龙牙楤木总皂苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护机制的研究

目的:观察龙牙楤木总皂苷对缺血再灌注损伤心肌炎症因子ICAM-1表达及SOD的影响。方法:可逆性冠脉左前降支结扎缺血45min再灌注6h复制MI/R模型,Wistar雄性大鼠30只,随机分成模型组、龙牙楤木组、波立维组,每组10只。HE染色观察心肌病理学变化,测定心肌SOD活性,ELISA法测定血清sICAM-1的表达。结果:与模型组比较,龙牙楤木总皂苷、波立维均能显著降低缺血再灌注大鼠血清LDH含量,显著升高SOD的活性,缺血45min再灌注6h血清sICAM-1有明显表达,各组之间无统计学差异。结论:龙牙楤木总皂苷对MI/R有保护作用,可能是通过增加SOD的活力,对抗氧自由基对心肌细胞的毒害作用,减轻心肌细胞的损伤而实现的。     

龙牙楤木总皂苷对离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究

目的探讨龙牙楤木总皂苷对离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法利用Langendorff离体心脏灌流装置,通过结扎左冠状动脉前降支30分钟,复灌75分钟,构建离体大鼠心脏缺血再灌注模型,将48只大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、MCC950组、龙牙组,利用多导生理仪记录全程心率(heart rate,HR)、左心室发展压(left ventricular developed pressure,LVDP)、左心室内压最大上升速率(+dp/dtMax)、左心室内压最大下降速率(-dp/dtMax)、2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色观察梗死面积、苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察心肌组织病理改变、采用酶联免疫法(ELISA)检测灌流液中肌酸激酶(creatine kinase,CK)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量。结果与假手术组比较,模型组再灌注时出现明显的心率失常,且出现灰白色梗死区;与模型组比较,假手术组、龙牙组、MCC950组各时刻心率无明显变化,差异无统计学意义(P0.05),龙牙组、MCC950组可明显升高再灌注时LVDP、±dp/dtMax,差异具有统计学意义(P0.05);与模型组比较,龙牙组、MCC950组可减少心肌细胞破碎、心肌纤维断裂和炎性细胞浸润,明显降低再灌注时灌流液中心肌酶CK、LDH、MDA的含量,升高SOD的含量。结论龙牙楤木总皂苷可通过抑制NLRP3炎症小体途径发挥抗心肌缺血再灌注损伤的作用。     

龙牙楤木总皂苷对缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞线粒体细胞色素C和膜电位的影响及其作用机制

目的:观察龙牙楤木总皂苷、Mito KATP激活剂二氮嗪(DZ)、Mito KATP抑制剂5-羟基癸酸(5-HD)、龙牙+5-HD对大鼠缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)心肌线粒体细胞色素C和膜电位的影响,并探讨龙牙楤木总皂苷在减轻MIRI中的作用及其机制。方法:将60只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(假手术组)、模型组、DZ组、5-HD组、龙牙组和龙牙+5-HD组,每组10只,建立Langendorff离体心脏灌流模型。对照组只穿线不结扎,以改良K-H液持续平衡灌流105分钟;其余5组均穿线结扎冠状动脉停灌30分钟,再分别以改良K-H液、DZ、5-HD、龙牙楤木总皂苷、龙牙+5-HD复灌75分钟(其中龙牙+5-HD组以5-HD复灌15分钟继以龙牙楤木总皂苷复灌60分钟)。提取线粒体,western-blot半定量测定线粒体内细胞色素C水平,荧光酶标仪测线粒体膜电位。结果:龙牙组线粒体细胞色素C释放减少,膜电位较高,与模型组、5-HD组、龙牙+5-HD组相比差异有统计学意义(P0.05),与DZ组相比差异无统计学意义(P0.05)。结论:龙牙楤木总皂苷在MIRI时起到保护作用,能减少MIRI时细胞色素C的释放,稳定线粒体膜电位,其作用可能与mito KATP的开放有关。     

基于PI3K/Akt信号通路探讨龙牙楤木总皂苷抗心肌缺血再灌注损伤的机制

目的 基于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路探讨龙牙楤木总皂苷抗心肌缺血再灌注损伤的机制。方法 将60只大鼠随机分为假手术组、模型组、龙牙楤木总皂苷组、LY29004组、LY29004+龙牙楤木总皂苷组，每组10只。除假手术组外，其余组利用Langendorff离体心脏灌流装置，通过结扎左冠状动脉前降支30 min、复灌75 min的方法构建离体大鼠心脏再灌注模型。模型组采用K-H液恒速灌流；龙牙楤木总皂苷组和LY29004组分别采用含5 mg/L龙牙楤木总皂苷的K-H液和含15μmol/L LY29004的K-H液恒速灌流；LY29004+龙牙楤木总皂苷组先给予含15μmol/L LY29004的K-H液灌流15 min,再以含5 mg/L龙牙楤木总皂苷的K-H液灌流60 min。采用Western blot法检测心肌组织中PI3K/Akt信号通路相关蛋白[Akt、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、糖原合酶激酶3β(GSK-3β)、磷酸化糖原合酶激酶3β(p-GSK-3β)]表达情况，免疫组化法检测心肌组织中凋亡相关蛋白[半胱氨酸天门冬氨酸酶3(Caspase-...     

龙牙楤木总皂苷对缺血/再灌注心肌细胞收缩功能和钙瞬变的影响

为探讨龙牙楤木总皂苷(AS)对缺血/再灌注(I/R)诱导大鼠心肌细胞损伤的保护作用,采用乳酸钠灌注液灌注成年大鼠的心室肌细胞模拟缺血,含钙台式液模拟再灌注,细胞收缩与离子浓度同步测定系统同步检测AS对单个I/R细胞收缩和钙瞬变的影响.发现AS使再灌注后心肌细胞静息态肌小节长度、收缩幅度、收缩/舒张速度以及钙瞬变幅度、速度增大(P ＜0.05,P＜0.01),细胞达到舒张时最大长度的90.0％的时间、细胞收缩达峰值的时间、稳态钙静息值、收缩期[Ca2+]i上升到最高的50.0％的时间、胞内钙瞬变衰减率减少(P ＜0.05,P＜0.01).因此,推测AS改善了缺血再灌注后细胞收缩与钙稳态的损伤.     

三七茎叶总皂苷对心肌缺血再灌注损伤保护作用研究

目的：研究三七茎叶总皂苷（PNSSL）对缺血再灌注损伤大鼠心肌的保护作用,为PNSSL的开发利用提供基础。方法：将SD大鼠随机分为6组,即假手术组、模型组40,80,160 mg·kg-1组、地奥心血康组,连续给药七天,末次给药后通过结扎冠状动脉左前降支的方法建立大鼠缺血再灌注损伤模型。观察缺血再灌注大鼠II导联心电图ST段的变化情况,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法检测心肌梗死面积,测定大鼠血清中乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）活性以及心肌组织中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性和丙二醛（MDA）含量,通过苏木精-伊红（HE）染色法观察缺血再灌心肌的病理形态。结果：与模型组相比,PNSSL各剂量组对于大鼠心电图ST段升高均具有降低作用,能够减少心肌梗死范围,其中PNSSL80,160 mg·kg-1组降低显著（P<0.05）;PNSSL160 mg·kg-1剂量能够明显降低血清中心肌酶活性（P<0.05）,PNSSL80 mg·kg-1显著升高心肌组织中SOD和GSH-Px的活性（P<0.05）。病理染色中,PNSSL组心肌组织间质水肿明显减轻,纤维排列整齐,心肌组织损伤降低。结论：三七茎叶总皂苷能够改善 由缺血再灌注引起的心肌组织损伤,改善心电图变化,提高细胞膜稳定性,清除氧自由基,减少炎性浸润,具有心肌保护作用。     

三七总皂苷对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用及机制的实验研究

目的：探讨三七总皂苷注射液对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法：40只Wistar大鼠被随机分为4组：假手术组、缺血再灌注损伤模型组、尼莫地平对照（Nim）组、三七总皂苷注射液处理组（PNS）。建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型，对脑水肿和脑梗死进行测量，并采用硫代巴比妥酸盐法测定MDA含量、邻苯三酚自氧化法测定SOD活性。结果：PNS组与模型组比较，脑组织含水量减少（P〈0．01），脑梗死面积显著减小（P〈0．05）；SOD活力显著升高（P〈0．05），MDA含量显著降低（P〈0．05）。结论：MDA是反映组织损伤程度的物质、SOD是体内重要的内源性保护物质，三七总皂苷注射液可降低缺血脑组织MDA的含量、增加SOD活性而发挥对脑的保护作用。     

龙牙楤木对大鼠急性心梗死亡率的影响

急性心肌梗死（AMI）早期,由于心肌缺血、再灌注损伤可以引起折返、触发活动及延迟后除极等多种心电不稳定现象,易发生室性心律失常和猝死。龙牙槐木（Araliaelate）提取物中的主要化学成分为皂苷,具有抗心肌缺血、抗衰老、抗炎和抗癌等多方面的作用。本研究旨在研究龙牙稳木总皂苷（Aralosides,As）对急性心肌梗死引发的室性心律失常及生存率的改善作用,以期为As的临床应用提供实验依据。     

龙牙楤木总皂苷及楤木皂苷A对缺氧/复氧诱导的AC16心肌细胞铁死亡的影响

目的 探讨龙牙楤木总皂苷及其组分楤木皂苷A能否减轻缺氧/复氧诱导的AC16心肌细胞铁死亡。方法 将AC16细胞随机分为正常组、模型组、龙牙楤木总皂苷组、楤木皂苷A组。通过缺氧24小时、复氧12小时建立AC16细胞缺氧/复氧模型,药物组缺氧/复氧损伤前6小时给予药物处理。CCK-8检测细胞存活率,乳酸脱氢酶检测试剂盒检测细胞受损程度,透射电子显微镜观察AC16细胞形态学变化,比色法检测Fe²⁺水平,酶联免疫试剂盒检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)和谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平,DHE荧光探针检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,蛋白免疫印迹法检测铁死亡相关蛋白p53、SLC7A11、SAT1、GLS2的表达。结果 与正常组相比,模型组AC16细胞存活率明显下降,细胞受损程度明显升高,细胞内的线粒体皱缩、内嵴增厚、膜电子密度增高,Fe²⁺、ROS、MDA水平明显上升,GSH活力明显下降,铁死亡相关蛋白p53、SAT1、GLS2蛋白表达明显升高,SLC7A11蛋白表达明显降低,...     

龙牙楤木皂苷类成分及药理活性研究进展

龙牙楤木Aralia elata为五加科楤木属植物,广泛分布于亚洲地区,在我国东北三省的储量极为丰富,而且龙牙楤木在民间作为重要药物来源用于治疗糖尿病、关节炎、心肌梗死等多种疾病.近年来,该植物受到越来越多的关注,并得到了深入研究.在化学成分方面,从其中分离得到100余种皂苷类成分;在药理研究方面,发现龙牙楤木总皂苷具有保护心血管、抗肿瘤、抗炎等多种重要的生物活性.通过检索,围绕龙牙楤木的化学成分及其药理活性等相关研究报道进行系统的总结,并对其研究现状进行剖析,以期为其深入开发利用提供参考.     

电针内关穴对心肌缺血再灌注损伤家兔心肌MDA、GSH-PX的影响

目的研究电针内关穴对心肌缺血再灌注损伤家兔心肌丙二醛、谷胱甘肽过氧化物酶含量的影响。方法将家兔随机分为4组:假手术组、模型组、电针内关组、电针列缺组。采用结扎左冠状动脉前降支30min,再灌注60min,建立心肌缺血再灌注损伤模型。应用分光光度法,观察电针对缺血再灌注损伤家兔心肌MDA、GSH-PX的影响。结果模型组家兔心肌MDA含量明显升高,而GSH-PX活性明显下降,与模型组、电针列缺组相比,电针内关组心肌MDA含量显著降低(P<0.05),而GSH-PX活性显著升高(P<0.01,P<0.05)。结论电针内关穴能显著降低缺血再灌注损伤心肌MDA含量,升高GSH-PX活性,达到抗缺血再灌注损伤的作用。     

五田保肝液对酒精性肝病大鼠肝组织SOD、MDA、GSH-PX影响的实验研究

目的：研究五田保肝液对酒精性肝病大鼠肝组织SOD、MDA、GSH-PX的影响。方法：用白酒辅以吡唑、玉米油的混合食料灌胃的方法建立大鼠酒精性肝病模型,随机分为正常组、模型组、中药低剂量组、中剂量组、高剂量组、易善复组（正常组10只,其余组各18只）。12周后处死,HE、Masson染色观察肝组织变化;制备肝匀浆后测定SOD、MDA、GSH-PX含量。结果：模型组大鼠肝组织SOD、GSH-PX水平较正常组显著降低（P〈0.01）,MDA水平较正常组显著升高（P〈0.01）。各治疗组大鼠肝组织SOD、GSH-PX水平较模型组升高（P〈0.05）,其中中、高剂量组P〈0.01;MDA水平较模型组降低（P〈0.05）,其中中、高剂量组P〈0.01。结论：五田保肝液可提高肝组织SOD、GSH-PX活性、降低MDA含量,抑制脂质过氧化反应,这可能是它防治酒精性肝病的机制之一。     

脑醒喷鼻剂对再灌注损伤脑组织自由基及一氧化氮合成酶变化的干预作用

目的:观察脑醒喷鼻剂对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤脑组织自由基及一氧化氮合成酶(NOS)变化的影响。方法:阻断大鼠左侧大脑中动脉,建立大鼠MCAO局灶脑缺血再灌注模型,用比色法检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)及一氧化氮合成酶(NOS)。结果:高剂量脑醒喷鼻剂使MDA生成减少,SOD含量升高,增加GSH-PX与NOS活性明显,与尼莫通对照组比较P>0.05,与生理盐水组比较P<0.05。结论:脑醒喷鼻剂能防止脑缺血缺氧所致的脂质过氧化,清除自由基损害,并增加内皮型NOS(eNOS)活性,对脑组织的缺血再灌注损伤有保护作用。     

槲皮素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的:探讨槲皮素(quercetin,Que)对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护机制.方法:将大鼠随机分为假手术组、心肌缺血再灌注损伤模型组、阳性对照组(盐酸硫氮卓酮片,0.01 mg·kg-1)和Que低、中、高剂量预处理组(15,30,60mg·kg-1),每组10只.冠状动脉前降支根部结扎30 min后剪断结扎线,再灌注60 min建立MIRI大鼠模型;Que预处理组在造模前给予Que各剂量灌胃1周.各组于再灌注60 min后分别取大鼠血清及心肌组织,测定大鼠血清丙二醛(MDA)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白(cTnI)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性;心肌肌浆网钙泵(SERCA)活性,用TTC染色法确定心肌损伤面积和梗死面积(MIS).结果:模型组血清MDA(17.71±3.24)μmol·L-1,CK-MB(2 010.21±76.31)U·L-1,cTnI(2.25 ±0.76) μg·L-1,IL-6(5.89±0.34) ng ·L-1和TNF-α(114.12 ±22.13) μg·L-1含量较假手术组显著升高(P＜0.01或P＜0.05),SOD(77.58±5.20)U·mL-1,GSH-Px(11.22±4.88)U·mL-1,心肌SERCA (2.76 ± 0.49)μmol· mg-1·prot-1·h-1活性显著降低(P＜0.01或P＜0.05);Que中、高剂量预处理组血清MDA(11.35±2.68,12.26 ± 2.49) μmol·L-1,CK-MB(1 361.11 ±33.98,1 350.11 ±43.02)U·L-1,cTnI(1.75 +0.43,1.73±0.33) μg·L-1,IL-6(3.23 ±0.16,3.12 ±0.17)ng·L-1和TNF-α(74.01±10.98,73.84±11.87) μg·L-1含量较模型组显著降低(P ＜0.01或P＜0.05),SOD(96.11±10.63,97.02±12.36)U·mL-1,GSH-Px(14.88±3.89,15.39±3.98)U·mL-1,心肌SERCA(3.98±0.23,3.92±0.31)μmol· mg-1·h-1活性显著升高(P＜0.01或P＜0.05);且明显缩小梗死面积(P＜0.01或P＜0.05).结论:Que预处理能减轻氧化应激损伤,降低炎症反应和减轻细胞内钙超载,对心肌缺血再灌注损伤有明显的保护作用.     

黄芪对大鼠心肌缺血再灌注损伤的防护作用

麻醉开胸大鼠结扎冠脉左室支３０ｍｉｎ后再灌注６０ｍｉｎ造成大鼠心肌缺血再灌注损伤，在再灌注的同时恒速ｉｖ黄芪（８３０ｍｇ／ｋｇ）对上述心肌损伤有明显的防护作用，表现为明显降低再灌注性心律失常室速（ＶＴ）及室颤（ＶＦ）的发生率，延迟其出现时间并缩短其持续时间，促进缺血型ＳＴ段的恢复。减少心肌细胞内Ｃａ２＋的蓄积及细胞内磷酸肌酸激酶同功酶（ＣＫ－ＭＢ）的漏出。明显降低心肌组织中ＭＤＡ含量并显著提高ＳＯＤ和ＧＳＨ－Ｐｘ的活性。结果提示黄芪防护心肌缺血再灌注损伤的作用与其提高心肌的抗氧化能力、清除氧自由基、减轻细胞膜脂质过氧化状态和维持细胞膜的完整性相关。     

川芎嗪预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠保护作用的实验研究

目的 探讨川芎嗪预处理对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制.方法 60只Wistar大鼠随机分为3组:假手术(sham)组、缺血再灌注损伤(IR)组、川芎嗪预处理组(LI);建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,测定心肌SOD、GSH-Px活性和MDA含量,血清LDH、CK、TNF-α和LI-6水平.结果 与 IR组比较,LI组SOD.GSD-Px活性显著升高(P<001),MDA、LDH、CK、TNF吨和IL-6显著降低(P<0.01),MIS显著缩小(P<0.05);ST段降低.结论 川芎嗪可提高SOD、GSH-Px活性.抑制炎症反应,从而发挥心肌保护作用.     

红景天苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的：研究红景天苷对大鼠冠脉结扎所致缺血再灌注损伤的影响。方法：结扎大鼠左冠状动脉,30 min后松开结扎处造成再灌注,再灌120 min后取血清测肌酸激酶（CK）,乳酸脱氢酶（LDH）的活性及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,白介素-1β（IL-1β）和白介素-6（IL-6）的含量,并取缺血处心室肌组织做病理切片。结果：红景天苷可明显减轻再灌注后血清中CK,LDH的活性及TNF-α,IL-1β和IL-6的含量,病理结果显示红景天苷可减轻心肌总体病变程度,减少炎细胞浸润并减轻局灶性坏死的程度。结论：红景天苷可显著减少缺血再灌注造成的心肌损伤,对缺血心肌有一定的保护作用。     

小檗碱对实验性心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的观察小檗碱对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法结扎大鼠冠状动脉左前降支30min，再灌90min后复制出大鼠心肌缺血再灌注损伤模型，观察小檗碱对大鼠心肌梗死范围及心肌酶学和脂质过氧化的影响，观察小檗碱对心肌组织NO含量及总NOS（tNOS）、诱导型NOS（iNOS）活性的影响。结果小檗碱能减少心肌梗死范围，减少心肌细胞磷酸肌酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（LDH）的释放，能显著降低心肌脂质过氧化代谢产物丙二醛（MDA）含量，增加NO含量，增强总NOS和诱导型NOS活性。结论小檗碱对大鼠心肌缺血再灌注损伤有保护作用，其机制可能与抑制脂质过氧化反应，增强iNOS活性从而增加心肌组织NO含量有关。     

缩醛基毛冬青提取化合物R4对大鼠急性心肌缺血/再灌注损伤的影响

目的 观察缩醛基毛冬青提取化合物R4 对在体大鼠急性心肌缺血/再灌注损伤（I/R）的影响,并探讨其保护作用机制.方法 建立大鼠心肌缺血/再灌注模型,采用试剂盒测定再灌注40 min 后血清肌酸激酶（CK）、肿瘤坏死因子（TNF-α）、IL-1Β的水平,观察心肌梗死范围,采用凝胶电泳法测定核转录因子κB（NF-κB）的活性,采用试剂盒测定测定心肌组织超氧化物（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量.结果 缺血20 min 再灌注40 min 后模型组及用药组的血清TNF-α、IL-1β、CK 水平明显高于假手术组,且缩醛基毛冬青提取化合物R4组及维拉帕米对照组明显低于模型组.再灌注40min后模型组及用药组的梗死范围明显增加,NF-κB 表达明显增高,且缩醛基毛冬青提取化合物R4 组及维拉帕米对照组明显低于模型组.再灌注40 min 后模型组及用药组的SOD 明显降低,MDA 明显增高,缩醛基毛冬青提取化合物R4 组及维拉帕米对照组MDA 明显低于模型组,SOD 明显高于模型组,有统计学意义.结论 缩醛基毛冬青提取化合物R4 对缺血再灌注心肌的保护作用与其显著缩小心肌梗死面积,降低肌酸磷酸激酶,降低MDA 同时提高SOD,减少心肌细胞内TNF-α、IL-1β、NF-κB 蛋白的表达有关.     

葛根素对大鼠心肌缺血/再灌注损伤中Apelin表达的影响

目的：观察葛根素对新发现的小分子活性肽Apelin在大鼠心肌缺血/再灌注损伤中表达的影响。方法：将SD大鼠60只,随机分成4组：缺血/再灌注（IR）组即缺血20min后再灌注180min;葛根素＋缺血/再灌注（IP）组;假手术（SH）组和正常对照（NC）组。体表心电图标Ⅱ导联全程记录,进行心律失常得分评估;用放免法测定各组大鼠血浆中Apelin-36蛋白含量变化;RT-PCR方法观察心肌Apelin mRNA表达。结果：（1）葛根素IP组心律失常得分仅为IR组的69.9%（P〈0.01）。（2）血浆Apelin-36浓度：SH组、IR组、IP组分别是NC组93.4%（P〉0.05）、51.5%（P〈0.01）和73.5%（P〈0.01）。IP组比IR组含量高,两者有统计学差异（P〈0.01）。（3）心肌Apelin mRNA的表达：IR组明显降低,仅为NC组的40.2%（P〈0.01）;IP组为NC组的68.1%（P〈0.01）;IP组比IR组高（P〈0.05）。结论：药物葛根素处理后能使大鼠血浆Apelin-36含量及心肌中ApelinmRNA表达升高。提示葛根素能影响小分子活性肽Apelin在大鼠心肌缺血/再灌注损伤过程中的表达。