)。甲状腺癌中VEGF和COX-2的表达与组织病理分型和淋巴结转移比较的差异具有统计学意义(P<0.05);在乳头状癌、滤泡状癌、髓样癌、未分化癌中VEGF的表达阳性率分别为81.8%、68.8%、55.6%、92.3%,COX-2的表达阳性率分别为81.8%、88.2%、77.7%、92.3%。而与甲状腺癌患者的年龄、性别无关(P>0.05)。甲状腺癌中VEGF的表达和COX-2的表达呈正相关。结论 VEGF和COX-2在甲状腺癌的发生、发展中均起到重要作用,并且存在一定的协同作用,两者联合检测能为甲状腺癌的恶性程度以及预后判断上提供有力证据。     

重度心肌挫伤心肌细胞中COX-2表达的实验研究

目的观察大鼠重度心肌挫伤后不同时间段挫伤区周围心肌细胞的COX-2阳性染色强度变化与损伤后经过时间之间的关系。方法运用免疫组织化学技术(SABC法),结合计算机彩色图像分析技术观察大鼠实验性重度心肌挫伤后COX-2的染色变化。结果 COX-2参与了重度心肌挫伤后细胞的损伤.结论心肌挫伤后的时序性变化规律使COX-2有可能成为重度心肌挫伤时间推断的客观指标以及生前伤和死后伤的鉴别指标。     

VEGF、COX-2在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）和环氧化酶-2（COX-2）在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法应用免疫组化S—P法检测不同乳腺组织中VEGF和COX-2的表达情况。结果VEGF、COX一2在乳腺导管癌组织中的表达明显上调,与其在正常乳腺组织、纤维腺瘤组织中的表达相比差异显著（P〈0．01）。VEGF、COX-2在乳腺浸润性导管癌中的阳性表达率高于其在乳腺导管癌中的阳性表达率。两组中COX-2的表达有显著性差异（77．1％和40％,P〈0．05）,VEGF的表达无显著性差异（80．0％和70％,P〉0．05）。VEGF在乳腺浸润性导管癌的阳性表达与其临床分期、淋巴结转移密切相关（P〈0．05,P〈0．01）,与肿瘤大小无关（P〉0．05）。COX-2在乳腺浸润性导管癌中的阳性表达与其临床分期、淋巴结转移及肿瘤大小均无关（P〉0．05）。VEGF、COX-2在乳腺导管癌中的表达呈正相关（r=0．98,P〈0．05）。结论VEGF、COX-2的高表达在乳腺癌的发生发展过程中起重要的作用,检测其表达异常对判断临床进展以及推测预后有一定的参考价值。     

丙泊酚对脑损伤大鼠认知功能及BDNF表达的影响

［摘要］目的　研究丙泊酚对创伤性脑损伤后大鼠认知功能以及脑皮质BDNF表达的影响,并阐明其脑保护的作用．方法　随机将训练后的48只成年SD大鼠随机分成3组．假手术组仅行手术操作,不给予改良的Feeney氏法自由落体撞击;对照组采用改良的Feeney氏法制作大鼠脑外伤模型;丙泊酚组在脑外伤模型制备后继续经尾静脉注射丙泊酚10 mL/(kg·h) 100 mg/(kg·h),持续6 h．术后3 d和14 d对大鼠进行神经功能缺损评分（NSS评分）和Morris水迷宫试验判定大鼠神经行为学功能,取材损伤皮质分别行RT-PCR、Western blot测定脑皮质BDNF表达情况．结果　与假手术组比较,对照组术后3 d、14 d 脑NSS评分增加、逃避潜伏期延长、穿越平台次数减少均具有统计学意义（P＜0.01）,而皮质BDNF表达仅在术后3 d减少（P＜0.01）,术后14 d差异无统计学意义（P＞0.05）．与对照组比较,丙泊酚组脑皮质BDNF表达在术后3 d、14 d表达均增加（P＜0.01）;且术后14 d,NSS评分减少、逃避潜伏期缩短、穿越平台次数增加（P＜0.01）．结论　丙泊酚促进创伤性脑损伤大鼠神经功能和学习记忆认知功能的恢复可能与促进BDNF的表达相关．     

闭合性脑损伤后NGF基因表达时间性变化的实验研究

目的:探讨大鼠闭合性脑损伤后 NGF基因表达的时间性变化。方法:采用逆转录 -聚合酶链反应 (RT-PCR)法 ,半定量分析闭合性脑损伤后 0、3、6、12 h和 1、3、5、7、9、11d脑组织中神经生长因子 (NGF ) m RNA表达的时间性变化。 结果:大鼠正常脑组织中存在 NGF m RNA,但表达量较低。当发生闭合性脑损伤后 ,其脑组织NGF基因的表达量明显增加 ,3d后达到高峰 ,7d后开始下降 ,11d后则降至一般水平。结论:闭合性脑损伤后脑组织中 NGF m RNA表达量显著升高 ,并呈现一定的规律性 ,这对于重构犯罪过程、探索脑损伤时间的推断方法具有重要的实验研究意义。     

脑损伤大鼠运动皮质BDNF的表达变化

目的观察创伤性脑损伤(TBI)大鼠脑组织运动皮质脑源性神经营养因子(BDNF)表达变化并探讨其与神经行为学的关系。方法成年SD大鼠分假手术对照组和自由落体脑外伤组(TBI组),每组13只。TBI后1、3、8、13d分别进行大鼠神经功能缺损评分(NSS)。术后7d处死大鼠,取损伤处脑组织行RT-PCR检测BDNFmRNA表达;术后13d处死大鼠,取损伤处脑组织行免疫组化和原位杂交检测BDNF表达。结果 TBI后大鼠神经行为明显受损,NSS评分较假手术组增加(P<0.05),但随时间延长NSS评分有所下降(P<0.05)。RT-PCR结果显示,BDNF mRNA表达水平TBI组和假手术组差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组化和原位杂交染色结果显示,BDNF蛋白和mRNA主要分布在皮质神经元,阳性细胞数量明显减少(P<0.05),而细胞内BDNF的光密度值则明显增加(P<0.05)。结论 TBI后大鼠神经功能有一定恢复,其机制可能与备用神经元内BDNF的表达水平上调有关。     

大鼠颅脑创伤后NaV1.6在海马的表达

目的 研究颅脑创伤(TBI)后NaV1.6的mRNA和蛋白在海马中的表达变化.方法 对成年SD大鼠实施脑液压伤,分别在伤后2、12、24和72 h处死大鼠,取伤侧海马行Real-time PCR和Western blotting,检测NaV1.6的mRNA和蛋白表达.结果 大鼠脑液压伤后2 h,NaV1.6 mRNA表达显著上调(P＜0.001),伤后12 h达最高水平;NaV1.6蛋白表达显著上调,并持续至伤后72 h(P＜0.01).结论 TBI可导致NaV1.6的mRNA和蛋白表达显著上调,这可能是TBI后神经元细胞膜上钠通道功能异常及其诱发兴奋性毒性作用的分子学基础之一.     

大鼠颅脑创伤后NaV1.6在海马的表达

目曲研究颅脑创伤（TBI）后Nav1．6的mRNA和蛋白在海马中的表达变化。方法对成年SD大鼠实施脑液压伤,分别在伤后2、12、24和72h处死大鼠,取伤侧海马行Real—time PCR和Western blotting,检测Nav1．6的mRNA和蛋白表达。结果大鼠脑液压伤后2h,Naf1．6mRNA表达显著上调（P〈0．001）,伤后12h达最高水平;Nav1．6蛋白表达显著上调,并持续至伤后72h（P〈0．01）。结论TBI可导致Nav1．6的mRNA和蛋白表达显著上调,这可能是TBI后神经元细胞膜上钠通道功能异常及其诱发兴奋性毒性作用的分子学基础之一。     

CRM1在创伤性脑损伤大鼠脑中的表达变化

目的:研究靶向调控运输蛋白(Chromosome region maintenance1,CRM1)在创伤性脑损伤中的表达变化。方法:采用Western blot和免疫组织化学荧光法检测脑损伤后CRM1在脑中的表达变化。结果:(1)假手术组皮质CRM1蛋白水平低,在损伤后12小时逐步增加,在损伤后3天达到高峰,之后恢复到正常水平。非手术对侧皮层中CRM1表达没有明显改变。(2)免疫组化荧光测定:损伤后CRM1表达水平不但上升,且有入核的亚定位变化,主要定位在神经元中。而假手术组和对侧则主要定位在胞浆中。结论:推测CRM1在创伤性脑损伤后与神经元凋亡有关。     

大鼠重型颅脑创伤后COX-2蛋白表达对学习记忆功能的影响

目的:观察大鼠重型颅脑创伤后COX-2的表达及选择性COX-2抑制剂NS-398对大鼠重型颅脑创伤后学习记忆功能的影响. 方法: 采用Marmarou's方法建立大鼠重型闭合性颅脑创伤模型, 将成年Wistar大鼠360只随机分为脑创伤组、NS-398治疗组、假手术组,每组又分为伤后1, 3, 6, 12, 24, 48, 72, 96, 168及336 h 10 个时相组,另取120只作为正常对照组. NS-398治疗组经致伤后, 给予腹腔注射NS-398 40 mg/(kg·d), 直至各时相点处死;脑创伤组、假手术组及正常对照组在相同时间给予等量的生理盐水腹腔注射. 各组均在相应的时间点处死取材应用Western Blot方法及免疫组化法检测COX-2蛋白变化. 再取24只大鼠随机分为脑创伤组、NS-398治疗组、假手术组及正常对照组,进行水迷宫测试. 结果: NS-398能够使大鼠脑内COX-2蛋白表达高峰明显下调,使水迷宫测试的潜伏期明显缩短. 结论:提示COX-2与脑创伤后引发的继发性脑损伤密切相关, NS-398能够明显改善大鼠重型颅脑创伤后学习记忆障碍.     

谷氨酸受体-2在闭合性颅脑损伤中的表达

【目的】研究闭合性脑损伤后GluR2在脑组织中的表达部位、时序性特点【方法】采用清洁级SD大鼠随机分为对照组及损伤后1 h组、2 h组、4 h组、8 h组、12 h组、24 h组、2 d组、3 d组、5 d组、7 d组,复制marmarou＇s落体打击脑损伤模型。免疫组化SP法检测SD大鼠脑组织GluR2的表达情况。采用Mias 2000图像分析系统采集并计算阳性细胞数和阳性细胞面积。以P〈0.05为显著性差异的水准。【结果】对照组顶叶皮层、海马等部位均有免疫反应阳性细胞表达。损伤后阳性细胞表达减少,12~24 h达最低值,顶叶皮层、海马CA4、CA3、脑底皮层阳性细胞面积、阳性细胞计数与对照组比较差别有极显著意义（P〈0.01）【结论】脑损伤后,GluR2表达逐渐减少,提示其参与颅脑损伤病理生理过程。     

CtBP2在大鼠创伤性损伤脑中的表达及意义

目的:研究C-末端结合蛋白2(C-terminal binding protein 2,CtBP2)在创伤性脑损伤(traumatic brain in-jury,TBI)后脑中的表达变化。方法:建立大鼠TBI模型,采用Western Blot、免疫组织化学和免疫荧光检测CtBP2在损伤脑中的表达变化。结果:CtBP2在TBI后脑组织中的表达水平增加,以损伤后3~5 d最为明显(P<0.05),免疫组织化学检测发现在损伤侧大脑皮层中CtBP2表达水平较假手术组和损伤对侧增高,并且CtBP2与星形胶质细胞有共定位。结论:CtBP2在TBI后与星形胶质细胞活化增殖有一定的关系。     

重型脑挫裂伤患者伤后脑组织诱导型一氧化氮合酶表达的变化

目的:探讨重型脑挫裂伤后诱导型一氧化氮合酶(induced nitric oxide synthase,iNOS)在脑组织中的表达变化及意义.方法:根据损伤后就诊时间将38例重型脑挫裂伤患者分为6组(0～6 h 7例,6～12 h 8例,12～24 h 9例,24～36 h 5例,36～72 h 6例,72 h以上3例),以4例良性脑肿瘤患者手术切除的部分正常脑组织为对照组.尼氏染色法观察重型脑挫裂伤后神经细胞病理变化过程,RT-PCR检测iNOS mRNA的变化,免疫组织化学染色方法观察iNOS阳性细胞的表达变化.结果:尼氏法染色发现损伤区神经细胞减少;RT-PCR结果发现,与正常对照组相比,重型脑挫裂伤后0～6 h创伤区周围iNOS mRNA表达量开始上升,12～24 h达到高峰,随后渐下降,72 h以后仍有表达;免疫组化结果发现iNOS阳性细胞表达增加在伤后12～24 h达到高峰;相关性分析结果显示iNOS mRNA相对灰度值与iNOS阳性细胞数呈高度正相关(r=0.956,P=0.003).结论:重型脑挫裂伤损伤区及周边皮质iNOS的表达增加,iNOS mRNA的表达与iNOS阳性细胞数呈正相关.     

p53诱导死亡结构域蛋白在大鼠创伤性脑损伤中的表达变化

目的:探索创伤性脑损伤病理过程中p53诱导死亡结构域蛋白(PIDD)的表达变化。方法:建立大鼠脑损伤模型,采用免疫印迹法和免疫组织化学法检测损伤后的大鼠皮层组织中PIDD的表达和定位变化。结果:(1)在假手术脑组织中,PIDD表达很低,脑损伤后其表达逐渐增加,在3天左右达到最高峰,之后表达下降;(2)免疫组织化学法和免疫荧光实验表明,PIDD在损伤后的脑组织中表达明显上升,并且主要定位于神经元之中。     

大鼠创伤性脑损伤后胰岛素抵抗的研究

目的:探讨大鼠创伤性脑损伤后是否存在胰岛素抵抗现象.方法:采用大鼠自由落体脑损伤模型(Feeney'smodel),分别在伤前1/2h及伤后6、12、24、48、72、120h测定轻、中、重型脑损伤动物的血糖和血清胰岛素值.运用正常血糖-高血胰岛素钳夹技术,检测大鼠重型创伤性脑损伤后24h后BG60-120、GIR60-120、ISI等3个反映胰岛素敏感性的指标.结果:中、重型创伤性脑损伤后大鼠血糖含量升高的同时血清胰岛素水平升高,大鼠重型创伤性脑损伤后24hBG60-120显著地升高,GIR60-120、ISI显著地降低.结论:在重型创伤性脑损伤急性期,大鼠血糖和血清胰岛素水平均显著地升高,高水平的胰岛素未能起到相应的降低血糖的作用,与机体产生胰岛素抵抗有关.